地中海貧血篩查一血液學(xué)分析

地中海貧血檢測(cè)血液學(xué)分析第一頁(yè)，共二十四頁(yè)。主要內(nèi)容篩查方案血液學(xué)分析地貧基因型與臨床表現(xiàn)第二頁(yè)，共二十四頁(yè)。地中海貧血篩查及產(chǎn)前診斷流程被檢對(duì)象（婚前或孕中期）血液學(xué)分析（MCV，HbA2變化）排除地貧地貧攜帶者遺傳咨詢，配偶檢查血液學(xué)分析（MCV

HbA2變化）地貧攜帶者排除地貧遺傳咨詢雙親基因分析胎兒產(chǎn)前診斷第三頁(yè)，共二十四頁(yè)。地中海貧血的臨床特征小細(xì)胞低色素性溶血型貧血(中、重度)黃疸肝脾腫大(脾大明顯)骨髓擴(kuò)增發(fā)育緩慢合并感染Bart’s水腫胎(α地貧,宮內(nèi)或出生后數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡)第四頁(yè)，共二十四頁(yè)。地貧血液學(xué)分析最常用的方法:紅細(xì)胞平均容積(MCV)、紅細(xì)胞脆性試驗(yàn)、Hb電泳聯(lián)合檢測(cè)進(jìn)行篩查,發(fā)現(xiàn)異常者再進(jìn)行基因診斷。第五頁(yè)，共二十四頁(yè)。地中海貧血的血液學(xué)表型特征

RBC脆性

RBC參數(shù)MCV

MCH

細(xì)胞形態(tài)變化

Hb電泳分析HbA2

(

)或

(

)HbBart’s(

)HbH(

)HbE(

)第六頁(yè)，共二十四頁(yè)。貧血實(shí)驗(yàn)室診斷程序貧血的形態(tài)學(xué)分類貧血類型MCV（fl）MCH(pg)MCHC(g/L)特征小細(xì)胞低色素性貧血<80<24200~300珠蛋白合成異常，缺鐵性貧血，慢性失血小紅細(xì)胞正色素性貧血<80<24320~360慢性腎功能衰竭等慢性病貧血大紅細(xì)胞正色素性貧血＞94>32320~360骨髓呈巨幼紅細(xì)胞特征正紅細(xì)胞正色素性貧血80~10027～32320~360急性失血，急性溶血，再生障礙性貧血第七頁(yè)，共二十四頁(yè)。第八頁(yè)，共二十四頁(yè)。人類不同時(shí)期血紅蛋白的組成人血紅蛋白的組成胚胎期血紅蛋白：HbGower1〔x2e2〕HbGower2(a2e2)HbPortland(x2g2)即HbPortland1另有少量HbPortland2(x2b2)，HbPortland3(x2d2)胎兒期主要血紅蛋白：HbF〔a2g2〕成人主要血紅蛋白：HbA〔a2b2〕約占血紅蛋白總量96.5—97.5%HbA2〔a2d2〕約占血紅蛋白總量2.5—3.5%HbF〔a2g2〕約占血紅蛋白總量1%以下。第九頁(yè)，共二十四頁(yè)。

第十頁(yè)，共二十四頁(yè)。地中海貧血表型陽(yáng)性診斷參考標(biāo)準(zhǔn)α－地中海貧血MCV＜82fL、HbA2＜2.5%、HbF＜2%、紅細(xì)胞形態(tài)異常，其中一項(xiàng)陽(yáng)性者。β－地中海貧血MCV＜82fL、HbA2＞3.5%、HbF＞3.5%、紅細(xì)胞形態(tài)異常，其中一項(xiàng)陽(yáng)性者。第十一頁(yè)，共二十四頁(yè)。血紅蛋白電泳圖譜123451.正常人HB2.輕型地貧3.異常HBE雜合子4.新生兒HBBart’s(γ4)(地貧標(biāo)準(zhǔn)型〕5.HBH(β4)NormalAA2AEBart’sAFHA+-500V,25min第十二頁(yè)，共二十四頁(yè)。全自動(dòng)血紅蛋白瓊脂糖凝膠電泳圖譜

1、正常成人HbA2,無HbF區(qū)帶;2、成人HbA2升高,但HbF堿變性含量正常,圖譜中不能掃描出HbF區(qū)帶;3、成人HbA2升高,HbF堿變性含量稍高于正常,圖譜中可見淺染HbF區(qū)帶;4、成人HbA2升高,HbF堿變性含量高于正常,圖譜中可見一淺染HbF區(qū)帶;5、成人HbA2升高,HbF堿變性含量明顯高于正常,圖譜中可見一清晰HbF

區(qū)帶。第十三頁(yè)，共二十四頁(yè)。a-珠蛋白基因突變及其遺傳學(xué)分型

●就遺傳單體型而言a-珠蛋白基因突變可分成三類：

a-地貧2缺失突變左缺失（-a4.2），右缺失（-a3.7）、-a2.7

a-地貧I缺失突變基因型為（--），包括：--SEA、--THAI、--FIL及--HWa-地貧非缺失突變基因型為（aaT），包括：aaCS，aa

QS，aa

ws●HbH病基因型可分成缺失型和非缺失型兩種：①缺失突變基因型：〔-a3.7/--〕、〔-a4.2/--〕及(-a2.7/--)②非缺失突變基因型：〔aaT/--〕和〔aaT/aaT〕第十四頁(yè)，共二十四頁(yè)。a-地中海貧血臨床類型根據(jù)臨床表現(xiàn)嚴(yán)重程度，可分成以下四種靜止型a-地貧

（aa／a-）或（aa／aaT）出生時(shí)臍血血紅蛋白含少量HbBart's，-般少于5％患者無臨床病癥輕型（標(biāo)準(zhǔn)型）a-地貧

（aa/--）或（a-／a-）出生時(shí)臍血血紅蛋白HbBart's占5％-10%患者多無明顯臨床病癥,實(shí)驗(yàn)室檢查可小細(xì)胞低色素性貧血，MCH和MCV均較低．血紅蛋白H病

（-a/--），或（a-/--），或（aaT/--），或（aaT／aaT）出生時(shí)臍血HbBart's約占20％-30％，此時(shí)HbH含量較低；但出生后HbBart's含量迅速降低，HbH含量逐漸增高。通常成年期患者HbH含量會(huì)持續(xù)在4%-20%范圍內(nèi)。終生輕度至中度貧血和肝脾腫大等，但差異較大.實(shí)驗(yàn)室檢查可見小細(xì)胞低色素性貧血，紅細(xì)胞內(nèi)可見包涵體．HBBart's胎兒水腫綜合征（--/--）

Bart’s為主,少量HbH和HbPortland患胎多于妊娠晚期（34～40周）或產(chǎn)后數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡．第十五頁(yè)，共二十四頁(yè)。

β-珠蛋白基因的突變

-珠蛋白基因點(diǎn)突變：β-珠蛋白基因最常見的突變類型。包括單堿基置換和數(shù)個(gè)堿基缺失或插人突變。在中國(guó)β-地貧群體中41/42〔-TCTT〕、IVS-Ⅱ-654(C→T),CD17(A→T),-28〔A→G〕和CD71/72〔+A〕等5種突變最常見，約占總突變率90%以上大片段缺失：缺失突變涉及基因組上較大片段的缺失包括δβ-地貧和遺傳性胎兒血紅蛋白持存癥(hereditarypersistanceoffetalhemoglobin,HPFH)。此外，Gγ-和Aγ-珠蛋白基因啟動(dòng)子區(qū)的突變也可導(dǎo)致HPFH。第十六頁(yè)，共二十四頁(yè)。突變類型編碼區(qū)的無義突變、移碼突變和起始密碼突變：如CD41-42，CD71-72，CD17突變后形成終止子，表現(xiàn)為

0。非編碼區(qū)IVS-1和IVS-2突變?nèi)鏘VS-II-654突變影響mRNA的拼接，表現(xiàn)為

＋。影響轉(zhuǎn)錄的突變：如-28，-29的突變影響基因的轉(zhuǎn)錄，表現(xiàn)為

＋。第十七頁(yè)，共二十四頁(yè)。b地貧的基因型與表現(xiàn)型重型-地中海貧血＋/＋、0/0、0/＋〔純合子或雙重雜合子〕所有患者有組織缺氧病癥，可出現(xiàn)“地中海貧血面容〞，生長(zhǎng)發(fā)育緩慢。紅細(xì)胞體積小且低色素。過剩的游離α鏈形成α鏈包涵體，引起溶血性貧血，靠輸血維持生命。實(shí)驗(yàn)室檢查主要可見：①血紅蛋白定量約為20-30g/L或更低；②紅細(xì)胞體積細(xì)小，形態(tài)不一，靶形紅細(xì)胞較常見，網(wǎng)織紅細(xì)胞增高；③血紅蛋白電泳時(shí)HbA缺乏或嚴(yán)重缺乏，HbF增高達(dá)30％以上〔偶可達(dá)90%以上〕。輕型-地中海貧血A/＋、A/0〔雜合子〕患者病癥較輕，輕度貧血，輕度肝脾腫大。紅細(xì)胞脆性降低，小細(xì)胞，低色素，MCV、MCH較低。實(shí)驗(yàn)室檢查可見：①血紅蛋白定量約為90-120g/L或更低;②小細(xì)胞低色素性貧血，MCH和MCV分別為20～22pg和50～70fl;③紅細(xì)胞脆性降低；④約50%患者HbF增高，約為1％-3%，甚少大于5%；⑤HbA2量增高〔達(dá)4%-8%〕。第十八頁(yè)，共二十四頁(yè)。b地貧的基因型與表現(xiàn)型中間型-地中海貧血＋/＋、＋/0〔純合子或雙重雜合子〕患者臨床病癥介于重型和輕型之間，如中度偏重貧血，生長(zhǎng)發(fā)育緩慢，黃疸等。血液檢查呈小細(xì)胞低色素貧血癥。實(shí)驗(yàn)室檢查呈小細(xì)胞低色素性貧血癥改變，血紅蛋白定量局部患者可低至60g/L，但也有患者高達(dá)100-120g/L本型患者通常屬某些β-地中海貧血變異型純合子，如日β+地貧〔高F〕／β+(高F)地貧或兩種不同變異型地中海貧血的雙重雜合子，如β+地貧／δβ+地貧。第十九頁(yè)，共二十四頁(yè)。血液學(xué)分析的敏感性和特異性RBC脆性假陰性血常規(guī)檢測(cè)(MCV)對(duì)靜止型地貧有小概率的漏檢靜止型a-地貧患者多無臨床病癥βE/N基因型患者的MCV十分接近篩查值這局部地貧患者極易漏診通過Hb電泳可對(duì)β-地貧進(jìn)行明確診斷HbA2輕度增高診斷β-地貧的敏感性可達(dá)96.8%,特異性可達(dá)97.4