超敏反應(yīng)及其檢測

關(guān)于超敏反應(yīng)及其檢測目的要求1．掌握超敏反應(yīng)的概念、特點、分型；各型的發(fā)生機制。2．熟悉各型超敏反應(yīng)的免疫學檢測及臨床常見疾病。第2頁,共50頁，2024年2月25日，星期天◆變態(tài)反應(yīng)(allergy)◆超敏反應(yīng)(hypersensitivity)：

是機體受抗原持續(xù)刺激或再次受到相同抗原刺激后發(fā)生的一種異常或病理性的免疫應(yīng)答?！糇儜?yīng)原(allergen)及變應(yīng)原性質(zhì)

◆類型：見下圖

I型(速發(fā)型)最常見Ⅱ型(細胞毒型或細胞溶解型)Ⅲ型(免疫復合物型或血管炎型)

Ⅳ型(遲發(fā)型)◆特點：特異性，記憶性，病理性，可轉(zhuǎn)移性。第3頁,共50頁，2024年2月25日，星期天類型（1963年Gell和Coombs）

I型超敏反應(yīng)速發(fā)型超敏反應(yīng)II型超敏反應(yīng)III型超敏反應(yīng)Ⅳ型超敏反應(yīng)細胞毒型超敏反應(yīng)免疫復合物型超敏反應(yīng)遲發(fā)型超敏反應(yīng)第4頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第一節(jié)I型超敏反應(yīng)性疾病與免疫學檢驗

◆特點：①主要由IgE抗體介導，發(fā)作迅速、強烈，但消退亦快；②常引起機體生理功能紊亂，但無嚴重的組織細胞損傷；③有明顯的個體差異，與機體的遺傳素質(zhì)有關(guān)；④效應(yīng)器官：平滑肌，粘膜，毛細血管，皮膚等?！?/p>

特應(yīng)性素質(zhì)個體：◆過程：速發(fā)相和遲發(fā)相。第5頁,共50頁，2024年2月25日，星期天◆一、發(fā)生機制(一)致敏階段1．變應(yīng)原如圖①吸人性變應(yīng)原②食入性變應(yīng)原③某些藥物④動物免疫血清2．特異性IgE抗體的產(chǎn)生3．IgE與效應(yīng)細胞表面FcεRⅠ結(jié)合→→效應(yīng)細胞的致敏，機體致敏狀態(tài)形成。

嗜酸粒細胞作用：雙重性。第6頁,共50頁，2024年2月25日，星期天吸入性變應(yīng)原花粉塵螨或其排泄物真菌或其孢子動物皮屑或羽毛藥物青霉素磺胺普魯卡因有機碘化物食物變應(yīng)原常見變應(yīng)原（Allergen）能夠誘導變態(tài)反應(yīng)的抗原性物質(zhì)。昆蟲第7頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第8頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第9頁,共50頁，2024年2月25日，星期天(二)發(fā)敏階段

1．效應(yīng)細胞活化和脫顆粒

2．活性介質(zhì)釋放

(1)預(yù)存介質(zhì)：①組胺(histamine)

②激肽原酶(kininogenase)

③嗜酸粒細胞趨化因子(eosinophilchemotacticfactorofanaphylaxis，ECF-A)(三)效應(yīng)階段

第10頁,共50頁，2024年2月25日，星期天(2)新合成的介質(zhì)：①前列腺素D2(prostaglandinD2，PGD2)：②白三烯(1eukotriene，LT)：③血小板活化因子(plateletactivatingfactor，PAF)：④細胞因子：IL-4、IL-13等，可促進Th2細胞應(yīng)答和B細胞向IgE類型轉(zhuǎn)換。第11頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第12頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第13頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第14頁,共50頁，2024年2月25日，星期天靜息肥大細胞激活后5分鐘激活后60分鐘第15頁,共50頁，2024年2月25日，星期天Ⅰ型超敏反應(yīng)的發(fā)生過程和發(fā)生機制第16頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第17頁,共50頁，2024年2月25日，星期天二、臨床常見疾病(一)過敏性休克

1．藥物過敏性休克2．血清過敏性休克

(二)呼吸道過敏反應(yīng)1．支氣管哮喘2．過敏性鼻炎(三)消化道過敏反應(yīng)(四)皮膚過敏反應(yīng)第18頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第19頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第20頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第21頁,共50頁，2024年2月25日，星期天三、免疫學檢驗Ⅰ型超敏反應(yīng)性疾病的診斷

詳盡的病史、體內(nèi)試驗和體外試驗。

（一）皮膚試驗(skintest)原理、部位、類型、方法及結(jié)果判定(1)皮內(nèi)試驗(intracutaneoustest)

注意：

①設(shè)置陽性及陰性對照。

②搶救準備，藥物及儀器。③假性現(xiàn)象。第22頁,共50頁，2024年2月25日，星期天相同超敏原不同稀釋度

速發(fā)型15～30min內(nèi)觀察

遲發(fā)型48～72h內(nèi)觀察0.01～0.03ml/針4mm/針方法結(jié)果皮內(nèi)試驗第23頁,共50頁，2024年2月25日，星期天比皮內(nèi)試驗敏感性稍低，但假陽性較少；皮試液濃度要比皮內(nèi)試驗高10～100倍。將試驗抗原與對照液分別滴于試驗部位的皮膚上用針尖透過液滴輕挑一下以刺破皮膚而不出血為度1min后拭（吸）去試驗抗原液點刺試驗第24頁,共50頁，2024年2月25日，星期天速發(fā)型皮膚試驗的結(jié)果判定標準分級皮內(nèi)試驗點刺試驗-無風團或小于陰性對照無風團反應(yīng)或小于陰性對照+風團3～5mm、紅暈＜20mm無風團,陰性對照＜紅暈≤20mm++風團6～9mm伴紅暈無風團，紅暈＞20mm+++風團10～15mm伴紅暈風團伴紅暈++++風團＞15mm伴紅暈和偽足風團伴紅暈和偽足第25頁,共50頁，2024年2月25日，星期天遲發(fā)型皮試結(jié)果判定標準反應(yīng)程度結(jié)果判定-無反應(yīng)或小于陰性對照+僅有紅腫++紅腫伴硬結(jié)+++紅腫、硬結(jié)、小皰++++大皰或/和潰瘍第26頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第一次讀：48小時打開斑試器,間隔30min待斑試器壓痕消失后判定結(jié)果。第二次讀：第3天或第4天。如懷疑光過敏，在斑貼試驗的基礎(chǔ)上給予紫外線照射，操作過程相似。斑貼試驗第27頁,共50頁，2024年2月25日，星期天斑貼試驗結(jié)果判定標準反應(yīng)程度結(jié)果判定－無反應(yīng)或小于陰性對照+輕度紅腫、搔癢++明顯紅腫、時有紅斑+++紅腫伴皮疹、水皰++++紅腫、水皰伴潰瘍第28頁,共50頁，2024年2月25日，星期天（三）結(jié)果分析及注意事項

假陽性出現(xiàn)的常見原因：

①皮試液含有非特異性刺激物；②患者患有皮膚劃痕征；③操作手法較重；④注入量較大或濃度過高；⑤注入少量空氣等。第29頁,共50頁，2024年2月25日，星期天詢問病史陽性對照必備搶救藥品和設(shè)施如何避免假性結(jié)果的出現(xiàn)：適應(yīng)證陰性對照皮試液濃度第30頁,共50頁，2024年2月25日，星期天應(yīng)用與評價預(yù)防藥物或疫苗等過敏防治Ⅰ型超敏反應(yīng)性疾病結(jié)核菌素試驗評估機體細胞免疫功能預(yù)防皮膚接觸過敏第31頁,共50頁，2024年2月25日，星期天假陽性：①皮試液不純，含有非特異性刺激物；②患者皮膚反應(yīng)過強，如患者皮膚劃痕癥陽性；③操作者手法較重，注射量較大或濃度過高、注入少量空氣等。假陰性：①皮試液抗原性低或失效；②患者皮膚反應(yīng)性差如老年人，或疾病大發(fā)作后；③皮試前使用過抗組胺藥物或免疫抑制劑等。第32頁,共50頁，2024年2月25日，星期天(2)點刺試驗(pricktest)：方法：注意：

①設(shè)置陽性及陰性對照。

②搶救準備。③假性現(xiàn)象。

第33頁,共50頁，2024年2月25日，星期天2．應(yīng)用與評價

真實、客觀，與其他檢測相關(guān)性強。預(yù)防原則：尋找變應(yīng)原，避免接觸。

(1)尋找變應(yīng)原：(2)預(yù)防藥物或疫苗過敏：(二)粘膜激發(fā)試驗(provocationtest)是模擬自然途徑，使變應(yīng)原進人體內(nèi)，引起一次輕微的發(fā)作，用以確定變應(yīng)原的試驗。

注意：嚴格的對照；搶救措施。第34頁,共50頁，2024年2月25日，星期天1．支氣管激發(fā)試驗(1)非特異性激發(fā)試驗：

常用指標：第1s用力呼氣量(FEV-1)和肺活量；

15～20min后復查FEV-1；

陽性：①明顯自覺癥狀，如胸部緊迫感和喘息等；②肺部聞及哮鳴音；③FEV-1下降20％以上。

目的：(2)變應(yīng)原激發(fā)試驗：(3)應(yīng)用評價：特異性高，與患者的病史、癥狀和過敏原吸附試驗的相關(guān)性較強。第35頁,共50頁，2024年2月25日，星期天2．其他激發(fā)試驗(1)鼻黏膜激發(fā)試驗：(2)食物和藥物激發(fā)試驗：(3)結(jié)膜激發(fā)試驗：

第36頁,共50頁，2024年2月25日，星期天(三)血清IgE的檢測1．血清總IgE的測定(1)ELISA：雙抗體夾心法。(2)放射免疫吸附試驗(radioimmunosorbenttest，RIST)；(3)化學發(fā)光法：

參考值：成人血清IgE水平在20~200IU／ml(1IU=2．4ng)。意義：疾病。注意：總IgE高不一定是超敏反應(yīng)；而過敏者總IgE也不一定升高。

第37頁,共50頁，2024年2月25日，星期天2．特異性IgE測定

(specificIgE，sIgE)(1)放射性變應(yīng)原吸附試驗(radioallergosorbenttest，RAST)：

1967年由Wide建立原理：固相載體-變應(yīng)原-sIgE-125I標記的抗人IgE(2)ELISA(3)CAP變應(yīng)原檢測系統(tǒng)(CAPsystem)：瑞典Pharmacia公司推出原理：熒光固相免疫檢測系統(tǒng)。其載體為CAP。單價變應(yīng)原CAP，多價變應(yīng)原CAP。（4）免疫芯片第38頁,共50頁，2024年2月25日，星期天意義：專一性檢測變應(yīng)原。

(5)吸入物變應(yīng)原過篩試驗(Phadiatop)：原理：SampleCAP，變應(yīng)原吸附，將空氣中95％以上的氣傳變應(yīng)原吸附到1個CAP上，患者血清中只要有針對這些變應(yīng)原其中之一的sIgE，即可呈陽性反應(yīng)。用途：過篩試驗。第39頁,共50頁，2024年2月25日，星期天

(四)嗜酸粒細胞陽離子蛋白測定(eosinophilcationicprotein，ECP)作用：標本：肺泡灌洗液和空腹血清ECP測定方法：①CAPsystem雙抗體夾心法。②ELISA

(五)嗜酸粒細胞涂片檢查標本：分泌物，排泄物。第40頁,共50頁，2024年2月25日，星期天(六)嗜堿粒細胞脫顆粒試驗原理：方法：外周血分離嗜堿粒細胞+變應(yīng)原→→染色判定：與對照比較，嗜堿粒細胞數(shù)減少30％以上時為陽性。評價；與RAST和皮膚試驗的符合率較高，可用于尋找過敏原及判斷脫敏治療的療效。第41頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)Ⅱ型超敏反應(yīng)

特點：抗體(主要為IgG或IgM類)，補體、吞噬細胞和NK細胞，導致靶細胞損傷或破壞。

細胞溶解型或細胞毒性超敏反應(yīng)。一、發(fā)生機制(一)抗原刺激1．細胞膜固有抗原①血細胞表面同種異型抗原②異嗜性抗原③改變的自身抗原