標本采集運送標準操作規(guī)程

微生物檢查的標本收集原則1.及時采集微生物標本作病原學檢查。2.采樣時嚴格執(zhí)行無菌操作，將污染情形降至最低。3.在感染的急性期、使用抗生素前或傷口局部治療前收集樣本。4.收集真正感染的病灶處的樣本，且避免鄰近區(qū)域常居菌群的污染。5.采用專用無菌容器收集標本。臨床微生物標本采集、運送標準操作程序微生物檢查的標本收集原則6.選擇正確的解剖部位，并以適當?shù)募夹g(shù)、方法與容器收集足量的樣本，盡量不要以棉花拭子收集樣本。7.采樣后立即送檢，最好在2h內(nèi)。如不能及時送檢，應將標本置于適當?shù)膬Υ姝h(huán)境待送，但存放一般不能超過24h。8.混有正常菌群的標本，不可置肉湯培養(yǎng)。9.每份標本都應貼上標簽并標明必要信息，在檢驗申請單上填寫足夠的有關臨床資料。（要標明病區(qū)、病人姓名、住院號、標本來源、采集部位、采集時間等）細菌室對微生物標本拒收的標準與處理方法

拒收標準處理方式申請單注明的標本種類與送檢標本不符與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求審核并重送符合要求的標本。申請單上填寫項目不全或與標本的標簽不符或容器上未貼標簽與原送檢部門聯(lián)系，要求補充完整申請單或重貼標簽或重送標本。檢驗單上未注明樣本來源和培養(yǎng)項目或僅注明身體部位者（如胸、腿）查詢申請醫(yī)師，補足標本信息。僅有申請單而無標本或無菌容器內(nèi)無標本與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求重送標本標本外漏及明顯受污染（如開塞）與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，建議重送標本。標本收集不符合采集要求退回申請單，及時通知臨床，告知正確收集方法，要求重送標本樣本混入消毒液或防腐劑退回申請單，及時通知臨床，建議重送標本。細菌室對微生物標本拒收的標準與處理方法送檢延誤，超過要求送檢時限與送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求重送標本。標本量過少或已明顯干燥與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求重送標本。申請項目不適合如血液培養(yǎng)同時要求涂片革蘭染色，肛門或直腸標本要求做革蘭染色檢查淋球菌。聯(lián)系申請醫(yī)師，建議刪去請求革蘭染色項目送檢容器不當或破損滲漏與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求重送標本。穿刺液標本嚴重凝固，無菌部位標本（如腦脊液、膿、穿刺液、尿液等）為非無菌管采集。退回申請單，并注明標本不當，要求重送標本。一支拭子同時做細菌、支原體、衣原體及真菌培養(yǎng)詢問醫(yī)師并補送標本，如不能補送，則按醫(yī)師要求優(yōu)先次序處理同一天同一病人重復送多次同一檢測目的的相同樣本（血液標本除外）一般只檢查一次即可，可與臨床醫(yī)生進行協(xié)商。各類標本儲存的環(huán)境儲存環(huán)境標本來源4℃冰箱痰、尿液、糞便、活檢組織、氣管沖洗物、導尿管、心包積液、膿和傷口分泌物等室溫（25℃）腦脊液、泌尿生殖道、眼、耳、鼻、喉、血液培養(yǎng)、血管導管尖、體液、厭氧菌培養(yǎng)標本細菌室項目檢驗周期表序號檢驗項目標本送達時限標本接收至進行檢驗時間標本接收至出報告時間標本檢驗的周期（標本接收至報告送達時間）1肥達氏反應、肺支抗體、結(jié)核抗體、梅毒篩查2小時1小時24小時2天2梅毒確診試驗2小時1小時24小時3天3普通細菌培養(yǎng)+藥敏（包括尿、痰、腦脊液、分泌物、糞便、咽拭子等）1小時1小時陰性3天、陽性結(jié)果3天以上4血培養(yǎng)立即1小時陽性結(jié)果3天以上，陰性結(jié)果7天7淋球菌培養(yǎng)30分鐘30分鐘2天8真菌培養(yǎng)1小時2小時3天后細菌室項目檢驗周期表9解脲、人型支原體培養(yǎng)及藥敏、衣原體培養(yǎng)1小時2小時2天后11一般涂片革蘭氏染色1小時2小時5小時當天下午12涂片找抗酸桿菌1小時2小時5小時當天下午13新型隱球菌墨汁染色1小時1小時5小時當天下午注：1.細菌室正常上班時間為周一至周六全天、周日上午；其他時間（包括中午、夜班、周日下午、）常規(guī)培養(yǎng)請送急診化驗室。2．各類血清學檢測周一至周五做；支原體、衣原體檢查周一至周六上午做，其余時間標本一律不接收。3．空氣培養(yǎng)、物表監(jiān)測周六、周日不做，于周一至周五打電話給細菌室告之數(shù)量。標本采集、運送的標準操作程序【目的】規(guī)范標本采集，保證實驗室檢測前標本質(zhì)量?！痉秶课⑸飳嶒炇宜袠吮??！韭氊煛坎杉⑦\送微生物標本的臨床各科室工作人員。【標準操作程序】

1.血液、骨髓標本：1.1采集指征：對可疑血流感染患者未進行抗菌藥物治療前，應及時進行血液培養(yǎng).可疑血流感染患者出現(xiàn)以下一項或幾項體征時應及時采集血培養(yǎng)：（1）發(fā)熱（≥38℃）或低溫（≤36℃）（2）寒戰(zhàn)。（3）白細胞增多（計數(shù)大于10,000×109/L，特別有“核左移”未成熟的或帶狀的白細胞）?！緲藴什僮鞒绦颉浚?）粒細胞減少（成熟時我多核白細胞小于1000×109/L）。（5）血小板減少。（6）皮膚黏膜出血。（7）昏迷.（8）多器官衰竭（9）血壓降低（10）呼吸加快（11）降鈣素原升高（PCT）【標準操作程序】

在評估可疑新生兒敗血癥時，除發(fā)熱或低燒外，很少培養(yǎng)出細菌，應該補充尿液和腦脊液培養(yǎng)。肺炎鏈球菌與流感嗜血桿菌菌血癥的患兒（特別是2歲或以下的幼兒）一般出現(xiàn)于門診，常伴有明顯的發(fā)熱（≥38.5℃）和白細胞增多（總數(shù)≥20,000×109/L）。老年菌血癥患者，可能不發(fā)熱或低體溫，如伴有身體不適，肌痛或中風可能是感染心內(nèi)膜炎的重要信號?！緲藴什僮鞒绦颉?.2血培養(yǎng)次數(shù)和采血時間：采血應盡量在使用抗菌藥之前進行，推薦同時采集2～3套（不同部位）血培養(yǎng)，以助于提高陽性檢出率，區(qū)別病原菌與污染菌。（一套血培養(yǎng)為一瓶需氧培養(yǎng)加一瓶厭氧培養(yǎng)。一次靜脈采血只能注入到1套培養(yǎng)瓶中）。盡可能選用可中和或吸附抗菌藥物的培養(yǎng)基。臨床對可疑菌血癥患者應立即采集血培養(yǎng)標本，對間歇性寒戰(zhàn)或發(fā)熱可在寒戰(zhàn)時或體溫高峰到來之前0.5～1h進行采血。除特殊情況之外（如懷疑細菌性心內(nèi)膜炎），采集血培養(yǎng)后的2至5天內(nèi)，無需重復采集血培養(yǎng)?！緲藴什僮鞒绦颉?.3特殊的全身性和局部感染患者采集血培養(yǎng)的建議：1.3.1急性心內(nèi)膜炎：對于可能的心內(nèi)膜炎患者，必須在經(jīng)驗使用抗菌藥物前30min之內(nèi)抽取血培養(yǎng)，起始采集3套血培養(yǎng)，如果在24h內(nèi)仍報告為陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)，全部培養(yǎng)一共為5套。1.3.2亞急性心內(nèi)膜炎：需在24h之內(nèi)連續(xù)從不同部位抽取3套血培養(yǎng)，間隔時間30-60min。如24h內(nèi)為陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)，全部培養(yǎng)一共為5套。【標準操作程序】1.3.3對于亞急性心內(nèi)膜炎的評估，皮膚消毒尤為重要，因為其主要的病原菌為皮膚定植菌如凝固酶陰性葡萄球菌。因此，血培養(yǎng)必須取自外周靜脈而非留置的靜脈導管。取自導管的血培養(yǎng)會伴有很高的污染風險從而導致錯誤的心內(nèi)膜炎的結(jié)論。建議采用正確的皮膚消毒，從不同的外周靜脈部位分別采集血培養(yǎng)，不能從留置的導管采血。1.3.4急性膿毒癥：10min內(nèi)從不同的部位采集2～3套血培養(yǎng)。1.3.5可疑菌血癥但血培養(yǎng)持續(xù)陰性，應改變血培養(yǎng)方法，如延長培養(yǎng)時間或增加特殊培養(yǎng)基，以獲得罕見的或苛養(yǎng)的微生物（真菌，結(jié)核菌等）。1.3.6不明原因發(fā)熱，如隱性膿腫、傷寒熱和波浪熱，從不同體位先采集2～3套血標本，24～36h后估計體溫升高之前（通常下午）再采集2套以上【標準操作程序】1.4皮膚消毒程序：1.4.1推薦使用碘酊、次氯酸和洗必太或碘伏。碘酊、次氯酸和洗必太的消毒效果要優(yōu)于碘伏。消毒劑需要有足夠的時間以保證消毒效果（碘酊作用30s；碘伏作用1.5～2min）。洗必泰的作用時間和碘酊一樣，但是沒有過敏反應，因此不必擦去，但不能用于小于2個月的嬰兒?！緲藴什僮鞒绦颉?.5靜脈穿刺點皮膚消毒程序：

1.5.170%酒精消毒皮膚（以采血點為中心，螺旋式用力有內(nèi)到外直徑5cm以上），作用60秒；

1.5.2用碘伏消毒皮膚（以采血點為中心，螺旋式用力有內(nèi)到外直徑5cm以上），作用1.5~2min；或用碘酊消毒皮膚，作用30秒；

1.5.3再用70%酒精脫碘（以采血點為中心，螺旋式用力有內(nèi)到外直徑5cm以上）；

1.5.4靜脈穿刺采血。注：血培養(yǎng)必須特別注意消毒，因許多微生物，尤其葡萄球菌屬通常存在皮膚表面或近表層處，易污染血培養(yǎng)標本。【標準操作程序】1.6培養(yǎng)瓶消毒程序：用70%酒精擦拭血培養(yǎng)瓶橡皮塞（不能用含碘消毒劑），作用60s。用無菌紗布或無菌棉簽清除橡皮塞表面殘余液體，然后注入血液。1.7采血量：成年患者推薦的采血量為每套不少于10ml，每瓶不少于5ml。嬰幼兒患者推薦的采血量，每瓶不少于2ml。1.8培養(yǎng)瓶推薦使用商品化的培養(yǎng)基?！緲藴什僮鞒绦颉?.9靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序：穿刺前或穿刺期間，為防止靜脈滑動，可戴乳膠手套固定靜脈，不可接觸刺點。骨髓標本采取對穿刺一側(cè)準備同外科切口。用注射器無菌穿刺取血或骨髓后，直接注入血培養(yǎng)瓶，勿換針頭（如果行第二次穿刺，應換針頭），或嚴格按廠商推薦的方法采血。血標本接種到血培養(yǎng)瓶后，輕輕顛倒混勻以防血液凝固，立即送檢?！緲藴什僮鞒绦颉?.10血培養(yǎng)瓶標識標識內(nèi)容應包括病人姓名、病員號、標本種類、采集時間。注：病人標識不可覆蓋在血液培養(yǎng)瓶的條形碼上。1.11標本的運送血培養(yǎng)標本應按要求盡快送往實驗室，不能超過2h。如無法及時送檢，血標本需室溫（20-25度）保存，切勿冷藏。

1.12生物安全防護參見《HS-JY-GL-XJ-302生物防護的安全程序》。【標準操作程序】2.尿液標本2.1采集指征：1)有典型的尿道刺激癥狀2)肉眼膿尿或血尿3)尿常規(guī)檢查表現(xiàn)為白細胞或亞硝酸鹽陽性（幾個+號）4)不明原因的發(fā)熱，無其他局部癥狀5)留置導尿管時間超過48h的患者出現(xiàn)發(fā)熱6)膀胱排空功能受損7)泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前。

【標準操作程序】2.2采集方法：標本采集應力爭在末使用抗菌藥物之前，注意避免消毒劑污染標本。清潔中段尿：最好留取早晨清潔中段尿標本，囑咐患者睡前少飲水，清晨起床,由專業(yè)人員指導下采集中段尿標本。尿標本消毒采集程序：女性中段尿的采集方法：用肥皂水完全清洗尿道區(qū)域，用濕紗布墊漂洗。分開陰唇，開始排泄。排除前段尿后，不停止尿流，采集中段尿。留置導尿管收集尿液：利用留置采集標本時，應先夾住導尿管1-2小時后，以75﹪酒精消毒導尿管外部，按無菌操作方法用注射器穿刺導尿管吸取尿液。注意不能從尿液收集袋中采集尿液。【標準操作程序】2.3采集量5～10ml。2.4容器無菌、帶螺旋蓋、透明塑料容器。2.5標本容器標識標識內(nèi)容應包括病人姓名、病員號、標本種類。2.6標本運送標本采集后立即蓋緊防止泄漏或容器外部留有殘留物。及時送檢，室溫保存下不得超過2小時，否則應置于4℃冰箱保存，保存時間不得超過24h。2.7注直接導尿可能導致尿道菌落進入膀胱，增加醫(yī)源性感染的危險。8生物安全防護參見《HS-JY-GL-XJ-302生物防護的安全程序》?！緲藴什僮鞒绦颉?.糞便樣本5.1采集指征：當腹瀉患者出現(xiàn)以下任何一種情況時建議采集糞便標本，進行細菌培養(yǎng)：糞便涂片鏡檢白細胞＞5/HP體溫＞38.5℃重癥腹瀉血便或便中有膿液未經(jīng)抗菌藥物治療的持續(xù)性腹瀉病人來自腸道傳染疫區(qū)的患者5.2采集時間：盡可能在發(fā)病早期和使用抗菌藥物之前采集。在不同的時間采集2—3個標本可以提高致病菌的分離率?！緲藴什僮鞒绦颉?.3采集方法：自然排便采集標本時，取有膿血，黏液，組織碎片部分的糞便1—3g（花生米大小）。水樣糞便則取絮狀物，一般取1—3ml，直接裝入運送培養(yǎng)基中送檢。直腸拭子采集糞便標本：先以肥皂和水，將肛門周圍洗凈，然后用經(jīng)無菌鹽水濕潤的棉式子插入肛門超越肛門括約肌約2～3cm，與直腸黏膜表面接觸，輕輕旋轉(zhuǎn)，必須將棉式子置于運送培養(yǎng)基中送檢。5.4采集量：成形糞便花生米大小1—3g，水樣便1—3ml。5.5容器：糞便標本裝于無菌加蓋螺旋廣口塑料杯；直腸肛拭置于Cary-Bair運送培養(yǎng)基。5.6標本容器標識應包括病人姓名、病員號、標本種類、檢驗項目、采集時間?！緲藴什僮鞒绦颉?.7標本運送：標本采集后應立即加蓋，防止泄漏或容器外部留有殘留物。1小時內(nèi)送檢，建議床邊接種。高度懷疑霍亂弧菌感染的標本運送必須符合相應的生物安全防護要求。5.8注：住院超過3d或入院診斷不是胃腸炎的患者，應考慮抗菌藥物相關腹瀉的檢測，一般不做常規(guī)糞便培養(yǎng)。除嬰兒和有活動性腹瀉癥狀的患者外不推薦用拭子做常規(guī)病原檢測。有腹部痙攣的患者在發(fā)病6h內(nèi)采集到的血便或水樣便的效果最好。疑似致病性大腸埃希菌，氣單胞菌，鄰單胞菌，弧菌，小腸結(jié)腸炎耶爾森菌感染的病人，需要培養(yǎng)時，須另外提出申請?！緲藴什僮鞒绦颉?組織標本9.1采集指征：淺表皮膚黏膜感染，深部組織感染等。9.2采集時間：在使用抗菌藥物之前采集。9.3采集方法：根據(jù)不同的病變部位，炎癥或壞死組織部位，采用相應的方法采集組織標本。9.4采集量：>1g。9.5容器：無菌封閉容器，需要加一些無菌鹽水保持濕潤。9.6標本容器標示:應包括病人姓名，病員號，標本種類，檢驗項目，采集時間。9.7標本運送:標本采集后正確蓋好，防止泄漏或容器外部留有殘留物，常溫1h內(nèi)送至實驗室。9.8注：送檢組織的量盡可能多，不要呈送表面簡單摩擦的拭子。組織標本不要添加固定液?！緲藴什僮鞒绦颉课⑸飿吮静杉改媳?標本類型采集送檢時間溫度報告時間重復采樣限制說明原則裝置和最小量轉(zhuǎn)運血培養(yǎng)培養(yǎng)瓶口的消毒：用70%酒精擦拭血培養(yǎng)瓶口橡皮塞，作用60s。用無菌棉簽清除橡皮塞表面殘留液體，然后注入血液。靜脈穿刺點皮膚消毒：70%乙醇消毒皮膚（以采血點為中心，螺旋式用力有內(nèi)到外直徑5cm以上），作用60s；用碘伏消毒皮膚，作用1.5～2min;或用碘酊消毒皮膚，作用30s（以采血點為中心，螺旋式用力有內(nèi)到外直徑5cm以上）再用70%酒精脫碘（以采血點為中心，螺旋式用力有內(nèi)到外直徑5cm以上）4.靜脈穿刺采血。注：血培養(yǎng)須特別注意消毒，因許多微生物，尤其葡萄球菌屬通常存在皮膚表面或近表面或表層處，易污染血培養(yǎng)標本血培養(yǎng)專用瓶成人：≥5ml/瓶，量大效果更好嬰兒：≥2ml/瓶2h內(nèi)送至實驗室，室溫放置7/d3瓶/24h1.急性膿毒癥：10min內(nèi)從不同的部位采