第十二章細(xì)菌的分布與消毒滅菌

第十二章細(xì)菌的分布與消毒滅菌第二節(jié)消毒滅菌消毒滅菌無菌防腐一、物理消毒滅菌法（一）熱力滅菌法1、濕熱滅菌法1）高壓蒸氣滅菌法2）煮沸法3）流通蒸氣法4）巴氏消毒法2、干熱滅菌法1）焚燒與燒灼2）干烤（二）紫外線與電離輻射滅菌法1）日光與紫外線2）電離輻射（三）濾過除菌二、化學(xué)消毒滅菌法（一）化學(xué)消毒劑的種類、性質(zhì)與用途（二）常用消毒劑的作用機(jī)制（三）影響消毒劑滅菌效果的因素（四）防腐劑教學(xué)目標(biāo)1、熟悉細(xì)菌在正常人體的分布2、掌握消毒、滅菌、防腐、無菌操作的概念3、掌握常用消毒滅菌方法第一節(jié)細(xì)菌的分布一、在自然界的分布1、土壤：含必需的營養(yǎng)物質(zhì)、水分、適宜PH及氣體環(huán)境。離地面10-20cm土壤中，細(xì)菌含量最多。多為非病原菌，但有些能形成芽胞。當(dāng)傷口被泥土污染，清創(chuàng)等防芽胞菌感染。2、水：易受人和動物糞便及多種排泄物的污染，→消化系統(tǒng)傳染病。保護(hù)水源、加強(qiáng)水、糞便管理→預(yù)防和控制腸道傳染病。3、空氣：存在不同種類的細(xì)菌，尤在公共場所或醫(yī)院，細(xì)菌種類和數(shù)量顯著增多。→口、呼吸道感染；空氣中非病原菌→生物制品、藥物制劑及培養(yǎng)基的污染。手術(shù)室、病房、制劑室、實(shí)驗(yàn)室等經(jīng)常空氣消毒，并嚴(yán)格按有關(guān)制度進(jìn)行消毒隔離和無菌操作，以防疾病的傳播及手術(shù)傷口的污染或術(shù)后的感染。二、細(xì)菌在正常人體的分布人的體表及其與外界相通的腔道中存在著不同種類和數(shù)量的微生物。三、人體正常菌群及其意義（一）正常菌群正常人體的體表及與外界相通的腔道粘膜上存在著不同種類和一定數(shù)量的細(xì)菌，通常對人體是無害的，稱為正常菌群。（二）正常菌群的生理意義1、生物拮抗作用：競爭營養(yǎng)、產(chǎn)生細(xì)菌素等方式拮抗病原菌，構(gòu)成防止外來細(xì)菌侵入與定居的生物屏障。2、營養(yǎng)作用：參與物質(zhì)代謝、營養(yǎng)轉(zhuǎn)化和合成。有的能合成宿主所必須的維生素。3、免疫作用：有免疫原性、促免疫細(xì)胞分裂作用，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體，促進(jìn)機(jī)體免疫系統(tǒng)的發(fā)育和成熟，限制正常菌群本身對宿主的危害，抑制或殺滅具有交叉抗原的病原菌。此外：有利于生長、發(fā)育和長壽、抗癌作用。（三）條件致病菌在特殊情況下能引起疾病的細(xì)菌。特定條件：①機(jī)體免疫功能低下②寄居部位發(fā)生變遷③不適當(dāng)?shù)目咕幬镏委熕鶎?dǎo)致的菌群失調(diào)。（四）菌群失調(diào)及菌群失調(diào)癥菌群失調(diào)：由于某種原因使正常菌群的種類、數(shù)量和比例發(fā)生較大輻度的改變，導(dǎo)致微生態(tài)失去平衡。菌群失調(diào)癥：由于嚴(yán)重菌群失調(diào)使宿主發(fā)生一系列臨床癥狀。二重感染：菌群失調(diào)癥往往是在抗菌藥物等治療原有感染性疾病過程中產(chǎn)生的另一種新感染。常見細(xì)菌：金黃色葡萄球菌、革蘭陰性桿菌和白假絲酵母菌多見。臨床表現(xiàn)：腸炎、鵝口瘡、肺炎、尿路感染或敗血癥等。處理：停用原抗生素；選用敏感抗生素；使用微生態(tài)制劑。

第二節(jié)消毒滅菌1、消毒：殺死物體上病原微生物的方法。消毒劑：用以消毒的化學(xué)藥物。一般常用濃度，只對繁殖體有效。2、滅菌：殺滅物體上所有微生物的法。3、無菌：物體上沒有活的微生物存在。無菌操作：防止微生物進(jìn)入機(jī)體或物體的操作技術(shù)。-外科手術(shù)、醫(yī)療技術(shù)操作及微生物實(shí)驗(yàn)過程等均需嚴(yán)格的無菌操作。4、防腐：防止或抑制微生物生長繁殖的方法。防腐劑：用于防腐的化學(xué)藥物。用于延長生物制品及口服制品的保存期。許多化學(xué)制劑在低濃度時防腐劑，在高濃度時則為消毒劑。消毒、滅菌的方法一般可分為：物理學(xué)方法熱力滅菌法紫外線與電離輻射滅菌法濾過除菌法化學(xué)方法一、物理消毒滅菌法（一）熱力滅菌法濕熱滅菌法1）高壓蒸氣法2）煮沸法3）流通蒸氣法4）5）干熱滅菌法6）焚燒法7）燒灼法8）干烤法巴氏消毒法間歇滅菌法分濕熱和干熱同一溫度下，濕熱滅菌效果比干熱好。原因：①穿透力強(qiáng)，較快提高滅菌物品內(nèi)部溫度；②易吸收水分，使菌體蛋白質(zhì)易于凝固變性。③熱蒸汽接觸被滅菌物品時變?yōu)橐簯B(tài)，可放出大量潛熱，能迅速提高滅菌物品的溫度。1、濕熱滅菌法：（1）高壓蒸汽滅菌法：最常用、最有效密閉的蒸汽鍋技術(shù)參術(shù)：壓力103.4kPa(1.05kg/c㎡)，溫度可達(dá)121.3℃經(jīng)15-30分鐘，殺死所有細(xì)菌繁殖體和芽胞。用途：耐高溫、不怕潮濕的物品--手術(shù)器械、敷料、一般培養(yǎng)基等。要求：須將鍋內(nèi)冷空氣排盡，物品不宜放置緊密。（2）煮沸法：水溫100℃5分鐘殺死細(xì)菌繁殖體。殺滅芽胞需煮沸1-3小時。若在水中加入2%碳酸氫鈉，可提高沸點(diǎn)105℃，優(yōu)點(diǎn)：促進(jìn)殺滅芽胞，防止金屬器械生銹。高原每海拔增加300m，應(yīng)延長2分鐘。用途：食具、刀剪、注射器、生理鹽水等消毒。（3）流通蒸汽法：蒸籠或阿諾蒸鍋溫度≦100℃，15-20分鐘可殺死細(xì)菌繁殖體。間歇滅菌法：把流通蒸汽加熱的物品放置37℃孵箱過夜，芽胞→繁殖體，次日再經(jīng)流通蒸汽加熱，如此重復(fù)3次，達(dá)到滅菌目的。用途：不耐高溫的營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基滅菌、外科器械、注射器、食具等。（4）巴氏消毒法：用較低溫度殺滅液體中的病原菌或特定微生物，延長食品的貯存時間，不影響營養(yǎng)成分及香味。溫度：61.1－62.8℃30分鐘或71.7℃15－30秒．用途：不耐高溫食品---牛奶、酒類、飲料等。2、干熱滅菌法：通過脫水干燥和使大分子變性的作用進(jìn)行滅菌。（1）焚燒與燒灼：廢棄的物品或尸體實(shí)驗(yàn)用的接種環(huán)、試管口、瓶口等可通過火焰燒酌滅菌。（2）干烤：用電熱干烤箱滅菌，通常加熱至160-170℃維持2小時，可達(dá)到滅菌的目的。用途：高溫下不變質(zhì)、不損壞、不蒸發(fā)的物品--玻璃、瓷器。（二）紫外線與電離輻射滅菌法1、日光與紫外線：日曬是有效的殺菌方法，殺菌作用主要靠紫外線。波長在200-300nm時，具有殺菌作用，其中以265-266nm殺菌力量最強(qiáng)。（此波長與DNA吸收波峰一致，易被細(xì)菌DNA吸收，干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細(xì)菌的死亡或變異。）缺點(diǎn)：穿透力弱，玻璃、紙張、塵埃等均能阻擋紫外線。用途：手術(shù)室、病房、實(shí)驗(yàn)室等的空氣消毒及物品的表面消毒。人工紫外線燈，2-3米，1-2小時。注意：對人體皮膚、眼睛有損傷作用。2、電離輻射：包括高速電子、Ｘ射線和γ射線等。機(jī)理：足夠劑量時，輻射粒子與某些分子撞擊后，可激發(fā)這些分子產(chǎn)生離子或其他活性分子和游離基，破壞DNA。用途：一次性醫(yī)用塑料制品。也可用于食品的消毒，而不破壞營養(yǎng)成分。（三）濾過除菌法是用物理阻留的方法將液體或空氣中的細(xì)菌去除，達(dá)到無菌的目的。用途：不耐高溫的血清、毒素、抗生素、藥液等的除菌。現(xiàn)代醫(yī)院的手術(shù)室、燒傷病房及無菌制劑室，已逐步采用高效顆粒空氣濾器以除去空氣中直徑小于0.3μm的微粒，保持室內(nèi)無菌環(huán)境。二、化學(xué)消毒滅菌法（一）化學(xué)消毒劑的種類、性質(zhì)與用途消毒劑對細(xì)菌和人體細(xì)胞都有毒性作用用途：人體體表和醫(yī)療器械、周圍環(huán)境的消毒。常用化學(xué)藥物的種類有：常用消毒劑的選用：（二）常用消毒劑的作用機(jī)制（三）影響消毒滅菌效果的因素1、消毒劑的性質(zhì)、濃度、和作用時間理化性質(zhì)不同，對微生物的作用大小也不同。表面活性劑對G+菌的殺菌效果要比對G-菌強(qiáng)。一般：濃度越高，作用時間越長，消毒效果愈強(qiáng)（醇類例外）。2、細(xì)菌的種類、數(shù)量、與狀態(tài)芽胞比繁殖體抵抗力強(qiáng)；有莢膜的細(xì)菌抵抗力強(qiáng)；幼齡菌比老齡菌對消毒劑敏感；數(shù)量越大，所需消毒時間越長。3、環(huán)境因素的影響：病原菌隨同排泄物、分泌物一起存在，對細(xì)菌有保護(hù)作用，并與消毒劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，影響消毒效果。4、溫度和酸堿度升高溫度可提高消毒劑的殺菌效果，如2%戊二醛殺滅104個/炭疽芽胞桿菌，20℃時需15分鐘；40℃時需要2分鐘。ＰＨ影響：戊二醛本身呈中性，其水溶液呈弱酸性，不具有殺芽胞的作用，只有在加入碳酸氫鈉后才能發(fā)揮殺菌作用。其他影響因素:濕度、穿透力及拮抗物質(zhì)等。（四）防腐劑低濃度的消毒劑可作防腐劑。在生物制品中，如疫苗、類毒素等常加入防腐劑，以防雜菌生長。常用:0.01%硫柳汞、0.5%苯酚、0.1-0.2%甲醛等。

第三節(jié)生物安全一、實(shí)驗(yàn)室生物安全及其重要意義二、病原微生物危害程度分級三、生物安全水平分級及實(shí)驗(yàn)室設(shè)備要求四、對生物恐怖活動的防范作業(yè)：一、概念：正常菌群、菌群失調(diào)癥、消毒、滅菌、無菌、防腐、無菌操作二、填空1、用于消毒滅菌的物理方法主要有（）（）（）（）。2、常用的濕熱滅菌法有（）（）（）（），其中最常用、最有效的方法是（）。三、單選題：1、殺滅芽胞最常用和最有效的方法是（）

A、紫外線照射B、煮沸5分鐘C、巴氏消毒法

D、流通蒸氣滅菌法E、高壓蒸氣滅菌法2、滅菌方法錯誤的是（）A、手術(shù)室空氣-紫外線B、排泄物-漂白粉C、飲水—氯氣D、含血清培養(yǎng)基-高壓蒸氣滅菌E、溫度計(jì)-75%酒精3、下述不可能殺滅細(xì)菌芽胞的方法是（）A、煮沸法B、巴氏消毒法C、間歇滅菌法D、干熱滅菌法E、高壓蒸氣滅菌法4、關(guān)于紫外線，說法錯誤的是（）

A、其殺菌作用與波長有關(guān)B、可損壞細(xì)菌的DNA構(gòu)型C、265-266nm殺菌作用最強(qiáng)D、其穿透力弱，故對人體無損害E、紫外線適用空氣和物體表面的消毒5、常用于空氣或物體表面的消毒的是（）A、高壓蒸氣滅菌法B、紫外線照射法C、濾過除菌法D、巴氏消毒法E、干烤法6、常用于基礎(chǔ)培養(yǎng)基滅菌的是（）A、高壓蒸氣滅菌法B、紫外線照射法C、濾過除菌法D、巴氏消毒法E、流通蒸汽法7.常用于手術(shù)器械的滅菌（）A.高壓蒸氣滅菌法B.紫外線照射法C.濾過除菌法D.巴氏消毒法