血凝項(xiàng)目介紹課件

目的和要求血凝系統(tǒng)工程應(yīng)用臨床根底知識(shí)的回憶熟悉不同工程的測(cè)試方法學(xué)、原理及臨床應(yīng)用了解檢測(cè)系統(tǒng)的大體構(gòu)成與意義血管中流動(dòng)的血液為什么不凝固破損的血管為什么能止血生理狀態(tài)下凝血血栓抗凝出血凝血系統(tǒng)血液凝固簡(jiǎn)稱凝血，凝血系統(tǒng)包括凝血和抗凝兩個(gè)方面，兩者間的動(dòng)態(tài)平衡是正常機(jī)體維持體內(nèi)血液液體流動(dòng)狀態(tài)和防止血液?jiǎn)适У年P(guān)鍵。凝血是由系列凝血因子〔的13個(gè)〕參與復(fù)雜的生理過(guò)程。三個(gè)階段：第一階段：凝血酶原激活物(凝血活酶)形成第二階段：凝血酶形成期第三階段：纖維蛋白形成期兩個(gè)途徑：內(nèi)源性、外源性

凝血過(guò)程血液凝血因子的特性血液凝固機(jī)制止血：由出血開(kāi)始到出血停止的整個(gè)過(guò)程凝血：血漿形成纖維蛋白凝塊的過(guò)程“瀑布〞學(xué)說(shuō)：凝血是一系列凝血因子依次相繼被激活的過(guò)程，分為三個(gè)途徑：內(nèi)源途徑：從因子X(jué)II激活到因子X(jué)激活外源途徑：從因子III激活到因子X(jué)激活共同途徑：從因子X(jué)激活到纖維蛋白的形成內(nèi)源性凝血途徑〔intrinsicpathway〕是指由因子Ⅻ被激活到因子Ⅸa-Ⅷa-Ca2+-PF3復(fù)合物形成的過(guò)程。外源性凝血途徑(extrinsicpathway)是指從因子Ⅲ釋放到因子Ⅲ-Ⅶa-Ca2+復(fù)合物形成的過(guò)程。是體內(nèi)凝血的主要途徑，也是發(fā)生止血血栓病理性改變的主要原因之一。

共同凝血途徑(commonpathway)

是指從FⅩ的激活到纖維蛋白形成的過(guò)程，它是內(nèi)、外源性凝血途徑后的共同凝血階段。主要包括凝血酶生成和纖維蛋白形成兩個(gè)階段。

參與因子篩選試驗(yàn)外源Ⅲ,Ⅶ,Ca2+PT內(nèi)源Ⅷ,Ⅸ,Ⅺ,Ⅻ,Ca2+APTT共同Ⅴ,Ⅹ,Ⅱ,Ⅰ,Ca2+TTⅩⅢ抗凝及纖溶系統(tǒng)正?？鼓袄w溶系統(tǒng)〔一〕細(xì)胞抗凝單核-巨噬細(xì)胞吞噬清除凝血過(guò)程有關(guān)物質(zhì)和產(chǎn)物體液抗凝肝素這種抗凝作用占體內(nèi)總抗凝的50%～60%血液中存在多種抗凝物質(zhì)及抗凝系統(tǒng)1．抗凝血酶III〔antithrombinIII，AT-III〕AT-III滅活I(lǐng)Ia、IXa、Xa、Ⅺa、XIIa、激肽釋放酶最重要的生理性抗凝系統(tǒng)纖維蛋白溶解系統(tǒng)

〔fibrinolysis，纖溶系統(tǒng)〕纖維蛋白或纖維蛋白原被纖維蛋白溶解酶水解的過(guò)程主要作用：分解纖維蛋白〔原〕，去除血管內(nèi)由于纖維蛋白沉積引起的阻塞，保持血流通暢纖維蛋白降解機(jī)制

〔一〕纖溶酶原激活

1.內(nèi)激活途徑

2.外激活途徑

3.外源激活途徑

〔二〕纖維蛋白〔原〕降解

1.纖維蛋白原的降解

2.可溶性纖維蛋白的降解

3.交聯(lián)性纖維蛋白的降解血凝檢測(cè)原理及工程應(yīng)用*血凝的檢測(cè)方法*凝固法：光學(xué)法A透射光度B散射光度法粘度法〔磁珠法〕*發(fā)色底物法*免疫學(xué)檢測(cè)法磁珠法檢測(cè)原理交替變化的磁場(chǎng)使磁珠產(chǎn)生運(yùn)動(dòng)。另有兩個(gè)垂直方向的線圈，利用電磁感應(yīng)的原理，檢測(cè)磁珠的運(yùn)動(dòng)。血漿如果不發(fā)生凝固，磁珠的運(yùn)動(dòng)振幅恒定。血漿發(fā)生凝固反響時(shí)，粘度增加，磁珠運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度衰減磁珠運(yùn)動(dòng)衰減到一定程度〔振幅變化50%〕，定為凝固終點(diǎn)。通過(guò)檢測(cè)磁珠運(yùn)動(dòng)的相對(duì)變化，計(jì)算出凝固時(shí)間。二、粘度法〔磁珠法〕原理：纖維蛋白原纖維蛋白粘度增大磁珠振幅衰減傳感器記錄下磁珠振幅衰減過(guò)程的時(shí)間〔凝血時(shí)間〕優(yōu)點(diǎn)：不受黃疸、溶血、乳糜脂等濁度標(biāo)本影響磁珠法檢測(cè)原理磁珠法特點(diǎn)1、完全消除黃疸、溶血、脂肪和混濁等干擾。2、結(jié)果精確，F(xiàn)ib可采用弱磁場(chǎng)，線性到達(dá)0.1-18g/L。3、感測(cè)磁珠的相對(duì)運(yùn)動(dòng)，振幅變化的50%計(jì)為凝固終點(diǎn)，不受原血漿粘度的影響。4、采用電磁場(chǎng)，不受磁場(chǎng)衰減因素的影響。光學(xué)法檢測(cè)原理通過(guò)血液凝固導(dǎo)致吸光強(qiáng)度變化來(lái)判斷凝固終點(diǎn)的方法，又分為散射比濁法和透射比濁法。散射比濁法根據(jù)待檢樣品在凝固過(guò)程中散射光的變化來(lái)測(cè)定凝固終點(diǎn)的方法。透射比濁法根據(jù)待檢樣品在凝固過(guò)程中吸光度的變化來(lái)測(cè)定凝固終點(diǎn)的方法。37℃37℃散亂光光源光源透過(guò)光透射光強(qiáng)度減少(光學(xué)法)●透射光●散射光凝固反響的進(jìn)行凝固反響的進(jìn)行凝固反響的進(jìn)行凝固反響的進(jìn)行検出部検出部凝固學(xué)方法纖維蛋白原纖維蛋白濁度增大透光度降低傳感器優(yōu)點(diǎn)：耗材相對(duì)減少〔磁珠〕缺點(diǎn)：受黃疸、溶血、乳糜脂等濁度標(biāo)本影響一、光學(xué)法原理：記錄下濁度變化過(guò)程的時(shí)間〔凝血時(shí)間〕雙磁路磁珠法與光學(xué)法原理主要區(qū)別前者是檢測(cè)血漿凝固過(guò)程中磁電信號(hào)變化后者是檢測(cè)該過(guò)程中光信號(hào)的變化免疫比濁法〔透射比濁〕通過(guò)血漿中的抗原與乳膠試劑中特異性的抗體發(fā)生的凝集反響，導(dǎo)致測(cè)試杯內(nèi)濁度發(fā)生改變，最終導(dǎo)致吸光度的改變，再通過(guò)700nm波長(zhǎng)的測(cè)量，然后將吸光度的值轉(zhuǎn)化為含量值。借助抗原抗體反響系統(tǒng)，檢測(cè)反響終點(diǎn)吸光度變化值；只表示含量，不反映所檢物活性。發(fā)色底物法產(chǎn)色底物能夠裂解出產(chǎn)色基團(tuán)，通過(guò)顯色反響，檢測(cè)吸光度變化，并通吸光度值轉(zhuǎn)化為百分比活性，在這一過(guò)程中顯色的深淺與AT-III活性成負(fù)相關(guān)。待測(cè)物+顯色劑有色溶液以溶液呈色的深淺判斷其濃度發(fā)色底物法根本原理各檢測(cè)工程的檢測(cè)方法凝固法PT,APTT,TT,FIB(PT-Based&FIB-Clauss),FactorsII,V,VII,X,VIII,IX,XI,XII,ProteinC,ProteinS,APC-R,LAC,PCX,HPX發(fā)色底物法Anti-thrombin,Heparin(普通&低分子),PLG,PlasminInhibitor,ProteinC免疫比濁法D-Dimer,FDP,vWFAg,vWFAct,ProteinS,HS-CRPSF-8100檢測(cè)原理凝固法〔磁珠法檢測(cè)〕發(fā)色底物法〔透射光比色檢測(cè)〕波長(zhǎng)：405nm免疫比濁法：〔透射光比濁檢測(cè)〕波長(zhǎng)：700nm〔540nm〕凝血檢測(cè)檢測(cè)方法測(cè)試原理臨床應(yīng)用臨床意義凝血工程檢查測(cè)定本卷須知1．所用試管必須潔凈、枯燥、無(wú)劃痕。2．應(yīng)使用對(duì)凝血因子無(wú)激活作用的塑料制品或硅化的玻璃器皿采血。3．采血要順利，抗凝要充分，采血后應(yīng)仔細(xì)檢查標(biāo)本有無(wú)溶血、黃疽和凝血塊，任何微小的凝塊都會(huì)影響測(cè)定結(jié)果，必須重新采血。4．采血后宜在2h內(nèi)完成測(cè)定，4℃冰箱內(nèi)保存不應(yīng)超過(guò)4h。5。孵育溫度要控制在(37．0±0．5)℃，溫度過(guò)高或過(guò)低都可影響測(cè)定結(jié)果。6.血液離心速度要到達(dá)3000r／min，時(shí)間為10min，盡可能除去血小板，離心后血漿血小板計(jì)數(shù)應(yīng)<20X109／L。凝血常規(guī)四項(xiàng)1、凝血酶原時(shí)間〔plasmaprothrombintime,PT)通常稱為凝血酶原時(shí)間〔PT〕2、凝血酶凝固時(shí)間〔thrombinclotting,TCT)又稱凝血酶時(shí)間〔thrombintime,TT)3活化局部凝血活酶〔activatedpartialthromboplastintime,APTT)4纖維蛋白原定量〔FIB凝血四項(xiàng)的檢測(cè)血漿凝血酶原時(shí)間

〔Prothrombintime,PT〕

反映外源性凝血篩查口服抗凝劑監(jiān)測(cè)〔華法令〕

PT臨床意義意義：PT是外源凝血系統(tǒng)各凝血因子總的凝血狀況的篩選試驗(yàn)，是監(jiān)測(cè)口服抗凝劑的首選指標(biāo)。正常參考值為11~14s，當(dāng)測(cè)定值超過(guò)正常對(duì)照值3s以上為異常。據(jù)報(bào)道，在口服抗凝劑的過(guò)程中，維持PT在正常對(duì)照的1-2倍最為適宜。PT延長(zhǎng)：〔1〕先天性因子VII、V、X、II缺乏和低〔無(wú)〕纖維蛋白原血癥?！?〕獲得性見(jiàn)于肝臟疾病、DIC、原發(fā)性纖溶癥、VitK缺乏癥。〔3〕血循環(huán)中有抗凝物質(zhì)如肝素、FDP、狼瘡抗凝物質(zhì)以及抗因子II、V、VII、X的抗體存在、口服抗凝藥。PT縮短：〔1〕先天性因子V增多癥〔2〕長(zhǎng)期口服避孕藥、高凝狀態(tài)、血栓性疾病等。血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定〔PT〕【實(shí)驗(yàn)原理】在受檢血漿中參加足量的組織凝血活酶和鈣離子,使得凝血活酶轉(zhuǎn)變?yōu)槟福瑴y(cè)定血漿凝固所需的時(shí)間即為血漿凝血酶原時(shí)間(PT)。凝塊所形成的時(shí)間與血漿中的外源性的凝血因子含量呈負(fù)相關(guān)性。本試驗(yàn)是外源性凝血系統(tǒng)常用的篩檢試驗(yàn)。血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定

(PT)IIIIVPLIIICa

,PL2+Ca

,PL2+XIIVIIXIIIIIXVIIIVIIVIVIIIIIXIXII

全血中血漿中PT試劑纖維蛋白Fibrin外原系統(tǒng)測(cè)量時(shí)間缺失組織因子Ca2+靜脈全血缺失枸櫞酸鈉正常范圍11-14sec37℃XVIXIIXIIIXVIIIXVIIIVIVIIIIII磷脂XIXIII+缺失離心螯合Ca2+實(shí)驗(yàn)流程：

50ul血漿樣本育溫位育溫180s--測(cè)試位+100ulPT試劑啟動(dòng)測(cè)試-

更換試劑注意修改ISI值

PT結(jié)果的報(bào)告方式及參考范圍①以直接測(cè)定的時(shí)間(PT)報(bào)告；s值②以PT比值(PTR)報(bào)告，ICSH規(guī)定，不再用稀釋曲線或百分比(活動(dòng)度)報(bào)告PTR＝待測(cè)血漿PT／健康人混合凍干血漿PT；③以國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值(INR)報(bào)告，用于指導(dǎo)口服抗凝劑用量的檢測(cè)〔華法令類〕參考范圍：11-14s>3s以上有意義

INR=ISIISI=InternationalSensitivityIndex患者PTsec患者PTsec均值(MNPT)()國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值〔INR〕國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值〔INR〕

ISI=1.0試劑 ISI=2.0試劑

PT正常平均12sec

12sec

PT病人sec24sec 16.9sec

PT病人INR

(24/12)=2.0 (16.9/12)=2.0

當(dāng)系統(tǒng)誤差是

(23/12)=1.92 (15.9/12)=1.761秒時(shí)的INR

(25/12)=

2.08

(17.9/12)=2.22INR誤差范圍1.92~2.08

1.76~2.22

Ex.同一口服劑病人標(biāo)本用兩種試劑檢測(cè)關(guān)于用INR報(bào)告PT檢測(cè)結(jié)果

—INR的優(yōu)勢(shì)：1.INR可以直接反映最適宜的抗凝劑使用劑量(1.5~3.0),增加病人的安性。2.使用INR報(bào)告PT，可糾正由不同類儀器、不同試劑所產(chǎn)生的結(jié)果差異和變化(INR=PTRISI)實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室間結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)化和可比性

國(guó)際敏感度指數(shù)(ISI)

(ISI為氯化鈣凝血活酶試劑國(guó)際敏感指數(shù))

是表示試劑中組織凝血活酶相對(duì)活性的指數(shù)。為使不同敏感性的組織凝血活酶在檢測(cè)中能得到同樣的結(jié)果所制定的共同敏感性指標(biāo)規(guī)定試劑生產(chǎn)廠商的產(chǎn)品必須標(biāo)有ISI

ISI愈接近1.0，試劑愈敏感。敏感的試劑可得到較好的準(zhǔn)確度和精確度。建議選用接近1.0的試劑。ISI越大，INR換算的誤差也越大PT結(jié)果的臨床應(yīng)用

:延長(zhǎng)秒數(shù):活性%:PT比:INR:秒數(shù)和PT比:秒數(shù)和PT比活化局部凝血活酶〔activatedpartialthromboplastintime,APTT)反映內(nèi)源性凝血篩查APTT監(jiān)測(cè)普通肝素首選指標(biāo)。APTT臨床意義意義：參考值：27--45sAPTT是反映內(nèi)源性凝血系統(tǒng)各凝血因子總的凝血狀況較敏感和常用篩選試驗(yàn)。較正常對(duì)照值延長(zhǎng)10s以上為異常。臨床應(yīng)用：活化局部凝血活酶時(shí)間〔APTT〕是檢查內(nèi)源性凝血因子的一種過(guò)篩試驗(yàn)，APTT是監(jiān)測(cè)普通肝素首選指標(biāo)。APTT延長(zhǎng)：〔1〕先天性因子X(jué)II、XI、IX、VIII、V、X、II缺乏和低〔無(wú)〕纖維蛋白原血癥。〔2〕獲得性見(jiàn)于肝臟疾病、VitK缺乏癥、DIC、原〔繼〕發(fā)性纖溶亢進(jìn)、腸道滅菌綜合征、VitK缺乏癥?！?〕血循環(huán)中有抗凝物質(zhì)如肝素、FDP、狼瘡抗凝物質(zhì)以及抗因子VIII、IX的抗體存在、應(yīng)用肝素、口服抗凝藥。APTT縮短：見(jiàn)于高凝狀態(tài)和血栓性疾病。活化局部凝血活酶時(shí)間測(cè)定(APTT)【原理】在37℃條件下，用硅藻土(激活劑)激活Ⅺ、Ⅻ因子，用腦磷脂(局部凝血活酶)代替血小板第3因子，測(cè)定乏血小板血漿參加Ca2+離子后凝固所需的時(shí)間即為APTT。該試驗(yàn)是內(nèi)源性凝血系統(tǒng)靈敏和常用的篩檢試驗(yàn)。PLCa

,PL2+Ca

,PL2+XIXXIXIIIActivatorIVIVIIIXIIIXIIXIXIXVIIIVIIVIIIXIIIXIIXIXIXVIIIVIIVIVIIIIII

血液中

血漿中缺失缺失缺失APTT試劑內(nèi)源系統(tǒng)測(cè)量時(shí)間鞣花酸（or白陶土or硅藻土）（Ca）2+正常范圍20-40secCaCl2磷脂纖維蛋白Fibrin37℃VIIVIII靜脈全血枸櫞酸三鈉+離心螯合Ca2+APTT(活化局部凝血活酶時(shí)間)APTT的臨床應(yīng)用報(bào)告方式：秒值[參考值]27-45s〔或與正常對(duì)照相差5s以內(nèi)〕>正常對(duì)照10s以上者延長(zhǎng)<正常對(duì)照5s以上者縮短試驗(yàn)流程：50ul血漿樣本+APTT試劑育溫位育溫240s----測(cè)試位加50ulCacl啟動(dòng)測(cè)試

纖維蛋白原定量〔FIB〕

血栓纖維蛋白原定量測(cè)定【原理】是Clauss法，在受檢血漿中加人一定量凝血酶，后者使血漿中的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，通過(guò)比濁原理計(jì)算FIB的含量。參考值：2-4g/LFbg(纖維蛋白原含量測(cè)定

(Clauss測(cè)定法

)

IIaIIaIIIXIIIXIIXIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIIXIIIXIIXIXIXVIIIVIIVIVII

血液中血漿中缺失全血標(biāo)本缺失缺失枸櫞酸三鈉FIB試劑纖維蛋白測(cè)量凝固時(shí)間凝血酶正常范圍2-4g/L計(jì)算的纖維蛋白原濃度37℃I離心螯合Ca2+實(shí)驗(yàn)流程：10ul血漿樣本+90ul咪唑緩沖液育溫位育溫180s----測(cè)試位參加50ulFIB試劑啟動(dòng)測(cè)試報(bào)告方式：g/L參考范圍：2-4g/LFIB檢測(cè)的臨床應(yīng)用

監(jiān)測(cè)纖維蛋白異常值

DIC的診斷和監(jiān)測(cè)纖溶治療的監(jiān)測(cè)機(jī)體感染和炎癥的診斷血栓傾向的診斷

Normalrange200-400mg/dL凝血酶時(shí)間(thrombintime，TT)反映共同途徑是否存在抗凝或纖溶亢進(jìn)TT主要用于檢測(cè)FXIII和血漿纖維蛋白原的減少或抗凝物質(zhì)的增多。

監(jiān)控：可用于粗略檢測(cè)肝素抗凝治療TT臨床意義意義：參考值：15—22s延長(zhǎng)〔超過(guò)正常對(duì)照3s以上〕見(jiàn)于肝素增多或類肝素抗凝物質(zhì)存在、纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)增多、DIC、低(無(wú))纖維蛋白原血癥等；TT延長(zhǎng)：>3秒①纖維增多或肝素、類肝素抗凝物質(zhì)存在〔SLE、肝素、腎病〕以及AT-Ⅲ顯著提高②纖維蛋白原降解物〔FDP〕的增加〔如DIC纖溶期〕③纖維蛋白原減少④纖維蛋白原機(jī)能障礙⑤纖維蛋白原分子異常⑥尿毒癥縮短：①高FIB血癥②鈣離子存在時(shí)或標(biāo)本有微小凝結(jié)塊及PH呈酸性凝血酶時(shí)間〔TT〕【原理】受檢血漿中參加“標(biāo)準(zhǔn)化〞的凝血酶溶液后，纖維蛋白原變?yōu)椴蝗苄缘睦w維蛋白，從而出現(xiàn)凝固，測(cè)定血漿凝固所需要的時(shí)間為凝血酶時(shí)間(thrombintime，TT)。TT主要用于檢測(cè)血漿纖維蛋白原的減少或抗凝物質(zhì)的增多。IIaIIaIIIXIIIXIIXIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIIXIIIXIIXIXIXVIIIVIIVIVII凝血酶（TT）測(cè)定法

血液中血漿中缺失全血標(biāo)本缺失缺失枸櫞酸三鈉TT試劑纖維蛋白測(cè)量凝固時(shí)間凝血酶測(cè)量范圍

<20s37℃I離心實(shí)驗(yàn)流程：100ul血漿樣本育溫位育溫180s---測(cè)試位參加100ulTT凝血酶啟動(dòng)測(cè)試報(bào)告方式：秒值參考范圍：<20s

TT〔凝血酶時(shí)間〕檢測(cè)的臨床應(yīng)用

肝素治療的監(jiān)測(cè)纖溶治療的監(jiān)測(cè)纖維蛋白/纖維蛋白原降解產(chǎn)物的檢測(cè)纖維蛋白原血癥的診斷影響因素患者準(zhǔn)備

年齡：

不同年齡不同參考區(qū)間，尤其是新生兒、嬰兒不同年齡與性別，血小板功能和凝血活性不一

ABO血型：O型血患者血漿vWF和因子Ⅷ活性較其他血型患者低。

季節(jié)變化：

清晨血小板最易激活，心肌梗死的發(fā)病率最高；寒冷季節(jié)，血凝活性增加，使心肌梗死和猝死的發(fā)病率增加。

。

影響因素生活習(xí)慣：吸煙可使血漿纖維蛋白原、vWF和其他凝血因子水平增加，并可使凝血酶生成及血小板激活增加；紅葡萄酒有抗氧化和抗血栓的作用，中度酒〔乙醇〕的飲用，可抑制血小板的反響性藥物：阿司匹林、非類固醇抗炎藥，激素替代療法藥物、避孕藥等。身體狀態(tài)，疾?。涸陆?jīng)期、妊娠期、貧血和紅細(xì)胞增多癥等?；颊郀顟B(tài)：患者在采血前應(yīng)有15-30分鐘的休息。劇烈活動(dòng)可激活血小板和凝血系統(tǒng)。

影響因素標(biāo)本采集抗凝劑的校正:CLSI指南H21-A3推薦血凝試驗(yàn)的抗凝劑為枸櫞酸鈉，濃度為3.13%(0.105mol/L)或3.2%(0.109mol/L)。血：抗凝劑=9：1。當(dāng)患者Hct大于55%或低于20%時(shí)，應(yīng)按下式校正：抗凝劑量〔ml〕=0.00185×血量(ml)×〔100-患者紅細(xì)胞比容〕。采血部位：嚴(yán)禁在輸液，特別是輸入肝素處或附近采集凝血檢測(cè)標(biāo)本。

影響因素標(biāo)本處理PPP〔PLT＜1×109/L〕制備,離心3000r/min×10minRPP對(duì)凝血檢測(cè)的影響：〔1〕血小板含有大量的磷脂，可以中和血漿中的狼瘡抗凝物；〔2〕血小板中含有PF4，能夠中和標(biāo)本中的肝素；〔3〕冷凍血漿含有大量磷脂和PF4，因?yàn)槔鋬隹梢云茐难“?。?biāo)本存放CLSI推薦止凝血試驗(yàn)應(yīng)在標(biāo)本采集和離心后4小時(shí)內(nèi)完成，PT應(yīng)在24小時(shí)內(nèi)完成。一般情況應(yīng)在采血后1h內(nèi)別離血漿，4h內(nèi)測(cè)定完畢。標(biāo)本如不能及時(shí)檢測(cè)時(shí)，應(yīng)放冰箱保存，4℃保存最多不能超過(guò)6h，-20℃可保存兩周，-70℃可保存6月?？偨Y(jié)臨床應(yīng)用PT、APTT、PLT結(jié)果的組合分析PTAPTTPLT臨床意義延長(zhǎng)正常正常獲得性FⅦ缺乏癥正常延長(zhǎng)正常FⅧ、FⅨ或FⅪ缺乏或抑制物、VWD、肝素抗凝物延長(zhǎng)延長(zhǎng)正常維生素K缺乏癥、肝病、肝素治療延長(zhǎng)延長(zhǎng)減低DIC、肝病正常正常增高獲得性血小板異常〔尿毒癥〕、輕型VWD正常正常正常血管異常相關(guān)疾病，如ⅩⅢ缺乏癥、遺傳性血性毛細(xì)管擴(kuò)張癥、輕型血友病。

抗凝檢測(cè)抗凝血酶Ⅲ活性(AT-Ⅲ:A)測(cè)定【方法】：發(fā)色底物法【原理】：將過(guò)量的凝血酶參加待測(cè)血漿，與血漿中的AT-III形成1:1的復(fù)合物，使之喪失轉(zhuǎn)化纖維蛋白原為纖維蛋白的酶活性，剩余凝血酶作用于發(fā)底物，裂解出產(chǎn)色基團(tuán)，顯色的深淺與AT-III活性成負(fù)相關(guān)。抗凝血酶Ⅲ活性(AT-Ⅲ:A)測(cè)定【臨床意義】

1.AT-Ⅲ活性減低見(jiàn)于先天性和獲得性AT-Ⅲ缺乏癥，后者見(jiàn)于肝臟疾病、DIC、血栓前狀態(tài)和血栓性疾病

2.AT-Ⅲ活性增高見(jiàn)于血友病、口服抗凝劑、應(yīng)用黃體酮等AT-Ⅲ的臨床應(yīng)用主要包括：〔1〕肝素抗凝治療前AT-Ⅲ水平評(píng)估及肝素治療的療效判斷：AT-Ⅲ活性為70%時(shí)，肝素作用約降低65%；AT-Ⅲ活性為50%時(shí)，肝素作用只有原來(lái)的1/5，應(yīng)考慮補(bǔ)充AT-Ⅲ；〔2〕易栓癥診斷；〔3〕血栓及血栓前狀態(tài)風(fēng)險(xiǎn)性及預(yù)后評(píng)估，AT-Ⅲ水平越低，病情越嚴(yán)重，預(yù)后那么越不良；〔4〕DIC的病程監(jiān)測(cè)、療效判斷和預(yù)后評(píng)估；〔5〕嚴(yán)重肝病、腎病綜合征病情判斷、預(yù)防血栓。纖溶活性檢測(cè)幾乎在凝血開(kāi)始的同時(shí)，纖維蛋白溶解系統(tǒng)也被激活。纖溶活性檢測(cè)篩選試驗(yàn)：

1、D-二聚體定性試驗(yàn)〔D-D〕

2、纖維蛋白〔原〕降解產(chǎn)物定性試驗(yàn)〔FDP〕

診斷試驗(yàn)：

1、D-二聚體定量試驗(yàn)〔D-D〕

2、纖維蛋白〔原〕降解產(chǎn)物定量試驗(yàn)〔FDP〕交聯(lián)纖維蛋白的特異性產(chǎn)物〔碎片X'、Y'、D'、E'〕是目前認(rèn)為DIC實(shí)驗(yàn)診斷中的一個(gè)特異性較強(qiáng)的指標(biāo)。為繼發(fā)性纖溶特有的代謝物。血漿FDP升高和D-Dimer的增高是繼發(fā)性纖溶兩個(gè)很有價(jià)值的指標(biāo)，其在血漿中濃度增高，表示纖維蛋白溶解亢進(jìn)。D-二聚體測(cè)定〔D-dimer,D-D〕D-Dimer檢測(cè)的臨床意義原理：當(dāng)含有D-二聚體抗原的待測(cè)血漿與含有D-二聚體特異性單克隆抗體的乳膠顆粒發(fā)生抗原抗體凝集反響時(shí)，凝集程度與血漿中的D-二聚體濃度成正比，并通過(guò)相應(yīng)波長(zhǎng)下的測(cè)量，由于凝集引起的濁度的變化，進(jìn)行D-二聚體的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)流程：20ul血漿樣本+210ulD-二聚體緩沖液育溫位育溫180s----測(cè)試位參加70ulD-D試劑經(jīng)吸吐混勻測(cè)試265s報(bào)告方式：ug/ml【參考值】：免疫比濁法＜1ug/ml

纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物(FDP)測(cè)定原理和方法：常采用FDP抗體包被的乳膠顆粒懸液檢測(cè)待測(cè)血漿中FDP的相對(duì)含量。假設(shè)血漿中的FDP含量>5mg/L那么乳膠顆粒發(fā)生凝集反響。【參考值】膠乳凝集法：＜5mg/L

【臨床意義】纖溶活性增強(qiáng)的篩選、確診試驗(yàn)。1、原發(fā)性纖溶2、繼發(fā)性纖溶：DIC、惡性腫瘤、急性早幼粒細(xì)胞白血病、肺血栓栓塞、深靜脈血栓形成、心、肝、腎疾病，溶栓治療等所致的繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)時(shí)FDP含量升高。[纖溶亢進(jìn)性出血檢測(cè)的選擇]指纖維蛋白〔原〕和凝血因子被纖溶酶降解所引起的出血。篩選實(shí)驗(yàn)主要檢測(cè)FDP和D-D三、FDP陰性伴D-D陽(yáng)性理論上只見(jiàn)于纖維蛋白被降解，而纖維蛋白原未被降解，見(jiàn)于血栓栓子自發(fā)性溶解。見(jiàn)于DIC、靜脈血栓、動(dòng)脈血栓和溶栓治療等。四、FDP和D-D均陽(yáng)性表示纖維蛋白原和纖維蛋白同時(shí)被降解，見(jiàn)于繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)，如DIC、溶栓治療。FDPDD臨床意義正常正常說(shuō)明纖溶活性正常++說(shuō)明繼發(fā)性纖溶活性亢進(jìn)+-說(shuō)明原發(fā)性纖溶活性亢進(jìn)-+說(shuō)明僅有纖維蛋白降解而無(wú)纖維蛋白原降解影響FDP和D-D檢測(cè)的主要因素1.使D-D/FDP↑〔假陽(yáng)性〕的因素〔1〕生理性：年齡隨年齡增長(zhǎng)而增高，＞80歲88%D-D水平↑飲食高脂飲食、酗酒↑活動(dòng)劇烈活動(dòng)↑妊娠隨妊娠期延長(zhǎng)而增高↑〔2〕病理性：嚴(yán)重感染敗血癥/膿毒血癥組織壞死/壞