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黃花菜(HemerocalliscitrinaBaroni)是一種草本植物。黃花菜含有豐富的蛋白質(zhì)、脂類、胡蘿卜素、糖類以及豐富的微量元素。食用黃花菜不僅能提高皮膚的彈性和緊致度,防止老化,而且有助于保持皮膚白皙。黃花菜的優(yōu)勢(shì)在于:其花蕾及根等部位中含有大量生物活性成分,例如:類黃酮類、生物堿類、皂苷等。黃花菜中黃酮類化合物是其重要有效成分之一,具有延緩衰老、抗氧化、清除自由基等功能。黃花菜還可以表現(xiàn)出抗菌、抗炎、有效改善睡眠等多方面的生物活性功能,而且其在市場(chǎng)中易獲取,原料廉價(jià),成分簡(jiǎn)單無害。由于市場(chǎng)上的化妝品僅含有低比例黃花菜成分并且有限的提取條件使其不能充分發(fā)揮黃花菜的功效,因此,選用微生物發(fā)酵的方法制備黃花菜發(fā)酵液。通過對(duì)發(fā)酵條件的控制、選擇合適的菌種和發(fā)酵工藝可以大規(guī)模生產(chǎn)所需產(chǎn)品。發(fā)酵技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在于無危險(xiǎn)性,易操作性。大量實(shí)驗(yàn)證明,經(jīng)過發(fā)酵后的原料活性物含量增多,抗衰老性能增強(qiáng),抗炎效果上升。本文使用植物乳桿菌和釀酒酵母菌發(fā)酵制備得到兩種黃花菜發(fā)酵液,并對(duì)其抗氧化性、抗炎性、美白性和安全性進(jìn)行評(píng)價(jià),以期彌補(bǔ)當(dāng)前黃花菜發(fā)酵液在化妝品領(lǐng)域研究的不足,為開發(fā)與制備微生物發(fā)酵成分相關(guān)的化妝品的原料提供理論支撐。摘要:使用植物乳桿菌和釀酒酵母菌發(fā)酵制得了兩種黃花菜發(fā)酵液,考察了樣品對(duì)HaCaT細(xì)胞存活率的影響,分析了其抗炎性功效、抗氧化功效、美白功效、安全性功效。結(jié)果表明,與水提液(空白對(duì)照)相比,兩種發(fā)酵液的抗氧化能力更強(qiáng)。在細(xì)胞水平上,兩種黃花菜發(fā)酵液均表現(xiàn)出對(duì)UVB誘導(dǎo)損傷細(xì)胞的修復(fù)作用,相對(duì)于經(jīng)過UVB照射后的細(xì)胞模型組,細(xì)胞Ⅰ型膠原蛋白(COL-Ⅰ)、過氧化氫酶(CAT)活力均提高。兩種黃花菜發(fā)酵液的酪氨酸酶活性抑制率遠(yuǎn)高于水提液,表現(xiàn)出良好的美白效果。通過HaCaT細(xì)胞中炎性因子IL-6、TNF-α和COX-2表達(dá)量可以看出,樣品組中炎性因子的表達(dá)量顯著低于模型組,說明黃花菜發(fā)酵液的抗炎性能力大于水提液。通過雞胚絨毛尿囊膜實(shí)驗(yàn)(HET-CAM)可以得出,樣品作用其前后均無出血現(xiàn)象,表明黃花菜發(fā)酵液無刺激性。結(jié)論以黃花菜為研究對(duì)象,采用植物乳桿菌和釀酒酵母菌發(fā)酵制備兩種黃花菜發(fā)酵液,從抗氧化、抗炎性、美白性和安全性多方面驗(yàn)證黃花菜發(fā)酵液可修復(fù)UVB給皮膚帶來的傷害。本文選取體積分?jǐn)?shù)為2.5%的樣品應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)。在抗氧化功效評(píng)價(jià)中,黃花菜水提液和黃花菜發(fā)酵液均能有效地清除DPPH自由基,且與濃度呈正相關(guān),表明黃花菜水提液和發(fā)酵液具有一定的抗氧化活性,其中S1的IC50為11.753%,S2的IC50為9.944%,S3的IC50為11.558%。3種溶液對(duì)羥基自由基的清除率隨著體積分?jǐn)?shù)的增加而提高,其中S1的IC50為82.892%,S2的IC50為82.154%,S3的IC50為82.034%。空白組的COL-Ⅰ表達(dá)量為6.14ng/mL;UVB照射能夠引起氧化應(yīng)激反應(yīng)激活膠原蛋白酶(MMPs),從而降低膠原蛋白含量。模型組細(xì)胞內(nèi)的COL-Ⅰ表達(dá)量降為4.52ng/mL;經(jīng)過S1、S2、S3作用后,細(xì)胞內(nèi)COL-Ⅰ表達(dá)量顯著增加到5.03、6.00、6.19ng/mL??瞻捉M的CAT表達(dá)量為3.44ng/mL;氧化應(yīng)激損傷下的CAT表達(dá)量顯著降低,模型組的CAT表達(dá)量?jī)H為1.52ng/mL;而S1、S2、S3均能顯著提高細(xì)胞中CAT的表達(dá)量,分別為2.06、2.25、2.40ng/mL。在抗炎性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)中,空白組的IL-6、TNF-α、COX-2的表達(dá)量分別為0.8、0.9和0.9ng/mL,模型組對(duì)3種炎性因子蛋白的表達(dá)量分別為3.2、3.4和1.3ng/mL。而用S1、S2、S3處理細(xì)胞后,炎性因子蛋白的表達(dá)量顯著降低,因此,發(fā)酵液和水提液有一定的抗炎效果。在安全性功效評(píng)價(jià)中,使用體積分?jǐn)?shù)0.9%NaCl水溶液作為陰性對(duì)照,刺激評(píng)分為0.04,血管無溶血;S1、S2、S3的
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