高考生物一輪總復(fù)習(xí)課件：專題22微生物的利用

專題二十二微生物的利用考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1.微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)液體固體碳源生長(zhǎng)因子計(jì)算滅菌不能微生物2.大腸桿菌的純化培養(yǎng)(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基(2)純化大腸桿菌的方法稱量滅菌倒平板接種環(huán)連續(xù)劃線梯度稀釋不同稀釋度比較消毒與滅菌實(shí)驗(yàn)室常用的消毒和滅菌的方法項(xiàng)目概念常用方法應(yīng)用范圍消毒使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法：在100℃下煮沸5～6min一般物品巴氏消毒法：在70～75℃下煮30min或在80℃下煮15min一些不耐高溫的液體，如牛奶化學(xué)藥劑消毒法如用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源等紫外線消毒法：紫外燈照射30min接種室、操作臺(tái)滅菌使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物(包括芽孢和孢子)灼燒滅菌：酒精燈火焰接種工具的滅菌和試管口的滅菌干熱滅菌：在160～170℃下滅菌1～2h玻璃器皿、金屬工具的滅菌高壓蒸汽滅菌：在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，滅菌15～30min培養(yǎng)基及容器的滅菌微生物的純化培養(yǎng)——平板劃線法與稀釋涂布平板法方法平板劃線法稀釋涂布平板法注意事項(xiàng)(1)接種環(huán)的灼燒①第一次劃線前：殺死接種環(huán)上的微生物，避免污染培養(yǎng)物②之后每次劃線前：殺死殘留菌種，保證每次劃線菌種來(lái)自上次劃線末端③劃線結(jié)束后：殺死殘留菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者(2)灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后再進(jìn)行取種，以免溫度太高殺死菌種(3)劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連(4)劃線用力要大小適當(dāng)，防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破(1)稀釋操作時(shí)：每支試管及其中的9mL水、移液管等均需滅菌；操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1cm～2cm處(2)涂布平板時(shí)：①涂布器用體積分?jǐn)?shù)為70%酒精消毒，取出時(shí)，讓多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃②不要將過(guò)熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精目的在培養(yǎng)基上形成由單個(gè)菌種繁殖而來(lái)的子細(xì)胞群體——菌落培養(yǎng)平板冷凝后倒置培養(yǎng)，使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，防止皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基造成污染比較選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基(1)兩種培養(yǎng)基比較種類制備方法原理用途舉例選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)物質(zhì)依據(jù)某些微生物對(duì)某些物質(zhì)的特殊需求或抗性而設(shè)計(jì)從眾多微生物中分離所需的微生物加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品產(chǎn)生特定的顏色或其他變化鑒別不同種類的微生物用伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌(2)選擇培養(yǎng)基四種常見(jiàn)制備方法或?qū)嵗键c(diǎn)二微生物的篩選與計(jì)數(shù)1.土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)分離與計(jì)數(shù)菌種篩選使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基計(jì)數(shù)方法稀釋涂布平板法；顯微鏡直接計(jì)數(shù)法實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣→樣品稀釋→培養(yǎng)與觀察→計(jì)數(shù)菌種鑒定以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑2.分解纖維素的微生物的分離篩選分解尿素的細(xì)菌與分解纖維素的微生物的比較項(xiàng)目土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離分解纖維素的微生物的分離選擇培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基富含纖維素的選擇培養(yǎng)基鑒定方法在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，pH升高，說(shuō)明細(xì)菌能分解尿素剛果紅染色法，即剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，培養(yǎng)基出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈特有代謝過(guò)程分離纖維素分解菌所用的兩種培養(yǎng)基比較分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)中先用選擇培養(yǎng)基，再用鑒別培養(yǎng)基。(1)選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長(zhǎng)，而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長(zhǎng)；因培養(yǎng)基中無(wú)凝固劑，為液體培養(yǎng)基，利用液體培養(yǎng)基能使?fàn)I養(yǎng)成分被充分消耗，以增加纖維素分解菌的濃度。(2)鑒別培養(yǎng)基含瓊脂，為固體培養(yǎng)基，細(xì)菌可在培養(yǎng)基上形成肉眼可見(jiàn)的菌落。剛果紅染色法應(yīng)用的就是鑒別培養(yǎng)基。1.誤認(rèn)為所有微生物培養(yǎng)基中均需加入“生長(zhǎng)因子”點(diǎn)撥碳源、氮源、水分、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子是微生物生長(zhǎng)必需的五大營(yíng)養(yǎng)成分，但大多數(shù)培養(yǎng)基中都含碳源、氮源水分、無(wú)機(jī)鹽四類物質(zhì)，可能不需額外添加“生長(zhǎng)因子(如維生素)”，這是因?yàn)樵S多微生物可自行合成這些生長(zhǎng)因子，而對(duì)那些合成能力有限或不能合成生長(zhǎng)因子的微生物(如乳酸菌)，則需在培養(yǎng)基中添加諸如維生素等生長(zhǎng)因子2.混淆兩種“對(duì)照組”與“重復(fù)組”點(diǎn)撥

(1)兩種對(duì)照組作用比較①判斷培養(yǎng)基中“是否有雜菌污染”，需將未接種的培養(yǎng)基同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)。②判斷選擇培養(yǎng)基“是否具有篩選作用”，需設(shè)立牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行接種后培養(yǎng)，觀察兩種培養(yǎng)基上菌落數(shù)目，進(jìn)行對(duì)比得出結(jié)論。(2)重復(fù)組的設(shè)置及作用為排除偶然因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，在每一稀釋度下宜設(shè)置3個(gè)平板作重復(fù)組，選擇菌落數(shù)均在30～300且數(shù)目相差不大的三個(gè)平板，用“平均值”代入計(jì)數(shù)公式予以計(jì)算菌落數(shù)。3.不明確每次劃線操作中“灼燒接種環(huán)”的目的或誤認(rèn)為劃線結(jié)束后“不必灼燒接種環(huán)”點(diǎn)撥平板劃線法純化大腸桿菌時(shí)不同階段灼燒接種環(huán)的目的不同①第一次操作：殺死接種環(huán)上原有的微生物。②每次劃線之前：殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端。③劃線結(jié)束后：殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。4.不知道菌落