DB34-T 1363-2022 飼料中喹烯酮的測(cè)定 高效液相色譜法

ICS

65.120CCS

B

4634 DB34/T

1363—2022代替DB34/T

1363-2011飼料中喹烯酮的測(cè)定 高效液相色譜法Determination

of

quinocetone

—High

performance

chromatography

發(fā)布

實(shí)施安徽省市場(chǎng)監(jiān)督管理局 發(fā)

布DB34/T

1363—2022 本文件按照GB/T

1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則

第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件代替

DB34/T

1363-2011《飼料中喹烯酮的測(cè)定-術(shù)變化如下：a)

增加方法檢出限、定量限；b)

修改了原理（見第

4

章）；c)

修改了試劑和材料內(nèi)容（見第

5

章）；d)

增加了儀器設(shè)備（見第

6

章）；e)

更改了樣品制備（見第

7

章）；f)

修改“色譜條件”（見第

8

章）；g)

修改了結(jié)果計(jì)算與表述（見第

章）。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由安徽省獸藥飼料監(jiān)察所提出。本文件由安徽省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳歸口。農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所。敏、吳昊、許世富、邵穎、潘孝成、宋亞偉?！?011

年首次發(fā)布為

1363-2011，2022

年第一次修訂。DB34/T

1363—2022 1 范圍本文件規(guī)定了飼料中喹烯酮含量的高效液相色譜測(cè)定方法。本文件適用于配合飼料、濃縮飼料和預(yù)混合飼料中喹烯酮含量的測(cè)定。本方法檢出限為

0.5

，定量限為

mg/kg。2 規(guī)范性引用文件文件。GB/T

6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T

20195 動(dòng)物飼料

試樣的制備3 術(shù)語(yǔ)和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。4 原理測(cè)定，外標(biāo)法定量。5試劑和材料除特殊說明外，本方法所用試劑均為分析純，水為符合

GB/T

6682

規(guī)定的一級(jí)水。甲醇：色譜純。乙腈：色譜純。二甲基甲酰胺。磷酸。0.025

mol/L

磷酸溶液：稱取

％

的磷酸（5.5）

2.88

g

，加水稀釋至

mL。流動(dòng)相：乙腈-甲醇-（

mol/L）磷酸溶液，按體積比

25：20：55（v/v）。標(biāo)準(zhǔn)品：喹烯酮標(biāo)準(zhǔn)品（

81810-66-4），純度

≥

98.0喹烯酮標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備如下：a)

0.5

50

mg

mL

二甲基甲酰胺溶解后，加入甲醇定容至

100

mL

棕色容量瓶，配制成濃度為

mg/mL

的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于4℃冰箱中保存，有效期二個(gè)月。DB34/T

1363—2022b)

標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：分別吸取儲(chǔ)備液（5.9-a））1

、2

mL、5

mL、10

mL、20

于

mL

棕色容量瓶，用流動(dòng)相溶液（5.7）定容，標(biāo)準(zhǔn)工作溶液系列濃度分別為

5

μg/mL、10

μg/mL、25

μg/mL、50

μg/mL、100

μg/mL。6 儀器和設(shè)備高效液相色譜儀：配紫外檢測(cè)器。分析天平：感量

0.1

g、

mg、0.01

mg。離心機(jī)：≥

8000

r/min。超聲波儀。分析篩：孔徑

0.42

mm。粉碎機(jī)。微孔濾膜：孔徑

0.45

μm

有機(jī)濾膜。7 試樣的制備按GB/T

20195的規(guī)定制備，磨碎，全部通過分析篩（6.5），混勻，裝入磨口瓶中備用。8 分析步驟試樣的提取稱取試樣適量（配合飼料

5.0

g、濃縮飼料

g、預(yù)混合飼料

1.0

g），精確至

g，置于100

具塞錐形瓶中，準(zhǔn)確加入流動(dòng)相

50

mL，超聲提取

30

，移取

10

mL

至離心管，以

r/min

離心

10

min，取離心上清液過

0.45

μm

有機(jī)濾膜，濾液供高效液相色譜儀測(cè)定，同時(shí)進(jìn)行平行試驗(yàn)。參考色譜條件色譜柱：色譜柱：C18柱（

250

mm×

mm，5

μm

）或相當(dāng)者；檢測(cè)波長(zhǎng)：260

nm；流動(dòng)相：乙腈-甲醇-（

mol/L）磷酸溶液，按體積比

25：20：55（v/v）；流速：1.0

mL/min；柱溫：25進(jìn)樣體積：10

μL。測(cè)定以保留時(shí)間定性，峰面積定量。喹烯酮標(biāo)準(zhǔn)工作溶液色譜圖參見附錄A中圖。結(jié)果的計(jì)算與表述8.4.1 計(jì)算公式結(jié)果按式（1）計(jì)算：式中：??

=

??×??×1000

DB34/T

1363—2022

(1)式中：X

——

試樣中喹烯酮含量，單位為毫克每千克（）；C

——

試液色譜峰對(duì)應(yīng)的喹烯酮濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；m

——

試樣質(zhì)量，單位為克（g）；f

——

稀釋倍數(shù)。8.4.2 結(jié)果表示測(cè)定結(jié)果用兩次平行測(cè)定的算術(shù)平均值表示，測(cè)定結(jié)果保留三位有效數(shù)字。9 精密度在重復(fù)性條件下獲