《化妝品中椰油酰甘氨酸鉀的測(cè)定 高效液相色譜法》征求意見稿

1T/GDAQIXXXX—XXXX化妝品中椰油酰甘氨酸鉀的測(cè)定高效液相色譜法本文件規(guī)定了用高效液相色譜法測(cè)定化妝品中椰油酰甘氨酸鉀含量的原理、試劑或材料、儀器和設(shè)含量、測(cè)式步驟和精密度。本文件適用于化妝水、乳液、膏霜類化妝品中椰油酰甘氨酸鉀的含量測(cè)定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1椰油酰甘氨酸鉀主要是由C8、C10、C12、C14、C16等多個(gè)或不等的碳鏈組分組成，其中C12和C14為主要成分。4原理試樣中的椰油酰甘氨酸鉀經(jīng)有機(jī)溶劑提取后用高效液相色譜分離，經(jīng)二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法定量。以椰油酰甘氨酸鉀對(duì)照品建立校準(zhǔn)曲線對(duì)試樣進(jìn)行定量分析；同時(shí)以月桂酰甘氨酸和肉豆蔻酰甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)品建立校準(zhǔn)曲線對(duì)對(duì)照品椰油酰甘氨酸鉀進(jìn)行定性定量分析，當(dāng)椰油酰甘氨酸鉀中同時(shí)具備有月桂酰甘氨酸鉀且含量在40%～70%和肉豆蔻酰甘氨酸鉀且含量在10%～30%時(shí)，才能確認(rèn)該對(duì)照品為椰油酰甘氨酸鉀，反之則不是。當(dāng)取樣量0.2g時(shí)，月桂酰甘氨酸鉀的檢出限為0.30%，定量限為0.80%；肉豆蔻酰甘氨酸鉀檢出限為0.50%，定量限為1.0%。5試劑或材料5.1甲醇：色譜純。5.2乙腈：色譜純。5.3甲酸：色譜純。5.4純化水：GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。5.5標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品5.5.1月桂酰甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)品：純度＞95%，CAS:7596-88-5，分子式：C14H27NO3；5.5.2肉豆蔻酰甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)品:純度＞95%，CAS:14246-55-0，分子式：C16H31NO3；5.5.3椰油酰甘氨酸鉀對(duì)照品：要求與樣品中添加的椰油酰甘氨酸鉀原料為同一廠家同一批次，以對(duì)照品中響應(yīng)最大的峰C12（月桂酰甘氨酸）做為目標(biāo)峰建立校準(zhǔn)曲線，CAS：301341-58-2。5.6混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取適量月桂酰甘氨酸和肉豆蔻酰甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)品于容量瓶中，加甲醇溶解并定容，配成1000μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，本溶液于常溫密封避光保存，在1個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定。5.7椰油酰甘氨酸鉀標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取適量椰油酰甘氨酸鉀對(duì)照品于容量瓶中，加甲醇溶解并定容，配成1000μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，本溶液于常溫密封避光保存，在1個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定。2T/GDAQIXXXX—XXXX5.8工作曲線溶液的配制：分別準(zhǔn)確移取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，用甲醇稀釋成質(zhì)量濃度為50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、500μg/mL、1000μg/mL的系列工作溶液，要求現(xiàn)配現(xiàn)用；椰油酰甘氨酸鉀工作曲線溶液的配制同上。6儀器和設(shè)備6.1高效液相色譜儀：帶二極管陣列檢測(cè)器。6.2分析天平：感量0.0001g。6.3漩渦震蕩器。6.4超聲波清洗器。6.5移液槍。7測(cè)試步驟7.1樣品制備7.1.1測(cè)定試樣中月桂酰甘氨酸和肉豆蔻酰甘氨酸2種組分：稱取0.2g(精確到0.0001g)試樣于100mL比色管中，用甲醇定容到刻度，通過(guò)超聲、渦旋、震蕩等方法，使樣品混合均勻。取上層清液（必要時(shí)離心）過(guò)0.45μm濾膜，濾液收集于液相小瓶中，待測(cè)。如果待測(cè)液中待測(cè)成分濃度超出“5.8”的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線范圍，應(yīng)稀釋到合適濃度范圍內(nèi)。7.1.2測(cè)定椰油酰甘氨酸鉀原料：稱取0.01g(精確到0.0001g)椰油酰甘氨酸鉀原料于10mL容量瓶中，用甲醇定容到刻度，通過(guò)超聲、渦旋、震蕩等方法，使樣品混合均勻。取上層清液（必要時(shí)離心）過(guò)0.45μm濾膜，濾液收集于液相小瓶中，待測(cè)。如果待測(cè)液中待測(cè)成分濃度超出“5.8”的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線范圍，應(yīng)稀釋到合適濃度范圍內(nèi)。7.2液相色譜分析參考條件色譜參考工作條件如下：a)色譜柱：C18柱(4.6×250mm，5μm)，或同等性能的色譜柱；b)柱溫：25℃或室溫；c)進(jìn)樣體積：10μL；d)流動(dòng)相：0.1%甲酸+乙腈（45+55），等度洗脫；e)流速：1.0mL/min；f)檢測(cè)波長(zhǎng)：205nm；g)色譜圖：見附錄圖A。7.3樣品測(cè)定7.3.1在“7.2”參考色譜條件下，取混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液“5.8”分別進(jìn)樣，進(jìn)行色譜分析，以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。7.3.2取“7.1”項(xiàng)下的待測(cè)液進(jìn)樣，進(jìn)行高效液相色譜儀分析，以保留時(shí)間和紫外光譜圖定性，以峰面積為定量，采用外標(biāo)法定量。根據(jù)上述標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測(cè)溶液中各測(cè)定組分的濃度，按“7.4”計(jì)算樣品中各待測(cè)組分的含量。注：椰油酰甘氨酸鉀原料判定要求為同時(shí)含有月桂酰甘氨酸鉀且含量在40%～70%和肉豆蔻酰甘氨酸鉀且含量在7.4分析結(jié)果的表述7.4.1試樣中各待測(cè)組分的含量按式（1）計(jì)算：………………………(1)式中:o——樣品中各待測(cè)組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（以酸計(jì)），%；3T/GDAQIXXXX—XXXXρ——從標(biāo)準(zhǔn)曲線上得到試樣中待測(cè)溶液中待測(cè)組分的質(zhì)量濃度，μg/mL；V——樣品定容體積,mL；m——樣品取樣量,g；計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。8精密度在重復(fù)條件下，獲得的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算數(shù)平均值的10%。4T/GDAQIXXXX—XXX