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第3節(jié)DNA的復(fù)制提出問(wèn)題:DNA是如何復(fù)制的?假說(shuō)的內(nèi)容:(1)解旋:DNA分子復(fù)制時(shí),DNA分子的
解開(kāi),互補(bǔ)堿基之間的
斷裂。(2)復(fù)制:模板:DNA分子解開(kāi)的_______
原料:游離的4種
原則:
原則,重新形_____
(3)復(fù)制結(jié)果(特點(diǎn)):新合成的每個(gè)DNA分子中,都保留了原來(lái)DNA分子雙螺旋氫鍵兩條單鏈脫氧核苷酸堿基互補(bǔ)配對(duì)氫鍵一、對(duì)DNA復(fù)制的推測(cè)1.半保留復(fù)制——沃森和克里克中的一條鏈復(fù)制一次半保留復(fù)制假說(shuō):新合成的DNA分子中,都保留了原來(lái)DNA分子中的
。一條鏈半保留復(fù)制親代DNA子代DNA3、全保留復(fù)制假說(shuō):全保留復(fù)制是指DNA復(fù)制以
,子代的DNA
都是
。DNA的雙鏈為模板雙鏈新合成的親代DNA全保留復(fù)制子代DNA親
代DNA
關(guān)鍵:在于子代DNA分子鏈的組成不同全保留復(fù)制半保留復(fù)制親代DNA
這兩種同位素的相對(duì)原子質(zhì)量不同,含
比含
的
更大,因此,利用離心技術(shù)可以在試管中分離開(kāi)含有不同氮元素的DNA,這種特殊的離心方法叫
。二、DNA半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)證據(jù)3、背景知識(shí):
和
是氮元素的兩種穩(wěn)定同位素,14N15N14N的DNA15N的DNA密度
密度梯度離心技術(shù)2、實(shí)驗(yàn)方法:同位素標(biāo)記法1958年,美國(guó)生物學(xué)家梅塞爾森和斯塔爾設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)材料:大腸桿菌4、實(shí)驗(yàn)原理:兩條鏈都被15N標(biāo)記的雙鏈DNA,密度最大,為重帶,靠近試管底部;14N/14N—DNA15N/14N—DNA15N/15N—DNA輕帶中帶重帶一條鏈為14N、一條鏈為15N的雙鏈DNA,密度居中,為中帶,位置居中;兩條都被14N標(biāo)記的雙鏈DNA,密度最小,即為輕帶,離試管底部最遠(yuǎn)。讓大腸桿菌在含15NH4Cl的培養(yǎng)液中生長(zhǎng)若干代細(xì)胞分裂一次轉(zhuǎn)移到含14NH4CI中第一代第二代5、實(shí)驗(yàn)過(guò)程:細(xì)胞分裂二次
在不同時(shí)刻收集大腸桿菌讓大腸桿菌在含15NH4Cl的培養(yǎng)液中生長(zhǎng)若干代細(xì)胞分裂一次提取DNA離心轉(zhuǎn)移到含14NH4CI中提取DNA離心提取DNA離心第一代第二代5、實(shí)驗(yàn)過(guò)程:細(xì)胞分裂二次
在不同時(shí)刻收集大腸桿菌并提取DNA,再將提取的DNA進(jìn)行離心,記錄離心后試管中DNA的位置實(shí)驗(yàn)預(yù)期:若為半保留復(fù)制,根據(jù)實(shí)驗(yàn)過(guò)程,畫出從親代到子二代過(guò)程中的脫氧核苷酸鏈組成(以一個(gè)DNA分子為例)演繹推理
分別預(yù)測(cè)兩種復(fù)制方式的結(jié)果,看預(yù)測(cè)結(jié)果是否與實(shí)驗(yàn)結(jié)果符合。1/2輕帶重帶親代DNA子一代全保留復(fù)制演繹推理1/2重帶3/4輕帶1/4重帶假如全保留復(fù)制是正確的,實(shí)驗(yàn)的預(yù)期又會(huì)是怎樣的?15N15N15N15N14N14N14N14N14N14N15N15N14N14N子二代讓大腸桿菌在含15NH4Cl的培養(yǎng)液中生長(zhǎng)若干代細(xì)胞分裂一次提取DNA離心轉(zhuǎn)移到含14NH4CI中提取DNA離心提取DNA離心第一代第二代細(xì)胞分裂二次15N/15N-DNA15N/14N-DNA15N/14N-DNA14N/14N-DNA重帶中帶輕帶中帶做出假說(shuō)提出問(wèn)題演繹推理實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果與半保留方式復(fù)制預(yù)期結(jié)果相符合,DNA復(fù)制是以半保留的方式進(jìn)行的做出假說(shuō)提出問(wèn)題演繹推理實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證得出結(jié)論假說(shuō)-演繹法作出假說(shuō):演繹推理:實(shí)施實(shí)驗(yàn),統(tǒng)計(jì)結(jié)果根據(jù)假說(shuō)演繹推理兩種復(fù)制得到的子代DNA的結(jié)果實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證:DNA是如何復(fù)制的?提出問(wèn)題:半保留復(fù)制全保留復(fù)制假說(shuō)——演繹法得出結(jié)論:DNA的復(fù)制是半保留復(fù)制【小結(jié)】DNA半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)證據(jù)
思考:1、在標(biāo)記過(guò)程中,是否可以使用14NH4Cl培養(yǎng),再使用15NH4Cl培養(yǎng)?親代第一代第二代第三代15N15N以此類推,第n代時(shí)結(jié)果如何?15N15N14N14N14N14N14N14N(1)親代DNA復(fù)制n代后,子代DNA分子數(shù)為_(kāi)______(2)含15N的DNA分子數(shù)為_(kāi)______(3)含14N的DNA分子數(shù)為_(kāi)________(4)只含15N的DNA分子數(shù)
(5)只含14N的DNA分子數(shù)一、DNA分子數(shù)計(jì)算2n22n02n-2(1)子代DNA的脫氧核苷酸鏈數(shù)為_(kāi)______(2)含15N脫氧核苷酸鏈數(shù)為_(kāi)______(3)含14N的脫氧核苷酸鏈數(shù)為_(kāi)________二、脫氧核苷酸鏈數(shù)的計(jì)算2n+122n+1-2三、DNA復(fù)制過(guò)程中消耗的脫氧核苷酸數(shù)的計(jì)算m(2n-1)設(shè)親代DNA中含有某種脫氧核苷酸數(shù)m個(gè),則:(1)經(jīng)過(guò)n次復(fù)制,共需消耗的該種游離的脫氧核苷酸數(shù)為(2)在第n次復(fù)制時(shí),共需消耗游離的該種脫氧核苷酸
mx2n-1三、DNA復(fù)制的過(guò)程1.概念:以親代DNA為模板合成子代DNA的過(guò)程2.時(shí)間:真核生物:細(xì)胞核(主要)、線粒體和葉綠體原核生物:擬核(主要)細(xì)胞分裂前的間期3.場(chǎng)所:4、DNA復(fù)制的過(guò)程CGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATACGTATACGGCTAGCCGTA3'5'(1)解旋:在能量的驅(qū)動(dòng)下,解旋酶將DNA雙螺旋的兩條鏈解開(kāi)(氫鍵斷裂)。CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATA3'5'ATP解旋酶(2)合成子鏈:DNA聚合酶等以解開(kāi)的每一條母鏈為模板,以細(xì)胞中游離的四種脫氧核苷酸為原料,按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,各自合成與母鏈互補(bǔ)的一條子鏈。CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATA3'5'ACGCAAGCTAGTCATTATATGCATGATCGAGCTTACGCAAGCTAGTCATTADNA聚合酶5'3'TATGCATGATCGAGCTT5'3'ATPATP(3)重新螺旋:每條新鏈與其對(duì)應(yīng)的模板鏈盤繞成雙螺旋結(jié)構(gòu)。CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATAA3'5'ACGCAAGCTAGTCATTATATGCATGATCGAGCTT5'3'TAGCCGTATAGCCGATAT3'5'TTACGCGTATATATA5'3'5.復(fù)制所需條件(1)模板(2)原料(3)
酶(4)能量DNA的兩條單鏈四種游離脫氧核苷酸ATP解旋酶、DNA聚合酶6.復(fù)制結(jié)果:得到兩個(gè)完全相同的DNA分子(1)邊解旋邊復(fù)制(2)半保留復(fù)制
8.“精確”復(fù)制的原因:(1)DNA分子獨(dú)特的雙螺旋結(jié)構(gòu),為復(fù)制提供了精確的模板;(2)通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,保證了復(fù)制能夠準(zhǔn)確地進(jìn)行。9.意義:
將遺傳信息從親代傳給子代,從而保持遺傳信息的連續(xù)性。7.復(fù)制特點(diǎn)例1.下面是DNA復(fù)制的有關(guān)圖示。A→B→C表示大腸桿菌的DNA復(fù)制。D→F表示哺乳動(dòng)物的DNA復(fù)制。圖中黑點(diǎn)表示復(fù)制起點(diǎn),“→”表示復(fù)制方向,“?”表示時(shí)間順序。(1)若A中含有48502個(gè)堿基對(duì),而子鏈延伸速率是105個(gè)堿基對(duì)/min,假設(shè)DNA分子從頭到尾復(fù)制,則理論上此DNA分子復(fù)制約需30s,而實(shí)際上只需約16s,根據(jù)A→C過(guò)程分析,這是因?yàn)開(kāi)____________________。復(fù)制
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