GB 4789.4-2024 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗

中 華 人 民 共 和 國 國 家 標 準B4食品安全國家標準食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗8發(fā)布 8實施中華人民共和國國家衛(wèi)生健康委員會國 家 市 場 監(jiān) 督 管 理 總 局 發(fā)布B4前 言本標準代替食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗本標準與6相比主要變化如下:修改了設備和材料培養(yǎng)基和試劑;修改了檢驗程序和操作步驟;修改了附錄A和附錄。ⅠB4食品安全國家標準食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗范圍本標準規(guī)定了食品中沙門氏菌的檢驗方法。本標準適用于食品中沙門氏菌的檢驗。設備和材料除微生物實驗室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設備外其他設備和材料如下。1冰箱2℃8℃。2恒溫培養(yǎng)箱6℃1℃恒溫裝置2℃1℃8℃2℃。均質器。振蕩器。天平感量。無菌錐形瓶容量00。無菌量筒容量0。無菌均質杯無菌均質袋。無菌廣口瓶容量0。無菌吸管1具1L刻度0具1L刻度或微量移液器及吸頭。無菌培養(yǎng)皿直徑00。無菌試管055080m或其他合適規(guī)格。無菌小玻管30。無菌接種環(huán)直徑約3L以及接種針。計或精密試紙。微生物生化鑒定系統(tǒng)。生物安全柜。培養(yǎng)基和試劑緩沖蛋白胨水W見。四硫磺酸鈉煌綠增菌液見。氯化鎂孔雀綠大豆胨增菌液見。亞硫酸鉍瓊脂見。E瓊脂見。 ( ) : 。木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂三糖鐵瓊脂見。營養(yǎng)瓊脂見。

見61B4半固體瓊脂見。蛋白胨水靛基質試劑見。尿素瓊脂H見。氰化鉀培養(yǎng)基見。賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基見。糖發(fā)酵培養(yǎng)基見。鄰硝基酚D半乳糖苷培養(yǎng)基見。丙二酸鈉培養(yǎng)基見。沙門氏菌顯色培養(yǎng)基。沙門氏菌診斷血清。生化鑒定試劑盒。檢驗程序沙門氏菌檢驗程序見圖。2kkkkkkkkkkkB4kkkkkkkkkkk圖1沙門氏菌檢驗程序操作步驟預增菌無菌操作取樣品置于盛有5LW的無菌均質杯中以n3B4均質12或置于盛有5LW的無菌均質袋內用拍擊式均質器拍打12。對于液態(tài)樣品也可置于盛有LW的無菌錐形瓶或其他合適容器中振蕩混勻。如需調節(jié)H時用1LH或調H至。無菌操作將樣品轉至0L錐形瓶或其他合適容器內如均質杯本身具有無孔蓋或使用均質袋時可不轉移樣品置于6℃1℃培養(yǎng)。對于乳粉無菌操作稱取g樣品緩緩傾倒在廣口瓶或均質袋內5W的液體表面勿調節(jié)也暫不混勻室溫靜置05n后再混勻置于6℃1℃培養(yǎng)。冷凍樣品如需解凍取樣前在0℃5℃的水浴中解凍不超過5或在2℃8℃冰箱緩慢化凍不超過。選擇性增菌輕輕搖動預增菌的培養(yǎng)物移取1L轉種于0LS中混勻后于2℃1℃培養(yǎng)~。同時另取1L轉種于0LB中后混勻低背景菌的樣品如深加工的預包裝食品等置于6℃1℃培養(yǎng)高背景菌的樣品如生鮮禽肉等置于2℃1℃培養(yǎng)。如有需要可將預增菌的培養(yǎng)物在2℃8℃冰箱保存不超過再進行選擇性增菌。分離振蕩混勻選擇性增菌的培養(yǎng)物后用直徑3的接種環(huán)取每種選擇性增菌的培養(yǎng)物各一環(huán)分別劃線接種于一個瓊脂平板和一個瓊脂平板也可使用瓊脂平板沙門氏菌顯色培養(yǎng)基平板或其他合適的分離瓊脂平板于6℃1℃分別培養(yǎng)S瓊脂平板或D瓊脂平板瓊脂平板沙門氏菌顯色培養(yǎng)基平板觀察各個平板上生長的菌落是否符合表1的菌落特征。如有需要可將選擇性增菌的培養(yǎng)物在2℃8℃冰箱保存不超過再進行分離。表1不同分離瓊脂平板上沙門氏菌的菌落特征分離瓊脂平板菌落特征S瓊脂菌落為黑色有金屬光澤棕褐色或灰色菌落周圍培養(yǎng)基可呈黑色或棕色有些菌株形成灰綠色的菌落周圍培養(yǎng)基不變色XLD瓊脂菌落呈粉紅色帶或不帶黑色中心有些菌株可呈現大的帶光澤的黑色中心或呈現全部黑色的菌落有些菌株為黃色菌落帶或不帶黑色中心HE瓊脂藍綠色或藍色多數菌落中心黑色或幾乎全黑色有些菌株為黃色中心黑色或幾乎全黑色沙門氏菌顯色培養(yǎng)基符合相應產品說明書的描述生化試驗挑取4個以上典型或可疑菌落進行生化試驗這些菌落宜分別來自不同選擇性增菌液的不同分離瓊脂也可先選其中一個典型或可疑菌落進行試驗若鑒定為非沙門氏菌再取余下菌落進行鑒定。將典型或可疑菌落接種三糖鐵瓊脂先在斜面劃線再于底層穿刺同時接種賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基和營養(yǎng)瓊脂或其他合適的非選擇性固體培養(yǎng)基平板于6℃1℃培養(yǎng)。三糖鐵和賴氨酸脫羧酶試驗的結果及初步判斷見表。將已挑菌落的分離瓊脂平板于2保存以備必要時復查。初步判斷為非沙門氏菌者直接報告結果。對疑似沙門氏菌者從營養(yǎng)瓊脂平板上挑取其純培4B4養(yǎng)物接種蛋白胨水供做靛基質試驗尿素瓊脂氰化鉀培養(yǎng)基也可在接種三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基的同時接種以上3種生化試驗培養(yǎng)基于6℃1℃培養(yǎng),按表3判定結果。表2三糖鐵和賴氨酸脫羧酶試驗結果及初步判斷三糖鐵賴氨酸脫羧酶初步判斷斜面底層產氣硫化氫KA+-)+-)+疑似沙門氏菌KA+-)+-)-疑似沙門氏菌AA+-)+-)+疑似沙門氏菌AA---非沙門氏菌KK---非沙門氏菌注產堿產酸+陽性-陰性+-多數陽性少數陰性-陽性或陰性。表3生化試驗結果鑒別表一)序號硫化氫靛基質尿素H)氰化鉀賴氨酸脫羧酶A1+---+A2++--+A3-----注+陽性-陰性-陽性或陰性。符合表3中1者為沙門氏菌典型的生化反應進行血清學鑒定后報告結果。尿素氰化鉀和賴氨酸脫羧酶中如有1項不符合按表4進行結果判斷尿素氰化鉀和賴氨酸脫羧酶中如有2項不符合判斷為非沙門氏菌并報告結果。表4生化試驗結果鑒別表二)尿素H氰化鉀賴氨酸脫羧酶判斷結果---甲型副傷寒沙門氏菌要求血清學鑒定結果)-++沙門氏菌Ⅳ或Ⅴ符合該亞種生化特性并要求血清學鑒定結果)+-+沙門氏菌個別變體要求血清學鑒定結果)注+陽性-陰性。生化試驗結果符合表3中2者補做甘露醇和山梨醇試驗沙門氏菌靛基質陽性變體的甘露醇和山梨醇試驗結果均為陽性其結果報告還需進行血清學鑒定。生化試驗結果符合表3者補做試驗。沙門氏菌的試驗結果為陰性且賴氨酸脫羧酶試驗結果為陽性但甲型副傷寒沙門氏菌的賴氨酸脫羧酶試驗結果為陰性。生化試驗結果符合沙門氏菌者進行血清學鑒定。必要時按表5進行沙門氏菌種和亞種的生化鑒定。如選擇生化鑒定試劑盒或微生物生化鑒定系統(tǒng)用分離平板上典型或可疑菌落的純培養(yǎng)物或者根據表2初步判斷為疑似沙門氏菌的純培養(yǎng)物按生化鑒定試劑盒或微生物生化鑒定系統(tǒng)的操作說5B4明進行鑒定。血清學鑒定培養(yǎng)物自凝性檢查一般采用瓊脂含量為25的純培養(yǎng)物進行玻片凝集試驗。首先進行自凝性檢查在潔凈的玻片上滴加一滴生理鹽水取適量待測菌培養(yǎng)物與之混合成為均一性的渾濁懸液將玻片輕輕搖動在黑色背景下觀察反應必要時用放大鏡觀察若出現可見的菌體凝集即認為有自凝性,反之無自凝性。對無自凝的培養(yǎng)物參照下面方法進行血清學鑒定。表5沙門氏菌種和亞種的生化鑒定種腸道沙門氏菌邦戈爾沙門菌亞種腸道亞種薩拉姆亞種亞利桑那亞種雙相亞利桑那亞種豪頓亞種印度亞種項目ⅠⅡⅢaⅢbⅣⅥⅤ衛(wèi)矛醇++---d+)--++-d+丙二酸鹽-+++---明膠酶-+++++-山梨醇+++++-+氰化鉀----+-++酒石酸鹽+------半乳糖醛酸-+-++++谷氨酰轉肽酶++-++++葡糖醛酸苷酶dd-+-d-黏液酸+++-0)-++水楊苷----+--乳糖---5)+5)-d-1噬菌體裂解++-+-+d注+陽性-陰性不定。,在玻片上劃出兩個約的區(qū)域挑取待測菌培養(yǎng)物各放約一環(huán)于玻片上的每一區(qū)域上,在玻片上劃出兩個約的區(qū)域挑取待測菌培養(yǎng)物各放約一環(huán)于玻片上的每一區(qū)域上部在其中一個區(qū)域下部加一滴多價菌體血清在另一區(qū)域下部加入一滴生理鹽水作為對照。再用無菌的接種環(huán)或針將兩個區(qū)域內的待測菌培養(yǎng)物分別與血清和生理鹽水研成乳狀液。將玻片傾斜搖動混合1并對著黑暗背景進行觀察與對照相比出現可見的菌體凝集者為陽性反應。O血清不凝集時將菌株接種在瓊脂含量較高如23的培養(yǎng)基上培養(yǎng)后再鑒定如果是由于抗原的存在而阻止了O血清的凝集反應時可挑取待測菌培養(yǎng)物在生理鹽水中制成濃菌液在沸水中水浴00冷卻后再進行鑒定。注不同廠商沙門氏菌診斷血清的組成鑒定操作及結果判斷可能存在差異。使用商品化的沙門氏菌診斷血清進行血清學鑒定時應遵循其產品說明。6B4多價鞭毛抗原鑒定按2的操作將多價菌體血清換成多價鞭毛血清進行多價鞭毛抗原鑒定。H抗原發(fā)育不良時將菌株接種在半固體瓊脂平板的中央待菌落蔓延生長時在其邊緣部分取菌鑒定或將菌株接種在裝有半固體瓊脂的小玻管培養(yǎng)1代代自遠端取菌再進行鑒定。血清學分型選做項目),,O血清做玻片凝集試驗同時用生理鹽水做對照。在生理鹽水中自凝者為粗糙型菌株不能分型。被F多價O血清凝集者依次用2和1因子血清做凝集試驗。根據試驗結果判定O群。被0血清凝集的菌株再用9單因子血清做凝集試驗,判定4各亞群。根據O單因子血清的鑒定結果確定每個O抗原成分。沒有O單因子血清的用O復合因子血清進行鑒定。O血清凝集者

先用9O血清鑒

如有其中一種血清凝

則用這種血清所包括的O群血清逐一進行鑒定以確定O群。每種多價O血清所包括的O群血清如下:O多價F群包括4群)O多價1群O多價9群O多價3群O多價8O多價3O多價8O多價2O多價7H抗原的鑒定O群的常見菌型依次用表6H因子血清鑒定第1相和第2H抗原。表6O群常見菌型H抗原表O群第1相第2相ABB12不產氣的)產氣的)144asdcrdqvti無無255無無x無無7B4不常見的菌型先用8H血清鑒定如有其中一種或兩種血清凝集則再用這一種或兩種血清所包括的各種H因子血清逐一進行鑒定以確定第1相和第2H抗原8種多價H血清所包括的H因子血清如下:H多價iH多價51H多價0380H多價6H多價4344429568H多價9124H多價2345H多價67012H抗原成分的最后確定均應根據H單因子血清的鑒定結果H單因子血清的要用兩個H復合因子血清進行鑒定。檢出第1H抗原而未檢出第2H抗原的或檢出第2H抗原而未檢出第1H抗原的要用以下位相變異的方法鑒定其另一相。單相菌不必做位相變異鑒定。簡易平板法將半固體瓊脂平板烘干表面水分挑取已知相的H因子血清1環(huán)滴在半固體平板表面正置平板片刻待血清吸收在滴加血清部位的中央點種待測菌株翻轉平板置于6℃1℃培養(yǎng)后在形成蔓延生長的菌苔邊緣取菌鑒定。小玻管法將12L半固體瓊脂熔化后冷卻至8℃左右加入已知相的H因子血清5~1混勻后裝入30m兩端開口的小玻管內。待瓊脂凝固后用接種針挑取待測菌接種于小玻管一端的瓊脂內。將小玻管平放在平皿內置于6℃1℃培養(yǎng)并采取保濕措施以防瓊脂中水分蒸發(fā)而干縮。每天觀察結果待另一相細菌解離后從小玻管另一端挑取細菌進行鑒定。培養(yǎng)基內血清的濃度應有適當的比例過高時細菌不能生長過低時同一相細菌的動力不能抑制。一般按原血清∶的量加入。小套管法在裝有大約0L半固體瓊脂培養(yǎng)基的試管中插入30m兩端開口的小玻管下端開口要留一個缺口不要平齊小玻管的上端應高出于培養(yǎng)基的表面1℃高壓滅菌5n后備用。臨用時加熱熔化并冷卻至8℃左右挑取已知相的H因子血清1環(huán)加入小玻管中的培養(yǎng)基內略加攪動使其混勻。待瓊脂凝固后在小玻管中的半固體表層內接種待測菌于6℃1℃培養(yǎng)每天觀察結果待另一相細菌解離后從小玻管外的半固體表面取菌鑒定或將所取的菌轉種1瓊脂斜面于6℃1℃培養(yǎng)后再進行鑒定?？乖蔫b定用因子血清進行鑒定。已知具有抗原的菌型有傷寒沙門氏菌丙型副傷寒沙門氏菌都柏林沙門氏菌。8B4血清型的判定根據血清學分型鑒定的結果按照附錄B或有關沙門氏菌屬抗原表判定血清型。結果與報告綜合以上生化試驗和血清學鑒定的結果報告樣品中檢出或未檢出沙門氏菌。9B4緩沖蛋白胨水)成分

附 錄A培養(yǎng)基和試劑蛋白胨 g氯化鈉磷酸氫二鈉

含2個結晶水)

gg磷酸二氫鉀 g蒸餾水 0L制法將各成分加入蒸餾水或其他符合要求的實驗用水下同中攪勻后加熱溶解必要時調節(jié),1℃高壓滅菌5。滅菌后的培養(yǎng)基在5℃的H為。四硫磺酸鹽煌綠增菌液)基礎液蛋白胨 g牛肉浸粉 g氯化鈉 g碳酸鈣硫代硫酸鈉

含5個結晶水)

gg牛膽鹽 g蒸餾水

, 。 ,

0L將各成分加入蒸餾水中為。碘溶液

攪勻后加熱溶解

煮沸無須高壓滅菌。煮沸后的培養(yǎng)基在5℃的H碘化鉀 g碘 g蒸餾水

, , 0L ,將碘化鉀溶解于少量的蒸餾水中內塞緊瓶塞冷藏貯存。

再加入碘振搖至碘全部溶解。加蒸餾水至0L轉入棕色瓶煌綠溶液煌綠 g蒸餾水,

。 0L將煌綠在蒸餾水中溶解后制法

存放在冷暗處不少于1d基礎液 0L0B4在冷卻后的基礎液中以無菌操作加入煌綠溶液搖勻加入碘溶液再搖勻分裝到無菌煌綠溶液 在冷卻后的基礎液中以無菌操作加入煌綠溶液搖勻加入碘溶液再搖勻分裝到無菌碘溶液使用的當天,使用的當天

0L試管中。加入煌綠和碘液的培養(yǎng)基當天使用且不能再次加熱。氯化鎂孔雀綠大豆胨增菌液成分大豆蛋白胨 g氯化鈉 g磷酸二氫鉀 g磷酸氫二鉀 g氯化鎂含6個結晶水) g孔雀綠 g蒸餾水 0L制法將各成分加入蒸餾水中攪勻后加熱溶解必要時調節(jié)定量分裝于試管中5℃高壓滅菌5。滅菌后的培養(yǎng)基在5℃的H為。亞硫酸鉍瓊脂成分蛋白胨 g牛肉浸粉 g葡萄糖 g硫酸亞鐵 g磷酸氫二鈉 g煌綠 g檸檬酸鉍銨 g亞硫酸鈉 g瓊脂 g蒸餾水 0L制法將各成分加入蒸餾水中攪勻后加熱溶解必要時調節(jié)。煮沸勿過度加熱勿高壓滅菌。冷卻至8℃2℃傾注平皿煮沸后的培養(yǎng)基在5℃的H為。注本培養(yǎng)基應于臨用前一天制備并傾注平皿在室溫暗處保存第二天使用。制備完成的培養(yǎng)基保存時間超過會降低其選擇性。瓊脂成分蛋白胨 g牛肉浸粉 g1B4乳糖 g蔗糖 g水楊苷 g膽鹽 g氯化鈉 g硫代硫酸鈉 g檸檬酸鐵銨 g脫氧膽酸鈉 g酸性品紅 g溴麝香草酚藍 g瓊脂 g蒸餾水 0L制法將各成分加入蒸餾水中攪勻后加熱溶解必要時調節(jié)。煮沸勿過度加熱勿高壓滅菌。冷卻至8℃2℃傾注平皿煮沸后的培養(yǎng)基在5℃的H為。木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂成分酵母浸粉 g賴氨酸 g木糖 g乳糖 g蔗糖 g脫氧膽酸鈉 g檸檬酸鐵銨 g硫代硫酸鈉 g氯化鈉 g酚紅 g瓊脂 g蒸餾水 0L制法將各成分加入蒸餾水中攪勻后加熱溶解必要時調節(jié)。煮沸勿過度加熱勿高壓滅菌。冷卻至8℃2℃傾注平皿煮沸后的培養(yǎng)基在5℃的H為。三糖鐵瓊脂成分蛋白胨 g牛肉浸粉 g乳糖 g蔗糖 g2葡萄糖 g酚紅

B4氯化鈉硫酸亞鐵銨

含6個結晶水)

gg硫代硫酸鈉 g瓊脂 g蒸餾水 0L制法將各成分加入蒸餾水中攪勻后加熱溶解必要時調節(jié)。定量分裝于試管中5℃高壓滅菌5。滅菌后制成斜面底層深度不小于。滅菌后的培養(yǎng)基在5℃的H為。營養(yǎng)瓊脂)成分蛋白胨 g牛肉浸粉 g氯化鈉 g瓊脂 g蒸餾水 0L制法將各成分加入蒸餾水中攪勻后加熱溶解必要時調節(jié)1℃高壓滅菌5。滅菌后的培養(yǎng)基在5℃的H為。半固體瓊脂成分蛋白胨 g牛肉浸粉 g氯化鈉 g瓊脂 g蒸餾水 0L制法將各成分加入蒸餾水中攪勻后加熱溶解必要時調節(jié)1℃高壓滅菌5。冷卻至8℃±2℃傾注平皿或分裝小玻管。滅菌后的培養(yǎng)基在5℃的H為。蛋白胨水靛基質試劑蛋白胨水成分蛋白胨 g氯化鈉 g3B4色氨酸 g蒸餾水 0L制法將各成分加入蒸餾水中攪勻后加熱溶解必要時調節(jié)。分裝小試管1℃高壓滅菌5。滅菌后的培養(yǎng)基在5℃的H為。靛基質試劑柯凡克試劑將g對二甲氨基苯甲醛溶解于5L戊醇中然后緩慢加入濃鹽酸5。波試劑將0g對二甲氨基苯甲醛溶解于5L5乙醇內然后緩慢加入濃鹽酸0。試驗方法挑取少量培養(yǎng)物接種在蛋白胨水中6℃1℃培養(yǎng)。加入柯凡克試劑約5輕搖試管試劑層呈深紅色者為陽性。波試劑約5沿管壁流下覆蓋于培養(yǎng)液表面液面接觸處呈玫瑰紅色者為陽性。尿素瓊脂H)成分蛋白胨 g氯化鈉 g葡萄糖 g磷酸二氫鉀 g酚紅 g瓊脂 g蒸餾水 0L0尿素溶液 0L制法除尿素外將其他成分加入0L蒸餾水中攪勻后加熱溶解必要時調節(jié)1℃高壓滅菌5。冷卻至8℃2℃加入0L經過濾除菌的0尿素溶液分裝于無菌試管內制成斜面。滅菌后的培養(yǎng)基在5℃的H為。試驗方法挑取培養(yǎng)物接種在尿素瓊脂斜面上6℃1℃培養(yǎng)觀察結果。尿素瓊脂斜面變?yōu)槊倒寮t色者為尿素酶陽性。注:也可采用不含瓊脂的尿素培養(yǎng)基。氰化鉀培養(yǎng)基成分蛋白胨 g氯化鈉 g4B4磷酸二氫鉀 g磷酸氫二鈉 g蒸餾水 0L5氰化鉀 0L制法將除氰化鉀以外的成分加入蒸餾水中攪勻后加熱溶解1℃高壓滅菌5。充分冷卻后在每0L培養(yǎng)基加入0L新制備的5氰化鉀溶液最后濃度為分裝于無菌試管內立刻用無菌管塞塞緊。同時將不加氰化鉀的培養(yǎng)基作為對照培養(yǎng)基分裝后備用。試驗方法將待測菌的純培養(yǎng)物用生理鹽水配制成5麥氏濁度的菌懸液滴加2滴3滴菌懸液于氰化鉀培養(yǎng)基混勻后滴加一層無菌液體石蠟進行密封。另外滴加2滴3滴菌懸液于對照培養(yǎng)基。在6℃1℃培養(yǎng)觀察結果。氰化鉀培養(yǎng)基內有細菌生長者為陽性不抑制培養(yǎng)h無細菌生長者為陰性抑制。注氰化鉀是劇毒藥操作時應戴手套避免沾染。試驗失敗的主要原因是密封不嚴而造成假陽性反應。賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基成分蛋白胨 g酵母浸粉 g葡萄糖 g溴甲酚紫 g蒸餾水 0L賴氨酸或賴氨酸 g或g制法除賴氨酸以外的成分加入蒸餾水中攪勻后加熱溶解加入賴氨酸或賴氨酸對照培養(yǎng)基不加賴氨酸。必要時調節(jié)。分裝后5℃高壓滅菌5。滅菌后的培養(yǎng)基在5℃的H為±。試驗方法挑取培養(yǎng)物接種于賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基混勻后滴加一層無菌液體石蠟進行密封6℃±1℃培養(yǎng)觀察結果。培養(yǎng)基呈紫色者為賴氨酸脫羧酶陽性培養(yǎng)基呈黃色者為賴氨酸脫羧酶陰性。對照管應為黃色。糖發(fā)酵培養(yǎng)基成分蛋白胨 g牛肉浸粉 g氯化鈉磷酸氫二鈉

含2個結晶水)

gg5B4溴麝香草酚藍 g蒸餾水 0L制法將各成分加入蒸餾水中攪勻后加熱溶解必要時調節(jié)1℃高壓滅菌5。冷卻后加入終濃度為51的無菌糖溶液分裝。滅菌后的培養(yǎng)基在5℃的H為。。挑取少量培養(yǎng)物接種于糖發(fā)酵管。挑取少量培養(yǎng)物接種于糖發(fā)酵管6℃1℃培養(yǎng)觀察結果。培養(yǎng)基變?yōu)辄S色者為陽性 對于培養(yǎng)h后懷疑為乳糖遲緩發(fā)酵者可繼續(xù)培養(yǎng)至d再觀察結果。鄰硝基酚D半乳糖苷培養(yǎng)基成分鄰硝基D半乳糖苷) 0g1L磷酸鈉緩沖液H) 0L1蛋白胨水H) 0L制法溶于緩沖液內加入蛋白胨水過濾除菌后分裝于無菌的小試管內塞緊管塞。試驗方法挑取培養(yǎng)物接種于G培養(yǎng)基6℃1℃培養(yǎng)h觀察結果培養(yǎng)基變?yōu)辄S色者半乳糖苷酶陽性。若培養(yǎng)基不變色繼續(xù)培養(yǎng)至培養(yǎng)基變黃者半乳糖苷酶陽性否則為陰性。丙二酸鈉培養(yǎng)基成分酵母浸粉 g硫酸銨 g磷酸氫二鉀 g磷酸二氫鉀 g氯化鈉 g丙二酸鈉 g溴麝香草酚藍 g蒸餾水 0L制法將各成分加入蒸餾水中攪勻后加熱溶解必要時調節(jié)分裝后1℃高壓滅菌5。滅菌后的培養(yǎng)基在5℃的H為。試驗方法用新鮮培養(yǎng)物接種于丙二酸鈉培養(yǎng)基6℃1℃培養(yǎng)觀察結果。培養(yǎng)基變藍色者為陽性。6B4常見沙門氏菌抗原見表

附 錄B常見沙門氏菌抗原表表1常見沙門氏菌抗原表菌名拉丁菌名O抗原H抗原第1相第2相A 群甲型副傷寒沙門氏菌SA2a]B 群基桑加尼沙門氏菌Si2a2阿雷查瓦萊塔沙門氏菌Sa2a7馬流產沙門氏菌Si2—x乙型副傷寒沙門氏菌aSB2b2利密特沙門氏菌Se]b5阿邦尼沙門氏菌Sy]bx維也納沙門氏菌Sn]bw伯里沙門氏菌Sy7c6斯坦利沙門氏菌Sy]d2圣保羅沙門氏菌Sl2h2里定沙門氏菌Sg2h5徹斯特沙門氏菌Sr2hx德爾卑沙門氏菌Sy2g]阿貢納沙門氏菌Sa2s]埃森沙門氏菌Sn2m—加利福尼亞沙門氏菌Sa2t7]金斯敦沙門氏菌Sn]t]布達佩斯沙門氏菌St]t—鼠傷寒沙門氏菌Sm2i2拉古什沙門氏菌Ss2i5布雷登尼沙門氏菌Sy7v7基爾瓦沙門氏菌ⅡSaⅡ2wx海德爾堡沙門氏菌Sg2r2印地安納沙門氏菌Sa2z7斯坦利維爾沙門氏菌Se]43]伊圖里沙門氏菌Si2057B4表1常見沙門氏菌抗原表續(xù))菌名拉丁菌名O抗原H抗原第1相第2相1 群奧斯陸沙門氏菌So4ax愛丁保沙門氏菌Sg4b5布隆方丹沙門氏菌ⅡSnⅡ7b2丙型副傷寒沙門氏菌SC]c5豬霍亂沙門氏菌Ss7c5豬傷寒沙門氏菌Ss7c5羅米他沙門氏菌Sa7h5布倫登盧普沙門氏菌Sp4h5里森沙門氏菌Sn4g—蒙得維的亞沙門氏菌So4s]里吉爾沙門氏菌Sl7]—奧雷寧堡沙門氏菌Sg4t7]奧里塔蔓林沙門氏菌Sn7i5湯卜遜沙門氏菌Sn4k5康科德沙門氏菌Sd7v2伊魯木沙門氏菌Su7v5姆卡巴沙門氏菌Sa7v6波恩沙門氏菌Sn7vx波茨坦沙門氏菌Sm4v5格但斯克沙門氏菌Sk4v6維爾肖沙門氏菌Sw4r2嬰兒沙門氏菌Ss4r5巴布亞沙門氏菌Sa7r5巴雷利沙門氏菌Sy4y5哈特福德沙門氏菌Sd7yx三河島沙門氏菌Sa4y5姆班達卡沙門氏菌Sa405耶路撒冷沙門氏菌Sm40w田納西沙門氏菌Se49]2 群習志野沙門氏菌So8ax8B4表1常見沙門氏菌抗原表續(xù))菌名拉丁菌名O抗原H抗原第1相第2相名古屋沙門氏菌Sa8b5加瓦尼沙門氏菌Si8bx慕尼黑沙門氏菌Sn8d2曼哈頓沙門氏菌Sn8d5紐波特沙門氏菌St0h2科特布斯沙門氏菌Ss8h5茨昂威沙門氏菌Se8h5]林登堡沙門氏菌Sg8i2塔科拉迪沙門氏菌Si8i5波那雷恩沙門氏菌Ss8ix利奇菲爾德沙門氏菌Sd8v2病牛沙門氏菌Ss0]5查理沙門氏菌Sy8435]哈達爾沙門氏菌Sr8Z10x3 群巴爾多沙門氏菌So8h2依麥克沙門氏菌Sk0s—肯塔基沙門氏菌Sy0i6科瓦利斯沙門氏菌Ss0436]D 群仙臺沙門氏菌Si2a5傷寒沙門氏菌Si]d—塔西沙門氏菌Se2d6伊斯特本沙門氏菌Se2h5以色列沙門氏菌Sl2h5腸炎沙門氏菌Ss2m]布利丹沙門氏菌Sm2q—沙門氏菌ⅡaⅡ2t]都柏林沙門氏菌Sn]p—芙蓉沙門氏菌Sn2i5巴拿馬沙門氏菌Sa2v5戈丁根沙門氏菌Sn2v5爪哇安納沙