實驗一-細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察課件

實驗一細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察1病原生物學(xué)教研室涂增醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗室規(guī)則2每次進(jìn)入實驗室必須穿白大褂，拒絕穿拖鞋者入內(nèi)。不準(zhǔn)攜帶食品、飲料和餐具入室，拒絕實驗室內(nèi)吃喝。上課前請不要動桌面上的實驗器材，老師介紹完后才能開始實驗。實驗完成后統(tǒng)一下課。實驗過程中發(fā)生意外時，應(yīng)立即報告老師，不要私自處理。實驗完成后要求洗手離開。服從班干部安排，做好實驗室清潔，驗收合格后簽字離開。每次實驗完成后書寫實驗報告。實驗?zāi)康模毫私飧锾m染色的原理.掌握并熟練操作細(xì)菌涂片的革蘭染色.熟悉細(xì)菌的特殊染色法并觀察細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)——莢膜, 鞭毛, 芽胞實驗內(nèi)容：制備細(xì)菌涂片，進(jìn)行革蘭染色并觀察細(xì)菌的大小、形態(tài)、排列與染色性.觀察細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)（示教鏡）——莢膜, 鞭毛, 芽胞31、細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察方法4常用染色方法：單染色法鑒別染色法革蘭染色法（Gram

stain):最常用，1884年丹麥細(xì)菌學(xué)家革蘭發(fā)明。其原理——“細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)學(xué)說”+“等電點學(xué)說”。特殊染色法：革蘭氏陰性菌（G-）的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)革蘭氏陽性菌（G+）的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)52、細(xì)菌涂片的制作:“有菌觀念，無菌操作”3、用接種環(huán)刮取細(xì)菌在生理鹽水中涂開，1-大腸桿菌，2-金黃色葡萄球菌（也可混合涂片）6步驟：涂片——干燥——固定1、講臺上取一張清潔載玻片2、用接種環(huán)取1-2環(huán)生理鹽水在載玻片上，取2個位置點水點菌涂成薄膜122、細(xì)菌涂片的制作:“有菌觀念，無菌操作”步驟：涂片——干燥——固定在空氣中自然干燥或在火焰上方烘干（菌膜面向上，至少

20cm)72、細(xì)菌涂片的制作:“有菌觀念，無菌操作”步驟：涂片——干燥——固定火焰上方，來回3次進(jìn)行熱固定83、革蘭染色（

Gram

stain

）1初染2水洗

媒染3水洗

脫色4水洗 復(fù)染（結(jié)晶紫等量的碳酸氫鈉3-5s）（碘液3-5s）（丙酮酒精3-5s）（稀釋復(fù)紅10-15s）水洗甩干油鏡鏡檢94、油鏡鏡檢油鏡觀察（100x）低倍鏡（40x）找視野 滴1滴香柏油觀察內(nèi)容：1、染色性觀察細(xì)菌被染成紫藍(lán)色——革蘭陽性（G+)菌細(xì)菌被染成紅色

——革蘭陰性（G-)菌2、單個細(xì)菌的形態(tài)：球菌（C），桿菌（b）3、細(xì)菌的排列：葡萄狀排列；散在排列葡萄球菌G+大腸桿菌G-105.細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)觀察(示教鏡)Capsule（特殊染色法，X1000)細(xì)菌的莢膜（capsule）11Sporeflagellum細(xì)菌的芽胞（spore）細(xì)菌的鞭毛(flagellum)(特殊染色法,x1000)12

莢膜

芽胞13鞭