丙泊酚及手術(shù)創(chuàng)傷對新生大鼠神經(jīng)發(fā)育和認知功能的影響

丙泊酚及手術(shù)創(chuàng)傷對新生大鼠神經(jīng)發(fā)育和認知功能的影響第一部分丙泊酚及手術(shù)創(chuàng)傷對新生大鼠中樞炎癥反應(yīng)及神經(jīng)元凋亡的影響目的:探討丙泊酚麻醉及手術(shù)創(chuàng)傷對新生大鼠中樞炎癥反應(yīng)及神經(jīng)元凋亡的影響及可能機制。方法:根據(jù)不同的丙泊酚用藥次數(shù),將104只13d齡SD大鼠隨機分為兩大組,即單次給藥組和多次給藥組。單次給藥組包括:對照組(con-s)、手術(shù)組(sur-s)、單次丙泊酚組(ppf-s)、單次丙泊酚+手術(shù)組(ppf-s+sur)。多次給藥組包括:對照組(con-m)、手術(shù)組(sur-m)、多次丙泊酚組(ppf-m)、多次丙泊酚+手術(shù)組(ppf-m+sur)。con-s組僅接受腹腔注射生理鹽水7.5ml/kg,ppf-s組僅腹腔注射丙泊酚75mg/kg,sur-s組行羅哌卡因局麻下剖腹探查術(shù),ppf-s+sur組腹腔注射丙泊酚75mg/kg后行羅哌卡因局麻下剖腹探查術(shù);con-m組連續(xù)5天腹腔注射生理鹽水7.5ml/kg/d,ppf-m組連續(xù)5天腹腔注射丙泊酚75mg/kg/d,sur-m組于新生鼠13d齡時行羅哌卡因局麻下剖腹探查術(shù),后續(xù)4天腹腔注射生理鹽水7.5ml/kg/d,ppf-m+sur組于大鼠13d齡時接受腹腔丙泊酚注射75mg/kg后,羅哌卡因局麻下行剖腹探查術(shù),隨后4天連續(xù)丙泊酚腹腔注射75mg/kg/d。于造模完成后1天檢測海馬組織TNF-α的濃度,腦組織caspase-3、c-fos的表達,TUNEL染色觀察新生鼠大腦皮層以及海馬神經(jīng)元凋亡情況。結(jié)果:在單次給藥組中,sur-s組TNF-α濃度、caspase-3、c-fos的表達較其他三組相比明顯升高,且差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),TUNEL染色結(jié)果也表明該組新生鼠大腦皮層及海馬神經(jīng)元凋亡數(shù)量明顯增多(P<0.05)。con-s組、ppf-s組、ppf-s+sur組三組之間TNF-α濃度、caspase-3、c-fos的表達差異無統(tǒng)計學意義,神經(jīng)細胞凋亡數(shù)亦無顯著差異;在多次給藥組中,與con-m組相比,其他三組海馬組織中TNF-α含量顯著升高,腦組織caspase-3、c-fos表達增加(P<0.05);與ppf-m組及ppf-m+sur組相比,sur-m組海馬組織TNF-α含量降低,腦組織caspase-3、c-fos表達減少(P<0.05)。ppf-m組及ppf-m+sur組較con-m組、sur-m組新生鼠大腦皮層及海馬神經(jīng)細胞凋亡數(shù)量明顯增多(P<0.05),sur-m組與con-m組相比神經(jīng)元凋亡數(shù)量增加(P<0.05)。小結(jié):新生大鼠接受局麻腹部手術(shù)可引起中樞炎癥介質(zhì)釋放增多以及caspase-3、c-fos的表達增多,大腦皮層、海馬神經(jīng)細胞凋亡數(shù)量增加;單次丙泊酚麻醉不會引起新生大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生上述改變,同時還能緩解手術(shù)創(chuàng)傷引起的大腦神經(jīng)功能的損傷。但多次接受丙泊酚麻醉則可引起新生鼠中樞炎癥介質(zhì)釋放增多以及caspase-3、c-fos表達增加,神經(jīng)細胞凋亡增多。第二部分新生大鼠接受丙泊酚麻醉及手術(shù)創(chuàng)傷對其成年期神經(jīng)發(fā)育及認知功能的影響目的:探討新生大鼠接受丙泊酚麻醉及手術(shù)創(chuàng)傷對其發(fā)育至成年階段神經(jīng)發(fā)育及認知功能的影響。方法:根據(jù)不同的丙泊酚用藥次數(shù),將104只13d齡SD大鼠隨機分為兩大組即:單次給藥組和多次給藥組。單次給藥組包括:對照組(con-s)、手術(shù)組(sur-s)、單次丙泊酚組(ppf-s)、單次丙泊酚+手術(shù)組(ppf-s+sur)。多次給藥組包括:對照組(con-m)、手術(shù)組(sur-m)、多次丙泊酚組(ppf-m)、多次丙泊酚+手術(shù)組(ppf-m+sur)。con-s組僅接受腹腔注射生理鹽水7.5ml/kg,ppf-s組僅腹腔注射丙泊酚75mg/kg,sur-s組行羅哌卡因局麻下剖腹探查術(shù),ppf-s+sur組腹腔注射丙泊酚75mg/kg后行羅哌卡因局麻下剖腹探查術(shù);con-m組連續(xù)5天腹腔注射生理鹽水7.5ml/kg/d,ppf-m組連續(xù)5天腹腔注射丙泊酚75mg/kg/d,sur-m組于新生鼠13d齡時行羅哌卡因局麻下剖腹探查術(shù),后續(xù)4天腹腔注射生理鹽水7.5ml/kg/d,ppf-m+sur組于大鼠13d齡時接受腹腔丙泊酚注射75mg/kg后,羅哌卡因局麻下行剖腹探查術(shù),隨后4天連續(xù)丙泊酚腹腔注射75mg/kg/d。模型建造完成后分籠飼養(yǎng)至大鼠60d齡時行Morris水迷宮實驗評估大鼠學習記憶能力后檢測大鼠海馬TNF-α的濃度,腦組織caspase-3、c-fos的表達,觀察皮層及海馬組織神經(jīng)細胞凋亡情況。結(jié)果:無論是單次給藥組還是多次給藥組,大鼠60d齡時行Morris水迷宮實驗結(jié)果表明各組大鼠之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。測定海馬組織TNF-α濃度、腦組織caspase-3、c-fos的表達及大腦皮層、海馬神經(jīng)細胞凋亡數(shù)量結(jié)果發(fā)現(xiàn)各組大鼠間無顯著差別(P>0.05)。小結(jié):新生大鼠接受手術(shù)創(chuàng)傷及丙泊酚麻醉對其成年階段神經(jīng)發(fā)育及認知功能無明顯影響。結(jié)論13d齡大鼠接受腹部局麻手術(shù)可引起中樞炎癥介質(zhì)釋放增多以及caspase-3、c-fos的表達增加,大腦皮層及海馬神經(jīng)細胞凋亡增多;單次注射75mg/kg丙泊酚不會對新生大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生影響,同時還能減