2023年高考生物一模試題匯編19 生物技術(shù)實(shí)踐

專(zhuān)題19生物技術(shù)實(shí)戰(zhàn)

（2023屆安徽省合肥市高三第一次教學(xué)質(zhì)量檢測(cè)）19.我國(guó)有歷史悠久的傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)，以此為基礎(chǔ)發(fā)展起

來(lái)的發(fā)酵工程實(shí)現(xiàn)了發(fā)酵食品、藥物等工業(yè)化生產(chǎn)，極大地改善了人們的生活。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

（）

A.腐乳的鮮味來(lái)源于毛霉等微生物分泌的蛋白酶對(duì)豆腐中蛋白質(zhì)的分解

B.利用酵母菌等菌種的發(fā)酵工程生產(chǎn)的單細(xì)胞蛋白，可作為食品添加劑

C.將乙型肝炎病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌，再通過(guò)發(fā)酵可生產(chǎn)乙型肝炎疫苗

D.發(fā)酵是指在無(wú)氧的條件下，利用微生物代謝將原料轉(zhuǎn)化為人類(lèi)所需要的產(chǎn)物的過(guò)程

【答案】D

【解析】

【分析】參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微

生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪

酸。

【詳解】A、腐乳制作過(guò)程中有多種微生物參與，其中起主要作用的是毛霉，主要是利用這些微生物產(chǎn)生

的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，味道鮮美，易于消化吸收，A正確；

B、用酵母菌等生產(chǎn)的單細(xì)胞蛋白可作為食品添加劑，甚至制成“人造肉”供人們直接食用，B正確；

C、一種生產(chǎn)乙型肝炎疫苗的方法就是將乙型肝炎病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌，再通過(guò)發(fā)酵生產(chǎn)，可以大

大提高生成效率，C正確；

D、發(fā)酵是指人們利用微生物，在適宜的條件下，將原料通過(guò)微生物的代謝轉(zhuǎn)化為人類(lèi)所需要的產(chǎn)物的過(guò)

程，不一定是無(wú)氧呼吸，D錯(cuò)誤。

故選D。

（2023屆安徽省合肥市高三第一次教學(xué)質(zhì)量檢測(cè)）25.花生是我國(guó)重要的油料作物和經(jīng)濟(jì)作物?；ㄉ谏L(zhǎng)

發(fā)育過(guò)程中，根系不斷分泌2,4-二甲基苯甲酸、蘋(píng)果酸，肉桂酸及香草酸等有機(jī)酸，連年種植花生使有機(jī)

酸在土壤中積累，引起花生有機(jī)酸中毒，使產(chǎn)量和品質(zhì)逐年下降。為克服有機(jī)酸中毒對(duì)花生產(chǎn)量的影響，

科技工作者通過(guò)“采集帶根土壤一富集培養(yǎng)T純化培養(yǎng)一菌種鑒定”途徑篩選出能降解2,4-二甲基苯甲酸的

根際促生菌。下表為5種根際促生菌在兩種不同選擇培養(yǎng)基上的培養(yǎng)結(jié)果。

巧培養(yǎng)基（檢測(cè)指標(biāo)）

2,4-二甲基苯甲酸（檢測(cè)2,4-二甲不含氮源（觀(guān)察菌落數(shù)

基苯甲酸剩余量）量及大?。?/p>

A04+++-

AO5+-

B07++++++

B15+++

B28++

注：表中“+”的數(shù)量越多,表示相對(duì)值越大，表示無(wú)。

據(jù)表分析回答下列問(wèn)題：

（I）富集培養(yǎng)和純化培養(yǎng)都使用以2,4-二甲基苯甲酸作唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，其中純化培養(yǎng)時(shí)須使用

______（選填“液體”或“固體”）培養(yǎng)基，理由是______,接種前該培養(yǎng)基需要采用______滅菌法滅菌。

（2）綜合考慮2,4-二甲基苯甲酸降解、生產(chǎn)成本投入及產(chǎn)品的產(chǎn)量與品質(zhì)等因素，科技工作者認(rèn)為在花生

種植中最適合混合使用的兩種菌種是______，理由是______o

（3）請(qǐng)聯(lián)系有機(jī)酸對(duì)土壤環(huán)境和根系生長(zhǎng)的影響，分析連作引起花生產(chǎn)量及品質(zhì)下降的可能原因有______

（答出2點(diǎn)即可）。

【答案】（1）①.固體②.固體培養(yǎng)基表面才能長(zhǎng)出由單個(gè)微生物繁殖而成菌落③.高壓蒸

汽

（2）①.B07和B28②.B07固氮能力最強(qiáng)，B28降解2,4-二甲基苯甲酸的能力強(qiáng)

（3）有機(jī)酸會(huì)破壞根細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)，影響根對(duì)無(wú)機(jī)鹽等的吸收；有機(jī)酸會(huì)破壞土壤生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性；

有機(jī)酸導(dǎo)致土壤微生物的種類(lèi)（或數(shù)量）改變，影響土壤結(jié)構(gòu)和土壤肥力，或使土壤微生物與花生的種間關(guān)

系發(fā)生改變；有機(jī)酸抑制土壤中某些酶的活性，影響土壤肥力。（答出1點(diǎn)得2分，共4分，合理即可得分）

【解析】

【分析】1、富集培養(yǎng)的目的是增加目的菌種的數(shù)量，可以使用液體選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，純化培養(yǎng)的目

的是獲得單一菌種，可以使用固體選擇培養(yǎng)基，在其表面長(zhǎng)出由單個(gè)微生物繁殖而成的菌落。

2、由表格數(shù)據(jù)分析可知，降解苯甲酸能力最強(qiáng)的是A05和B28,在不含氮源培養(yǎng)基上B07的固氮能力最

強(qiáng)。

【小問(wèn)1詳解】

純化培養(yǎng)的目的是得到由單個(gè)微生物繁殖而來(lái)的純凈培養(yǎng)物，固體培養(yǎng)基表面才能長(zhǎng)出由單個(gè)微生物繁殖

而成的菌落，所以純化培養(yǎng)時(shí)須使用固體培養(yǎng)基。一般用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。

【小問(wèn)2詳解】

據(jù)表數(shù)據(jù)可知，B07固氮能力最強(qiáng)，B28降解2,4-二甲基苯甲酸的能力強(qiáng)，所以可以用B07和B28兩種菌

種混合使用增強(qiáng)使用效果，節(jié)省成本。

【小問(wèn)3詳解】

連年種植花生使有機(jī)酸在土壤中積累，有機(jī)酸會(huì)破壞根細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)，影響根對(duì)無(wú)機(jī)鹽等的吸收；有機(jī)酸

會(huì)破壞土壤生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性；有機(jī)酸導(dǎo)致土壤微生物的種類(lèi)（或數(shù)量）改變，影響土壤結(jié)構(gòu)和土壤肥力，

或使土壤微生物與花生的種間關(guān)系發(fā)生改變；有機(jī)酸抑制土壤中某些酶的活性，影響土壤肥力，從而引起

花生產(chǎn)量及品質(zhì)下降。

（2023屆安徽省黃山市高三一模理綜）11.新冠病毒是RNA病毒，病毒的S蛋白（刺突蛋白）是決定病毒入

侵易感細(xì)胞的關(guān)鍵蛋白，可與宿主細(xì)胞的受體結(jié)合。下面為兩種針對(duì)新冠病毒的疫苗研發(fā)方法，回答下列

問(wèn)題。

方法技術(shù)路線(xiàn)

基因工程疫苗S蛋白基因τ基因表達(dá)載體一大腸桿菌TS蛋白T人體

腺病毒載體重組疫苗S蛋白基因—腺病毒基因表達(dá)載體一人體

（1）基因表達(dá)載體的組成除了S蛋白基因外還必須有標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、（答出2點(diǎn)）等。

基因表達(dá)載體的構(gòu)建有利于目的基因完成轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化是指。

（2）基因工程疫苗制備過(guò)程中需要分離和提純大腸桿菌，通常情況下，我們需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行

滅菌，當(dāng)采用平板劃線(xiàn)法分離大腸桿菌時(shí)，第二次及以后的劃線(xiàn)都要從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始，其目的是

（3）除研制疫苗外，還可對(duì)新冠病毒進(jìn)行免疫學(xué)檢測(cè)以阻斷傳播途徑，其過(guò)程是：

①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒S蛋白后分離產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞，并與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，常用的融合方

法有（答出1種）；再多次篩選、檢測(cè)，最終獲得所需雜交瘤細(xì)胞，該種細(xì)胞的特點(diǎn)是

②獲得的雜交瘤細(xì)胞可在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到內(nèi)增殖，獲得大量可與S蛋白

特異性結(jié)合的單克隆抗體作為診斷試劑。

【答案】（1）①.終止子、復(fù)制原點(diǎn)②.目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定

和表達(dá)的過(guò)程

（2）①.高壓蒸汽滅菌（濕熱滅菌）②.使微生物的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而減少（保證接種

環(huán)上的細(xì)菌來(lái)自上一次劃線(xiàn)的末端）

（3）①.PEG融合法（滅活病毒誘導(dǎo)融合）②.既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生與S蛋白特異性結(jié)

合的專(zhuān)一抗體③.小鼠腹腔

【解析】

【分析】單克隆抗體的制備：（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，

然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B

淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克

隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從

細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【小問(wèn)1詳解】

基因表達(dá)載體包括復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因、目的基因等?；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建有利于目的

基因完成轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程。

【小問(wèn)2詳解】

為防止雜菌污染，對(duì)培養(yǎng)基往往要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌；采用平板劃線(xiàn)法分離大腸桿菌時(shí)，第二次及以后的

劃線(xiàn)都要從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始，其目的是使微生物的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而減少（保證接種環(huán)上

的細(xì)菌來(lái)自上一次劃線(xiàn)的末端）。

【小問(wèn)3詳解】

①誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有電融合法、聚乙二醇、滅活病毒等誘導(dǎo)；經(jīng)過(guò)多次篩選、檢測(cè)，最終獲得的

所需雜交瘤細(xì)胞既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生與S蛋白特異性結(jié)合的專(zhuān)一抗體。

②雜交瘤細(xì)胞可在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。

（2023屆安徽省馬鞍山市高三第一次教學(xué)質(zhì)量監(jiān)測(cè)（一模）理綜）11.為篩選出高效分解石油的微生物，研

究人員取石油污泥IOg加入到IOomL基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，適宜條件下培養(yǎng)2周，獲得富集培養(yǎng)液。將富集培養(yǎng)

液進(jìn)行梯度稀釋并涂布于篩選平板上，適宜條件下培養(yǎng)后，篩選出分解石油效果較好的兩種菌株A和B。

回答下列問(wèn)題。

（1）在實(shí)驗(yàn)前需對(duì)基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，常用的方法是。涂布于篩選平板前，稀釋富集培養(yǎng)液

的目的是。

（2）為了檢測(cè)A菌和B菌對(duì)石油污泥的實(shí)際分解石油效果，研究人員以石油污泥為底物進(jìn)行搖瓶實(shí)驗(yàn),

實(shí)驗(yàn)條件和結(jié)果如表所示。

組另I」1234

基礎(chǔ)物質(zhì)IOg石油污泥、IoomLIOg石油污泥、IOOmLIOg石油污泥、IOOmLIog石油污泥、IoOmL

基礎(chǔ)培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基

培養(yǎng)液種A菌液和B菌液各

無(wú)菌培養(yǎng)液ImLA菌液ImLB菌液ImL

類(lèi)0.5mL

7天后石

17%86%70%92%

油分解率

組別1中石油被分解的主要原因是O由表可知A菌和B菌在分解石油過(guò)程中具有一定的協(xié)同

作用，判斷的依據(jù)是o

（3）為了確定A菌和B菌的種類(lèi)，研究人員預(yù)利用PCR擴(kuò)增兩種菌的部分DNA片段，測(cè)定堿基排列順

序后與已知序列對(duì)比。PCR的原理是,在PCR前需要設(shè)計(jì)特異性引物，引物的作用是

，PCR每次循環(huán)一般分為_(kāi)________三步。

【答案】（1）①.濕熱滅菌##高壓蒸汽滅菌②.為了獲得石油分解菌的純培養(yǎng)物##稀釋菌液，便

于得到單個(gè)細(xì)胞形成的菌落

（2）①.石油污泥中有少量能分解石油的微生物②.組別4混合使用菌液后的石油分解率明顯高

于比組別2、3

（3）①.DNA半保留復(fù)制##DNA復(fù)制②.使DNA聚合酶能夠從引物的3,端開(kāi)始連接脫氧核甘酸

③.變性、復(fù)性和延伸

【解析】

【分析】1、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法：①灼燒滅菌；②干熱滅菌：③高壓蒸汽滅菌；

2、PCR擴(kuò)增原理是雙鏈DNA復(fù)制。

【小問(wèn)1詳解】

常用的滅菌方式有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌，對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌常用高壓蒸汽滅菌法；富集培

養(yǎng)增加目的菌的數(shù)量，所以涂布于篩選平板前，稀釋富集培養(yǎng)液的目的為了獲得石油分解菌的純培養(yǎng)物，

即稀釋菌液，便于得到單個(gè)細(xì)胞形成的菌落。

【小問(wèn)2詳解】

據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，組別1中石油被分解的主要原因是石油污泥中有少量能分解石油的微生物。根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可

得，組別4混合使用菌液后的石油分解率是92%,明顯高于比組別2、3,所以由表可知A菌和B菌在分

解石油過(guò)程中具有一定的協(xié)同作用.

【小問(wèn)3詳解】

PCR的原理是DNA半保留復(fù)制，由于DNA兩條鏈反向平行，且DNA聚合酶只能使新合成的DNA子鏈

從5，T3，方向延伸，所以該過(guò)程需要設(shè)計(jì)特異性引物序列，引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3,

端開(kāi)始連接脫氧核甘酸；PCR的每次循環(huán)一般包括變性、復(fù)性、延伸三步。

（2023屆福建省泉州市高三質(zhì)量檢測(cè)（二））4.啤酒是以大麥為主要原料經(jīng)酵母菌發(fā)酵制成的。下列相關(guān)敘

述錯(cuò)誤的是（）

酵母菌種

活化

大麥f發(fā)芽+破碎f糖化A煮沸計(jì)?接種一發(fā)酵一過(guò)濾一包裝

___________________________?I___________________________________________jI______________________________________I

制麥糖化發(fā)酵

A.經(jīng)赤霉素處理的大麥種子可直接用于糖化過(guò)程

B.破碎有利于淀粉酶與淀粉充分接觸，提升反應(yīng)速率

C.煮沸過(guò)程可以終止淀粉酶作用，同時(shí)殺死雜菌

D.應(yīng)在發(fā)酵液中的糖分完全消耗后，終止酵母菌的主發(fā)酵過(guò)程

【答案】D

【解析】

【分析】啤酒是以大麥為主要原料經(jīng)酵母菌發(fā)酵制成的，其中發(fā)酵過(guò)程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個(gè)階段。酵

母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發(fā)酵階段完成。主發(fā)酵結(jié)束后，發(fā)酵液還不適合飲用，

要在低溫、密閉的環(huán)境下儲(chǔ)存一段時(shí)間進(jìn)行后發(fā)酵，這樣才能形成澄清、成熟的啤酒。發(fā)酵的溫度和發(fā)酵

的時(shí)間隨啤酒品種和口味要求的不同而有所差異。

【詳解】A、經(jīng)赤霉素處理的大麥種子無(wú)需發(fā)芽就可以產(chǎn)生淀粉酶，可直接用于糖化過(guò)程，A正確；

B、破碎有利于淀粉酶的釋放，從而使淀粉酶與淀粉充分接觸，提升反應(yīng)速率，B正確；

C、蒸煮過(guò)程中高溫使淀粉酶失活，可以終止淀粉酶的作用，同時(shí)殺死雜菌，C正確；

D、酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發(fā)酵階段完成。隨著酒精含量的增多，酵母菌

的生長(zhǎng)受到了抑制，因此主發(fā)酵結(jié)束時(shí)，糖分未完全消耗，D錯(cuò)誤。

故選D。

（2023屆福建省漳州市高三第二次質(zhì)量檢測(cè)）8.袋裝酸奶的包裝上通常都會(huì)注明"脹袋勿食某同學(xué)選擇一

過(guò)期的脹袋密封酸奶，按圖中的操作流程，研究其中的某微生物生長(zhǎng)情況，有關(guān)敘述正確的是（）

A.使用巴氏消毒法可以殺死牛奶中的微生物和芽抱，但不破壞其營(yíng)養(yǎng)成分

B.酸奶脹袋是由于其中的乳酸菌有氧呼吸產(chǎn)生了CO2

C.利用圖示方法向培養(yǎng)基接種前和接種后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌

D.若3個(gè)平板的平均菌落數(shù)是180個(gè)，則ImL酸奶中該微生物個(gè)數(shù)為9x106個(gè)

【答案】D

【解析】

【分析】1、酸奶制作的原理是乳酸菌發(fā)酵，乳酸菌屬于原核生物，其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)厭氧型。

2、乳酸菌的無(wú)氧呼吸可將葡萄糖分解形成乳酸，并釋放少量的能量。

【詳解】A、無(wú)菌技術(shù)包括消毒和滅菌兩個(gè)方面，其中消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體

表面或內(nèi)部的部分微生物（不包括芽抱和抱子），A錯(cuò)誤；

B、乳酸菌屬于厭氧菌，不進(jìn)行有氧呼吸，B錯(cuò)誤：

C、利用圖示實(shí)驗(yàn)方法應(yīng)該使用涂布器進(jìn)行接種，C錯(cuò)誤；

D、利用公式C÷VxM,可以計(jì)算ImL,酸奶中該微生物數(shù)量為180÷0.2xl（yt=9xl06,D正確。

故選D。

（2023屆廣東省揭陽(yáng)市高三第一次教學(xué)質(zhì)量測(cè)試）21.中國(guó)科學(xué)家采集了某深海海域的沉積物樣品，分離、

鑒定得到其中的深海放線(xiàn)菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問(wèn)題：

（1）研究人員欲篩選出深海放線(xiàn)菌進(jìn)行研究，取Ig沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取

菌液通過(guò)法接種到高氏一號(hào)（加數(shù)滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。培養(yǎng)基

中的酚能抑制細(xì)菌等雜菌的生長(zhǎng)，而放線(xiàn)菌能在該培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)，這種培養(yǎng)基屬于（填“選

擇"或‘'鑒別”）培養(yǎng)基。

（2）通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增分離得到的放線(xiàn)菌的16SrRNA基因可進(jìn)行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵

作用的酶是。該技術(shù)能在放線(xiàn)菌總的DNA中專(zhuān)一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是。

PCR產(chǎn)物一般可通過(guò)_________鑒定。

（3）紫色桿菌的紫色菌素（一種毒素，致死率高）能使培養(yǎng)基呈紫色，己知吠喃酮C30能明顯抑制紫色

菌素的產(chǎn)生。研究人員篩選出了放線(xiàn)菌菌株A,用甲醇將菌株A發(fā)酵產(chǎn)物提取后配制成溶液，對(duì)提取物能

否抑制紫色菌素的產(chǎn)生進(jìn)行了研究。

①將紫色桿菌菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面，待菌液干燥后，將無(wú)菌圓紙片貼于培養(yǎng)基表面，按圖1所示

在濾紙片上滴加溶液。該實(shí)驗(yàn)以組為對(duì)照，通過(guò)比較A、B、C三組的可知提取物

是否能抑制紫色菌素的產(chǎn)生。

Z

c.0

pL

?.26

≡

)L

、

嘲S.48

祿

W

用O.O

圖I提取物抑制紫色菌素產(chǎn)生的研究圖2提取物對(duì)紫色桿菌生長(zhǎng)的影響

②實(shí)驗(yàn)表明甲醇溶液不會(huì)影響紫色桿菌的繁殖，培養(yǎng)過(guò)程中對(duì)A、B、C三組紫色桿菌的數(shù)量進(jìn)行監(jiān)測(cè)，

結(jié)果如圖2所示，據(jù)圖推測(cè)，深海放線(xiàn)菌A的提取物作為抗生素替代品的優(yōu)點(diǎn)是o

【答案】（I）①.稀釋涂布平板##涂布平板②.選擇

（2）①.耐高溫的DNA聚合酶②.引物能與16SrRNA基因特異性結(jié)合##引物是根據(jù)16SrRNA

基因一段已知序列設(shè)計(jì)合成的③.瓊脂糖凝膠電泳

（3）①.A、C②.褪色（透明）圈直徑③.不會(huì)影響致病菌的生長(zhǎng)，從而不會(huì)脅迫致病菌使

其產(chǎn)生耐藥性##不易對(duì)致病菌形成選擇壓力而導(dǎo)致其產(chǎn)生耐藥性

【解析】

【分析】PCR反應(yīng)過(guò)程：變性T復(fù)性T延伸。變性：當(dāng)溫度上升到90C以上時(shí)，雙鏈DNA解聚為單鏈，

復(fù)性：溫度下降到50。C左右，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合，延伸：72°C左右時(shí)，Taq

酶有最大活性，可使DNA新鏈由5,端向3,端延伸。

【小問(wèn)1詳解】

分離和純化微生物常用的方法是平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法，題干信息提示菌液已經(jīng)先經(jīng)過(guò)稀釋?zhuān)浦?/p>

這里的接種方法是稀釋涂布平板法。該培養(yǎng)基允許放線(xiàn)菌生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他細(xì)菌等雜菌的生長(zhǎng)，

推知該培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。

【小問(wèn)2詳解】

PCR技術(shù)變性（90℃以上）、復(fù)性（50C左右）、延伸（72。C左右）階段需要的溫度都比較高，所以需要

耐高溫的DNA聚合酶。引物是一段能與DNA母鏈部分堿基互補(bǔ)配對(duì)的短單鏈核酸，因此能特異性擴(kuò)增出

目的基因片段，該P(yáng)CR中引物能與16SrRNA基因特異性結(jié)合，因此能在放線(xiàn)菌總的DNA中專(zhuān)一性擴(kuò)增

出16SrRNA基因。PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物是DNA分子，DNA分子具有可解離的基團(tuán)，在一定的PH條件下，

這些基團(tuán)可以帶上正電荷或者負(fù)電荷，在電場(chǎng)作用下，這些帶電分子會(huì)向著與其所帶的電荷相反的電極移

動(dòng)，因此PCR產(chǎn)物一般通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定。

【小問(wèn)3詳解】

①研究提取物的作用時(shí)，一般需要設(shè)置空白對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照。由題干可知吠喃酮C30能明顯抑制紫色菌素

的產(chǎn)生，推知陽(yáng)性對(duì)照滴加5μL映喃酮C30,而菌株A發(fā)酵產(chǎn)物通過(guò)甲醇提取，推知空白對(duì)照滴加5μL

甲醇溶液，即該實(shí)驗(yàn)以A、C組為對(duì)照。由于紫色菌素使得培養(yǎng)基呈紫色，若提取物能抑制紫色菌素產(chǎn)生,

則會(huì)產(chǎn)生褪色圈（透明圈），根據(jù)褪色圈的直徑即可推知其抑制作用大小。

②由圖8可知，滴加吠喃酮C30和菌株A提取物后，紫色桿菌的數(shù)量與空白對(duì)照組（滴加甲醇溶液）差別

不大，推知提取物不會(huì)影響致病菌的生長(zhǎng)，但是致病菌產(chǎn)生的紫色菌素卻有區(qū)別，推知提取物不會(huì)對(duì)致病

菌進(jìn)行選擇，使得其不會(huì)產(chǎn)生耐藥性。

（2023屆廣東省茂名市高三第一次綜合考試）21.研究人員欲篩選出能高效降解一次性口罩（主要成分是由

C、H兩種元素組成的聚丙烯纖維）的細(xì)菌，設(shè)計(jì)了如圖所示的流程。回答下列問(wèn)題:

樣

分

鑒

分

品

離

別

離

采

純

培

甲鑒

集

化

養(yǎng)

定

（1）土壤是微生物的天然培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基能為微生物的生長(zhǎng)供的四大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)分別是碳源、-o

（2）通過(guò)相關(guān)實(shí)驗(yàn)來(lái)選擇較合適的土壤樣品，該實(shí)驗(yàn)的自變量是最適合作為選擇土壤樣品的指標(biāo)是

（3）圖中“甲”指的是使用的是液體培養(yǎng)基，目的是—。

（4）將分離純化得到的不同菌種分別接種到鑒別培養(yǎng)基上，鑒別培養(yǎng)基以—為唯一碳源，并加入了能與

之結(jié)合的顯色染色劑。設(shè)不同菌種的菌落面積為s,菌落周?chē)该鲌D的面積為S,選擇S/s的比值一的菌

落，就是能高效降解一次性口罩的目的菌群。

（5）研究人員欲獲取上述目的菌相應(yīng)基因進(jìn)行后續(xù)研究，該過(guò)程中需要用到RT-PCR技術(shù)即以RNA為模

板，還應(yīng)加入4種脫氧核糖核昔三磷酸（ANTP）,一般要加入4種脫氧核糖核甘三磷酸（dNTP）而不是脫氧核

甘酸的原因是一，同時(shí)需加入的有一。

【答案】（1）氮源、水和無(wú)機(jī)鹽

（2）①.土壤樣品的種類(lèi)②.一次性口罩的腐爛程度

（3）①.選擇培養(yǎng)②.可增大菌體與培養(yǎng)液的面積

（4）①.聚丙烯纖維②.大

（5）①.dNTP能為子鏈延伸過(guò)程提供能量②.酶和引物

【解析】

【分析】微生物常見(jiàn)的接種方法：（1）平板劃線(xiàn)法；（2）稀釋涂布平板法。培養(yǎng)基中四大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是碳源、

氮源、水和無(wú)機(jī)鹽。

【小問(wèn)1詳解】

培養(yǎng)基能為微生物的生長(zhǎng)供的四大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)分別是碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽，土壤是微生物的天然培養(yǎng)基,

也能為微生物的生長(zhǎng)提供這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

【小問(wèn)2詳解】

通過(guò)實(shí)驗(yàn)選擇較合適的土壤樣品時(shí)，實(shí)驗(yàn)的自變量是土壤樣品的種類(lèi)，選擇合適土壤樣品的指標(biāo)是一次性

口罩的腐爛程度。

【小問(wèn)3詳解】

結(jié)合圖示可知，圖中“甲''指的是選擇培養(yǎng)，利用液體培養(yǎng)基可增大菌體與培養(yǎng)液的面積。

【小問(wèn)4詳解】

口罩主要成分是由C、H兩種元素組成的聚丙烯纖維，要分離出高效降解口罩的菌種，鑒別培養(yǎng)基應(yīng)以聚

丙烯纖維為唯一碳源，并加入了能與之結(jié)合的顯色染色劑。設(shè)不同菌種的菌落面積為s,菌落周?chē)该鲌D

的面積為S,選擇S/s的比值大的菌落，就是能高效降解一次性口罩的目的菌群。因?yàn)橥该魅υ酱?，說(shuō)明

降解聚丙烯纖維的效果越好。

【小問(wèn)5詳解】

RT-PCR技術(shù)即以RNA為模板，一般要加入4種脫氧核糖核昔三磷酸（dNTP）而不是脫氧核甘酸的原因是

dNTP能為子鏈延伸過(guò)程提供能量的同時(shí)還能提供原料，同時(shí)需加入酶和引物。

（2023屆廣西柳州市高三第二次模擬考試?yán)砭C）11.氯蟲(chóng)苯甲酰胺（CAP）是目前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中非常重要的殺

蟲(chóng)劑品種之一，研究人員從被CAP污染的土壤中分離到一株降解CAP效果較好的分離株CGWl3,初步鑒

定GW13為假單胞菌屬細(xì)菌。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（I）GW13的最適培養(yǎng)條件為：

①以0.1%葡萄糖、200mg∕L氯蟲(chóng)苯甲酰胺原藥、0.15%硝酸核為原料配置培養(yǎng)基，其中硝酸錢(qián)作為GW13

生長(zhǎng)所需的。

②培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，需將培養(yǎng)基的PH調(diào)至,調(diào)節(jié)PH需要在滅菌（選填"前''或"后"）進(jìn)行。

（2）為了檢測(cè)所用培養(yǎng)基平板滅菌是否合格需要進(jìn)行的操作是O

（3）某研究小組做了探究CW13繁殖的最適溫度和分解CAP的最適溫度的實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)中具體的觀(guān)察指標(biāo)

分別是，24小時(shí)后。

（4）土壤微生物與農(nóng)作物生長(zhǎng)密切相關(guān)，其作用主要體現(xiàn)為。雖然CAP具有高效低毒的特點(diǎn)，但

使用過(guò)程對(duì)生態(tài)安全的影響仍值得關(guān)注，因此，研究人員設(shè)置了不同施藥水平，分析了CAP降解過(guò)程對(duì)

土壤微生物群落和活性的影響。除了研究CAP本身對(duì)土壤微生物群落和活性的影響,我們還需要研究

對(duì)土壤微生物群落和活性的影響。

（5）在獲得降解效果較好的GW13后，若要將其進(jìn)行長(zhǎng)期保存，可采用的方法。

【答案】（1）①.氮源②.中性或微堿性③.前

（2）將未接種的空白培養(yǎng)基的平板在相同的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀(guān)察是否有菌落產(chǎn)生

（3）平板上的菌落數(shù)目和CAP的剩余量（或CAP的降解率）

（4）①.土壤中微生物會(huì)將土壤中的有機(jī)物分解，為農(nóng)作物提供無(wú)機(jī)鹽（或土壤中的固氮微生物可

以作為農(nóng)作物提供含氮有機(jī)物）②.CAP降解產(chǎn)物

（5）甘油管藏

【解析】

【分析】雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮

元素的物質(zhì)）和無(wú)機(jī)鹽。另外還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)

乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的PH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將PH調(diào)

至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無(wú)氧的條件。

【小問(wèn)1詳解】

①培養(yǎng)基一般都含有水、碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無(wú)機(jī)鹽，硝酸核中含

有N元素，可作為GW13生長(zhǎng)所需的氮源。

②微生物培養(yǎng)時(shí)還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求，細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)需將PH調(diào)至中

性或微堿性；為避免雜菌污染，調(diào)節(jié)PH需要在滅菌前進(jìn)行。

【小問(wèn)2詳解】

為了檢測(cè)所用培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，需要進(jìn)行的操作是：將未接種的空白培養(yǎng)基的平板在相同的條件

下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀(guān)察是否有菌落產(chǎn)生：若產(chǎn)生菌落，則證明滅菌不合格.

【小問(wèn)3詳解】

分析題意可知，本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖翘骄緾W13繁殖的最適溫度和分解CAP的最適溫度，實(shí)驗(yàn)的自變量是不同

溫度,因變量是CW13的繁殖情況和CAP分解情況，具體觀(guān)察指標(biāo)分別是，24小時(shí)后平板上的菌落數(shù)目

和CAP的剩余量。

【小問(wèn)4詳解】

土壤微生物與農(nóng)作物生長(zhǎng)密切相關(guān)，可作為分解者，其作用主要體現(xiàn)為土壤中的微生物會(huì)將土壤中的有機(jī)

物分解，為農(nóng)作物提供無(wú)機(jī)鹽（或土壤中的固氮微生物可以作為農(nóng)作物提供含氮有機(jī)物）；除了研究CAP

本身對(duì)土壤微生物群落和活性的影響，我們還需要研究CAP降解產(chǎn)物對(duì)土壤微生物群落和活性的影響，

以避免二次污染。

【小問(wèn)5詳解】

對(duì)微生物進(jìn)行長(zhǎng)期保存的方法是甘油管藏法。

（2023屆河南省安陽(yáng)市高三一模理綜）11.工業(yè)廢水中可能含有大量有機(jī)物苯酚，若直接排放會(huì)造成環(huán)境污

染。為貫徹國(guó)家環(huán)保要求，某工廠(chǎng)對(duì)工業(yè)廢水進(jìn)行處理后再排放，處理時(shí)需將苯酚分解為無(wú)害物質(zhì)。為高

效處理苯酚，研究人員采用富集方法（在含有大量苯酚的牛肉膏蛋白腺培養(yǎng)基上培養(yǎng)）從土壤中分離能高

效降解苯酚的菌株，其實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

將污泥中樣品接種到含

苯酚的液體富集培養(yǎng)液中

菌落在平

鼠培養(yǎng)鼠培養(yǎng)崽接種板上生長(zhǎng)

半葭三G京叁

①②③④⑤

（1）科研人員應(yīng)從中取樣，①~③過(guò)程中對(duì)樣品進(jìn)行富集培養(yǎng)時(shí)應(yīng)選用液體培養(yǎng)基，原因是

（2）④過(guò)程所用接種方法為,為篩選出降解苯酚的菌株，④過(guò)程所用培養(yǎng)基應(yīng)以

為唯一碳源。為證明該過(guò)程培養(yǎng)基的選擇作用，可用作對(duì)照實(shí)驗(yàn)。

（3）苯酚降解后會(huì)在培養(yǎng)基上形成透明圈，科研人員常在⑤中平板上挑取出現(xiàn)透明圈且透明圈直徑

（填“較大”或"較小”）的菌落進(jìn)一步培養(yǎng)，原因是。

（4）與化學(xué)降解法相比，苯酚降解菌處理工業(yè)廢水具有更好的應(yīng)用前景，原因是O

【答案】（1）①.廢水處理的污泥②.可以使培養(yǎng)基與菌體接觸充分，能增大高效降解苯酚的菌

株的濃度

（2）①.稀釋涂布平板法②.苯酚③.牛肉膏蛋白陳為氮源的培養(yǎng)基

（3）①.較大②.降解苯酚能力越強(qiáng)的菌透明圈較大

（4）生物降解法能將苯酚分解為無(wú)害物質(zhì)，比化學(xué)方法更安全，更環(huán)保

【解析】

【分析】微生物常見(jiàn)的接種的方法：

（1）平板劃線(xiàn)法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種、劃線(xiàn)，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線(xiàn)的開(kāi)

始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線(xiàn)的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)

菌落。

【小問(wèn)1詳解】

為了分離能高效降解苯酚的菌株，應(yīng)從廢水處理的污泥中取樣。用液體培養(yǎng)基進(jìn)行富集培養(yǎng)時(shí)，可以使

培養(yǎng)基與菌體接觸充分，菌體繁殖快，能增大高效降解苯酚的菌株的濃度。

【小問(wèn)2詳解】

常用稀釋涂布平板法進(jìn)行初選分離，待分離的菌液均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

為了篩選出高效降解苯酚的菌株需要以苯酚為唯一的氮源的選擇培養(yǎng)基，大多數(shù)的細(xì)菌可以在以牛肉膏蛋

白豚為氮源的培養(yǎng)基上生活，因此可以作為實(shí)驗(yàn)組的對(duì)照。

【小問(wèn)3詳解】

苯酚降解后會(huì)在培養(yǎng)基上形成透明圈，降解苯酚能力越強(qiáng)的菌透明圈較大，因此需挑選透明圈較大的菌落

進(jìn)行篩選。

【小問(wèn)4詳解】

化學(xué)降解法在分解苯酚的同時(shí)可能造成二次污染，而用苯酚降解菌處理苯酚時(shí)，能將苯酚分解為無(wú)害物質(zhì)，

不會(huì)造成污染，因此，與化學(xué)降解法相比，苯酚降解菌處理工業(yè)廢水具有更好的應(yīng)用前景。

（2023屆黑龍江省大慶市高三第一次教學(xué)質(zhì)量檢測(cè)）22.某同學(xué)將自然發(fā)酵的甘蔗汁加入體積分?jǐn)?shù)為3%的

無(wú)水乙醇中，利用高產(chǎn)菌株釀制甘蔗醋。下列分析錯(cuò)誤的是（）

A.醋酸菌可將甘蔗汁中的糖類(lèi)和乙醇轉(zhuǎn)化為醋酸

B.添加高產(chǎn)菌株到發(fā)酵液后，應(yīng)高溫處理殺滅雜菌

C.發(fā)酵過(guò)程需要保持通氣，溫度控制在30-35℃

D.培養(yǎng)液中的醋酸濃度不再上升時(shí)即可停止發(fā)酵

【答案】B

【解析】

【分析】1、在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無(wú)菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖，再隔絕

氧氣進(jìn)行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18?25C,pH最好是弱酸性。

2、醋酸菌好氧型細(xì)菌，當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣、糖源都充

足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；醋酸菌生長(zhǎng)的最佳溫度是在30?35℃。

【詳解】A、糖原充足時(shí)醋酸菌可將糖類(lèi)轉(zhuǎn)化為醋酸，當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌可將乙醇變?yōu)橐胰?，再將?/p>

醛變?yōu)榇姿?，A正確；

B、高溫會(huì)將醋酸菌殺死，所以添加高產(chǎn)菌株到發(fā)酵液后，不能用高溫處理，B錯(cuò)誤；

C、醋酸菌是好氧菌，需要保持通氣，醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度約為33℃,因此果醋發(fā)酵溫度要控制在30?

35℃,C正確；

D、持續(xù)培養(yǎng)至培養(yǎng)液中醋酸濃度不再上升，或者培養(yǎng)液中乙醇含量達(dá)到最低時(shí)，發(fā)酵結(jié)束，D正確。

故選B。

（2023屆黑龍江省大慶市高三第一次教學(xué)質(zhì)量檢測(cè)）23.下列有關(guān)培養(yǎng)基和菌種鑒定的敘述，錯(cuò)誤的是

（）

A.在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中，培養(yǎng)皿可用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精擦拭滅菌

B.微生物的生長(zhǎng)除受營(yíng)養(yǎng)因素的影響外，還受pH、滲透壓等的影響

C,配制培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基時(shí)要將PH調(diào)至中性或弱堿性

D.菌落的形狀、大小、顏色等特征都可作為菌種鑒定的依據(jù)

【答案】A

【解析】

【分析】培養(yǎng)基，是指供給微生物、植物或動(dòng)物（或組織）生長(zhǎng)繁殖的，由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的

營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類(lèi)物質(zhì)。培

養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。

【詳解】A、在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中，培養(yǎng)皿可用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精擦拭消毒，A錯(cuò)誤；

B、微生物的生長(zhǎng)除受營(yíng)養(yǎng)因素影響外，還受到pH、滲透壓等的影響，如細(xì)菌中性偏堿，霉菌中性偏酸，

“細(xì)菌喜葷，霉菌喜素''等，B正確；

C、不同的微生物培養(yǎng)需要的PH是不同的，如培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將培養(yǎng)基的PH調(diào)至中性或微堿性，C正確；

D、不同微生物的菌落的形狀、大小、顏色、和隆起程度不同，可作為菌種鑒定的依據(jù)，D正確。

故選A。

（2023屆湖北省高三高考第四次適應(yīng)性模擬測(cè)試）16.為探究菌株Zl對(duì)病原菌I、II、ΠI生長(zhǎng)的抑制效果，

取病原菌的菌絲塊放置在平板中央,在距離中央3cm處用接種環(huán)分別在4個(gè)位點(diǎn)接種菌株ZL28°C培養(yǎng)3?

5天，觀(guān)察抑菌圈大小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖。下列分析,睇的是（）

θθO

Iπm

A.菌株ZI能在圖中所示培養(yǎng)基上生長(zhǎng)

B.三種病原菌在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的速度不同

C.菌株Zl對(duì)病原菌II的抑制作用最強(qiáng)

D.菌株ZI通過(guò)釋放分泌物抑制病原菌生長(zhǎng)

【答案】C

【解析】

【分析】將含有殺菌物質(zhì)的濾紙片放到滴有細(xì)菌培養(yǎng)液的固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)，殺菌物質(zhì)殺死細(xì)菌后

會(huì)在濾紙片周?chē)纬梢志Α?/p>

抑菌圈越大，說(shuō)明該菌對(duì)此藥敏感性越大，反之越小，若無(wú)抑菌圈，則說(shuō)明該菌對(duì)此藥具有耐藥性。透明

圈直徑大小與藥物濃度、細(xì)菌濃度有直接關(guān)系。

【詳解】A、據(jù)圖可知，菌株Zl病原菌的菌絲塊放置在平板中央，圖示培養(yǎng)基中菌落抑菌圈范圍有限，證

明菌株Zl能在圖中所示培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，A正確；

B、圖示三種病原菌所形成的的抑菌圈大小不同，故三種病原菌在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的速度不同，B正確；

CD、菌株Zl能通過(guò)釋放分泌物抑制病原菌生長(zhǎng)，據(jù)圖可知，菌株Zl對(duì)病原菌I的抑制作用最強(qiáng)，C錯(cuò)誤,

D正確。

故選C。

（2023屆湖北省高三高考仿真模擬測(cè)試）17.青霉菌處在葡萄糖濃度不足的環(huán)境中時(shí)，會(huì)通過(guò)分泌青霉素殺

死細(xì)菌，以保證自身生存所需的能量供應(yīng)。目前已實(shí)現(xiàn)青霉素的工業(yè)化生產(chǎn)，關(guān)于該生產(chǎn)過(guò)程，下列說(shuō)法

錯(cuò)誤的是（）

A.發(fā)酵液中的碳源不宜使用葡萄糖

B.可用深層通氣液體發(fā)酵技術(shù)提高產(chǎn)量

C.選育出的高產(chǎn)菌株經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)后才可接種到發(fā)酵罐中

D.青霉素具有殺菌作用，因此發(fā)酵罐不需嚴(yán)格滅菌

【答案】D

【解析】

【分析】培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等四類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。配制培養(yǎng)基時(shí)除了滿(mǎn)足基本的營(yíng)養(yǎng)

條件外，還需滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、pH、O2的要求。

【詳解】A、青霉菌處于葡萄糖濃度不足的環(huán)境中會(huì)通過(guò)分泌青霉素殺死細(xì)菌；提供相同含量的碳源，葡

萄糖溶液?jiǎn)挝惑w積中溶質(zhì)微粒較多，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞失水，發(fā)酵液中的碳源不宜使用葡萄糖，乳糖是二糖，可

被水解為半乳糖和葡萄糖，是青霉菌生長(zhǎng)的最佳碳源，可以被青霉菌緩慢利用而維持青霉素分泌的有利條

件，A正確；

B、青霉菌的代謝類(lèi)型為異養(yǎng)需氧型，可用深層通氣液體發(fā)酵技術(shù)提高產(chǎn)量，B正確；

C、選育出的高產(chǎn)青霉素菌株經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)純化后，才可接種到發(fā)酵罐中進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)，C正確；

D、為了防止細(xì)菌、其他真菌等微生物的污染，獲得純凈的青霉素，發(fā)醛罐仍需嚴(yán)格滅菌，D錯(cuò)誤。

故選D。

（2023屆湖北省高三高考適應(yīng)性模擬測(cè)試（三））19.多氟烷基物質(zhì)（PFAS）是添加在可以長(zhǎng)時(shí)間不脫落的

液體唇膏和粉底，以及防水睫毛膏中的化學(xué)物質(zhì)，PFAS極難被分解。研究人員利用圖示方法成功篩選到

能高效降解PFAS的細(xì)菌（目的菌），下列關(guān)于該方法的敘述，錯(cuò)誤的是（）

污水池中,污泥樣品

:初選

?

彳與候選菌

-----------------?接種

振蕩培養(yǎng)肯干天后，測(cè)定各瓶TPFAS的含量

選擇

接種

I接種

-≡

固體培養(yǎng)基

A.培養(yǎng)基要加入的物質(zhì)還應(yīng)該有PFAS,其屬于選擇培養(yǎng)基

B.配制好的培養(yǎng)基可采用高壓蒸汽滅菌法滅菌

C.多次篩選后，含有目的菌的培養(yǎng)瓶中PFAS的含量高

D.重復(fù)多次的目的是純化高效降解PFAS的細(xì)菌

【答案】C

【解析】

【分析】選擇培養(yǎng)基是指一類(lèi)根據(jù)特定微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某理化因素抗性的原理而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)

基。具有只允許特定的微生物生長(zhǎng)，而同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)的功能。

【詳解】A、培養(yǎng)基要加入的物質(zhì)還應(yīng)該有PFAS,其目的是篩選出能高效分解PFAS的目的菌，因而屬于

選擇培養(yǎng)基，A正確；

B、配制好的培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，起到避免雜菌污染的作用，B正確；

C、多次篩選后，含有目的菌的培養(yǎng)瓶中PFAS應(yīng)該被高效分解，其中PFAS的含量應(yīng)該最低，C錯(cuò)誤；

D、重復(fù)多次的目的是為了純化并獲得高效降解PFAS的細(xì)菌，D正確。

故選Co

（2023屆湖南省岳陽(yáng)市華容縣高三新高考適應(yīng)性考試）16.為解決全球塑料污染問(wèn)題，某研究團(tuán)隊(duì)從食塑料

蠟蟲(chóng)腸道中分離細(xì)菌，用于降解聚乙烯（PE）o將分離的兩種細(xì)菌（YTI和YPl）在PE薄膜培養(yǎng)液中培養(yǎng),

培養(yǎng)液中細(xì)胞數(shù)量變化以及PE失重率變化如下圖所示。下列敘述正確的是（）

(

Z

E空

W三

rlYSS

H(

P%YT1

o)PI

?

X一

)tt

皿*

凝Q

Sd

忌

時(shí)間/天時(shí)間/天

A.可用稀釋涂布平板法分離腸道細(xì)菌

B.PE薄膜培養(yǎng)液中含有葡萄糖等碳源

C.兩種細(xì)菌種群數(shù)量變化呈“S”形增長(zhǎng)

D.YTl細(xì)菌分解PE的能力強(qiáng)于YPl細(xì)菌

【答案】AC

【解析】

【分析】據(jù)圖分析可知，兩種細(xì)菌細(xì)胞數(shù)目在PE薄膜培養(yǎng)液中都是先緩慢增加，后快速增加，最終保

持不變，符合'S'形增長(zhǎng)，PE失重率變化曲線(xiàn)可知YPl明顯高于YTl。

【詳解】A、稀釋涂布平板法可用于腸道細(xì)菌分離，A正確；

B、本實(shí)驗(yàn)研究細(xì)菌對(duì)聚乙烯（PE）的降解作用，所以PE薄膜培養(yǎng)液為選擇培養(yǎng)基，僅由PE提供能量，

不含葡萄糖等其他碳源，B錯(cuò)誤；

C、分析細(xì)胞數(shù)量變化曲線(xiàn)可知兩種細(xì)菌的細(xì)胞數(shù)目在PE薄膜培養(yǎng)液中都是先緩慢增加，后快速增加，最

終保持不變，符合“S”形增長(zhǎng)，C正確；

D、用YPl細(xì)菌處理PE失重率明顯高于YTl細(xì)菌，且其細(xì)菌數(shù)目少，因此，YPl細(xì)菌分解PE的能力強(qiáng)

于YTl細(xì)菌，D錯(cuò)誤。

故選AC。

（2023屆湖南省株洲市高三教學(xué)質(zhì)量統(tǒng)一檢測(cè)（一））16.金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素的敏感度高且高度耐鹽

化。菌株可在血瓊脂平板（完全培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長(zhǎng)，并能產(chǎn)生溶血毒素（可使紅細(xì)胞及組成

物質(zhì)完全溶解）。而耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）的mecA基因可編碼新的青霉素結(jié)合蛋白2a,該

蛋白對(duì)青霉素類(lèi)抗菌藥物親和力低，繼而對(duì)青霉素產(chǎn)生了一定的抗藥性。以下敘述正確的是（）

A.在金黃色葡萄球菌分離培養(yǎng)過(guò)程中，須在選擇培養(yǎng)基中加入10%-15%的NaC1、青霉素

B.培養(yǎng)在血瓊脂平板上的金黃色葡萄球菌菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)透明的溶血圈

C.可利用平板劃線(xiàn)法在固體培養(yǎng)基表面獲得均勻分布的金黃色葡萄球菌的單個(gè)菌落

D.可利用DNA分子雜交技術(shù)和PCR技術(shù)檢測(cè)mecA基因，從而檢測(cè)篩選出MRSA

【答案】BD

【解析】

【分析】培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基：

①選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生

物生長(zhǎng)，培養(yǎng)、分離出特定的微生物（如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄

球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽）。

②鑒別培養(yǎng)基：根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，鑒別不同種類(lèi)的微生物,

如可用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）。

【詳解】A、金黃色葡萄球菌具有對(duì)磺胺類(lèi)藥物敏感性低，對(duì)青霉素、紅霉素等敏感度高和高度耐鹽化等

特性，故在金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)過(guò)程中，須在選擇培養(yǎng)基中加入1O%-15%的NaCI、磺胺類(lèi)藥物，

不能加青霉素、紅霉素等，A錯(cuò)誤；

B、金黃色葡萄球菌能產(chǎn)生溶血毒素，培養(yǎng)在血瓊脂平板上的金黃色葡萄球菌菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)透明的溶血

圈，B正確；

C、可利用平板劃線(xiàn)法在固體培養(yǎng)基表面不能獲得均勻分布的金黃色葡萄球菌的單個(gè)菌落，應(yīng)該采用稀釋

涂布平板法，C錯(cuò)誤；

D、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）的mecA基因可編碼新的青霉素結(jié)合蛋白2a,故可利用DNA分

子雜交技術(shù)或PCR技術(shù)檢測(cè)mecA基因，從而檢測(cè)篩選出MRSA,D正確。

故選BD。

（2023屆江蘇省南京市、鹽城市高三第一次模擬考試）10.下列有關(guān)果酒和果醋制作的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.為降低雜菌污染，發(fā)酵前需要對(duì)原料和器具進(jìn)行滅菌處理

B.裝置密閉發(fā)酵過(guò)程中，酒精度的變化是先增加后趨于穩(wěn)定

C.葡萄釀酒過(guò)程中，使用果膠酶利于出汁，還能提高酒透明度

D.由果酒制作轉(zhuǎn)為果醋制作時(shí)，不僅要升高發(fā)酵溫度，還要注意通氣

【答案】A

【解析】

【分析】在葡萄酒的自然發(fā)酵過(guò)程中，起主要作用的是附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。在發(fā)酵過(guò)程中，

隨著酒精度數(shù)的提高，紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)醛液，使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色。在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，

酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無(wú)法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。

【詳解】A、為降低雜菌污染，發(fā)酵前需要對(duì)器具進(jìn)行消毒處理，而原料不需要消毒，因?yàn)榫N來(lái)自原料

本身，消毒會(huì)導(dǎo)致菌種被殺死，A錯(cuò)誤；

B、裝置密閉發(fā)酵過(guò)程中，隨著發(fā)酵的進(jìn)行酒精積累，酒精度逐漸增大，而在發(fā)酵后期由于底物被大量消

耗，導(dǎo)致酒精度趨于穩(wěn)定，B正確；

C、果膠酶能夠分解果膠，瓦解植物的細(xì)胞壁和胞間層，使葡萄釀酒變得更容易，且果膠酶能夠?qū)⒐z分

解成可溶性的半乳糖醛酸，因此還能提高酒的透明度，C正確；

D、果酒制作需要的菌種是酵母菌，在厭氧條件下將葡萄糖分解為酒精，果酒制作的適宜溫度是18?25℃,

制作果醋需要的菌種是醋酸菌，為需氧菌，果醋制作的適宜溫度是30?35℃,因此由果酒制作轉(zhuǎn)為果醋制

作時(shí)，不僅要升高發(fā)酵溫度，還要注意通氣，D正確。

故選Ao

（2023屆江蘇省南京市、鹽城市高三第一次模擬考試）13.人們?cè)谘芯俊⒗梦⑸飼r(shí)，需用無(wú)菌技術(shù)培養(yǎng)

獲取純種微生物，并對(duì)其進(jìn)行計(jì)數(shù)或保存。下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)時(shí)，結(jié)果往往比實(shí)際值低

B.培養(yǎng)基配制過(guò)程是計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、調(diào)pH、定容、滅菌、倒平板

C.高壓蒸汽滅菌后，打開(kāi)排氣閥，待壓力表指針降至“0”后開(kāi)蓋取物

D.獲得純種微生物后，利用涂布平板法接種至斜面培養(yǎng)基上，進(jìn)行低