大鰭鳠血液錐蟲病的組織學(xué)觀察課件_第1頁
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大鰭鳠血液錐蟲病的組織學(xué)觀察答辯人:鐘正蘋指導(dǎo)教師:張耀光教授金麗博士研究背景錐蟲(Trypanosome)是血鞭毛原生動物,隸屬于原生動物亞界,肉鞭門,動基體目,錐蟲亞目,最早在魚類血液中發(fā)現(xiàn),隨后在幾乎所有的脊椎動物血液中都有發(fā)現(xiàn)。錐蟲病已被國際衛(wèi)生組織列為重要傳染病之一。大鰭鳠(Mystusmacropterus)屬鲇形目,鲿科,鳠屬,廣泛分布于長江干流及其支流。因其生長快、食性廣、肉質(zhì)細嫩、無肌間棘,是產(chǎn)區(qū)上等水產(chǎn)品。目前關(guān)于其血液錐蟲病的組織學(xué)觀察尚無報道。實驗材料材料:實驗用魚大鰭鳠均來自嘉陵江,帶回實驗室后經(jīng)血涂片鑒定其是否有錐蟲,然后分開暫養(yǎng)。實驗方法

外周血血涂片制備:尾靜脈抽血涂片→甲醇固定→吉姆薩染色→顯微鏡下白細胞分類計數(shù)→Nikon80i照相系統(tǒng)觀察拍照→IPP測量軟件測定各類細胞大小。血細胞計數(shù):用吸管吸取抗凝血,以Dacie’s稀釋液將血液稀釋300倍,用Neubauer計數(shù)板在顯微鏡下計數(shù)。Hb的測定:高鐵氰化鉀法——血紅蛋白儀(XF-1B)測定。組織(采用常規(guī)石蠟切片技術(shù)對各種組織器官進行病理學(xué)觀察)(健康魚和病魚各5尾)迅速解剖,分別取鰓、肝臟、腎臟、頭腎、脾臟,Bouin’s液固定,酒精系列脫水,常規(guī)石蠟包埋,切片,HE染色,中性樹膠封片,Nikon80i照相系統(tǒng)觀察拍照。錐蟲體顯微結(jié)構(gòu)

Ⅰ型鳠錐體蟲(Ⅰ)Ⅲ型鳠錐體蟲(Ⅲ)

Ⅱ型鳠錐體蟲(Ⅱ)(24.27±1.89μm)×(0.71±0.37μm)(51.08±6.08μm)×(2.28±0.29μm)(46.28±5.16μm)×(3.54±0.60μm)實驗結(jié)果及討論外周血常數(shù)值測定參數(shù)parameterRBC(個/L)WBC(個/L)Hb(g/L)正常normal(1.45±0.25)×1012(5.61±1.40)×101067.75±5.04錐蟲病Trypanosomiasis(1.17±0.23)×1012(↓)(7.51±2.27)×1010(↑)60.03±8.78(↓)血液錐蟲病各型血細胞大小的變化ChangesinthesizeofdifferentblodcellsofTrypanosomiasis細胞類型Celltype正常個體(長徑×短徑)uninfectedindividual(L×S)患病個體(長徑×短徑)Infectedindividual(L×S)紅細胞E胞體C(11.49±1.21)×(10.05±0.67)(10.1±0.98)×(7.55±0.77)(↓)(↓)

胞核N(4.45±0.51)×(3.09±0.41)(3.58±0.64)×(2.84±0.35)(↓)(↓)

淋巴細胞L(10.47±3.58)×(7.98±2.65)(7.60±1.27)×(6.40±1.17)(↓)(↓)

嗜中性粒細胞NG(12.46±2.28)×(10.52±1.60)(8.85±1.50)×(7.54±1.25)(↓)(↓)

單核細胞M(13.81±1.83)×(11.24±1.74)(12.37±2.04)×(10.77±2.35)(↓)(↓)

血栓細胞T(8.44±2.21)×(4.99±1.14)(6.52±1.16)×(4.38±0.54)(↓)(↓)

鰓的顯微變化

正常鰓絲病變鰓絲病變彎曲出血粘連組織增生肝臟的顯微變化

正常肝臟肝臟水樣變性病變腎臟的顯微變化病變正常腎小體腎小球充血頭腎的顯微變化

病變正常頭腎病變頭腎脾臟的顯微變化

病變正常脾臟

病變脾臟致謝:

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