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2024屆四川省華鎣一中高高二生物第二學(xué)期期末經(jīng)典試題請(qǐng)考生注意:1.請(qǐng)用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上,請(qǐng)用0.5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫(xiě)在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫(xiě)在試題卷、草稿紙上均無(wú)效。2.答題前,認(rèn)真閱讀答題紙上的《注意事項(xiàng)》,按規(guī)定答題。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.關(guān)于人類(lèi)遺傳病的敘述正確的是()A.單基因遺傳病是由一個(gè)致病基因引起的遺傳病 B.先天性疾病都是遺傳病C.遺傳病患者的體細(xì)胞中一定含致病基因 D.基因診斷常用于診斷單基因遺傳病2.如圖是油菜種子在發(fā)育和萌發(fā)過(guò)程中,糖類(lèi)和脂肪的變化曲線。下列分析正確的是()A.干重相等的可溶性糖和脂肪,所貯存的能量大致相同B.種子發(fā)育過(guò)程中,由于可溶性糖更多地轉(zhuǎn)變?yōu)橹?,種子需要的N增加C.種子萌發(fā)過(guò)程中,脂肪酶的活性很高D.種子萌發(fā)過(guò)程中,脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)榭扇苄蕴?,說(shuō)明可溶性糖是種子生命活動(dòng)的直接能源物質(zhì)3.下列有關(guān)生物變異的敘述,正確的是()A.基因上堿基對(duì)的改變定引起遺傳信息的改變 B.基因重組不能產(chǎn)生新的基因,但肯定會(huì)產(chǎn)生新的性狀C.21三體綜合征是染色體結(jié)構(gòu)變異引起的 D.染色體倒位一般不改變基因數(shù)量對(duì)個(gè)體影響較小4.某自花傳粉的植物種群中,親代中AA基因型個(gè)體占40%,aa基因型個(gè)體占20%,則親代A的基因頻率和F1中AA的基因型頻率分別是()A.60%和50%B.48%和40%C.60%和36%D.45%和1.5%5.下列關(guān)于“克隆羊”“試管羊”“轉(zhuǎn)基因羊”的說(shuō)法,合理的是()A.它們的遺傳物質(zhì)都只來(lái)自于一個(gè)親本B.它們?cè)谛纬蛇^(guò)程中一般都有卵細(xì)胞的參與C.它們是通過(guò)相同的生殖方式獲得親本的優(yōu)良性狀D.培育過(guò)程都用到核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)6.阻斷下丘腦與垂體的聯(lián)系后,受影響最小的生理過(guò)程是()A.性激素的分泌B.甲狀腺激素的分泌C.腎上腺素的分泌D.性腺的發(fā)育7.下列的哪一種物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸方式與其他三種方式不同()A.根吸收礦質(zhì)元素B.紅細(xì)胞吸收鉀離子,排出鈉離子C.小腸對(duì)鈣的吸收D.漿細(xì)胞分泌抗體8.(10分)大腸桿菌和噬菌體的遺傳物質(zhì)分別是A.RNA、DNAB.DNA、RNAC.DNA、DNAD.RNA和DNA、DNA二、非選擇題9.(10分)基因工程中,GUS基因編碼的酶可將無(wú)色底物生成藍(lán)色產(chǎn)物,GFP基因會(huì)產(chǎn)生綠色熒光蛋白,這兩種基因都可作為標(biāo)記基因來(lái)研究發(fā)育生物學(xué)的問(wèn)題。利用雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)和Cre/loxP重組酶系統(tǒng)技術(shù)可更好地實(shí)現(xiàn)該研究。請(qǐng)據(jù)圖作答:(1)生長(zhǎng)在太平洋西北部的一種海蜇能發(fā)出綠色熒光,原因是________________________。(2)圖1為雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖。該系統(tǒng)能夠特異性識(shí)別DNA序列并切割特定位點(diǎn),行使這些功能的分子結(jié)構(gòu)分別是___________、___________。(3)圖中向?qū)NA與DNA結(jié)合的原理是___________。將刪除區(qū)切割后,轉(zhuǎn)入基因與原DNA片段可通過(guò)形成_______拼接起來(lái),形成新的DNA序列。(4)雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)可直接在靶細(xì)胞內(nèi)起作用,與傳統(tǒng)的基因工程相比,該操作無(wú)需___________(填寫(xiě)工具)。與質(zhì)粒載體導(dǎo)入外源基因比,雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)編輯的基因可以不含___________。(5)圖2為Cre/loxP重組酶系統(tǒng)作用示意圖。利用雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)可精準(zhǔn)地將loxP序列、GUS基因及GFP基因連接,接上35S啟動(dòng)子之后可在組織中檢測(cè)出藍(lán)色區(qū)而無(wú)綠色熒光區(qū),這是由于_________而無(wú)法表達(dá)。Cre基因是重組酶基因,經(jīng)38℃熱處理后可被激活表達(dá),在此前提下組織中可檢測(cè)出綠色熒光區(qū)。10.(14分)利用單克隆抗體技術(shù)可以制得抗人肝癌的單克隆抗體,但產(chǎn)生此抗體的雜交瘤細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中凋亡現(xiàn)象嚴(yán)重,通過(guò)基因工程可提高此雜交瘤細(xì)胞的抗凋亡能力。相關(guān)步驟如下圖,請(qǐng)回答問(wèn)題:(1)對(duì)人肝癌細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),為了防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染,可在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加適量______,為了及時(shí)清除代謝產(chǎn)物,需要定期___________。(2)向小鼠注入人肝癌細(xì)胞懸液,需要反復(fù)多次操作,其目的是____________。(3)將小鼠骨髓瘤細(xì)胞和淋巴細(xì)胞進(jìn)行融合時(shí)除了用滅活的病毒、電激等,還可以使用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是__________。(4)用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),需要合成引物。設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是_______________。(5)過(guò)程①和②的目的都是進(jìn)行篩選,過(guò)程①是要篩選出____________的雜交瘤細(xì)胞B,過(guò)程②是要篩選出_______的雜交瘤細(xì)胞C。(6)與普通抗癌藥物相比,用抗人肝癌單克隆抗體與相應(yīng)抗癌藥物結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”治療肝癌的主要優(yōu)點(diǎn)是__________。11.(14分)金屬硫蛋白(MT)是一類(lèi)廣泛存在的金屬結(jié)合蛋白。某研究小組計(jì)劃通過(guò)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增獲得目的基因,構(gòu)建轉(zhuǎn)基因工程菌,用于重金屬?gòu)U水的凈化處理。PCR擴(kuò)增過(guò)程示意圖圖像,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)從高表達(dá)MT蛋白的生物組織中提取mRNA,通過(guò)______________獲得cDNA用于PCR擴(kuò)增。(2)設(shè)計(jì)一對(duì)與MT基因兩端序列互補(bǔ)配對(duì)的引物(引物1和引物2),為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒,在引物中需要增加適當(dāng)?shù)南拗菩院怂醿?nèi)切酶位點(diǎn)。設(shè)計(jì)引物時(shí)需要避免引物之間形成______________,而造成引物自連。(3)圖中步驟1代表____________________,步驟2代表退火,步驟3代表延伸,這三個(gè)步驟組成一輪循環(huán)。(4)PCR擴(kuò)增時(shí),退火溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。退火溫度過(guò)高會(huì)破______________的堿基配對(duì)。退火溫度的設(shè)定與引物長(zhǎng)度、堿基組成有關(guān),長(zhǎng)度相同但______________的引物需要設(shè)定更高的退火溫度。(5)如果PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物,則可以采取的改進(jìn)措施有______________(填序號(hào):①升高退火溫度②降低退火溫度③重新設(shè)計(jì)引物)。12.下圖分別為生物體內(nèi)分子的部分結(jié)構(gòu)模式圖,請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題:(1)甲圖中的三種物質(zhì)分別屬于動(dòng)物、植物細(xì)胞中的儲(chǔ)能物質(zhì)的是_____,組成這三種物質(zhì)的單體都是_____。(2)乙圖所示化合物的基本組成單位是___________,即圖中字母_______________所示的結(jié)構(gòu)表示,各基本單位之間是通過(guò)_____________(填“①”“②”或“③”)連接起來(lái)的。(3)丙圖是由________個(gè)氨基酸經(jīng)__________過(guò)程形成的,氨基酸的結(jié)構(gòu)通式為_(kāi)_________。檢驗(yàn)丙和戊可以用______________試劑。(4)丁和戊中的Mg2+、Fe2+體現(xiàn)了無(wú)機(jī)鹽具有什么功能?_____。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解題分析】
人類(lèi)遺傳病是指由遺傳物質(zhì)該病引起的人類(lèi)疾病,主要分為單基因遺傳病、多基因遺傳病、染色體異常遺傳病?!绢}目詳解】單基因遺傳病是指由一對(duì)等位基因控制的遺傳病,A錯(cuò)誤;先天性疾病不一定是由遺傳物質(zhì)該病引起的,因此不一定是遺傳病,B錯(cuò)誤;遺傳病患者的體細(xì)胞中不一定含致病基因,如貓叫綜合癥是由于人類(lèi)5號(hào)染色體短臂缺失引起的,不含致病基因,C錯(cuò)誤;基因診斷常用于診斷單基因遺傳病,D正確?!绢}目點(diǎn)撥】解答本題的關(guān)鍵是對(duì)于遺傳病的類(lèi)型和概念的理解和識(shí)記,明確遺傳病患者的體內(nèi)不一定含有致病基因,如染色體異常遺傳病。2、C【解題分析】由于脂肪中的碳?xì)浔壤撸愿芍叵嗟鹊目扇苄蕴呛椭?,貯存的能量脂肪多于糖,A錯(cuò)誤;脂肪和可溶性糖所含有的元素都是C、H、O,所以在可溶性糖轉(zhuǎn)變?yōu)橹具^(guò)程中,不需要增加N元素,B錯(cuò)誤;種子萌發(fā)時(shí),隨著天數(shù)的增多,脂肪明顯減少,說(shuō)明脂肪酶的活性較高,C正確;生命活動(dòng)的直接能源物質(zhì)是ATP,可溶性糖是能源物質(zhì),經(jīng)氧化分解釋放能量并轉(zhuǎn)移到ATP中去,D錯(cuò)誤【考點(diǎn)定位】細(xì)胞呼吸的過(guò)程和意義【名師點(diǎn)睛】根據(jù)題意和圖示分析可知:在種子萌發(fā)過(guò)程中,需要利用種子的有機(jī)物提供能量,脂肪含量下降,還原糖的含量上升,脂肪轉(zhuǎn)變成可溶性糖.3、A【解題分析】
生物變異包括基因突變、基因重組和染色體變異;基因突變可以產(chǎn)生新的基因和基因型,而基因重組只能產(chǎn)生新的基因型;染色體變異包括染色體結(jié)構(gòu)的變異和數(shù)目的變異?!绢}目詳解】A、基因的堿基排列順序代表了遺傳信息,所以基因上堿基對(duì)的改變一定會(huì)引起遺傳信息的改變,A正確;B、基因重組不能產(chǎn)生新的基因,也不會(huì)產(chǎn)生新的性狀,只是原有性狀的重新組合,B錯(cuò)誤;C、21三體綜合征是染色體數(shù)目變異引起的,C錯(cuò)誤;D、染色體倒位一般不改變基因數(shù)量,但是染色體上的基因排列順序發(fā)生了改變,因此對(duì)個(gè)體影響較大,D錯(cuò)誤。故選A。4、A【解題分析】試題分析:親代中AA基因型個(gè)體占40%,aa基因型個(gè)體占20%,則雜合子Aa占40%,親代A的基因頻率=顯性純合子比例+1/2雜合子比例=60%,自交一代后,雜合子發(fā)生性狀分離,F(xiàn)1中AA的基因型頻率40%+40%/4=50%??键c(diǎn):本題考查基因的分離定律。5、B【解題分析】
A.三種羊的遺傳物質(zhì)都不只來(lái)自一個(gè)親本,如克隆羊也有少量遺傳物質(zhì)來(lái)自供質(zhì)的親本,試管羊是體外受精的產(chǎn)物,細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)一半來(lái)自父方,一半來(lái)自母方,A錯(cuò)誤;B.克隆羊的培育,要把體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵母細(xì)胞中;試管羊的培育需要精子和卵細(xì)胞體外受精;轉(zhuǎn)基因羊中,往往把目的基因?qū)肼鸭?xì)胞,B正確;C.克隆羊、轉(zhuǎn)基因羊的產(chǎn)生過(guò)程屬于無(wú)性生殖,試管羊的產(chǎn)生過(guò)程屬于有性生殖,C錯(cuò)誤;D.三個(gè)成就都用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù),但試管羊和轉(zhuǎn)基因羊沒(méi)有用到核移植技術(shù),D錯(cuò)誤;因此,本題答案選B。6、C【解題分析】
本題查激素分級(jí)調(diào)節(jié)的方式,結(jié)合具體的激素進(jìn)行分析?!绢}目詳解】A、性激素的分泌屬于分級(jí)調(diào)節(jié):下丘腦分泌促性激素釋放激素作用于垂體,垂體分泌促性激素作用于性腺,性腺分泌性激素,錯(cuò)誤;B、甲狀腺激素的分泌受垂體的調(diào)節(jié):例如外界條件寒冷,下丘腦會(huì)分泌促甲狀腺激素釋放激素,這種激素作用于垂體后,使垂體分泌促甲狀腺激素,促甲狀腺激素作用于甲狀腺,使甲狀腺分泌甲狀腺激素分泌增多,錯(cuò)誤;C、腎上腺素是腎上腺髓質(zhì)分泌的一種激素:當(dāng)人體經(jīng)歷某些刺激時(shí),如興奮、恐懼,就可以分泌這種激素,使心跳與呼吸加速、血流量加大、血糖量升高,從而增強(qiáng)力量、提高反應(yīng)速度。腎上腺素也可以用于拯救心臟驟停和過(guò)敏性休克的病人,正確;D、性腺的發(fā)育受影響:下丘腦分泌促性激素釋放激素作用于垂體,垂體分泌促性激素作用于性腺,錯(cuò)誤。故選C?!绢}目點(diǎn)撥】解題的關(guān)鍵是平時(shí)要注意對(duì)知識(shí)點(diǎn)的總結(jié):下丘腦分泌的促(甲狀腺、部分腎上腺分泌的激素、性腺)激素釋放激素和垂體分泌的促(甲狀腺、部分腎上腺分泌的激素、性腺)激素可影響這三種內(nèi)分泌腺激素的分泌,對(duì)于其中類(lèi)似的調(diào)節(jié)要放到一起進(jìn)行識(shí)記。7、D【解題分析】試題分析:根吸收礦質(zhì)元素以離子形式吸收,屬于主動(dòng)運(yùn)輸;紅細(xì)胞吸收鉀離子和排出鈉離子屬于主動(dòng)運(yùn)輸,需要載體和能量;小腸對(duì)鈣的吸收都是主動(dòng)運(yùn)輸過(guò)程;漿細(xì)胞分泌抗體是胞吐過(guò)程,體現(xiàn)細(xì)胞膜的流動(dòng)性,與A、B、C三個(gè)選項(xiàng)不同;所以D項(xiàng)正確??键c(diǎn):本題考查物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)南嚓P(guān)知識(shí),考查了學(xué)生對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)掌握和應(yīng)用能力,另外注意物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)挠绊懸蛩兀孩儆绊懽杂蓴U(kuò)散的因素:細(xì)胞膜內(nèi)外物質(zhì)的濃度差.②影響協(xié)助擴(kuò)散的因素:a.細(xì)胞膜內(nèi)外物質(zhì)的濃度差;b.細(xì)胞膜上載體的種類(lèi)和數(shù)量.③影響主動(dòng)運(yùn)輸?shù)囊蛩兀篴.載體(核糖體);b.能量(細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體)。8、C【解題分析】大腸桿菌是原核生物,以DNA為遺傳物質(zhì);噬菌體僅由蛋白質(zhì)外殼和DNA組成,其遺傳物質(zhì)是DNA。綜上分析,C正確,A、B、D均錯(cuò)誤。二、非選擇題9、海蜇的DNA分子上含有綠色熒光蛋白基因向?qū)NACas9蛋白堿基互補(bǔ)配對(duì)磷酸二酯鍵載體(運(yùn)載體)啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因GFP基因自身無(wú)啟動(dòng)子【解題分析】
生物的性狀受基因控制,海蜇能發(fā)出綠色熒光是由于海蜇的DNA分子上含有綠色熒光蛋白基因,基因能通過(guò)控制蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)直接控制生物性狀;圖1為雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖,由圖可知,向?qū)NA中有一段識(shí)別序列,具有識(shí)別功能,可以與特定的DNA序列發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì),Cas9蛋白則可切割所識(shí)別的特定DNA序列;導(dǎo)入的基因和原DNA片段之間需要重新形成磷酸二酯鍵才能連接在一起,形成新的DNA分子,該過(guò)程類(lèi)似于基因工程操作中的構(gòu)建基因表達(dá)載體步驟,據(jù)此作答?!绢}目詳解】(1)由于海蜇的DNA分子上含有綠色熒光蛋白基因,因此海蜇能發(fā)出綠色熒光。(2)據(jù)圖1所示,向?qū)NA可以識(shí)別特定的DNA序列,Cas9蛋白可切割所識(shí)別的特定DNA序列。(3)向?qū)NA與DNA根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則結(jié)合;轉(zhuǎn)入的基因與原DNA片段之間要形成新的磷酸二酯鍵才能連接起來(lái)。(4)雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)可直接在靶細(xì)胞內(nèi)起作用,因此無(wú)需運(yùn)載體。構(gòu)建的基因表達(dá)載體必須含啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等結(jié)構(gòu),而雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)編輯的基因可不含有這些結(jié)構(gòu)。(5)GUS基因編碼的酶可將無(wú)色底物生成藍(lán)色產(chǎn)物,GFP基因會(huì)產(chǎn)生綠色熒光蛋白,在組織中檢測(cè)出藍(lán)色區(qū)而無(wú)綠色熒光區(qū),說(shuō)明GUS基因正常表達(dá)而GFP基因不能正常表達(dá),根據(jù)“Cre基因是重組酶基因,經(jīng)38℃熱處理后可被激活表達(dá),在此前提下組織中可檢測(cè)出綠色熒光區(qū)”提示,可見(jiàn)GFP基因的正常表達(dá)需以Cre基因被激活表達(dá)為前提,即GFP基因自身無(wú)啟動(dòng)子,無(wú)法啟動(dòng)自身的表達(dá)?!绢}目點(diǎn)撥】本題以雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)和Cre/loxP重組酶系統(tǒng)技術(shù)的原理和應(yīng)用為背景,意在考查學(xué)生正確理解題圖,能夠根據(jù)題干信息和題圖信息判斷雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)和Cre/loxP重組酶系統(tǒng)技術(shù)的生物學(xué)原理的能力,本題注重考查學(xué)生的基礎(chǔ)知識(shí)、基本技能以及在具體情境下分析和解決問(wèn)題的能力。10、抗生素更換培養(yǎng)液加強(qiáng)免疫,刺激小鼠產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞聚乙二醇(PEG)要有一段已知的目的基因的核苷酸序列能產(chǎn)生抗人肝癌的單克隆抗體能產(chǎn)生能抗凋亡能力的抗人肝癌的單克隆抗體能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位,減少對(duì)正常細(xì)胞的傷害,減少用藥劑量【解題分析】
據(jù)圖可知,取人的肝癌細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,多次向小鼠注入人肝癌細(xì)胞懸液,使之產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞,再取小鼠的脾臟細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞A,經(jīng)過(guò)篩選得到雜交瘤細(xì)胞B,此細(xì)胞能產(chǎn)生抗人肝癌的單克隆抗體,但產(chǎn)生此抗體的雜交瘤細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中凋亡現(xiàn)象嚴(yán)重,再用PCR技術(shù)擴(kuò)增大量的抗凋亡基因,構(gòu)建基因表達(dá)載體導(dǎo)入到雜交瘤細(xì)胞B中,經(jīng)過(guò)篩選后獲得具抗凋亡能力的雜交瘤細(xì)胞C?!绢}目詳解】(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,可以添加適量的抗生素防止培養(yǎng)過(guò)程中的雜菌污染,為了及時(shí)清除代謝產(chǎn)物,需要定期更換培養(yǎng)液。(2)多次給小鼠注入肝癌細(xì)胞懸液的目的是:增強(qiáng)免疫,刺激小鼠產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞。(3)促使小鼠骨髓瘤細(xì)胞和淋巴細(xì)胞進(jìn)行融合,除了用滅活的病毒、電激等,還可以使用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇(PEG)。(4)利用PCR技術(shù)獲取目的基因的前提,是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成引物。(5)根據(jù)題意可知,過(guò)程①是要篩選出能產(chǎn)生抗人肝癌的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞B,過(guò)程②是要篩選出能產(chǎn)生抗凋亡能力的抗人肝癌的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞C。(6)抗人肝癌單克隆抗體與相應(yīng)抗癌藥物結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”治療肝癌與普通抗癌藥物相比的主要優(yōu)點(diǎn)是:能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位,減少對(duì)正常細(xì)胞的傷害,減少用藥劑量?!绢}目點(diǎn)撥】解答本題的關(guān)鍵是看清題干中信息“利用單克隆抗體技術(shù)可以制得抗人肝癌的單克隆抗體,但產(chǎn)生此抗體的雜交瘤細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中凋亡現(xiàn)象嚴(yán)重,通過(guò)基因工程可提高此雜交瘤細(xì)胞的抗凋亡能力”,再根據(jù)題意作答。11、逆轉(zhuǎn)錄堿基互補(bǔ)配對(duì)變性引物與模板GC含量高②③【解題分析】
PCR技術(shù):
1、概念:PCR全稱(chēng)為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。
2、原理:DNA復(fù)制。
3、前提條件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。
4、條件:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)。
5、過(guò)程:①高溫變性:DNA解旋過(guò)程;②低溫復(fù)性:引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上;③中溫延伸:合成子鏈;PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)。【題目詳解】(1)PCR擴(kuò)增目的基因,首先要有目的基因作為模板,所以從高表達(dá)MT
蛋白的生物組織中提取mRNA,通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA,從而用于PCR擴(kuò)增。(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒,首先要用限制酶切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒,所以位于目的基因兩端的引物中需要增加適當(dāng)?shù)南拗菩院怂醿?nèi)切酶位點(diǎn),設(shè)計(jì)的引物之間不能有堿基互補(bǔ)配對(duì),否則引物自連,而不能與模板相連。
(3)圖中步驟1、2、3分別代表變性、退火、延伸,這三個(gè)步驟組成一輪循環(huán)。
(4)退火表示引物與模板相連,若退火溫度過(guò)高會(huì)破壞引物與模板
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