丙泊酚減輕抑郁大鼠電休克后學(xué)習(xí)記憶損害的氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)機(jī)制

丙泊酚減輕抑郁大鼠電休克后學(xué)習(xí)記憶損害的氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)機(jī)制目的觀察丙泊酚對(duì)抑郁大鼠電休克(electroconvulsivetherapy,ECT)后學(xué)習(xí)記憶的影響;檢測(cè)大鼠海馬腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brainderivedneurotrophicfactor,BDNF)mRNA的表達(dá),測(cè)定谷氨酸(glutamate,Glu)、γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyricacid,GABA)含量及谷氨酸脫羧酶65(glutamicaciddecarboxylase65,GAD65)表達(dá),探討丙泊酚減輕抑郁大鼠電休克后學(xué)習(xí)記憶損害的氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)機(jī)制。方法雄性SD大鼠60只,鼠齡2~3月,體重200～250g,隨機(jī)分為5組(n=12):正常對(duì)照組(C組)、抑郁對(duì)照組(D組)、單純丙泊酚組(P組)、單純電休克組(E組)、丙泊酚聯(lián)合電休克組(M組)。C組正常飼養(yǎng),其余4組采用孤養(yǎng)加慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激(CMUS)法建立大鼠抑郁模型。建模成功后,C組和D組予以生理鹽水10ml/kg腹腔注射(intraperitonealinjection,I.P.),P組丙泊酚100mg/kgI.P.,上述3組不予以電刺激;E組予以生理鹽水10ml/kgI.P.后行電休克治療(正弦波、頻率50Hz、電流50mA、持續(xù)時(shí)間1s);M組予以丙泊酚100mg/kgI.P.后行電休克治療(刺激參數(shù)同E組)。各組處理均隔天一次,共6次。于建模前1天(基礎(chǔ)狀態(tài)),建模后第1天(T1)及實(shí)驗(yàn)處理后第1天(T2)采用Open-field法行行為學(xué)評(píng)分。于T1,T2時(shí)采用Morris水迷宮測(cè)評(píng)學(xué)習(xí)記憶功能,完成后處死大鼠,采用Real-timePCR法檢測(cè)海馬BDNFmRNA表達(dá);免疫組織化學(xué)法檢測(cè)海馬GAD65表達(dá);高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定海馬Glu、GABA含量,并計(jì)算Glu/GABA比值。結(jié)果(1)Open-field行為學(xué)評(píng)分:建模前1天(基礎(chǔ)狀態(tài)),各組大鼠行為學(xué)評(píng)分差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);建模后第1天,與C組和建模前1天比較,其余4組水平計(jì)分和垂直計(jì)分降低(P<0.05),4組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);實(shí)驗(yàn)處理后第1天,與C組和建模前比較,其余4組水平計(jì)分和垂直計(jì)分降低(P<0.05),分別與D組、P組和建模后第1天比較,E組和M組水平計(jì)分和垂直計(jì)分升高(P<0.05)。(2)Morris水迷宮學(xué)習(xí)記憶功能測(cè)評(píng):①逃避潛伏期(evasivelatency,EL):建模后,與C組比較,其余4組EL延長(zhǎng)(P<0.05),4組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);實(shí)驗(yàn)處理后,與C組比較,其余4組EL仍延長(zhǎng)(P<0.05);與D組和M組比較,E組EL延長(zhǎng)(P<0.05)。②目標(biāo)象限游泳時(shí)間百分比(swimmingtimepercentageinplatformquadrant,STP):建模后,與C組比較,其余4組STP減小(P<0.05),4組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);實(shí)驗(yàn)處理后,與C組比較,其余4組STP仍減小(P<0.05),4組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與D組和M組比較,E組STP減小(P<0.05)。(3)海馬BDNFmRNA表達(dá):與C組比較,D組表達(dá)減弱(P<0.05);與D組比較,E組和M組表達(dá)增強(qiáng)(P<0.05),兩組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(4)海馬Glu、GABA含量及Glu/GABA比值:與C組比較,D組Glu含量升高,GABA含量降低,Glu/GABA比值升高(P<0.05),E組Glu含量降低,GABA含量升高,Glu/GABA比值降低(P<0.05),M組Glu、GABA含量和Glu/GABA比值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與D組比較,E組和M組Glu含量降低,GABA含量升高,Glu/GABA比值降低(P<0.05);與E組比較,M組Glu含量升高,GABA含量降低,Glu/GABA比值升高(P<0.05)。(5)海馬GAD65表達(dá):與C組比較,D組海馬GAD65表達(dá)減弱(P<0.05);與D組比較,E組和M組海馬GAD65表達(dá)增強(qiáng)(P<0.05);與E組比較,M組海馬GAD65表達(dá)減弱(P<0.05)。結(jié)論(1)電休克和丙泊酚聯(lián)合電休克可上調(diào)海馬BDNFmRNA表達(dá),緩解抑郁癥狀,BDNF通路可能不參與電休克損害學(xué)習(xí)記憶的主要機(jī)制。(2)慢性應(yīng)激抑郁和單純E