多不飽和脂肪酸對神經(jīng)管畸形和自然流產(chǎn)的影響及機制研究

多不飽和脂肪酸對神經(jīng)管畸形和自然流產(chǎn)的影響及機制研究神經(jīng)管畸形(NTD)及自然流產(chǎn)均為胚胎發(fā)育過程中出現(xiàn)的疾病。NTD是胚胎神經(jīng)管無法完成正常閉合而導致的一種先天畸形。葉酸缺乏所引起的葉酸-同型半胱氨酸Hcy)代謝紊亂是導致NTD發(fā)生的最主要原因。此外肌醇代謝通路異常、炎癥反應(yīng)等也是導致NTD發(fā)生的原因。自然流產(chǎn)是指非人為地在自然狀態(tài)下發(fā)生的流產(chǎn),其發(fā)病原因主要包括染色體異常,感染、免疫及炎癥,內(nèi)分泌功能紊亂,葉酸—Hcy代謝異常等。多不飽和脂肪酸(PUFA)是神經(jīng)系統(tǒng)的重要結(jié)構(gòu)組分。PUFA代謝產(chǎn)生的類花生酸TXA2、PGI2(二者的穩(wěn)定代謝產(chǎn)物分別為TXB2及6-keto-PGF1α)能夠參與調(diào)控營養(yǎng)物質(zhì)由母親經(jīng)胎盤到胎兒的轉(zhuǎn)運。此外,PUFA對葉酸-Hcy代謝通路及炎癥反應(yīng)也具有調(diào)控作用?；谇叭说倪@些研究結(jié)果,本文提出假設(shè):PUFA能夠通過調(diào)控類花生酸代謝、葉酸-Hcy代謝、炎癥反應(yīng)以及彌補機體PUFA的不足而對NTD及自然流產(chǎn)的發(fā)生起到一定的預(yù)防作用。本論文通過病例對照實驗分析PUFA與NTD及自然流產(chǎn)的相關(guān)性,進而通過動物實驗研究PUFA的攝入對子代NTD及流產(chǎn)發(fā)病率的影響及其機制。主要研究結(jié)果如下:(1)病例對照實驗發(fā)現(xiàn)胎盤中C18:2n-6、C18:3n-6、C20:3n-6、C18:3n-3、C20:3n-3、C20:5n-3、C22:5n-3含量過低及C20:4n-6/C20:5n-3、TXB2/6-keto-PGF1α的比值過高與胎兒NTD發(fā)病風險的升高密切相關(guān),表明這些PUFA的缺乏及類花生酸代謝紊亂是NTD的風險因素。(2)病例對照實驗發(fā)現(xiàn),孕早期自然流產(chǎn)婦女胎盤絨毛和蛻膜中必須脂肪酸C18:3n-3、蛻膜中總n-3PUFA、絨毛中必需脂肪酸C18:2n-6的含量均顯著低于健康孕婦,表明這些PUFA的缺乏與孕早期自然流產(chǎn)發(fā)生的密切相關(guān)。孕早期自然流產(chǎn)婦女絨毛中C20:4n-6/C20-5n-3的比值顯著高于健康孕婦,而C20:4n-6代謝產(chǎn)生的類花生酸PGI2及C20:5n-3代謝產(chǎn)生的類花生酸HEPE、LTB5、TXB3的水平顯著低于健康孕婦,表明胎盤絨毛中類花生酸代謝紊亂是孕早期自然流產(chǎn)發(fā)生的風險因素。此外,胎盤蛻膜和絨毛中溶血磷脂及絨毛中甘油二酯的含量偏低也是孕早期自然流產(chǎn)發(fā)生的潛在風險因素。(3)動物實驗發(fā)現(xiàn),孕鼠PUFA的攝入對丙戊酸鈉(VPA)誘導的NTD及流產(chǎn)的發(fā)生具有預(yù)防作用,并且n-3PUFA的效果優(yōu)于n-6PUFA。PUFA的攝入有效減輕了VPA引起的胎盤中類花生酸TXB2及6-keto-PGF1α的過量合成,并且n-3PUFA的攝入降低了胎盤中TXB2/6-keto-PGF1α的比值,表明PUFA調(diào)控胎盤中類花生酸的合成是其預(yù)防NTD及流產(chǎn)發(fā)生的機制之一。(4)動物實驗發(fā)現(xiàn),孕鼠腹腔注射VPA抑制了孕鼠肝臟中葉酸-Hcy的代謝通路關(guān)鍵基因(DHFR、MTRR、CSE、GAMT及CBS)的mRNA和蛋白表達,。與孕鼠肝臟中的結(jié)果相反,孕鼠VPA的注射升高了胚胎中葉酸-Hcy代謝通路關(guān)鍵基因(DHFR、MTRR、CSE、GAMT、CBS及MTHFR)的mRNA及蛋白表達水平。孕鼠n-3PUFA或n-6PUFA的攝入均有效減輕了VPA所引起的孕鼠肝臟及胚胎中葉酸-Hcy代謝紊亂,并且n-3PUFA的效果優(yōu)于n-6PUFA。這很好的闡明了n-3PUFA及n-6PUFA能夠降低VPA誘導的NTD及流產(chǎn)發(fā)病率并且n-3PUFA的效果優(yōu)于n-6PUFA的機制。此外,孕鼠VPA的注射降低了孕鼠肝臟中C18:2n-6、C20:4n-6及C22:6n-3的含量,而n-3PUFA及n-6PUFA的攝入有效的彌補了VPA所引起的孕鼠肝臟中這三種PUFA的不足,這可能也是PUFA預(yù)防NTD及流產(chǎn)發(fā)生的機制之一。綜上所述,本論文通過人體病例對照實驗發(fā)現(xiàn)PUFA的缺乏及類花生酸代謝異常均與NTD及自然流產(chǎn)的發(fā)生密切相關(guān)。動物實驗發(fā)現(xiàn)孕鼠n-3PUFA或n-6PUFA的攝入均能有效預(yù)防NTD及流產(chǎn)的發(fā)生