分析方法驗證、確認和轉(zhuǎn)移

USP分析方法的驗證、確認和轉(zhuǎn)移一.分析方法驗證、確認和轉(zhuǎn)移的定義二.分析方法驗證三.分析方法確認四.分析方法轉(zhuǎn)移五.總結(jié)驗證、確認和轉(zhuǎn)移的定義USP<1225>:分析方法驗證是一個按照已建立的實驗室研究來證明方法的性能參數(shù)符合期望的分析應(yīng)用要求的過程ICHQ2(R1):分析方法驗證的目標是闡明分析方法適用于它所期望的應(yīng)用目的FDA工業(yè)指南：方法驗證是一個闡述分析方法適合于其使用目的的過程SFDA(驗證)：證明任何操作規(guī)程(或方法)，生產(chǎn)工藝或系統(tǒng)能夠達到預(yù)期結(jié)果的一系列活動驗證：驗證、確認和轉(zhuǎn)移的定義<1225>:USP-NF所收載方法的使用者不需要驗證這些方法的準確性和可靠性，但需要確認這些方法在實際使用條件下的適應(yīng)性<1225>:簡而言之：是相關(guān)數(shù)據(jù)而不是重復(fù)驗證過程<1226>:確認包括所涉及方法的性能參數(shù)，如那些在本章節(jié)中描述的FDA：出現(xiàn)在USP中的方法被認為已驗證，如果作為已批準的ANDA的一部分，它們也被認為是驗證過的對于法定方法，廠家必須闡明該方法在實際使用情況下的狀態(tài)確認：驗證、確認和轉(zhuǎn)移的定義<1224>:方法轉(zhuǎn)移是一個文件化的過程，用于確定一個實驗室(接收方)有能力使用來源于另一個實驗室(轉(zhuǎn)移方)的分析方法，由此保證接收方有知識和能力來應(yīng)用該分析方法，以達到預(yù)期的效果<1224>將非法定方法從一個實驗室轉(zhuǎn)移至另一個實驗室，即為分析方法轉(zhuǎn)移

通常不適用于法定方法，但可以參考轉(zhuǎn)移：USP分析方法種類類別Ⅰ—用于原料藥中主要成分或藥物制劑中

活性成分(包括防腐劑)定量測試類別Ⅱ—用于原料藥中雜質(zhì)或制劑中降解成分

定量和限度測試類別Ⅲ—用于性能參數(shù)測試(如：溶出度、釋

放度)類別Ⅳ—鑒別測試分析方法驗證-------常規(guī)要求USP：在驗證開始階段將待驗證的目的清晰的表述出來是十分必要的ICH：分析方法的目標應(yīng)能很清晰地被理解，因為它將主導(dǎo)那些驗證參數(shù)被評估分析方法驗證-------常規(guī)要求Example：1.原料藥XXX的新生產(chǎn)工藝已被開發(fā)，本方法是針對原料A色譜純度測定的HPLC方法，在供應(yīng)商相關(guān)HPLC方法的基礎(chǔ)上開發(fā)。本HPLC方法驗證按照ICHQ2B指南進行。2.為驗證原料A中殘留溶劑(丙酮,二氯甲烷,甲醇)檢驗方法的準確性和可靠性，依據(jù)ICH指導(dǎo)原則，制定本方案。分析方法驗證-------常規(guī)要求驗證實施所需的條件應(yīng)明確提出Example：液相測定儀器、設(shè)備試劑對照品色譜條件驗證方案驗證方案包括：

使用目的和分析方法描述

涉及的性能參數(shù)列表

適當?shù)慕邮軜藴?/p>

源于法規(guī)要求的復(fù)核和批準人簽名

驗證方案起草一個適合的驗證方案，應(yīng)考慮：

分析方法的目的性能參數(shù)列表的選擇

基于以下方面考慮的適當?shù)慕邮軜藴?/p>

---使用目的(定性/定量)---歷史要求---來自研發(fā)部門針對QC/法定方法進行的預(yù)驗證數(shù)據(jù)驗證方案----性能參數(shù)典型的性能參數(shù)包括：●專屬性●檢測限●定量限●線性●范圍●準確度●精密度(重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性)●耐用性●系統(tǒng)適用性性能參數(shù)----線性線性方程：Y=a+kxa---Y軸截距：背景干擾(≤標準溶液響應(yīng)值的n%)k---斜率r2---線性相關(guān)系數(shù)回歸線的離均差平方和SStotal=SSexplained+SSunexplainedr2=SSexplained/SStotal性能參數(shù)----線性藥物X中有關(guān)物質(zhì)測定目的：檢測含量在0.05%—2%的各種雜質(zhì)樣品：藥物X用流動相配制成1mg/mL對照溶液：藥物X用流動相配制成0.002mg/mL(0.2%)接受標準：相關(guān)性r2≥0.999Y軸截距≤標準溶液響應(yīng)值的20%性能參數(shù)----線性藥物X雜質(zhì)水平的線性原始數(shù)據(jù)性能參數(shù)----線性性能參數(shù)----線性線性數(shù)據(jù)是否達到預(yù)設(shè)標準？預(yù)設(shè)標準是否合適？相關(guān)系數(shù)R2=0.9994＞0.999Y-截距：355.49＜（1863×20%=373）性能參數(shù)----線性性能參數(shù)----線性線性/準確度---在0.5-2%范圍，應(yīng)在±n%或F值RSD≤n%響應(yīng)因子F對濃度C作圖性能參數(shù)----系統(tǒng)適用性相對標準偏差(RSD)標準溶液的重復(fù)進樣系統(tǒng)重復(fù)性的評價---對于要求不超過2.0%的，測試物進樣5次---對于要求大于2.0%的，測試物進樣6次---對于主藥成分在1.0—2.0%---有關(guān)物質(zhì)在5.0—15.0%分析方法確認USP<1226>:驗證：使用確定好的樣品對分析方法進行挑戰(zhàn)確認：使用確定的方法對試驗環(huán)境進行挑戰(zhàn)，包

括以下因素：----分析員----設(shè)備----試劑----其他因素常規(guī)測試一般不需要確認(水分、重金屬、熾灼殘渣等)針對原料藥和輔料進行確認的數(shù)據(jù)要求(包括但不限于以下項目)方法種類類別I類別Ⅱ類別Ⅲ類別Ⅳ定量限度HPLC/GCPP,S,LOQS,LOD---SSpectro.orcolorimetPP,LOQS,LOD---STitrationPP---------TLC---S,LOQS,LOD---SGelElectro---S,LOQS,LOD---SP-Precision；S-Specificity；L-Linearity；LOD-檢測限；LOQ-定量限精密度專屬性線性針對制劑產(chǎn)品進行確認的數(shù)據(jù)要求

(包括但不限于以下項目)方法種類類別I類別Ⅱ類別Ⅲ類別Ⅳ定量限度HPLC/GCP,S,LP,S,LOQS,LODPSSpectro.orcolorimetP,LP,LOQS,LODPSTitrationP,LP---------TLC---S,LOQS,LOD---SGelElectro---S,LOQS,LOD---SP-Precision；S-Specificity；L-Linearity；LOD-檢測限；LOQ-定量限精密度專屬性線性確認過程沒有通用的確認方案按所寫的進行測試全驗證確認分析方法轉(zhuǎn)移什么時候需要進行方法轉(zhuǎn)移？---研發(fā)實驗室至QC實驗室---A場地至B場地(同一公司內(nèi)部或不同公司之間)---QC實驗室至合同實驗室---A儀器至B儀器到目前為止還沒有官方發(fā)布的關(guān)于分析方法轉(zhuǎn)移的指導(dǎo)原則轉(zhuǎn)移方式方法轉(zhuǎn)移比較測試共同驗證驗證/重驗證轉(zhuǎn)移免除比較測試---目的：表明驗證過的方法在兩個或更多實驗室使用的一致性---比較測試是最常用的方法轉(zhuǎn)移方式---用已驗證過的方法進行---不需要挑戰(zhàn)所有驗證參數(shù)；是比較性研究---兩個實驗室檢測相同的樣品(集)：

1.選擇有良好批均勻性的樣品

2.確保樣品在所有實驗室都在預(yù)定的時間范圍內(nèi)得到檢驗

3.對于用于降解研究的方法，使用含有在定量限或更高水平雜質(zhì)的樣品比較測試---數(shù)據(jù)評估---觀察所有產(chǎn)生的數(shù)據(jù)：確保數(shù)據(jù)符合可接受標準確保在各實驗室之間的偏差和平均值相符并和以往的經(jīng)驗符合確保沒有偏移比較測試---數(shù)據(jù)評估---常用的用于設(shè)定可接收標準的統(tǒng)計學(xué)參數(shù)：

T-test

F-test

ANOVA(單因素方差分析)

f2(溶出度)

RSD共同驗證---接收方作為驗證團隊的一員，參加轉(zhuǎn)移方的實驗室間共同驗證---當方法未被完全驗證時---通則<1225>法定方法驗證提供了指導(dǎo)，以說明哪些參數(shù)適合用于驗證測試---接收方實驗室的驗證數(shù)據(jù)將包含在方法驗證報告中作為方法轉(zhuǎn)移的證據(jù)重驗證---接收方重復(fù)部分或全部驗證試驗來挑戰(zhàn)適用的驗證性能參數(shù)---這種方式更費時，更難發(fā)現(xiàn)存在于兩個不同實驗室、操作人員及儀器間的差異---不能保證實驗室間測試方法的等效性轉(zhuǎn)移免除接收方實驗室能在不進行跨實驗室比較測試的情況下使用檢測方法何時使用：---新產(chǎn)品配方與現(xiàn)有產(chǎn)品類似，且接收方已有這樣的分析經(jīng)驗---轉(zhuǎn)移的方法與現(xiàn)在已使用的方法相同或類似---負責(zé)產(chǎn)品開發(fā)、驗證或日常分析的轉(zhuǎn)移方人員調(diào)職于接收方總結(jié)：轉(zhuǎn)移方法轉(zhuǎn)移已驗證？能轉(zhuǎn)移免除嗎？有接收方嗎？能用比較測試嗎？共同驗證重驗證轉(zhuǎn)移免除比較測試NOYesYesYesYesNONO方法轉(zhuǎn)移要素---培訓(xùn)---方案---檢驗規(guī)程---設(shè)施和儀器---樣品和標準品---轉(zhuǎn)移報告培訓(xùn)---轉(zhuǎn)移方應(yīng)對接收方提供培訓(xùn)，或者接收方須在轉(zhuǎn)移方案批準前進行預(yù)實驗來發(fā)現(xiàn)可能需要解決的問題---培訓(xùn)依據(jù)開發(fā)的階段、方法的復(fù)雜程度以及對于相關(guān)儀器的經(jīng)驗---涵蓋盡可能多的檢驗程序相關(guān)的技術(shù)項目包括安全事項和方法的注意事項---對培訓(xùn)和分析員的確認進行記錄方案---在分析方法轉(zhuǎn)移執(zhí)行前應(yīng)討論、商定并起草精心設(shè)計的方案---方案至少應(yīng)包括以下內(nèi)容：

1.范圍

2.轉(zhuǎn)移方和接收方的職責(zé)與責(zé)任

3.檢驗規(guī)程

4.實驗設(shè)計和接受標準檢驗規(guī)程---檢驗規(guī)程應(yīng)包含充分的細節(jié)及明確的指導(dǎo)，使得經(jīng)過培訓(xùn)的分析員能夠毫無困難的執(zhí)行---應(yīng)由明確規(guī)定重復(fù)次數(shù)以及進樣順序---如果有完整或者部分驗證數(shù)據(jù)，此信息應(yīng)提供給接收方，包括任何檢測相關(guān)的技術(shù)細節(jié)設(shè)施和儀器---接收方應(yīng)確保設(shè)施和儀器經(jīng)過恰當?shù)男ｒ灪痛_認，并確認實驗室系統(tǒng)符合相關(guān)的法規(guī)和內(nèi)部實驗室通則的要求---一個經(jīng)過精心設(shè)計的系統(tǒng)適用性測試能幫助發(fā)現(xiàn)儀器的問題樣品和標準品---盡量使用法定標準品---當涉及的實驗室處于不同地理區(qū)域，標準品尤其關(guān)鍵轉(zhuǎn)移報告當分析方法轉(zhuǎn)移完成后，接收方應(yīng)起草方法轉(zhuǎn)移報告，報告要包含獲得結(jié)果和可接收標準的對比以及確認接收方是否適合來運行此方法的結(jié)論

---兩個實驗室的數(shù)據(jù)應(yīng)一致

---兩組數(shù)據(jù)應(yīng)同方案中的可接受標準進行比較

---包含任何對于方案的修正和偏差，以及這些變化發(fā)生的原因和影響

---應(yīng)由轉(zhuǎn)移方和接收方共同批準如果不能符合可接受標準，應(yīng)啟動調(diào)查來確定失敗的原因方法轉(zhuǎn)移的程序準備階段培訓(xùn)階段確認階段差異分析Summary<1225>分析方法驗證：分析方法用于非藥典物質(zhì)或使用替代方法測試藥典物質(zhì)<1226>分析方法確認：第一次使用USP方法測定藥典物質(zhì)需進行方法確認<1224>分析方法轉(zhuǎn)移：將非法定方法從一個實驗室轉(zhuǎn)移至另一個試驗室Summary