全自動(dòng)生化分析儀校準(zhǔn)規(guī)范

1本規(guī)范適用于以朗伯-比爾定律為定量原理的全自動(dòng)生化分析儀的校準(zhǔn)，不適用于YY/T0654—2017全自動(dòng)生化分析儀OIMLR135:2004(E)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室用光譜儀(Spectrophotometersformedicalla-凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本規(guī)范；凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本規(guī)范。所有分析過(guò)程(包括樣品和試劑的加注、互相反應(yīng)、化學(xué)和生物分析、結(jié)果計(jì)算和結(jié)果讀出)都實(shí)施了自動(dòng)化的生化分析儀。[YY/T0654—20173.2]透射光強(qiáng)度與入射光強(qiáng)度的比值為透射率，透射率倒數(shù)的常用對(duì)數(shù)值稱為吸光度。全自動(dòng)生化分析儀(以下簡(jiǎn)稱分析儀)根據(jù)被測(cè)物質(zhì)在紫外、可見(jiàn)光區(qū)產(chǎn)生的特征吸收光譜遵從郎伯-比爾定律的原理，用未知濃度的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行比2分析儀的類型分為分立式和流動(dòng)式，單色裝置分為濾光片式與光柵式，光路形式包括前分光或后分光，反應(yīng)杯(可兼做比色杯)可以是循環(huán)使用式或一次性使用式。流動(dòng)式是指測(cè)定項(xiàng)目相同的各待測(cè)樣品與試劑混合后的化學(xué)反應(yīng)在同一管道流動(dòng)的過(guò)程中完成；分立式是指每個(gè)待測(cè)樣品與試劑混合間的化學(xué)反應(yīng)都是分別在各自的反應(yīng)皿中完成。前分光儀器將光源發(fā)出的光經(jīng)單色裝置分光后成為單色光，單色光被比色杯內(nèi)待測(cè)溶液吸收，使單色光的強(qiáng)度減弱。通過(guò)檢測(cè)器測(cè)量吸收前后單色光的強(qiáng)度，從而得到待測(cè)溶液的吸光度值；后分光儀器先將一束復(fù)合光照到比色杯上，再用光柵分光，在光柵后面采用二極管陣列檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。分析儀由加注、控溫、反應(yīng)、檢測(cè)、清洗等多系統(tǒng)組成，根據(jù)朗伯-比爾定律可進(jìn)一步計(jì)算出待測(cè)物的濃度。5.1吸光度示值誤差吸光度示值誤差見(jiàn)表1。吸光度標(biāo)稱值吸光度最大允許誤差5.2吸光度重復(fù)性吸光度1.0的測(cè)量重復(fù)性≤1.5%。5.3線性誤差線性誤差絕對(duì)值≤5%。5.4ALT和GLU測(cè)量示值誤差與重復(fù)性丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、葡萄糖(GLU)測(cè)量示值誤差與重復(fù)性要求如表2名稱標(biāo)稱范圍最大允許誤差%%士1036校準(zhǔn)條件6.1環(huán)境條件溫度：15℃~30℃;其他：無(wú)強(qiáng)光直射，無(wú)腐蝕性氣體，無(wú)震動(dòng)及電磁干擾。6.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)6.2.1生化分析儀校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(吸光度標(biāo)準(zhǔn)溶液):吸光度標(biāo)稱值0.5和1.0,6.2.2全自動(dòng)生化分析儀校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶，U,≤6%,k=2;血清中葡萄糖，U,≤4%,k=2。6.2.3全自動(dòng)生化分析儀校準(zhǔn)用線性誤差標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：橘紅G吸光度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，至少5個(gè)吸光度水平，最小吸光度>0.1,最高吸光度>2.0,并且在吸光度(0.1～2.0)范7校準(zhǔn)項(xiàng)目和校準(zhǔn)方法分析儀應(yīng)有名稱、型號(hào)、儀器編號(hào)、制造廠名、出廠日期等內(nèi)容。7.2吸光度示值誤差以蒸餾水為參比，在分析儀上340nm處分別測(cè)定吸光度標(biāo)稱值為0.5和1.0的生化分析儀校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(吸光度標(biāo)準(zhǔn)溶液)的吸光度。重復(fù)測(cè)定3次，取平均值與標(biāo)準(zhǔn)值之差，用于吸光度示值誤差的表征，分別記錄兩個(gè)吸光度水平下的示值誤差，應(yīng)滿足表1的要求。7.3吸光度重復(fù)性以蒸餾水為參比，在分析儀上340nm處分別測(cè)定吸光度標(biāo)稱值為1.0的生化分析儀校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(吸光度標(biāo)準(zhǔn)溶液)的吸光度，重復(fù)測(cè)定7次，按照公式(2)計(jì)算1.0吸光度水平下的測(cè)量結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD),用于吸光度重復(fù)性的表征。4z——n次測(cè)量值的平均值；n——測(cè)量次數(shù)，此處n=7。7.4線性誤差在比色池中優(yōu)先以手動(dòng)加入方式注入全自動(dòng)生化分析儀校準(zhǔn)用線性誤差標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，對(duì)分析儀(450～520)nm范圍內(nèi)任一波長(zhǎng)進(jìn)行線性范圍測(cè)定，至少5個(gè)吸光度水平，每個(gè)吸光度水平測(cè)定3次，然后將所得數(shù)據(jù)按照公式(3)～公式(5)計(jì)算各點(diǎn)的線性誤差△;,記錄線性誤差最大值?！?——線性誤差n——濃度水平個(gè)數(shù)；A;——第i個(gè)濃度水平下3次實(shí)測(cè)的吸光度平均值；As——第i個(gè)濃度水平下吸光度標(biāo)準(zhǔn)值。7.5ALT和GLU測(cè)量示值誤差用配套校準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)分析儀并運(yùn)行質(zhì)控合格后，分別測(cè)量低值和高值的血清中ALT及血清中GLU標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)各3次，記錄測(cè)量結(jié)果并計(jì)算平均值，按照公式(6)計(jì)算示值誤差，分別報(bào)告ALT和GLU兩個(gè)濃度水平下的示值誤差。I?——ALT或GLU標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值。7.6ALT和GLU測(cè)量重復(fù)性用配套校準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)分析儀并運(yùn)行質(zhì)控合格后，分別測(cè)量低值和高值的血清中ALT及血清中GLU標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)各7次，按照公式(2)計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差作為重復(fù)性的表征，分別記錄ALT和GLU兩個(gè)水平重復(fù)性較大值。8校準(zhǔn)結(jié)果表達(dá)經(jīng)校準(zhǔn)后的分析儀應(yīng)填發(fā)校準(zhǔn)證書，校準(zhǔn)證書應(yīng)符合JJF1071—2010中5.12的要求，并給出各校準(zhǔn)項(xiàng)目名稱和測(cè)量結(jié)果以及擴(kuò)展不確定度。校準(zhǔn)原始記錄格式見(jiàn)附5錄A。分析儀校準(zhǔn)不確定度按JJF1059.1—2012的要求評(píng)定，示值誤差的不確定度評(píng)定示例見(jiàn)附錄B。分析儀的復(fù)校時(shí)間間隔，根據(jù)實(shí)際使用情況由送校單位自主決定，建議不超過(guò)1年。附錄A校準(zhǔn)原始記錄(推薦)格式室溫/℃儀器型號(hào)濕度/%制造廠名校準(zhǔn)員出廠編號(hào)核驗(yàn)員校準(zhǔn)日期1.儀器外觀：吸光度A%1234567/////K1231234567897I%%1234567高值高值8校準(zhǔn)證書內(nèi)頁(yè)(推薦)格式校準(zhǔn)機(jī)構(gòu)授權(quán)說(shuō)明校準(zhǔn)所依據(jù)/參照的技術(shù)文件(代號(hào)、名稱)校準(zhǔn)環(huán)境條件及其地點(diǎn)：名稱測(cè)量范圍不確定度/準(zhǔn)確度等級(jí)/最大允許誤差證書編號(hào)9校準(zhǔn)證書第3頁(yè)證書編號(hào)：××××-××××校準(zhǔn)結(jié)果校準(zhǔn)項(xiàng)目校準(zhǔn)結(jié)果不確定度外觀與初步檢查吸光度示值誤差吸光度重復(fù)性線性誤差GLU重復(fù)性第×頁(yè)共×頁(yè)吸光度示值誤差校準(zhǔn)不確定度評(píng)定示例C.1測(cè)量方法采用生化分析儀測(cè)定生化分析儀校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(吸光度標(biāo)準(zhǔn)溶液),并與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)值進(jìn)行比較。C.2測(cè)量模型相應(yīng)校準(zhǔn)項(xiàng)目的示值誤差可由公式(C.1)給出：△A——吸光度示值誤差，無(wú)量綱；A——儀器對(duì)生化分析儀校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(吸光度標(biāo)準(zhǔn)溶液)3次測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值，無(wú)量綱；A,——生化分析儀校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(吸光度標(biāo)準(zhǔn)溶液)的標(biāo)準(zhǔn)值，無(wú)量綱。C.3不確定度來(lái)源a)生化分析儀測(cè)量重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度uπ;b)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度ua.;下面以一次生化分析儀校準(zhǔn)為例具體分析校準(zhǔn)不確定度。在校準(zhǔn)中生化分析儀校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(吸光度標(biāo)準(zhǔn)溶液)7次測(cè)定結(jié)果的分別為0.981,0.985,0.987,0.984,0.982,0.987,0.981;該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值為0.990±0.005(k=2)。C.4合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度計(jì)算公式生化分析儀測(cè)量結(jié)果A與生化分析儀校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值A(chǔ)。之間不相關(guān)，因此輸出量估計(jì)方差的完整表達(dá)式應(yīng)為：C.5標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量計(jì)算C.5.1測(cè)量重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量ux選定一臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀，對(duì)生化分析儀校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(吸光度標(biāo)準(zhǔn)溶液)連續(xù)測(cè)量10次，得到一組測(cè)量值：0.986,0.981,0.987,0.980,0.984,0.982,則單次測(cè)量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差s(x;):實(shí)際校準(zhǔn)時(shí)在重復(fù)性條件下連續(xù)測(cè)量7次，以7次測(cè)量的算術(shù)平均值作為結(jié)果，則由測(cè)量重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量為：uπ=s(x;)/√n=0.0031/√7≈0.0012在這種測(cè)量條件下，儀器的分辨力為0.001,認(rèn)為是均勻分布，則由分辨力引起的不確定度分量為：由于uπ>>ur,所以忽略由儀器分辨力引入的不確定度分量。C.5.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量uA,由標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)引入的不確定度uA,可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書提供的擴(kuò)展不確定度Ua,和包含因子k?,根據(jù)公式(C.9)計(jì)算：ua,——生化分析儀校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(吸光度標(biāo)準(zhǔn)溶液)引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度，無(wú)U?,——生化分析儀校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(吸光度標(biāo)準(zhǔn)溶液)證書提供的擴(kuò)展不確定度，ka,——標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書提供的包含因子，通常為2。在校準(zhǔn)過(guò)程使用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值為0.990±0.005(k=2),則由標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量：