實驗6酶的特異性課件

實驗六酶的特異性生物化學(xué)實驗之－－山東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院【實驗?zāi)康摹?/p>

學(xué)習(xí)酵母蔗糖酶（粗提液）和唾液淀粉酶的制備，了解酶的特異性及檢測方法?！緦嶒炘怼?/p>

酶是生物催化劑，酶對所作用的底物有嚴(yán)格的選擇性，即酶的特異性。淀粉和蔗糖都是非還原性糖，分別為唾液淀粉酶和蔗糖酶的專一底物。淀粉被唾液淀粉酶水解生成具有還原性的麥芽糖，蔗糖被蔗糖酶水解生成具有還原性的葡萄糖和果糖。Benedict試劑（含有Cu2+）常用于檢驗還原糖的存在，其被還原后生成磚紅色的Cu2O沉淀?！酒鞑募霸噭浚ㄒ唬┢鞑模?.恒溫水浴鍋2.試管及試管架3.離心機(jī)4.吸量管5.燒杯、量筒、漏斗等（二）試劑：1.2%蔗糖2.1%淀粉（內(nèi)含0.3%的NaCl）3.唾液淀粉酶溶液4.蔗糖酶溶液5.Benedict試劑【實驗步驟】（一）淀粉酶的特異性1.唾液淀粉酶溶液的制備：先用蒸餾水漱口，然后用潔凈試管1支，取唾液（無泡沫）約2ml，蒸餾水20倍稀釋，備用。2.取試管5支，標(biāo)號，按下表所列的次序操作：試劑試管編號123451%淀粉溶液（ml）1.0—1.0——2%蔗糖溶液（ml）—1.0—1.0—唾液淀粉酶（ml）——1.01.01.0蒸餾水（ml）1.01.0——1.0

3.

搖勻，置37℃恒溫水浴保溫10min，然后每管加入Benedict試劑2ml，再放沸水浴5min。觀察各管顏色變化，并解釋實驗結(jié)果。3.搖勻，

置37℃恒溫水浴保溫10min，然后每管加入Benedict試劑2ml，再放沸水浴5min。觀察各管顏色變化，并解釋實驗結(jié)果。【注意事項】

唾液的稀釋倍數(shù)因人而異，有時差別很大，稀釋倍數(shù)可以是50～300倍。【思考題】1、若將淀粉酶和蔗糖酶煮沸1min，實驗結(jié)果會發(fā)生什么樣的變化？2、酶作用的專一性有哪幾種？量程的調(diào)節(jié)

1.按照從大體積調(diào)為小體積的方法調(diào)節(jié)。2.用拇指和食指旋轉(zhuǎn)取液器上的旋鈕，使數(shù)字窗口出現(xiàn)所需容量體積的數(shù)字。注意：千萬不要將旋鈕旋出最大量程，否則會卡住內(nèi)部機(jī)械裝置或者彈簧彈出而損壞了移液槍。

微量移液器的使用方法槍頭（吸液嘴）的裝配

在將槍頭（pipettetips）套上移液槍時，正確的方法是將移液槍（器）垂直插入槍頭中，稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動即可使其緊密結(jié)合。

移液的方法

1.吸取液體時，用大拇指將按鈕按下至第一停點(diǎn)，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下2－3毫米。

2.然后慢慢松開按鈕回原點(diǎn)。3.接著將按鈕按至第一停點(diǎn)排出液體，稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點(diǎn)吹出殘余的液體。最后松開按鈕。

移液器的正確放置

使用完畢，可以將其豎直掛在移液槍架上，但要小心別掉下來。當(dāng)移液器槍頭里有液體時，切勿將移液器水平放置或