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文檔簡介
江蘇省無錫市江陰市南菁高中2024屆高三一診考試生物試卷注意事項:1.答題前,考生先將自己的姓名、準考證號碼填寫清楚,將條形碼準確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2.答題時請按要求用筆。3.請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書寫的答案無效;在草稿紙、試卷上答題無效。4.作圖可先使用鉛筆畫出,確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5.保持卡面清潔,不要折暴、不要弄破、弄皺,不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.下列關(guān)于新型冠狀病毒的敘述,錯誤的是()A.冠狀病毒沒有細胞結(jié)構(gòu),只能寄生于活細胞中,這說明細胞是生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,生命活動離不開細胞B.冠狀病毒和人體細胞膜上的結(jié)合位點ACE2結(jié)合從而入侵細胞,說明細胞膜控制物質(zhì)進出的功能是相對的C.冠狀病毒的+RNA進入宿主細胞后,首先翻譯出RNA聚合酶。這一過程需要冠狀病毒的+RNA為模板,還需宿主細胞的氨基酸、ATP、酶、tRNA、核糖體等參與D.冠狀病毒侵入人體后需要免疫細胞將其消滅,免疫細胞直接生活的內(nèi)環(huán)境是淋巴2.2020年春節(jié)期間,“新冠肺炎”疫情導致全國性的居家隔離,引發(fā)該病的新型冠狀病毒是一種外層有冠狀刺突蛋白的RNA病毒?下列關(guān)于該冠狀病毒的敘述,正確的是()A.降低了活性的新型冠狀病毒的RNA可以作為疫苗B.該病毒可能在血漿中自我復制,因此具有極強的傳染性C.該病毒侵入人體后,能激發(fā)人體的細胞免疫和體液免疫D.該病毒的遺傳物質(zhì)徹底水解可得到A?C?T?G四種堿基3.下圖為反射弧局部結(jié)構(gòu)示意圖,下列相關(guān)敘述錯誤的是()A.結(jié)構(gòu)①為過程③及其釋放的遞質(zhì)移動到④供能B.神經(jīng)遞質(zhì)存在于②內(nèi),可避免被細胞內(nèi)其他酶系破壞C.結(jié)構(gòu)④膜電位的變化與其選擇透過性密切相關(guān)D.興奮傳導到⑤,使膜對Na+的通透性增強,電位變?yōu)橥庳搩?nèi)正4.下列可以稱為種群密度的是()A.浙江省嘉興市的人口數(shù)量 B.池塘中一立方米內(nèi)魚的數(shù)量C.一個蜂巢中所有工蜂數(shù)量 D.穩(wěn)定型生物種群的個體數(shù)量5.下列說法錯誤的是()A.基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程既可以在葉綠體內(nèi)發(fā)生,也可以在線粒體內(nèi)發(fā)生B.氫鍵既可以在線粒體內(nèi)形成,也可以在線粒體內(nèi)斷裂C.高能磷酸鍵既可以在類囊體上形成,也可以在葉綠體基質(zhì)中形成D.磷酸二酯鍵既可以存在于DNA分子中,也可以存在于RNA分子中6.果蠅的等位基因A?a和B?b分別控制一對相對性狀,都位于常染色體上?基因型為AaBb的雌果蠅會產(chǎn)生4種基因型的卵細胞,而該基因型的雄果蠅只產(chǎn)生2種基因型的精子?下列相關(guān)敘述最合理的是()A.雄果蠅體細胞中的基因A?a和B?b所處的染色體沒有同源染色體B.基因型為AaBb的雌果蠅能產(chǎn)生4種卵細胞可能是因為發(fā)生了交叉互換C.基因型為AaBb的雌?雄果蠅分別進行測交,后代的性狀類型相同D.基因型為AaBb的雌?雄果蠅交配,其后代會出現(xiàn)9∶3∶3∶1的性狀分離比7.下列有關(guān)生物進化的敘述,正確的是()A.某種群中若RR個體的百分率增加,則R的基因頻率一定增加B.自然選擇的實質(zhì)是種群基因頻率發(fā)生定向改變C.地理隔離必然導致生殖隔離D.一個種群中控制某一性狀的全部基因稱為基因庫8.(10分)細菌會產(chǎn)生內(nèi)毒素,高濃度的內(nèi)毒素進入人體會引發(fā)廣泛的炎癥反應(yīng)和內(nèi)毒素血癥。研究者測定了不同溫度下藥物單獨或聯(lián)合處理細菌時內(nèi)毒素的釋放量。下列相關(guān)分析或推理錯誤的是()分組溫度內(nèi)毒素濃度(μg/mL)對照組溶菌酶A抗生素B溶菌酶A+抗生素B37℃5.45.122.48.240℃5.01.516.82.3A.對照組的處理是培養(yǎng)細菌但不添加藥物,結(jié)果說明細菌可白發(fā)地釋放內(nèi)毒素B.在兩種溫度下,抗生素B在殺菌的同時均可引起較多的內(nèi)毒素釋放到細菌細胞外C.與單獨使用抗生素B相比較,溶菌酶A與其聯(lián)合處理時可顯著降低內(nèi)毒素的釋放量D.若因細菌感染引起高燒,單獨使用溶菌酶A進行治療對緩解內(nèi)毒素血癥的效果最差二、非選擇題9.(10分)某科研小組隨機選擇多只布氏田鼠,研究麻醉對體溫調(diào)節(jié)的影響,結(jié)果如下表所示(耳鼓膜溫度與核心溫度接近,可反映布氏田鼠核心溫度的變化)。請回答下列問題:時間耗氧量(mL)產(chǎn)熱量(千卡/小時)耳鼓膜溫度(℃)給藥前1.72.63.82持續(xù)給藥時間20min4.85.33.1540min6.07.18.9615min9.210.68.842h11.312.58.513h13.312.28.18停藥時14.515.316.95停藥后20min17.518.116.9740min19.220.28.3715min21.122.48.53(1)從表中數(shù)據(jù)可推測,全麻后耳鼓膜溫度降低,停藥后耳鼓膜溫度升高的原因可能是____。(2)布氏田鼠的體溫調(diào)節(jié)中樞位于___________,通過___________的調(diào)節(jié)方式增加產(chǎn)熱、減少散熱。若將布氏田鼠置于5℃條件下,體溫沒有明顯變化,此時體內(nèi)___________(填激素名稱,至少回答兩種)含量會增加,這些激素分子___________(填“能”或“不能”)反復多次發(fā)揮作用。(3)若將布氏田鼠置于炎熱條件下,抗利尿激素分泌量___________(填“增加”或“減少”),尿量___________(填“增加”或“減少”)。10.(14分)已知果蠅的體色受兩對獨立遺傳的等位基因控制,其基因控制性狀的過程如圖所示?,F(xiàn)有純合的白身雌性果蠅和純合的灰身雄果蠅雜交,雜交后代F1全為黑身果蠅,F(xiàn)1雌雄果蠅自由交配,交配后代的表現(xiàn)型如表所示,回答下列問題:黑身灰身白身雌性97032雄性494831(1)親本中雌雄果蠅的基因型為______________________。(2)F2的黑身果蠅的基因型有______種,F(xiàn)2的黑身果蠅隨機交配,交配后代黑身果蠅所占的比例為_____________。(3)F2的某雜合的灰身雄性果蠅由于基因突變變?yōu)榘咨?,已知其可能的原因有兩種:情況1:控制色素合成的基因A發(fā)生了突變。情況2:在另外一條常染色體(與A基因所在的染色體為非同源染色體)上出現(xiàn)了一個新的是抑制色素合成的基因D。若要判斷屬于哪一種情況,可讓該突變的白身雄性果蠅和純合的黑身雌性果蠅雜交。①若雜交后代的表現(xiàn)型為__________________________________________,則為情況1。②若雜交后代的表現(xiàn)型為__________________________________________,則為情況2。11.(14分)為增加油菜種子的含油量,研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運肽基因相連,導入油菜細胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。(1)研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計引物,采用__________技術(shù)從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因,從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運肽基因。在上述引物設(shè)計時,分別在引物中加入上圖所示酶的識別序列,這樣可以用____________________酶處理兩個基因后,得到____________端(填圖中字母)相連的融合基因。(2)將上述融合基因插入右圖所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中,構(gòu)建_______________并導入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含______________的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落,再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng),可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液。(3)剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間,此過程的目的是_________________________,進一步篩選后培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因油菜。(4)提取上述轉(zhuǎn)基因油菜的mRNA,在____________酶的作用下獲得cDNA,再依據(jù)融合基因的DNA片段設(shè)計引物進行擴增,對擴增結(jié)果進行檢測,可判斷融合基因是否________。12.米醋是眾多種類的醋中營養(yǎng)價值較高的一種,制作米醋的主要流程是:蒸熟拌曲→入壇發(fā)酵→加水醋化。請回答下列問題:(1)“蒸熟拌曲”階段中拌入的“酒曲”中含有酵母菌,從呼吸作用的類型看,該微生物屬于__________型生物。將大米蒸熟冷卻,經(jīng)酶處理后得到葡萄糖,目的是更好地為微生物培養(yǎng)提供營養(yǎng)物質(zhì)中的___________。(2)“入壇發(fā)酵”階段產(chǎn)生的乙醇與酸性重鉻酸鉀反應(yīng)呈現(xiàn)_________色,該階段在生產(chǎn)時總是先“來水”后“來酒”,原因是___________________________。該階段雖未經(jīng)滅菌,但在______________的發(fā)酵液中,酵母菌能生長繁殖,絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。(3)“加水醋化”階段中醋酸發(fā)酵前,某同學計劃統(tǒng)計醋酸菌的總數(shù),他選用稀釋104、105、106倍的稀釋液進行涂布平板,每種稀釋液都設(shè)置了3個培養(yǎng)皿。從設(shè)計實驗的角度看,還應(yīng)設(shè)置的一組對照實驗為__________________________________________,設(shè)此對照的目的是_________________________,統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比實際數(shù)目________________(填“多”或“少”)。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解題分析】
病毒的結(jié)構(gòu)非常簡單,沒有細胞結(jié)構(gòu),僅由蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)組成,不能獨立生存,只有寄生在活細胞里才能進行生命活動?!绢}目詳解】A、新冠病毒沒有細胞結(jié)構(gòu),只能寄生在活細胞中,不可以獨立完成各項生命活動,A正確;B、冠狀病毒和細胞膜上的結(jié)合位點結(jié)合入侵細胞,說明細胞膜具有進行信息交流的功能,也說明細胞膜控制物質(zhì)進出的功能是相對的,B正確;C、冠狀病毒的遺傳物質(zhì)是進入宿主細胞內(nèi),原料、能量和場所都是由宿主提供,C正確;D、冠狀病毒侵入人體后需要免疫細胞將其消滅,免疫細胞直接生活的內(nèi)環(huán)境是淋巴和血漿,D錯誤。故選D?!绢}目點撥】易錯點:培養(yǎng)基不能直接培養(yǎng)病毒。2、C【解題分析】
病毒沒有細胞結(jié)構(gòu),只含有蛋白質(zhì)和1種核酸;病毒作為非己成分可以激發(fā)機體的免疫反應(yīng)?!绢}目詳解】A、疫苗本身是抗原,一般是病毒的蛋白質(zhì)外殼,A錯誤;B、病毒沒有獨立生存的能力,所以只能在細胞內(nèi)依賴于宿主細胞的營養(yǎng)物質(zhì)進行復制,B錯誤;C、該病毒侵入人體后,能激發(fā)人體的細胞免疫和體液免疫,C正確;D、該病毒是RNA病毒,其核酸徹底水解獲得A、U、C、G四種堿基,D錯誤。故選C?!绢}目點撥】本題以“新冠病毒”為題材,考查病毒的知識,需要考生識記病毒的結(jié)構(gòu)、病毒與免疫的知識。3、A【解題分析】
分析題圖:該圖為突觸結(jié)構(gòu)圖,其中①為線粒體、②為突觸小泡(內(nèi)含神經(jīng)遞質(zhì))、③為突觸前膜、④為突觸后膜、⑤為神經(jīng)遞質(zhì),因為神經(jīng)遞質(zhì)只能由突觸前膜釋放,作用于突觸后膜,故興奮只能從突觸前膜傳向突觸后膜?!绢}目詳解】A、過程③神經(jīng)遞質(zhì)的釋放方式為胞吐,結(jié)構(gòu)①線粒體為神經(jīng)遞質(zhì)的釋放提供能量,但是神經(jīng)遞質(zhì)擴散到④突觸后膜并與受體結(jié)合,不需要線粒體提供能量,A錯誤;B、神經(jīng)遞質(zhì)存在于②突觸小泡內(nèi),可避免被細胞內(nèi)其他酶系破壞,B正確;C、結(jié)構(gòu)④突觸后膜膜電位的變化是鈉離子通道打開,鈉離子大量內(nèi)流,形成內(nèi)正外負的動作電位,說明與其選擇透過性密切相關(guān),C正確;D、興奮傳導到⑤神經(jīng)遞質(zhì),使膜對Na+通透性增強,引起Na+內(nèi)流,膜電位變?yōu)橥庳搩?nèi)正,D正確。故選A。4、A【解題分析】
種群密度是指單位面積或體積內(nèi)某一種群個體的數(shù)量,是種群結(jié)構(gòu)最基本的參數(shù)。單位面積或體積內(nèi)種群個體數(shù)量越多,種群密度越高。【題目詳解】A、一定區(qū)域面積如浙江省嘉興市的人口數(shù)量可表示種群密度,A正確;B、魚的種類有很多,一立方米內(nèi)的魚包含多種魚,不是一個種群,B錯誤;C、種群密度應(yīng)是單位面積或體積中同種生物所有個體的數(shù)量,而一個蜂巢中所有工蜂只是蜂群中的部分個體,C錯誤;D、種群密度是種群的最基本的數(shù)量特征,與年齡組成無關(guān),D錯誤。故選A。5、C【解題分析】
葉綠體和線粒體均是半自主細胞器,含有少量的DNA、RNA和核糖體,可進行DNA復制和遺傳信息的轉(zhuǎn)錄、翻譯?!绢}目詳解】A、葉綠體和線粒體內(nèi)都含有DNA和核糖體,都能完成基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程,A正確;B、線粒體中含有少量的DNA,可發(fā)生DNA復制,DNA復制過程中會發(fā)生氫鍵的斷裂和氫鍵的形成,B正確;C、ADP合成ATP時,伴隨著高能磷酸鍵的形成。光合作用過程中,光反應(yīng)階段會產(chǎn)生ATP,而暗反應(yīng)階段不會產(chǎn)生ATP,故高能磷酸鍵可以在類囊體上形成在,不會在葉綠體基質(zhì)中形成,C錯誤;D、DNA和RNA分子中相鄰兩個核苷酸通過磷酸二酯鍵進行連接,D正確。故選C。6、B【解題分析】
根據(jù)題干中“AaBb的雌果蠅會產(chǎn)生4種基因型的卵細胞,而該基因型的雄果蠅只產(chǎn)生2種基因型的精子”,說明Aa和Bb在一對同源染色體上?!绢}目詳解】A、根據(jù)分析雄果蠅體細胞中的基因A?a和B?b在一對同源同源染色體上,A錯誤;B、如果Aa和Bb在一對同源染色體上,在減數(shù)分裂過程中產(chǎn)生四種配子,可能是發(fā)生了交叉互換,B正確;C、由于雄性只能產(chǎn)生兩種配子,所以測交后代有兩種表現(xiàn)型,而雌性可以產(chǎn)生四種配子,所以測交后代能產(chǎn)生四種表現(xiàn)型,C錯誤;D、由于Aa和Bb在一對同源染色體上,不遵循自由組合定律,所以后代的比例不會出現(xiàn)9∶3∶3∶1,D錯誤。故選B。【題目點撥】本題需要考生掌握自由組合定律的實質(zhì),分析出在卵細胞產(chǎn)生過程中發(fā)生了交叉互換,而在精子產(chǎn)生過程中沒有交叉互換。7、B【解題分析】
種群是生物進化的基本單位,生物進化的實質(zhì)是種群基因頻率的改變。突變和基因重組,自然選擇及隔離是物種形成過程的三個基本環(huán)節(jié),通過它們的綜合作用,種群產(chǎn)生分化,最終導致新物種形成。在這個過程中,突變和基因重組產(chǎn)生生物進化的原材料,自然選擇使種群的基因頻率定向改變并決定生物進化的方向,隔離是新物種形成的必要條件。【題目詳解】A、若RR個體的百分率增加,則R基因頻率不一定增加,如RR個體只增加一點點,可是Rr個體大幅減少,rr個體大幅增加的話,R的基因頻率可能會減少,r的基因頻率可能會增加,A錯誤;B、生物進化的實質(zhì)是基因頻率的改變,自然選擇能決定生物進化的方向,自然選擇的實質(zhì)是使種群基因頻率發(fā)生定向改變,B正確;C、地理隔離不一定導致生殖隔離,C錯誤;D、基因庫是指一個種群中全部個體中的所有基因,D錯誤。故選B。8、D【解題分析】
表格分析:37℃時,與對照組比較,只有溶菌酶A產(chǎn)生的內(nèi)毒素量減少,而抗生素B和聯(lián)合用藥,內(nèi)毒素釋放量都升高;40℃時,溶菌酶A處理,內(nèi)毒素下降較大,而抗生素B內(nèi)毒素釋放量增加,聯(lián)合用藥內(nèi)毒素下降,但下降幅度小于溶菌酶A?!绢}目詳解】A、對照組的處理是培養(yǎng)細菌但不添加藥物,結(jié)果說明細菌可自發(fā)地釋放內(nèi)毒素,A正確;B、由表格分析可知,在兩種溫度下,抗生素B在殺菌的同時均可引起較多的內(nèi)毒素釋放到細菌細胞外,B正確;C、據(jù)表格數(shù)據(jù)可以看出,與單獨使用抗生素B相比較,溶菌酶A與其聯(lián)合處理時可顯著降低內(nèi)毒素的釋放量,C正確;D、若因細菌感染引起高燒,單獨使用抗生素B進行治療對緩解內(nèi)毒素血癥的效果最差,D錯誤。故選D?!绢}目點撥】本題是一個實驗題,分析表格中的數(shù)據(jù)找到自變量是“溫度”和“所加物質(zhì)的種類”,因變量是內(nèi)毒素濃度,結(jié)合表格中的數(shù)據(jù)進行分析。二、非選擇題9、麻醉抑制細胞呼吸,減少產(chǎn)熱,停藥后,呼吸產(chǎn)熱增加下丘腦神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)促甲狀腺激素釋放激素、促甲狀腺激素、甲狀腺激素、腎上腺素不能增加減少【解題分析】
1、表格分析:與麻醉前比較,麻醉后布氏田鼠的耗氧量、產(chǎn)熱量、耳鼓膜溫度都有不同程度的下降,說明麻醉影響布氏田鼠的代謝,進而影響體溫變化。2、寒冷環(huán)境→皮膚冷覺感受器→下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞→增加產(chǎn)熱(骨骼肌戰(zhàn)栗、立毛肌收縮、甲狀腺激素等分泌增加),減少散熱(毛細血管收縮、汗腺分泌減少)→體溫維持相對恒定。3、在甲狀腺激素的分級調(diào)節(jié)中,下丘腦分泌促甲狀腺激素釋放激素,作用于垂體,使垂體分泌促甲狀腺激素,該激素作用于甲狀腺,使甲狀腺分泌甲狀腺激素;當甲狀腺激素含量過多時,會通過反饋調(diào)節(jié)抑制下丘腦和垂體的功能?!绢}目詳解】(1)體溫是產(chǎn)熱和散熱共同作用的結(jié)果,全麻后耳鼓膜溫度降低,可能是麻醉抑制細胞呼吸,使產(chǎn)熱減少。停藥后耳鼓膜溫度升高,可能是停藥后呼吸增強,產(chǎn)熱增加。(2)體溫調(diào)節(jié)中樞位于下丘腦,寒冷時體溫調(diào)節(jié)方式是神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié),寒冷時促甲狀腺激素釋放激素、促甲狀腺激素、甲狀腺激素、腎上腺素分泌增加,促進產(chǎn)熱,激素一旦發(fā)揮作用后就被滅活了,不能反復多次發(fā)揮作用。(3)炎熱時,通過出汗水分散失增加,細胞外液滲透壓增強,抗利尿激素分泌增加,促進腎小管和集合管對水分的重吸收,使尿量減少?!绢}目點撥】本題以實驗為載體,考查體溫調(diào)節(jié)的相關(guān)知識,意在考查學生能運用所學知識與觀點,通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理,做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論。10、aaXBXB和AAXbY67/9全為黑身黑身:白身=1:1【解題分析】
分析表中數(shù)據(jù)結(jié)果可知,雜交結(jié)果中黑身:灰身:白身=9:3:4,因此F1的雌雄個體均為雙雜合,又由于灰身均為雄性,因此B基因位于X染色體上,并且F1的基因型為AaXBXb和AaXBY,由于親本為純合的白身雌性果蠅和純合的灰身雄性果蠅,因此親本的基因型為aaXBXB和AAXbY?!绢}目詳解】(1)根據(jù)雜交結(jié)果可知,雜交結(jié)果中黑身:灰身:白身=9:3:4,因此F1的雌雄個體均為雙雜合,又由于灰身均為雄性,因此B基因位于X染色體上,并且F1的基因型為AaXBXb和AaXBY,由于親本為純合的白身雌性果蠅和純合的灰身雄性果蠅,因此親本的基因型為aaXBXB和AAXbY。(2)F2的黑身果蠅同時具有A和B,含有A基因的有AA和Aa兩種基因型,含有B基因的有XBXB、XBXb和XBY三種基因型,因此一共有2×3=6種基因型;F2的黑身果蠅隨機交配,先分析A、a這對等位基因,其中有1/3AA和2/3的Aa,隨機交配后代含A基因的占8/9,再分析B、b這對等位基因,其中雌性為XBXB和XBXb,雄性為XBY,后代不含B的概率為1/2×1/4=1/8,含B基因的概率為7/8,因此后代同時含有A和B,即為黑色的概率為7/8×8/9=7/9。(3)雜合的灰身雄性果蠅的基因型為AaXbY,根據(jù)題意可知,若為情況1,突變后果蠅的基因型為aaXbY,純合的黑身雌性果蠅的基因型為AAXBXB,雜交后代全為黑身;若為情況2,突變后果蠅的基因型為DdAaXbY,純合的黑身雌性果蠅的基因型為ddAAXBXB,雜交后代黑身:白身=1:1?!绢}目點撥】該題目涉及到伴性遺傳以及基因與染色體的位置關(guān)系相關(guān)考點,題目有一定難度。11、PCRClaⅠ(限制酶)和DNA連接A、D表達載體(或“重組質(zhì)?!保┧沫h(huán)素利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思毎孓D(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄【解題分析】
1、基因文庫包括cDNA文庫、基因組文庫等。某個群體包含一種生物所有的基因的文庫叫基因組文庫,而用某種生物發(fā)育的某個時期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補DNA片段屬于cDNA文庫。2、限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性。同種限制酶切割能夠產(chǎn)生相同的黏性末端,便于質(zhì)粒和目的基因連接?!绢}目詳解】(1)擴增目的基因常用PCR技術(shù)。切割獲得酶D基因和轉(zhuǎn)基因肽基因時,應(yīng)該用同種限制酶,以獲得相應(yīng)的黏性末端。因此,可用ClaⅠ限制酶和DNA連接酶處理兩個基因后,得到A、D端相連的融合基因。
(2)將上述融合基因插入右圖所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中,構(gòu)建基因表達載體即重組質(zhì)粒并導入農(nóng)桿菌中。由于質(zhì)粒上含有四環(huán)素抗性基因作為標記基因,所以將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落。(3)剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間,此過程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思毎?/p>
(4)提取上述轉(zhuǎn)基因油菜的mRNA,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下獲得cDNA,再依據(jù)融合基因的DNA片段設(shè)計引物進行
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