生物化學(xué)習(xí)題及答案-核酸及生物化學(xué)習(xí)題及答案-酶

核酸(一)名詞解釋1．單核苷酸(mononucleotide)2．磷酸二酯鍵（phosphodiesterbonds）3．不對(duì)稱比率（dissymmetryratio）4．堿基互補(bǔ)規(guī)律(complementarybasepairing)5．反密碼子（anticodon）6．順反子（cistron）7．核酸的變性與復(fù)性（denaturation、renaturation）8．退火（annealing）9．增色效應(yīng)（hyperchromiceffect）10．減色效應(yīng)（hypochromiceffect）11．噬菌體（phage）12．發(fā)夾結(jié)構(gòu)（hairpinstructure）13．DNA的熔解溫度（meltingtemperatureTm）14．分子雜交（molecularhybridization）15．環(huán)化核苷酸(cyclicnucleotide)

（二）填空題1．DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型是_________于____年提出的。2．核酸的基本結(jié)構(gòu)單位是_____。3．脫氧核糖核酸在糖環(huán)______位置不帶羥基。4．兩類核酸在細(xì)胞中的分布不同，DNA主要位于____中，RNA主要位于____中。5．核酸分子中的糖苷鍵均為_____型糖苷鍵。糖環(huán)與堿基之間的連鍵為_____鍵。核苷與核苷之間通過_____鍵連接成多聚體。6．核酸的特征元素____。7．堿基與戊糖間是C-C連接的是______核苷。8．DNA中的____嘧啶堿與RNA中的_____嘧啶堿的氫鍵結(jié)合性質(zhì)是相似的。9．DNA中的____嘧啶堿與RNA中的_____嘧啶堿的氫鍵結(jié)合性質(zhì)是相似的。10．DNA雙螺旋的兩股鏈的順序是______關(guān)系。11．給動(dòng)物食用3H標(biāo)記的_______，可使DNA帶有放射性，而RNA不帶放射性。12．B型DNA雙螺旋的螺距為___，每匝螺旋有___對(duì)堿基，每對(duì)堿基的轉(zhuǎn)角是___。13．在DNA分子中，一般來說G-C含量高時(shí)，比重___，Tm（熔解溫度）則___，分子比較穩(wěn)定。14．在___條件下，互補(bǔ)的單股核苷酸序列將締結(jié)成雙鏈分子。15．____RNA分子指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成，_____RNA分子用作蛋白質(zhì)合成中活化氨基酸的載體。16．DNA分子的沉降系數(shù)決定于_____、_____。17．DNA變性后，紫外吸收___，粘度___、浮力密度___，生物活性將___。18．因?yàn)楹怂岱肿泳哂衉__、___，所以在___nm處有吸收峰，可用紫外分光光度計(jì)測(cè)定。19．雙鏈DNA熱變性后，或在pH2以下，或在pH12以上時(shí)，其OD260______，同樣條件下，單鏈DNA的OD260______。20．DNA樣品的均一性愈高，其熔解過程的溫度范圍愈______。21．DNA所在介質(zhì)的離子強(qiáng)度越低，其熔解過程的溫度范圍愈___，熔解溫度愈___，所以DNA應(yīng)保存在較_____濃度的鹽溶液中，通常為_____mol/L的NaCI溶液。22．mRNA在細(xì)胞內(nèi)的種類___，但只占RNA總量的____，它是以_____為模板合成的，又是_______合成的模板。23．變性DNA的復(fù)性與許多因素有關(guān)，包括____，____，____，____，_____，等。24．維持DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要因素是_____，其次，大量存在于DNA分子中的弱作用力如_____，______和_____也起一定作用。25．mRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)呈___形，三級(jí)結(jié)構(gòu)呈___形，其3＇末端有一共同堿基序列___其功能是___。26．常見的環(huán)化核苷酸有___和___。其作用是___，他們核糖上的___位與___位磷酸-OH環(huán)化。27．真核細(xì)胞的mRNA帽子由___組成，其尾部由___組成，他們的功能分別是______，_______。28．DNA在水溶解中熱變性之后，如果將溶液迅速冷卻，則DNA保持____狀態(tài)；若使溶液緩慢冷卻，則DNA重新形成___。

（三）選擇題1．ATP分子中各組分的連接方式是：A．R-A-P-P-PB．A-R-P-P-PC．P-A-R-P-PD．P-R-A-P-P2．hnRNA是下列哪種RNA的前體？A．tRNAB．rRNAC．mRNAD．SnRNA3．決定tRNA攜帶氨基酸特異性的關(guān)鍵部位是：A．–XCCA3`末端B．TψC環(huán)；C．DHU環(huán)D．額外環(huán)E．反密碼子環(huán)4．根據(jù)Watson-Crick模型，求得每一微米DNA雙螺旋含核苷酸對(duì)的平均數(shù)為：:A．25400B．2540C．29411D．2941E．35055．構(gòu)成多核苷酸鏈骨架的關(guān)鍵是：A．2′3′-磷酸二酯鍵B．2′4′-磷酸二酯鍵C．2′5′-磷酸二酯鍵D．3′4′-磷酸二酯鍵E．3′5′-磷酸二酯鍵6．與片段TAGAp互補(bǔ)的片段為：A．AGATpB．ATCTpC．TCTApD．UAUAp7．含有稀有堿基比例較多的核酸是：A．胞核DNAB．線粒體DNAC．tRNAD．mRNA8．真核細(xì)胞mRNA帽子結(jié)構(gòu)最多見的是：A．m7APPPNmPNmPB．m7GPPPNmPNmPC．m7UPPPNmPNmPD．m7CPPPNmPNmPE．m7TPPPNmPNmP9．DNA變性后理化性質(zhì)有下述改變：A．對(duì)260nm紫外吸收減少B．溶液粘度下降C．磷酸二酯鍵斷裂D．核苷酸斷裂10．雙鏈DNA的Tm較高是由于下列哪組核苷酸含量較高所致：A．A+GB．C+TC．A+TD．G+CE．A+C11．密碼子GψA，所識(shí)別的密碼子是：A．CAUB．UGCC．CGUD．UACE．都不對(duì)12．真核生物mRNA的帽子結(jié)構(gòu)中，m7G與多核苷酸鏈通過三個(gè)磷酸基連接，連接方式是：A．2′-5′B．3′-5′C．3′-3′D．5′-5′E．3′-3′13．在pH3.5的緩沖液中帶正電荷最多的是：A．AMPB．GMPC．CMPD．UMP14．下列對(duì)于環(huán)核苷酸的敘述，哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的？A．cAMP與cGMP的生物學(xué)作用相反B．重要的環(huán)核苷酸有cAMP與cGMPC．cAMP是一種第二信使D．cAMP分子內(nèi)有環(huán)化的磷酸二酯鍵15．真核生物DNA纏繞在組蛋白上構(gòu)成核小體，核小體含有的蛋白質(zhì)是A．H1、H2、H3、H4各兩分子B．H1A、H1B、H2B、H2A各兩分子C．H2A、H2B、H3A、H3B各兩分子D．H2A、H2B、H3、H4各兩分子E．H2A、H2B、H4A、H4B各兩分子（四）是非判斷題（）1．DNA是生物遺傳物質(zhì)，RNA則不是。（）2．脫氧核糖核苷中的糖環(huán)3’位沒有羥基。（）3．原核生物和真核生物的染色體均為DNA與組蛋白的復(fù)合體。（）4．核酸的紫外吸收與溶液的pH值無關(guān)。（）5．生物體的不同組織中的DNA，其堿基組成也不同。（）6．核酸中的修飾成分（也叫稀有成分）大部分是在tRNA中發(fā)現(xiàn)的。（）7．DNA的Tm值和AT含量有關(guān)，AT含量高則Tm高。（）8．真核生物mRNA的5`端有一個(gè)多聚A的結(jié)構(gòu)。（）9．DNA的Tm值隨（A+T）/（G+C）比值的增加而減少。（）10．B-DNA代表細(xì)胞內(nèi)DNA的基本構(gòu)象，在某些情況下，還會(huì)呈現(xiàn)A型、Z型和三股螺旋的局部構(gòu)象。（）11．DNA復(fù)性（退火）一般在低于其Tm值約20℃的溫度下進(jìn)行的。（）12．用堿水解核酸時(shí)，可以得到2’和3’-核苷酸的混合物。（）13．生物體內(nèi)，天然存在的DNA分子多為負(fù)超螺旋。（）14．mRNA是細(xì)胞內(nèi)種類最多、含量最豐富的RNA。（）15．tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)中的額外環(huán)是tRNA分類的重要指標(biāo)。（）16．對(duì)于提純的DNA樣品，測(cè)得OD260/OD280<1.8，則說明樣品中含有RNA。（）17．基因表達(dá)的最終產(chǎn)物都是蛋白質(zhì)。（）18．兩個(gè)核酸樣品A和B，如果A的OD260/OD280大于B的OD260/OD280，那么A的純度大于B的純度。（）19．毫無例外，從結(jié)構(gòu)基因中DNA序列可以推出相應(yīng)的蛋白質(zhì)序列。（）20．真核生物成熟mRNA的兩端均帶有游離的3’-OH。

（五）簡(jiǎn)答題1．將核酸完全水解后可得到哪些組分?DNA和RNA的水解產(chǎn)物有何不同？2．計(jì)算下列各題：（1）T7噬菌體DNA，其雙螺旋鏈的相對(duì)分子質(zhì)量為2.5×107。計(jì)算DNA鏈的長(zhǎng)度（設(shè)核苷酸的平均相對(duì)分子質(zhì)量為650）。（2）相對(duì)分子質(zhì)量為130×106的病毒DNA分子，每微米的質(zhì)量是多少？（3）編碼88個(gè)核苷酸的tRNA的基因有多長(zhǎng)？（4）編碼細(xì)胞色素C（104個(gè)氨基酸）的基因有多長(zhǎng)（不考慮起始和終止序列）？（5）編碼相對(duì)分子質(zhì)量為9.6萬的蛋白質(zhì)的mRNA，相對(duì)分子質(zhì)量為多少（設(shè)每個(gè)氨基酸的平均相對(duì)分子量為120）？3．對(duì)一雙鏈DNA而言，若一條鏈中（A+G）/（T+C）=0.7，則：（1）互補(bǔ)鏈中（A+G）/（T+C）=？（2）在整個(gè)DNA分子中（A+G）/（T+C）=？（3）若一條鏈中（A+T）/（G+C）=0.7，則互補(bǔ)鏈中（A+T）/（G+C）=？（4）在整個(gè)DNA分子中（A+T）/（G+C）=？4．DNA熱變性有何特點(diǎn)？Tm值表示什么？5．在pH7.0，0.165mol/LNaCl條件下，測(cè)得某一DNA樣品的Tm為89.3℃。求出四種堿基百分組成。6．簡(jiǎn)述下列因素如何影響DNA的復(fù)性過程：（1）陽離子的存在；（2）低于Tm的溫度；（2）高濃度的DNA鏈。7．核酸分子中是通過什么鍵連接起來的？8．DNA分子二級(jí)結(jié)構(gòu)有哪些特點(diǎn)？9．在穩(wěn)定的DNA雙螺旋中，哪兩種力在維系分子立體結(jié)構(gòu)方面起主要作用？10．簡(jiǎn)述tRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)的組成特點(diǎn)及其每一部分的功能。11．用1mol/L的KOH溶液水解核酸，兩類核酸（DNA及RNA）的水解有何不同？12．如何將分子量相同的單鏈DNA與單鏈RNA分開？13．計(jì)算下列各核酸水溶液在pH7.0，通過1.0cm光徑杯時(shí)的260nm處的A值（消光度）。已知：AMP的摩爾消光系數(shù)A260=15400GMP的摩爾消光系數(shù)A260=11700CMP的摩爾消光系數(shù)A260=7500UMP的摩爾消光系數(shù)A260=9900dTMP的摩爾消光系數(shù)A260=9200求：（1）32μmol/LAMP，（2）47.5μmol/LCMP，（3）6.0μmol/LUMP的消光度，（4）48μmol/LAMP和32μmol/LUMP混合物的A260消光度。(5)A260=0.325的GMP溶液的摩爾濃度(以摩爾/升表示，溶液pH7.0)。(6)A260=0.090的dTMP溶液的摩爾濃度(以摩爾/升表示，溶液pH7.0)。14．如果人體有1014個(gè)細(xì)胞，每個(gè)體細(xì)胞的DNA量為6.4×109個(gè)堿基對(duì)。試計(jì)算人體DNA的總長(zhǎng)度是多少？是太陽-地球之間距離（2.2×109公里）的多少倍？15．指出在pH2.5、pH3.5、pH6、pH8、pH11.4時(shí)，四種核苷酸所帶的電荷數(shù)（或所帶電荷數(shù)多少的比較），并回答下列問題：（1）電泳分離四種核苷酸時(shí)，緩沖液應(yīng)取哪個(gè)pH值比較合適？此時(shí)它們是向哪一極移動(dòng)？移動(dòng)的快慢順序如何？（2）當(dāng)要把上述四種核苷酸吸附于陰離子交換樹脂柱上時(shí)，應(yīng)調(diào)到什么pH值？（3）如果用洗脫液對(duì)陰離子交換樹脂上的四種核苷酸進(jìn)行洗脫分離時(shí)，洗脫液應(yīng)調(diào)到什么pH值？這四種核苷酸上的洗脫順序如何？為什么？

參考答案（一）名詞解釋1.

單核苷酸(mononucleotide)：核苷與磷酸縮合生成的磷酸酯稱為單核苷酸。2.

磷酸二酯鍵（phosphodiesterbonds）：?jiǎn)魏塑账嶂?，核苷的戊糖與磷酸的羥基之間形成的磷酸酯鍵。3.

不對(duì)稱比率（dissymmetryratio）：不同生物的堿基組成由很大的差異，這可用不對(duì)稱比率（A+T）/（G+C）表示。4.

堿基互補(bǔ)規(guī)律(complementarybasepairing)：在形成雙螺旋結(jié)構(gòu)的過程中，由于各種堿基的大小與結(jié)構(gòu)的不同，使得堿基之間的互補(bǔ)配對(duì)只能在G…C（或C…G）和A…T（或T…A）之間進(jìn)行，這種堿基配對(duì)的規(guī)律就稱為堿基配對(duì)規(guī)律（互補(bǔ)規(guī)律）。5.

反密碼子（anticodon）：在tRNA鏈上有三個(gè)特定的堿基，組成一個(gè)密碼子，由這些反密碼子按堿基配對(duì)原則識(shí)別mRNA鏈上的密碼子。反密碼子與密碼子的方向相反。6.

順反子（cistron）:基因功能的單位；一段染色體，它是一種多肽鏈的密碼；一種結(jié)構(gòu)基因。7.核酸的變性、復(fù)性（denaturation、renaturation）：當(dāng)呈雙螺旋結(jié)構(gòu)的DNA溶液緩慢加熱時(shí)，其中的氫鍵便斷開，雙鏈DNA便脫解為單鏈，這叫做核酸的“溶解”或變性。在適宜的溫度下，分散開的兩條DNA鏈可以完全重新結(jié)合成和原來一樣的雙股螺旋。這個(gè)DNA螺旋的重組過程稱為“復(fù)性”。8.

退火（annealing）：當(dāng)將雙股鏈呈分散狀態(tài)的DNA溶液緩慢冷卻時(shí)，它們可以發(fā)生不同程度的重新結(jié)合而形成雙鏈螺旋結(jié)構(gòu)，這現(xiàn)象稱為“退火”。9.

增色效應(yīng)（hyperchromiceffect）：當(dāng)DNA從雙螺旋結(jié)構(gòu)變?yōu)閱捂湹臒o規(guī)則卷曲狀態(tài)時(shí)，它在260nm處的吸收便增加，這叫“增色效應(yīng)”。10.減色效應(yīng)（hypochromiceffect）：DNA在260nm處的光密度比在DNA分子中的各個(gè)堿基在260nm處吸收的光密度的總和小得多（約少35%~40%）,這現(xiàn)象稱為“減色效應(yīng)”。11.

噬菌體（phage）：一種病毒，它可破壞細(xì)菌，并在其中繁殖。也叫細(xì)菌的病毒。12.發(fā)夾結(jié)構(gòu)（hairpinstructure）：RNA是單鏈線形分子，只有局部區(qū)域?yàn)殡p鏈結(jié)構(gòu)。這些結(jié)構(gòu)是由于RNA單鏈分子通過自身回折使得互補(bǔ)的堿基對(duì)相遇，形成氫鍵結(jié)合而成的，稱為發(fā)夾結(jié)構(gòu)。13.

DNA的熔解溫度（Tm值）：引起DNA發(fā)生“熔解”的溫度變化范圍只不過幾度，這個(gè)溫度變化范圍的中點(diǎn)稱為熔解溫度（Tm）。14.

分子雜交（molecularhybridization）：不同的DNA片段之間，DNA片段與RNA片段之間，如果彼此間的核苷酸排列順序互補(bǔ)也可以復(fù)性，形成新的雙螺旋結(jié)構(gòu)。這種按照互補(bǔ)堿基配對(duì)而使不完全互補(bǔ)的兩條多核苷酸相互結(jié)合的過程稱為分子雜交。15.環(huán)化核苷酸(cyclicnucleotide)：?jiǎn)魏塑账嶂械牧姿峄謩e與戊糖的3’-OH及5’-OH形成酯鍵，這種磷酸內(nèi)酯的結(jié)構(gòu)稱為環(huán)化核苷酸。

（二）填空題1.

Watson-Crick;19532.

核苷酸3.

2’4.

細(xì)胞核；細(xì)胞質(zhì)5.

β；糖苷；磷酸二酯鍵6.

磷7.

假尿嘧啶8.

胸腺；尿9.

胸腺；尿10.

反向平行、互補(bǔ)11.

胸腺嘧啶12.

3.4nm；10；36°13.

大；高14.

退火15.

mRNA；tRNA16.

分子大??；分子形狀17.

增加；下降；升高；喪失18.

嘌呤；嘧啶；26019.

增加；不變20.

窄21.

寬；低；高；122.

多；5%；DNA；蛋白質(zhì)23.

樣品的均一度；DNA的濃度；DNA片段大??；溫度的影響；溶液離子強(qiáng)度24.

堿基堆積力；氫鍵；離子鍵；范德華力25.

三葉草；倒L型；CCA；攜帶活化了的氨基酸26.

cAMP；cGMP；第二信使；3’；5’27.

m7G；polyA；m7G識(shí)別起始信號(hào)的一部分；polyA對(duì)28.

單鏈；雙鏈

（三）選擇題1．B：ATP分子中各組分的連接方式為：腺嘌呤-核糖-三磷酸，既A-R-P-P-P。2．C：hnRNA是核不均一RNA，在真核生物細(xì)胞核中，為真核mRNA的前體。3．E：tRNA的功能是以它的反密碼子區(qū)與mRNA的密碼子堿基互補(bǔ)配對(duì)，來決定攜帶氨基酸的特異性。4．D：根據(jù)Watson-Crick模型，每對(duì)堿基間的距離為0.34nm，那么1μmDNA雙螺旋平均含有1000nm/0.34nm個(gè)核苷酸對(duì)數(shù)，即2941對(duì)。5．E：核苷酸是通過3`5`-磷酸二酯鍵連結(jié)成多核苷酸鏈的。6．C：核酸是具有極性的分子，習(xí)慣上以5’→3’的方向表示核酸片段，TAGAp互補(bǔ)的片段也要按5’→3’的方向書寫，即TCTAp7．C：tRNA含有稀有堿基比例較多的核酸。8．B：真核細(xì)胞mRNA帽子結(jié)構(gòu)最多見的是通過5’,5’-磷酸二酯鍵連接的甲基鳥嘌呤核苷酸，即m7GPPPNmP。9．B：核酸的變性指核酸雙螺旋區(qū)的氫鍵斷裂，變成單鏈的無規(guī)則的線團(tuán)，并不涉及共價(jià)鍵的斷裂。一系列物化性質(zhì)也隨之發(fā)生改變：粘度降低，浮力密度升高等，同時(shí)改變二級(jí)結(jié)構(gòu)，有時(shí)可以失去部分或全部生物活性。DNA變性后，由于雙螺旋解體，堿基堆積已不存在，藏于螺旋內(nèi)部的堿基暴露出來，這樣就使得變性后的DNA對(duì)260nm紫外光的吸光率比變性前明顯升高（增加），這種現(xiàn)象稱為增色效應(yīng)。因此判斷只有B對(duì)。10．D：因?yàn)镚≡C對(duì)比A=T對(duì)更為穩(wěn)定，故G≡C含量越高的DNA的變性是Tm值越高，它們成正比關(guān)系。11．D：ψ為假尿苷酸，其中的U可以與A配對(duì)，所以反密碼子GψA，所識(shí)別的密碼子是UAC。12．D：參照選擇題8。13．C：在pH3.5的緩沖液中，C是四種堿基中獲得正電荷最多的堿基。14．A：在生物細(xì)胞中存在的環(huán)化核苷酸，研究得最多的是3’,5’-環(huán)腺苷酸（cAMP）和3’,5’-環(huán)鳥苷酸（cGMP）。它們是由其分子內(nèi)的磷酸與核糖的3’,5’碳原子形成雙酯環(huán)化而成的。都是一種具有代謝調(diào)節(jié)作用的環(huán)化核苷酸。常被稱為生物調(diào)節(jié)的第二信使。15．D：真核染色質(zhì)主要的組蛋白有五種——Hl、H2A、H2B、H3、H4。DNA和組蛋白形成的復(fù)合物就叫核小體，核小體是染色質(zhì)的最基本結(jié)構(gòu)單位，成球體狀，每個(gè)核小體含有8個(gè)組蛋白，各含兩個(gè)H2A、H2B、H3、H4分子，球狀體之間有一定間隔，被

（四）是非判斷題1．錯(cuò)：RNA也是生命的遺傳物質(zhì)。2．錯(cuò)：脫氧核糖核苷中的糖環(huán)2’位沒有羥基。3．錯(cuò)：真核生物的染色體為DNA與組蛋白的復(fù)合體，原核生物的染色體為DNA與堿性精胺、亞精胺結(jié)合。4．錯(cuò)：核酸的紫外吸收與溶液的pH值有關(guān)。5．錯(cuò)：生物體的不同組織中的DNA，其堿基組成也不同。6．對(duì)：核酸中的修飾成分（也叫稀有成分）大部分是在tRNA中發(fā)現(xiàn)的。7．錯(cuò)：DNA的Tm值和GC含量有關(guān)，GC含量高則Tm高。8．錯(cuò)：真核生物mRNA的3`端有一個(gè)多聚A的結(jié)構(gòu)。9．對(duì)：（G+C）含量減少，DNA的Tm值減少，（A+T）/（G+C）比值的增加。10．對(duì)：在細(xì)胞內(nèi)，B-DNA代表DNA的基本構(gòu)象，但在不同某些情況下，也會(huì)呈現(xiàn)A型、Z型和三股螺旋的局部構(gòu)象。11．對(duì)：DNA復(fù)性（退火）一般在低于其Tm值約20~25℃12．對(duì)：用堿水解核酸時(shí)，先生成2’,3’-環(huán)核苷酸，再水解為2’或3’-核苷酸。13．對(duì)：生物體內(nèi)，負(fù)超螺旋DNA容易解鏈，便于進(jìn)行復(fù)制、轉(zhuǎn)錄等反應(yīng)。14．錯(cuò)：mRNA是細(xì)胞內(nèi)種類最多、但含量很低的RNA。細(xì)胞中含量最豐富的RNA是rRNA。15．對(duì)：不同tRNA中額外環(huán)大小差異很大，因此可以作為tRNA分類的重要指標(biāo)。16．錯(cuò)：對(duì)于提純的DNA樣品，如果測(cè)得OD260/OD280<1.8，則說明樣品中有蛋白質(zhì)。17．錯(cuò)：基因表達(dá)的最終產(chǎn)物可以是蛋白質(zhì)或RNA。18．錯(cuò)：核酸樣品的純度可以根據(jù)樣品的OD260/OD280的比值判斷，純的DNA樣品OD260/OD280=1.8，純的RNA樣品OD260/OD280=2.0。19．錯(cuò)：真核生物的結(jié)構(gòu)基因中包括內(nèi)含子和外顯子部分，經(jīng)轉(zhuǎn)錄、加工后只有外顯子部分翻譯成蛋白質(zhì)，與蛋白質(zhì)氨基酸序列相對(duì)應(yīng)。20．對(duì)：真核生物成熟mRNA的5’為帽子結(jié)構(gòu)，即m7G（5’）PPP（5’）Nm-，因此兩5’端也是3’-OH（五）問答題及計(jì)算題（解題要點(diǎn)）1．答：核酸完全水解后可得到堿基、戊糖、磷酸三種組分。DNA和RNA的水解產(chǎn)物戊糖、嘧啶堿基不同。2．答：（1）(2.5×107/650)×0.34=1.3×104nm=13μm。（2）650/0.34=1.9×106/μm。（3）88×0.34nm=30nm=0.3μm。（4）104×3×0.34=106nm≈0.11μm。（5）(96000/120)×3×320=76800。3．答：（1）設(shè)DNA的兩條鏈分別為α和β，那么：A=βT，Tα=Aβ，Gα=Cβ，：Cα=Gβ，因?yàn)椋?Aα+Gα)/（Tβ+Cβ）=(Aα+Gα)/（Aβ+Gβ）=0.7所以，互補(bǔ)鏈中（Aβ+Gβ）/（Tβ+Cβ）=1/0.7=1.43（2）在整個(gè)DNA分子中，因?yàn)锳=T，G=C，所以，A+G=T+C，（A+G）/（T+C）=1（3）假設(shè)同（1），則Aα+Tα=Tβ+Aβ，Gα+Cα=Cβ+Gβ，所以，（Aα+Tα）/（Gα+Cα）=（Aβ+Tβ）/（Gβ+Cβ）=0.7（4）在整個(gè)DNA分子中（Aα+Tα+Aβ+Tβ）/（Gα+Cα+Gβ+Cβ）=2（Aα+Tα）/2（Gα+Cα）=0.74．答：將DNA的稀鹽溶液加熱到70～100℃幾分鐘后，雙螺旋結(jié)構(gòu)即發(fā)生破壞，氫鍵斷裂，兩條鏈彼此分開，形成無規(guī)則線團(tuán)狀，此過程為DNA的熱變性，有以下特點(diǎn)：變性溫度范圍很窄，260nm處的紫外吸收增加；粘度下降；生物活性喪失；比旋度下降；酸堿滴定曲線改變。Tm值代表核酸的變性溫度（熔解溫度、熔點(diǎn)）。在數(shù)值上等于DNA5．答：為（G+C）%=(Tm–69.3)×2.44×%=(89.3-69.3)×2.44×%=48.8%G=C=24.4%(A+T)%=1－48.8%=51.2%A=T=25.6%6．答：（1）陽離子的存在可中和DNA中帶負(fù)電荷的磷酸基團(tuán)，減弱DNA鏈間的靜電作用，促進(jìn)DNA的復(fù)性；（2）低于Tm的溫度可以促進(jìn)DNA復(fù)性；（3）DNA鏈濃度增高可以加快互補(bǔ)鏈隨機(jī)碰撞的速度、機(jī)會(huì)，從而促進(jìn)DNA復(fù)性。7．答：核酸分子中是通過3’,5’-磷酸二酯鍵連接起來的。8．答：按Watson-Crick模型，DNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)有：兩條反相平行的多核苷酸鏈圍繞同一中心軸互繞；堿基位于結(jié)構(gòu)的內(nèi)側(cè)，而親水的糖磷酸主鏈位于螺旋的外側(cè)，通過磷酸二酯鍵相連，形成核酸的骨架；堿基平面與軸垂直，糖環(huán)平面則與軸平行。兩條鏈皆為右手螺旋；雙螺旋的直徑為2nm，堿基堆積距離為0.34nm，兩核酸之間的夾角是36°，每對(duì)螺旋由10對(duì)堿基組成；堿基按A=T，G≡C配對(duì)互補(bǔ)，彼此以氫鍵相連系。維持DNA結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的力量主要是堿基堆積力；雙螺旋結(jié)構(gòu)表面有兩條螺形凹溝，一大一小。9．答：在穩(wěn)定的DNA雙螺旋中，堿基堆積力和堿基配對(duì)氫鍵在維系分子立體結(jié)構(gòu)方面起主要作用。10．答：tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)為三葉草結(jié)構(gòu)。其結(jié)構(gòu)特征為：（1）tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)由四臂、四環(huán)組成。已配對(duì)的片斷稱為臂，未配對(duì)的片斷稱為環(huán)。（2）葉柄是氨基酸臂。其上含有CCA-OH3’，此結(jié)構(gòu)是接受氨基酸的位置。（3）氨基酸臂對(duì)面是反密碼子環(huán)。在它的中部含有三個(gè)相鄰堿基組成的反密碼子，可與mRNA上的密碼子相互識(shí)別。（4）左環(huán)是二氫尿嘧啶環(huán)（D環(huán)），它與氨基酰-tRNA合成酶的結(jié)合有關(guān)。（5）右環(huán)是假尿嘧啶環(huán)（TψC環(huán)），它與核糖體的結(jié)合有關(guān)。（6）在反密碼子與假尿嘧啶環(huán)之間的是可變環(huán)，它的大小決定著tRNA分子大小。11．答：不同。RNA可以被水解成單核苷酸，而DNA分子中的脫氧核糖2’碳原子上沒有羥基，所以DNA不能被堿水解。12．答：（1）用專一性的RNA酶與DNA酶分別對(duì)兩者進(jìn)行水解。（2）用堿水解。RNA能夠被水解，而DNA不被水解。（3）進(jìn)行顏色反應(yīng)。二苯胺試劑可以使DNA變成藍(lán)色；苔黑酚（地衣酚）試劑能使RNA變成綠色。（4）用酸水解后，進(jìn)行單核苷酸的分析（層析法或電泳法），含有U的是RNA，含有T的是DNA。13．答：已知：（1）32μmol/LAMP的A260消光度A260=32×10-6×15400=0.493（2）47.5μmol/LCMP的A260消光度A260=47.5×10-6×7500=0.356（3）6.0μmol/LUMP的A260消光度A260=6.0×10-6×9900=0.0594（4）48μmol/LAMP和32μmol/LUMP混合物的A260消光度A260=32×10-6×9900+48×10-6×15400=0.493=1.056（5）0.325/11700=2.78×10-5mol/L（6）0.090/9200=9.78×10-6mol/L14．答：（1）每個(gè)體細(xì)胞的DNA的總長(zhǎng)度為：6.4×109×0.34nm=2.176×109nm=2.176m（2）人體內(nèi)所有體細(xì)胞的DNA的總長(zhǎng)度為：2.176m×1014=2.176×10（3）這個(gè)長(zhǎng)度與太陽-地球之間距離（2.2×1092.176×1011/2.2×109=99倍15．答：種核苷酸帶電荷情況：

pH2.5pH3.5pH6pH8pH11.4UMP負(fù)電荷最多-1-1.5-2-3GMP負(fù)電荷較多-0.95-1.5-2-3AMP負(fù)電荷較少-0.46-1.5-2-2CMP帶正電荷-0.16-1.5-2-2（1）電泳分離四種核苷酸時(shí)應(yīng)取pH3.5的緩沖液，在該pH值時(shí)，這四種單核苷酸之間所帶負(fù)電荷差異較大，它們都向正極移動(dòng)，但移動(dòng)的速度不同，依次為：UMP>GMP>AMP>CMP（2）應(yīng)取pH8.0，這樣可使核苷酸帶較多負(fù)電荷，利于吸附于陰離子交換樹脂柱。雖然pH11.4時(shí)核苷酸帶有更多的負(fù)電荷，但pH過稿對(duì)樹脂不利。（3）洗脫液應(yīng)調(diào)到pH2.5。當(dāng)不考慮樹脂的非極性吸附時(shí)洗脫順序?yàn)镃MP>AMP>UMP>GMP（根據(jù)pH2.5時(shí)核苷酸負(fù)電荷的多少來決定洗脫速度），但實(shí)際上核苷酸和聚苯乙烯陰離子交換樹脂之間存在著非極性吸附，嘌呤堿基的非極性吸附是嘧啶堿基的3倍。靜電吸附與非極性吸附共同作用的結(jié)果使洗脫順序?yàn)椋篊MP>AMP>UMP>GMP。酶

（一）名詞解釋1．米氏常數(shù)（Km值）2．底物專一性（substratespecificity）3．輔基（prostheticgroup）4．單體酶（monomericenzyme）5．寡聚酶（oligomericenzyme）6．多酶體系（multienzymesystem）7．激活劑（activator）8．抑制劑（inhibitorinhibiton）9．變構(gòu)酶（allostericenzyme）10．同工酶（isozyme）11．誘導(dǎo)酶（inducedenzyme）12．酶原（zymogen）13．酶的比活力（enzymaticcompareenergy）14．活性中心（activecenter）

（二）英文縮寫符號(hào)1．NAD+（nicotinamideadeninedinucleotide）2．FAD（flavinadeninedinucleotide）3．THFA（tetrahydrofolicacid）4．NADP+（nicotinamideadeninedinucleotidephosphate）5．FMN（flavinmononucleotide）6．CoA（coenzymeA）7．ACP（acylcarrierprotein）8．BCCP（biotincarboxylcarrierprotein）9．PLP（pyridoxalphosphate）

（三）填空題1．酶是產(chǎn)生的，具有催化活性的。2．酶具有、、和等催化特點(diǎn)。3．影響酶促反應(yīng)速度的因素有、、、、和。4．胰凝乳蛋白酶的活性中心主要含有、、和基，三者構(gòu)成一個(gè)氫鍵體系，使其中的上的成為強(qiáng)烈的親核基團(tuán)，此系統(tǒng)稱為系統(tǒng)或。5．與酶催化的高效率有關(guān)的因素有、、、、等。6．丙二酸和戊二酸都是琥珀酸脫氫酶的抑制劑。7．變構(gòu)酶的特點(diǎn)是：（1），（2），它不符合一般的，當(dāng)以V對(duì)[S]作圖時(shí)，它表現(xiàn)出型曲線，而非曲線。它是酶。8．轉(zhuǎn)氨酶的輔因子為即維生素。其有三種形式，分別為、、，其中在氨基酸代謝中非常重要，是、和的輔酶。9．葉酸以其起輔酶的作用，它有和兩種還原形式，后者的功能作為載體。10．一條多肽鏈Asn-His-Lys-Asp-Phe-Glu-Ile-Arg-Glu-Tyr-Gly-Arg經(jīng)胰蛋白酶水解可得到個(gè)多肽。11．全酶由和組成，在催化反應(yīng)時(shí)，二者所起的作用不同，其中決定酶的專一性和高效率，起傳遞電子、原子或化學(xué)基團(tuán)的作用。12．輔助因子包括、和等。其中與酶蛋白結(jié)合緊密，需要除去，與酶蛋白結(jié)合疏松，可以用除去。13．T．R．Cech和S.Alman因各自發(fā)現(xiàn)了而共同獲得1989年的諾貝爾獎(jiǎng)（化學(xué)獎(jiǎng)）。14．根據(jù)國際系統(tǒng)分類法，所有的酶按所催化的化學(xué)反應(yīng)的性質(zhì)可分為六類、、、、、和。15．根據(jù)國際酶學(xué)委員會(huì)的規(guī)定，每一種酶都有一個(gè)唯一的編號(hào)。醇脫氫酶的編號(hào)是EC1.1.1.1，EC代表，4個(gè)數(shù)字分別代表、、和。16．根據(jù)酶的專一性程度不同，酶的專一性可以分為、、和。17．酶的活性中心包括和兩個(gè)功能部位，其中直接與底物結(jié)合，決定酶的專一性，是發(fā)生化學(xué)變化的部位，決定催化反應(yīng)的性質(zhì)。18．酶活力是指，一般用表示。19．通常討論酶促反應(yīng)的反應(yīng)速度時(shí)，指的是反應(yīng)的速度，即時(shí)測(cè)得的反應(yīng)速度。20．解釋別構(gòu)酶作用機(jī)理的假說有模型和模型兩種。21．固定化酶的優(yōu)點(diǎn)包括，，等。22．pH值影響酶活力的原因可能有以下幾方面：影響，影響，影響。23．溫度對(duì)酶活力影響有以下兩方面：一方面，另一方面。24．脲酶只作用于尿素，而不作用于其他任何底物，因此它具有專一性；甘油激酶可以催化甘油磷酸化，僅生成甘油-1-磷酸一種底物，因此它具有專一性。25．酶促動(dòng)力學(xué)的雙倒數(shù)作圖（Lineweaver-Burk作圖法），得到的直線在橫軸的截距為，縱軸上的截距為。26．磺胺類藥物可以抑制酶，從而抑制細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖。27．判斷一個(gè)純化酶的方法優(yōu)劣的主要依據(jù)是酶的和。28．維生素是維持生物體正常生長(zhǎng)所必需的一類_________有機(jī)物質(zhì)。主要作用是作為_________的組分參與體內(nèi)代謝。29．根據(jù)維生素的____________性質(zhì)，可將維生素分為兩類，即____________和____________。30．維生素B1由__________環(huán)與___________環(huán)通過__________相連，主要功能是以__________形式，作為____________和____________的輔酶，轉(zhuǎn)移二碳單位。31．維生素B2的化學(xué)結(jié)構(gòu)可以分為二部分，即____________和____________，其中____________原子上可以加氫，因此有氧化型和還原型之分。32．維生素B3由__________與_________通過___________相連而成，可以與__________，_________和___________共同組成輔酶___________，作為各種____________反應(yīng)的輔酶，傳遞____________。33．維生素B5是_________衍生物，有_________，_________兩種形式，其輔酶形式是________與_________，作為_______酶的輔酶，起遞______作用。34．生物素可看作由____________，____________，____________三部分組成，是____________的輔酶，在____________的固定中起重要的作用。35．維生素B12是唯一含____________的維生素，由____________，____________和氨基丙酸三部分組成，有多種輔酶形式。其中____________是變位酶的輔酶，____________是轉(zhuǎn)甲基酶的輔酶。36．維生素C是____________的輔酶，另外還具有____________作用等。

（四）選擇題1．酶的活性中心是指：A．酶分子上含有必需基團(tuán)的肽段B．酶分子與底物結(jié)合的部位C．酶分子與輔酶結(jié)合的部位D．酶分子發(fā)揮催化作用的關(guān)鍵性結(jié)構(gòu)區(qū)E．酶分子有絲氨酸殘基、二硫鍵存在的區(qū)域2．酶催化作用對(duì)能量的影響在于：A．增加產(chǎn)物能量水平B．降低活化能C．降低反應(yīng)物能量水平D．降低反應(yīng)的自由能E．增加活化能3．競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑作用特點(diǎn)是：A．與酶的底物競(jìng)爭(zhēng)激活劑B．與酶的底物競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心C．與酶的底物競(jìng)爭(zhēng)酶的輔基D．與酶的底物競(jìng)爭(zhēng)酶的必需基團(tuán)；E．與酶的底物競(jìng)爭(zhēng)酶的變構(gòu)劑4．競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑抑制程度與下列那種因素?zé)o關(guān)：A．作用時(shí)間B．抑制劑濃度C．底物濃度D．酶與抑制劑的親和力的大小E．酶與底物的親和力的大小5．哪一種情況可用增加[S]的方法減輕抑制程度：A．不可逆抑制作用B．競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用C．非競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用D．反競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用E．無法確定6．酶的競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑可以使：A．Vmax減小，Km減小B．Vmax增加，Km增加C．Vmax不變，Km增加D．Vmax不變，Km減小E．Vmax減小，Km增加7．下列常見抑制劑中，除哪個(gè)外都是不可逆抑制劑：A有機(jī)磷化合物B有機(jī)汞化合物C有機(jī)砷化合物D氰化物E磺胺類藥物8．酶的活化和去活化循環(huán)中，酶的磷酸化和去磷酸化位點(diǎn)通常在酶的哪一種氨基酸殘基上：A．天冬氨酸Ｂ．脯氨酸Ｃ．賴氨酸D．絲氨酸Ｅ．甘氨酸9．在生理?xiàng)l件下，下列哪種基團(tuán)既可以作為H+的受體，也可以作為H+的供體：A．His的咪唑基B．Lys的ε氨基C．Arg的胍基D．Cys的巰基E．Trp的吲哚基10．對(duì)于下列哪種抑制作用，抑制程度為50%時(shí)，[I]=Ki：A．不可逆抑制作用B．競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用C．非競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用D．反競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用E．無法確定11．下列輔酶中的哪個(gè)不是來自于維生素：A．CoA B．CoQ C．PLPD．FH2 E．FMN12．下列敘述中哪一種是正確的：A．所有的輔酶都包含維生素組分B．所有的維生素都可以作為輔酶或輔酶的組分C．所有的B族維生素都可以作為輔酶或輔酶的組分D．只有B族維生素可以作為輔酶或輔酶的組分13．多食糖類需補(bǔ)充：A．維生素B1B．維生素B2 C．維生素B5D．維生素B6E．維生素B714．多食肉類，需補(bǔ)充：A．維生素B1B．維生素B2 C．維生素B5D．維生素B6E．維生素B715．以玉米為主食，容易導(dǎo)致下列哪種維生素的缺乏：A．維生素B1B．維生素B2 C．維生素B5D．維生素B6E．維生素B716．下列化合物中除哪個(gè)外，常作為能量合劑使用：A．CoA B．ATP C．胰島素D．生物素17．下列化合物中哪個(gè)不含環(huán)狀結(jié)構(gòu)：A．葉酸B．泛酸C．煙酸D．生物素E．核黃素18．下列化合物中哪個(gè)不含腺苷酸組分：A．CoA B．FMNC．FADD．NAD+ E．NADP+19．需要維生素B6作為輔酶的氨基酸反應(yīng)有：A．成鹽、成酯和轉(zhuǎn)氨 B．成酰氯反應(yīng)C．烷基化反應(yīng)D．成酯、轉(zhuǎn)氨和脫羧E．轉(zhuǎn)氨、脫羧和消旋

（五）是非判斷題（）1．酶促反應(yīng)的初速度與底物濃度無關(guān)。（）2．當(dāng)?shù)孜锾幱陲柡退綍r(shí)，酶促反應(yīng)的速度與酶濃度成正比。（）3．某些酶的Km由于代謝產(chǎn)物存在而發(fā)生改變，而這些代謝產(chǎn)物在結(jié)構(gòu)上與底物無關(guān)。（）4．某些調(diào)節(jié)酶的V-[S]的S形曲線表明，酶與少量底物的結(jié)合增加了酶對(duì)后續(xù)底物分子的親和力。（）5．測(cè)定酶活力時(shí)，底物濃度不必大于酶濃度。（）6．測(cè)定酶活力時(shí)，一般測(cè)定產(chǎn)物生成量比測(cè)定底物消耗量更為準(zhǔn)確。（）7．在非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑存在下，加入足量的底物，酶促的反應(yīng)能夠達(dá)到正常Vmax。（）8．碘乙酸因可與活性中心-SH以共價(jià)鍵結(jié)合而抑制巰基酶，而使糖酵解途徑受阻。（）9．誘導(dǎo)酶是指當(dāng)細(xì)胞加入特定誘導(dǎo)物后，誘導(dǎo)產(chǎn)生的酶，這種誘導(dǎo)物往往是該酶的產(chǎn)物。（）10．酶可以促成化學(xué)反應(yīng)向正反應(yīng)方向轉(zhuǎn)移。（）11．對(duì)于可逆反應(yīng)而言，酶既可以改變正反應(yīng)速度，也可以改變逆反應(yīng)速度。（）12．酶只能改變化學(xué)反應(yīng)的活化能而不能改變化學(xué)反應(yīng)的平衡常數(shù)。（）13．酶活力的測(cè)定實(shí)際上就是酶的定量測(cè)定。（）14．從鼠腦分離的己糖激酶可以作用于葡萄糖（Km=6×10-6mol/L）或果糖（Km=2×10-3mol/L），則己糖激酶對(duì)果糖的親和力更高。（）15．Km是酶的特征常數(shù)，只與酶的性質(zhì)有關(guān)，與酶濃度無關(guān)（）16．Km是酶的特征常數(shù)，在任何條件下，Km是常數(shù)。（）17．Km是酶的特征常數(shù)，只與酶的性質(zhì)有關(guān)，與酶的底物無關(guān)。（）18．一種酶有幾種底物就有幾種Km值。（）19．當(dāng)[S]>>Km時(shí)，V趨向于Vmax，此時(shí)只有通過增加[E]來增加V。（）20．酶的最適pH值是一個(gè)常數(shù)，每一種酶只有一個(gè)確定的最適pH值。（）21．酶的最適溫度與酶的作用時(shí)間有關(guān)，作用時(shí)間長(zhǎng)，則最適溫度高，作用時(shí)間短，則最適溫度低。（）22．金屬離子作為酶的激活劑，有的可以相互取代，有的可以相互拮抗。（）23．增加不可逆抑制劑的濃度，可以實(shí)現(xiàn)酶活性的完全抑制。（）24．競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑一定與酶的底物結(jié)合在酶的同一部位。（）25．由1g粗酶制劑經(jīng)純化后得到10mg電泳純的酶制劑，那么酶的比活較原來提高了100倍。（）26．酶反應(yīng)的最適pH值只取決于酶蛋白本身的結(jié)構(gòu)。（）27．所有B族維生素都是雜環(huán)化合物。（）28．B族維生素都可以作為輔酶的組分參與代謝。（）29．脂溶性維生素都不能作為輔酶參與代謝。（）30．除了動(dòng)物外，其他生物包括植物、微生物的生長(zhǎng)也有需要維生素的現(xiàn)象。（）31．植物的某些器官可以自行合成某些維生素，并供給植物整體生長(zhǎng)所需。（）32．維生素E不容易被氧化，因此可做抗氧化劑。

（六）問答題及計(jì)算題1．怎樣證明酶是蛋白質(zhì)？2．簡(jiǎn)述酶作為生物催化劑與一般化學(xué)催化劑的共性及其個(gè)性？3．簡(jiǎn)述Cech及Altman是如何發(fā)現(xiàn)具有催化活性的RNA的？4．試指出下列每種酶具有哪種類型的專一性？（1）脲酶（只催化尿素NH2CONH2的水解，但不能作用于NH2CONHCH3）；（2）β-D-葡萄糖苷酶（只作用于β-D-葡萄糖形成的各種糖甘，但不能作用于其他的糖苷，例如果糖苷）；（3）酯酶（作用于R1COOR2的水解反應(yīng)）；（4）L-氨基酸氧化酶（只作用于L-氨基酸，而不能作用于D-氨基酸）；（5）反丁烯二酸水合酶[只作用于反丁烯二酸（延胡索酸），而不能作用于順丁烯二酸（馬來酸）]；（6）甘油激酶（催化甘油磷酸化，生成甘油-1-磷酸）。5．稱取25mg蛋白酶配成25mL溶液，取2mL溶液測(cè)得含蛋白氮0.2mg，另取0.1mL溶液測(cè)酶活力，結(jié)果每小時(shí)可以水解酪蛋白產(chǎn)生1500μg酪氨酸，假定1個(gè)酶活力單位定義為每分鐘產(chǎn)生1μg酪氨酸的酶量，請(qǐng)計(jì)算：（1）酶溶液的蛋白濃度及比活。（2）每克純酶制劑的總蛋白含量及總活力。6．Vmax與米氏常數(shù)可以通過作圖法求得，試比較V~[S]圖，雙倒數(shù)圖，V~V/[S]作圖，[S]/V~[S]作圖及直接線性作圖法求Vmax和Km的優(yōu)缺點(diǎn)？7．（1）為什么某些腸道寄生蟲如蛔蟲在體內(nèi)不會(huì)被消化道內(nèi)的胃蛋白酶、胰蛋白酶消化？（2）為什么蠶豆必須煮熟后食用，否則容易引起不適？8．使用下表數(shù)據(jù)，作圖判斷抑制劑類型（競(jìng)爭(zhēng)性還是非競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑）？[S]mmol/L2.03.04.010.015.0每小時(shí)形成產(chǎn)物的量（μmol）13.917.921.331.337.0（沒有抑制劑）每小時(shí)形成產(chǎn)物的量（μmol）8.812.114.925.731.3（有抑制劑）

9．甘油醛-3-磷酸脫氫酶（Mr150000）的活性位點(diǎn)有一個(gè)Cys殘基，假定為使5mL的1.2mg/mL的酶溶液完全失活，需要3.0×10-2mg碘乙酰胺（Mr185），計(jì)算酶的催化亞基的數(shù)目？10．對(duì)活細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)測(cè)定表明，酶的底物濃度通常就在這種底物的Km值附近，請(qǐng)解釋其生理意義？為什么底物濃度不是大大高于Km或大大低于Km呢？11．有時(shí)別構(gòu)酶的活性可以被低濃度的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑激活，請(qǐng)解釋？12．（1）對(duì)于一個(gè)遵循米氏動(dòng)力學(xué)的酶而言，當(dāng)[S]=Km時(shí)，若V=35μmol/min，Vmax是多少μmol/min？（2）當(dāng)[S]=2×10-5mo/L，V=40μmol/min，這個(gè)酶的Km是多少？（3）若I表示競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，KI=4×10-5mol/L，當(dāng)[S]=3×10-2mol/L和[I]=3×10-5mol/L時(shí)，V是多少？（4）若I是非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，在KI、[S]和[I]條件與（3）中相同時(shí)，V是多少？ （2）計(jì)算[S]=1.0×10-6mol/L和[S]=1.0×10-1mol/L時(shí)的v？ （3）計(jì)算[S]=2.0×10-3mol/L或[S]=2.0×10-6mol/L時(shí)最初5min內(nèi)的產(chǎn)物總量？ （4）假如每一個(gè)反應(yīng)體系中酶濃度增加到4倍時(shí)，Km，Vmax是多少？13．在很多酶的活性中心均有His殘基參與，請(qǐng)解釋？22．將下列化學(xué)名稱與B族維生素及其輔酶形式相匹配？（A）泛酸；（B）煙酸；（C）葉酸；（D）硫胺素；（E）核黃素；（F）吡哆素；（G）生物素。（1）B1；（2）B2；（3）B3；（4）B5；（5）B6；（6）B7；（7）B11；（8）B12。(Ⅰ)FMN；(Ⅱ)FAD；(Ⅲ)NAD+；(Ⅳ)NADP+；(Ⅴ)CoA；(Ⅵ)PLP；(Ⅶ)PMP；(Ⅷ)FH2，F(xiàn)H4；(Ⅸ)TPP。

參考答案

（一）名詞解釋1．米氏常數(shù)（Km值）：用Ｋm值表示，是酶的一個(gè)重要參數(shù)。Ｋm值是酶反應(yīng)速度（V）達(dá)到最大反應(yīng)速度（Vmax）一半時(shí)底物的濃度（單位M或mM）。米氏常數(shù)是酶的特征常數(shù)，只與酶的性質(zhì)有關(guān)，不受底物濃度和酶濃度的影響。2．底物專一性：酶的專一性是指酶對(duì)底物及其催化反應(yīng)的嚴(yán)格選擇性。通常酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng)或一類相似的反應(yīng)，不同的酶具有不同程度的專一性，酶的專一性可分為三種類型：絕對(duì)專一性、相對(duì)專一性、立體專一性。3．輔基：酶的輔因子或結(jié)合蛋白質(zhì)的非蛋白部分，與酶或蛋白質(zhì)結(jié)合得非常緊密，用透析法不能除去。4．單體酶：只有一條多肽鏈的酶稱為單體酶，它們不能解離為更小的單位。分子量為13,000——35,000。5．寡聚酶：有幾個(gè)或多個(gè)亞基組成的酶稱為寡聚酶。寡聚酶中的亞基可以是相同的，也可以是不同的。亞基間以非共價(jià)鍵結(jié)合，容易為酸堿，高濃度的鹽或其它的變性劑分離。寡聚酶的分子量從35000到幾百萬。6．多酶體系：由幾個(gè)酶彼此嵌合形成的復(fù)合體稱為多酶體系。多酶復(fù)合體有利于細(xì)胞中一系列反應(yīng)的連續(xù)進(jìn)行，以提高酶的催化效率，同時(shí)便于機(jī)體對(duì)酶的調(diào)控。多酶復(fù)合體的分子量都在幾百萬以上。7．激活劑：凡是能提高酶活性的物質(zhì)，都稱激活劑，其中大部分是離子或簡(jiǎn)單的有機(jī)化合物。8．抑制劑：能使酶的必需基團(tuán)或酶活性部位中的基團(tuán)的化學(xué)性質(zhì)改變而降低酶的催化活性甚至使酶的催化活性完全喪失的物質(zhì)。9．變構(gòu)酶：或稱別構(gòu)酶，是代謝過程中的關(guān)鍵酶，它的催化活性受其三維結(jié)構(gòu)中的構(gòu)象變化的調(diào)節(jié)。10．同工酶：是指有機(jī)體內(nèi)能夠催化同一種化學(xué)反應(yīng)，但其酶蛋白本身的分子結(jié)構(gòu)組成卻有所不同的一組酶。11．誘導(dǎo)酶：是指當(dāng)細(xì)胞中加入特定誘導(dǎo)物后誘導(dǎo)產(chǎn)生的酶，它的含量在誘導(dǎo)物存在下顯著增高，這種誘導(dǎo)物往往是該酶底物的類似物或底物本身。12．酶原：酶的無活性前體，通常在有限度的蛋白質(zhì)水解作用后，轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂谢钚缘拿浮?3．酶的比活力：比活力是指每毫克蛋白質(zhì)所具有的活力單位數(shù)，可以用下式表示：

比活力=活力單位數(shù)蛋白質(zhì)量（mg）

14．活性中心：酶分子中直接與底物結(jié)合，并催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的部位，稱為酶的活性中心。

（二）英文縮寫符號(hào)1．NAD+（nicotinamideadeninedinucleotide）：煙酰胺腺嘌呤二核苷酸；輔酶Ⅰ。2．FAD（flavinadeninedinucleotide）：黃素腺嘌呤二核苷酸。3．THFA（tetrahydrofolicacid）：四氫葉酸。4．NADP+（nicotinamideadeninedinucleotidephosphate）：煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸；輔酶Ⅱ。5．FMN（flavinmononucleotide）：黃素單核苷酸。6．CoA（coenzymeA）：輔酶A。7．ACP（acylcarrierprotein）：?；d體蛋白。8．BCCP（biotincarboxylcarrierprotein）：生物素羧基載體蛋白。9．PLP（pyridoxalphosphate）：磷酸吡哆醛。

（三）填空題1．活細(xì)胞；蛋白質(zhì)2．高效性；專一性；作用條件溫和；受調(diào)控3．[E]；[S]；pH；T（溫度）；I（抑制劑）；A（激活劑）4．Ser195；His57；Asp102；Ser195；氧原子；電荷轉(zhuǎn)接；電荷中繼網(wǎng)5．鄰近效應(yīng)；定向效應(yīng)；誘導(dǎo)應(yīng)變；共價(jià)催化；活性中心酸堿催化6．競(jìng)爭(zhēng)性7．由多個(gè)亞基組成；除活性中心外還有變構(gòu)中心；米氏方程；S；雙；寡聚酶8．磷酸吡哆醛；VB6；磷酸吡哆醛；磷酸吡哆胺；磷酸吡哆醇；磷酸吡哆醛；轉(zhuǎn)氨酶；脫羧酶；消旋酶9．還原性產(chǎn)物；DHFA；THFA；一碳單位10．三11．酶蛋白；輔助因子；酶蛋白；輔助因子12．輔酶；輔基；金屬離子；輔基；化學(xué)方法處理；輔酶；透析法13．核酶（具有催化能力的RNA）14．氧化還原酶類；轉(zhuǎn)移酶類；水解酶類；裂合酶類；異構(gòu)酶類；合成酶類15．酶學(xué)委員會(huì)；氧化還原酶類；作用-CHOH基團(tuán)的亞類；受體NAD+或NADP+的亞亞類；序號(hào)為116．絕對(duì)專一性；相對(duì)專一性；立體專一性 17．結(jié)合部位；催化部位；結(jié)合部位；催化部位18．酶催化化學(xué)反應(yīng)的能力；一定條件下，酶催化某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速度19．初；底物消耗量<5%20．齊變；序變21．穩(wěn)定性好；可反復(fù)使用；易于與反應(yīng)液分離22．底物分子的解離狀態(tài)；酶分子的解離狀態(tài)；中間復(fù)合物的解離狀態(tài)23．溫度升高，可使反應(yīng)速度加快；溫度太高，會(huì)使酶蛋白變性而失活24．絕對(duì)；立體25．-1/Km；1/Vmax26．二氫葉酸合成酶27．比活力；總活力28．微量；輔酶29．溶解；水溶性維生素；脂溶性維生素30．嘧啶；噻唑；亞甲基；TPP；脫羧酶；轉(zhuǎn)酮酶31．二甲基異咯嗪基；核糖醇基；1，10位氮32．丁酸衍生物；β-丙氨酸；酰胺鍵；巰基乙胺；焦磷酸；3’-AMP；CoA；酰化；酰基33．吡啶；煙酸；煙酰胺；NAD+；NADP+；脫氫；氫34．尿素；噻吩；戊酸側(cè)鏈；羧化酶；CO235．金屬元素；咕啉環(huán)；核苷酸；5’-脫氧腺苷鈷胺素；甲基鈷胺素36．羥化；解毒

（四）選擇題1．D：酶活性中心有一個(gè)結(jié)合部位和一個(gè)催化部位，分別決定專一性和催化效率，是酶分子發(fā)揮作用的一個(gè)關(guān)鍵性小區(qū)域。2．B：酶是生物催化劑，在反應(yīng)前后沒有發(fā)生變化，酶之所以能使反應(yīng)快速進(jìn)行，就是它降低了反應(yīng)的活化能。3．B：酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑與酶作用的底物的結(jié)構(gòu)基本相似，所以它與底物競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心，從而抑制酶的活性，阻止酶與底物反應(yīng)。4．A：競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑抑制程度與底物濃度、抑制劑濃度、酶與抑制劑的親和力、酶與底物的親和力有關(guān)，與作用時(shí)間無關(guān)。5．B：競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用可用增加[S]的方法減輕抑制程度。6．C：酶的競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑可以使Vmax不變，Km增加。7．E：磺胺類藥物是競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制劑。8．D：蛋白激酶可以使ATP分子上的γ-磷酸轉(zhuǎn)移到一種蛋白質(zhì)的絲氨酸殘基的羥基上，在磷酸基的轉(zhuǎn)移過程中，常伴有酶蛋白活性的變化，例如肝糖原合成酶的磷酸化與脫磷酸化兩種形式對(duì)糖原合成的調(diào)控是必需的。9．A：His咪唑基的pK值在6.0~7.0之間，在生理?xiàng)l件下一半解離，一半未解離，解離的部分可以作為H+的受體，未解離的部分可以作為H+的供體。10．C：對(duì)于非競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制作用，抑制程度為50%時(shí)，[I]=Ki。11．B：CoQ不屬于維生素，CoA是維生素B3的衍生物，PLP是維生素B6的衍生物，F(xiàn)H2是維生素B11的衍生物，F(xiàn)MN是維生素B2的衍生物。12．C：很多輔酶不包含維生素組分，如CoQ等；有些維生素不可以作為輔酶或輔酶的組分，如維生素E等；所有的B族維生素都可以作為輔酶或輔酶的組分，但并不是只有B族維生素可以作為輔酶或輔酶的組分，如維生素K也可以作為γ-羧化酶的輔酶。13．A：維生素B1以輔酶TPP的形式參與代謝，TPP是丙酮酸脫氫酶系、α-酮戊二酸脫氫酶系、轉(zhuǎn)酮酶等的輔酶，因此與糖代謝關(guān)系密切。多食糖類食物消耗的維生素B1增加，需要補(bǔ)充。14．D：維生素B6以輔酶PLP，PMP的形式參與氨基酸代謝，是氨基酸轉(zhuǎn)氨酶、脫羧酶和消旋酶的輔酶，因此多食用蛋白質(zhì)類食物消耗的維生素B6增加，需要補(bǔ)充。15．C：玉米中缺少合成維生素B5的前體—色氨酸，因此以玉米為主食，容易導(dǎo)致維生素B5的缺乏。16．D：CoA、ATP和胰島素常作為能量合劑使用。17．B：泛酸是B族維生素中唯一不含環(huán)狀結(jié)構(gòu)的化合物。18．B：FMN是黃素單核苷酸，不含腺苷酸組分。19．E：VB6以輔酶PLP，PMP的形式參與氨基酸代謝，是氨基酸轉(zhuǎn)氨酶、脫羧酶和消旋酶的輔酶。

（五）是非判斷題1．錯(cuò)：酶促反應(yīng)的初速度與底物濃度是有關(guān)的，當(dāng)其它反應(yīng)條件滿足時(shí)，酶促反應(yīng)的初速度與底物濃度成正比。2．對(duì)：當(dāng)?shù)孜镒銐驎r(shí)，酶濃度增加，酶促反應(yīng)速度也加快，成正比。3．對(duì)：Km是酶的特征性常數(shù)，反應(yīng)的代謝產(chǎn)物可能影響酶性質(zhì)的改變從而影響Km的變化，而這些代謝產(chǎn)物在結(jié)構(gòu)上并不與底物一致。4．對(duì)：調(diào)節(jié)酶大多數(shù)為變構(gòu)酶，變構(gòu)酶是利用構(gòu)象的改變來調(diào)節(jié)其催化活性的酶，是一個(gè)關(guān)鍵酶，催化限速步驟，當(dāng)少量底物與酶結(jié)合后，使酶的構(gòu)象發(fā)生改變從而能結(jié)合更多的底物分子。5．錯(cuò)：底物應(yīng)該過量才能更準(zhǔn)確的測(cè)定酶的活力。6．對(duì)：產(chǎn)物生成量比底物消耗量更易測(cè)得且準(zhǔn)確。7．錯(cuò)：非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑只和酶與底物反應(yīng)的中間產(chǎn)物結(jié)合，酶促反應(yīng)的Vmax是減小的，不能通過增加底物來達(dá)到正常的Vmax。而競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑可以通過增加底物的濃度來達(dá)到Vmax。8．對(duì)：碘乙酸是糖酵解過程中的一個(gè)抑制劑，與半胱氨酸或蛋氨酸的-SH結(jié)合，使糖酵解途徑受阻。9．錯(cuò)：誘導(dǎo)物一般為酶的作用底物，可誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生特定的誘導(dǎo)酶。10．錯(cuò)：對(duì)于可逆反應(yīng)而言，酶既可以改變正反應(yīng)速度，也可以改變逆反應(yīng)速度，但不改變化學(xué)反應(yīng)的平衡點(diǎn)。11．對(duì)。12．對(duì)：酶通過降低化學(xué)反應(yīng)的活化能加快化學(xué)的反應(yīng)速度，但不改變化學(xué)反應(yīng)的平衡常數(shù)。13．對(duì)：檢查酶的含量及存在，不能直接用重量或體積來表示，常用它催化某一特定反應(yīng)的能力來表示，即用酶的活力來表示，因此酶活力的測(cè)定實(shí)際上就是酶的定量測(cè)定。14．錯(cuò)：Km值可以近似地反應(yīng)酶與底物親和力，Km越低，親和力越高，因此已糖激酶對(duì)葡萄糖的親和力更高。15．對(duì)：Km是酶的特征常數(shù)之一，一般只與酶的性質(zhì)有關(guān)，與酶濃度無關(guān)。不同的酶，Km值不同。16．錯(cuò)：Km作為酶的特征常數(shù)，只是對(duì)一定的底物、一定的pH值、一定的溫度條件而言。17．錯(cuò)：見上題，同一種酶有幾種底物就有幾種Km值，其中Km值最小的底物一般稱為酶的最適底物。18．對(duì)。19．對(duì)：當(dāng)[S]>>Km時(shí)，V趨向于Vmax，因此v=K3[E]，所以可以通過增加[E]來增加V。20．錯(cuò)：酶的最適pH值有時(shí)因底物種類、濃度及緩沖液成分不同而不同，并不是一個(gè)常數(shù)。21．錯(cuò)：酶最適溫度與酶的作用時(shí)間有關(guān)，作用時(shí)間越長(zhǎng)，則最適溫度低，作用時(shí)間短，則最適溫度高。22．對(duì)：金屬離子作為酶的激活劑，有的可以相互取代，如Mg2+作為激酶等的激活劑可以被Mn2+取代；有的可以相互拮抗，如Na+抑制K+