腸桿菌科細(xì)菌檢驗(yàn)課件

實(shí)驗(yàn)三腸桿菌科細(xì)菌檢驗(yàn)1.目的要求掌握常見(jiàn)腸桿菌科細(xì)菌的培養(yǎng)特性和形態(tài)染色特征掌握常見(jiàn)腸桿菌科細(xì)菌的鑒定技術(shù)掌握腸桿菌科微量生化管編碼鑒定技術(shù)掌握腸桿菌科臨床常見(jiàn)致病菌的血清學(xué)凝集技術(shù)2.實(shí)驗(yàn)材料一、菌種：大腸埃希菌、沙門(mén)菌、普通變形桿菌、肺炎克雷伯菌（BAP、MAC、SS）二、生化管：KIA、半固體、腸桿菌科微量生化管編碼鑒定管（1套/2人）三、診斷血清：沙門(mén)菌多價(jià)四、其他：玻片、鹽水、接種環(huán)（針）、革蘭染液、3%H2O2、氧化酶試劑、液體石蠟3.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、菌落觀察：大腸埃希菌、沙門(mén)菌、普通變形桿菌、肺炎克雷伯菌（BAP、MAC、SS）

菌落形態(tài)、顏色、溶血現(xiàn)象、遷徙生長(zhǎng)現(xiàn)象觀察與描述二、形態(tài)觀察：

所有細(xì)菌革蘭染色

顯微鏡下細(xì)菌形態(tài)、染色性觀察與描述4.三、生化實(shí)驗(yàn)：

1.觸酶試驗(yàn)：2.氧化酶試驗(yàn)：

3.KIA試驗(yàn)（1支）：

4.半固體試驗(yàn)（1支）：

5.腸桿菌科微量生化編碼管（1支）

6.沙門(mén)菌血清學(xué)玻片凝集試驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（2人/組）5.檢驗(yàn)程序糞便腸道選擇培養(yǎng)基可疑菌落生化反應(yīng)血清學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告藥敏試驗(yàn)?zāi)c道外標(biāo)本血平板、弱選擇平板6.1.腸桿菌科與其它革蘭陰性桿菌區(qū)別

腸道桿菌的生化反應(yīng)鑒定7.2.初步分三組苯丙氨酸（－）VP（－）苯丙氨酸（＋）VP（－）苯丙氨酸（－）VP（＋）埃希菌屬變形桿菌屬克雷伯菌屬沙門(mén)菌屬普羅威登斯菌屬腸桿菌屬志賀菌屬摩根菌屬沙雷菌屬枸櫞酸菌屬哈夫尼亞菌屬愛(ài)德華菌屬耶爾森菌屬8.3.腸道桿菌屬間鑒定菌屬KIAMIU斜面底層氣體H2S動(dòng)力吲哚脲酶埃希菌屬AA＋－+/-+-志賀菌屬KA-－-+/--沙門(mén)菌屬KA+D/++--變形桿菌屬KA++/－+-/++克雷伯菌屬AA+－-d+9.

麥康凱瓊脂（MACC）蛋白胨20g氯化鈉5g瓊脂20-25g蒸餾水1000ml乳糖10g1%中性紅水溶液5ml膽鹽5g

10.

配方一

配方二

配方三

配方四

牛肉膏5

5

牛心浸液

1000

肉膏液

850

胨57.5（胨）

5

乳糖10151010

膽鹽10（粗制）10（透析）150（ml）（牛膽汁）

8.5（混合）硫代硫酸鈉125118.5

枸櫞酸鈉1215118.5

枸櫞酸鐵0.5

1枸櫞酸鐵銨

14

磷酸氫二鈉

54

瓊脂25182013.5

煌綠0.33

0.331.0

0.33

中性紅22.5377025

水1000

1000

SS瓊脂(四種配方)11.MACCSS12.大腸埃希桿菌呈典型粉紅色，乳糖發(fā)酵菌落。福氏痢疾桿菌菌落小，無(wú)色透明，非乳糖發(fā)酵菌。（18hr,37℃)13.

蛋白胨10g葡萄糖

1g

氯化鈉5g乳糖

10g

牛肉膏3g硫代硫酸鈉0.2g

瓊脂16g硫酸亞鐵

0.2g

水1000ml0.4%酚紅

6ml

雙糖鐵培養(yǎng)基(KIA)14.細(xì)菌在KIA中的生長(zhǎng)現(xiàn)象

觀察高層與斜面顏色變化情況以及培養(yǎng)基是否變黑上層固體斜面：乳糖+指示劑下層固體：葡萄糖+指示劑+FeSO4觀察指標(biāo)：葡萄糖、乳糖發(fā)酵、H2S15.16.細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象觀察穿刺線邊緣是否清晰及培養(yǎng)基