共聚焦激光顯微內(nèi)鏡在結(jié)直腸疾病中的應用進展

檢有出血、穿孔等風險，而共聚焦激光顯微內(nèi)鏡(confocallaserendomicroscopy,CLE)的出現(xiàn)剛好可以彌補這個缺陷。CLE作為新興的內(nèi)鏡技術，自2004年推出以來，已經(jīng)實現(xiàn)1000倍放大和1Hm分辨率的成像[1],具備實時活體組織細胞結(jié)構(gòu)的變化進行實時監(jiān)測[2],即“虛擬活檢”。本文將概述CLE在當前化為電子圖像，最后形成一個灰度圖像，代表著某一個特定的平面。目前CLE分為兩種類型：基于內(nèi)鏡的CLE(endoscope-based可與白蛋白結(jié)合，其余未結(jié)合的熒光素進入組織后強烈標記細胞外基質(zhì)而顯像1.炎癥性腸病(inflammatoryboweldisease,IBD):IBD是一種由多種復雜因素相互作用導致的腸道慢性炎癥性疾病，主要分為潰瘍性結(jié)ativecolitis,UC)和克羅恩病(crohndisease,CD)兩種亞型[8]。在正光素滲漏等表現(xiàn)[1]。Quénéhervé等[9]利用CLE對50例IBD患者以及9例對照組患者的14項形態(tài)學及功能學改變進行評估，設計出一種基于計算機的CLE圖像分析方法來診斷IBD以及區(qū)分UC和CD,其中診斷IBD的敏感度和特異度均為100%,鑒別UC與CD的敏感度、特異度分別為92.3%和91.3%。后續(xù)的一項研究進一步證實了CLE能夠可靠地區(qū)分正常及炎癥性腸黏膜，并可以作為IBD診斷的輔助手段[10]。上皮內(nèi)瘤變和癌變是IBD嚴重的遠期并發(fā)癥，最近一項腫瘤性病變，敏感度為91%,特異度為97%[11]。在另一項研究中，DePlama等[12]利用熒光素偶聯(lián)的VRPMPLQ肽作為分子探針，從9例UC患者中切除了11處內(nèi)鏡下疑似異型增生的病變，用肽噴灑標本并進行CLE檢查，然后將圖像親和力，證實了CLE聯(lián)合靶向熒光標記肽在檢測UC相關的異型增生病灶方面具變、微侵蝕等為基礎的CD內(nèi)鏡下活動評分[13];以小腸及微侵蝕腔熒光素滲漏等為基礎的Watson量表[14-15];以血管直徑>20Hm、隱窩結(jié)構(gòu)不規(guī)則、隱指數(shù)[16];以及LI等[17]提腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor,TNF)抗體通過與跨膜型腫瘤壞死因子(membrane-boundtumornecrosisfactor,mTNF)結(jié)合可以抑制CD的炎癥反應。在一項臨床試驗中，Atreya等[18]利用CLE評估了25例接受TNF抗體治療的CD患者治療反應，12周后發(fā)現(xiàn)與mTNF細胞數(shù)量少的患者相比，具有大量mTNF免疫細胞的患者對治療的反應率要高得多(92%比15%,P<0.001);訪檢查時的黏膜愈合有關。Iacucci等[19]以類似的方式利用CLE對29例接D的療效方面具有重要作用，同時可以指導IBD及其他慢性炎癥性疾病藥物的合內(nèi)鏡下黏膜愈合評分(endomicroscopicmucosal敏感度(100%)、特異度(93.75%)和準確率(94.44%);此外，eMHs還與組織學評分(Gupta指數(shù))以及內(nèi)鏡活動評分(Mayo評分)有良好的相關性。在另蛛網(wǎng)型和缺乏型3種黏膜毛細血管血流模式，發(fā)現(xiàn)黏膜局部缺血現(xiàn)象與UC緩解形式，可作為進一步研究黏膜愈合的指標[21]。IBD的復發(fā)是目前疾病診療關注的熱點，Kiesslich等[15]使用CLE來評隙增加和熒光素滲漏與較高的復發(fā)率相關，敏感度為62.5%,特異度為91.2%,特異度和準確率分別為64%、88.9%和74.4%[22],與Kiesslich等[15]的研究結(jié)論相當。后續(xù)一些文獻研究進一步證明CLE在預測IBD復發(fā)方面具有重要意義[23-25]。早期鑒別惡變傾向息肉，可以有效預防息肉癌變。因此，在基于pCLE(邁阿密分類)和eCLE(美因茨分類)基礎上建立了結(jié)直腸息肉的CLE分類系統(tǒng)[26-2上皮顏色變深伴不規(guī)則增厚以及杯狀細胞減少等表現(xiàn)[26]。最近一項研究還確紊亂，表現(xiàn)為隱窩結(jié)構(gòu)變形(主要表現(xiàn)為隱窩底部擴張，分支或水平延伸)和營養(yǎng)不良性杯狀細胞的存在[28]。杯狀細胞數(shù)量減少[29]。Taunk等[30]發(fā)現(xiàn)CLE聯(lián)合計算機輔助診斷技術(computer-aideddiagnosis,CAD)可獲得高度準確的息肉組織學結(jié)果(敏感度為95%,特異度為94%,準確率為94%),如果使用CAD算法來輔助初級內(nèi)鏡醫(yī)潛力[31-33]。行早期結(jié)直腸癌的診斷，結(jié)果顯示非腫瘤組織的BODIPY-FA強度分別比低級別上皮內(nèi)瘤變、高級別上皮內(nèi)瘤變和腫瘤組織高出近1.6倍、2倍和2.2倍，提示相較于非腫瘤組織，腫瘤組織對BODIPY-FA攝取減少；研究還發(fā)現(xiàn)，與靜脈應用熒光素鈉相比，BODIPY-FA染色聯(lián)合CLE具有更高的一致性(0.68比0.43)和總體有效性(74.65%比55.88%)[34]。Wang等[35]利用類似方法評估CLE聯(lián)合熒光標記的荊豆凝集素(ulexeuropaeusagglutinin,UEA)-異硫氰LE鏡下可見UEA-FITC在結(jié)直腸癌組織中的熒光強度明顯低于正常組織，研究顯示相較于單獨使用CLE(敏感度為81%~91.4%,特異度為76%~85.7%)[36-37],UEA-FITC聯(lián)合CLE對結(jié)直腸癌顯示出更為良好的診斷準確性(敏感度為95.6%,特異度為97.7%)。這表明CLE聯(lián)合分子成像技術在結(jié)直腸癌的診斷方面Liu等[38]在2018年提出利用CLE評估低位直腸癌病變部位遠端切緣性質(zhì)。該研究前瞻性納入18例低位直腸癌患者，其中11例病變直腸遠端切緣黏膜其敏感度為85.71%,特異度為100%,準確率為94.44%。另一項研究通過CLE來直腸癌的浸潤深度，實時評估的敏感度、特異度和準確率分別為100%、94%和95%[31]。以上結(jié)果表明，CLE有助于評估結(jié)直腸癌的病變邊緣和浸潤深度，因床完全緩解的患者可以進行密切隨訪而不需要立即手術[39-43]。最近有學者利用pCLE評估晚期直腸腺癌患者在接受新輔助放化療后的反應，研究納入47全緩解的敏感度和準確率均較高(分別為100%和95.7%)[44]。這有助于確定4.腸易激綜合征(irritablebowelsyndrome,IBS):在傳統(tǒng)內(nèi)鏡下難以IBS患者結(jié)直腸黏膜炎癥發(fā)生率升高[45]。這表明CLE可能是評估IBS患者腸Fritscher-Ravens等[46]利用CLE實時顯示疑似食物不耐受的IBS患者在接受食物刺激后腸黏膜的結(jié)構(gòu)/功能變化，發(fā)現(xiàn)約60%的IBS患者，當他們的最近一項更大規(guī)模的研究中得到了重復和拓展[47],這表明CLE可以對特定食物成分引起的IBS患者腸黏膜結(jié)構(gòu)/功能改變進行可視化診斷，是一個非常有價值的診斷工具，并可以指導IBS患者后續(xù)的治療方案。Turcotte等[48]利用p用仍存在一定的局限性：(1)由于目前大多數(shù)CLE研究是由資深的內(nèi)鏡專家而的不良事件主要與造影劑的過敏特性有關[49],因此未來還需要對有過敏史的[1]BuchnerAM.Confocallaserendomicroflammatoryboweldisease[J].InflammBowelDis,2019,25(8):1302-1DOI:10.1093/ibd/izz021.[2]HurlstoneDP,Brownrativecolitis[J].PostgradMedJ,2007,83(981):451-460.DOI:10.11[3]CommitteeAT.Confocallaserendomicroscopy[J].Gastsc,2014,80(6):928-938.DOI:10.1016/j.gie.2014.02014,26(Suppl1):86-94.DOI:10.1111/den.12152.[5]PilonisND,JanuszewiczW,DiPietroM.Confocallaserpplications[J].TranslGastroenterolHepatol,2022,7:7.DOI:10.210safetyandefficacyndosc,2021,35(5):2091-2103.DOI:10.1007/s00464-020-07607-3.[7]HoffmanA,GoetzM,Vieth1275-1283.DOI:10.1055/s[8]GrahamDB,XavierRJ.Pathwayparadigmsrevealedfromsofinflammatoryboweldisease[J].Nature,2020,578(7796):527-539.[9]QuénéhervéL,DavidG,BourreilleA,etal.Quantilaserendomicroscopyininflammatoryboweldiseases[J].GastroiEndosc,2019,89(3):626-636.DOI:10.1016/j.gie.2018.08.006.rithmfortheconfirmationofedonconfocallaserendomicroscopyiDis,2021,30(1):59-65.DOI:10.15403/jgld-3212.ionininflammatoryboweldisease:asystematicrevisis[J].WorldJGastroenterol,2018,24(10):1167-1180.DOI:10.3748/dysplasiainpatientswithulcerativecolitisusingatargetescentpeptideandconfocallaserendomLoSOne,2017,12(6):e0180509.DOI:10.1371/journal.pone.0180509.[13]NeumannH,ViethM,AtreyaR,etal.Assessmeseactivitybyconfocallase012,18(12):2261-2269.DOI:10.1002/ibd.22907.[14]LimLG,NeumannJ,Hansetifieslossoflocalbarrierfunctioninthed20(5):892-900.DOI:10.1097/MIB.OOOOOO0000000027.[15]KiesslichR,Duckworthunctionidentifiedbyconfocallaserendomicroscopyprininflammatoryboweldisease[J].Gut,2012,61(8):1146-11domicroscopyforinvivoassessmentofhistoltivecolitis:developmentandvalidationoftheErohnsColitis,2021,15(6):994-999.DOI:10.1093/ecco-jcc/jjaa255.[17]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