丙泊酚對(duì)大鼠急性腦損傷S100β蛋白、腦組織總鈣、含水量及組織形態(tài)學(xué)的影響

丙泊酚對(duì)大鼠急性腦損傷S100β蛋白、腦組織總鈣、含水量及組織形態(tài)學(xué)的影響目的：觀察丙泊酚對(duì)大鼠急性腦損傷S100β蛋白含量、腦組織總鈣含量、腦含水量及組織形態(tài)學(xué)的變化，探討丙泊酚對(duì)大鼠急性腦損傷腦組織的影響。方法：健康雄性SD大鼠84只采用隨機(jī)數(shù)字表法分為六組，每組14只（n=14）。假手術(shù)組（S組）、腦損傷組（I組）、脂肪乳組（F組）、丙泊酚低劑量組（L組）、丙泊酚中劑量組（M組）和丙泊酚高劑量組（H組）。采用改良Feeney法自由落體腦損傷裝置，制備大鼠腦損傷模型：SD大鼠采用10%水合氯醛以350mg/kg腹腔內(nèi)注射進(jìn)行麻醉，待其翻正反射、睫毛反射消失提示麻醉成功。將大鼠仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上，氣管切開插管，接小動(dòng)物呼吸機(jī)，潮氣量2～3ml/100g，通氣頻率50～60次/min，吸呼比1:2，分離左側(cè)股靜脈，并置管用于靜脈泵藥；分離右側(cè)頸總動(dòng)脈并置管用于采集血樣。動(dòng)、靜脈置管后，俯臥位固定大鼠，碘伏消毒皮膚，無菌操作，正中切開，剝離骨膜，暴露右頂骨，用牙科鉆在冠狀縫后1.5mm，中線旁2.5mm處鉆一直徑5mm骨窗，保持硬膜完整。墊片置于骨窗上，用20g砝碼于30cm高處沿著套管自由墜落，致右頂葉腦損傷，打擊力為600g·cm，打擊后用骨蠟封閉骨窗，縫合頭皮。S組僅顱骨開窗后用骨蠟封閉，不實(shí)施打擊，經(jīng)左側(cè)股靜脈以3.49mlkg-1h-1的速度持續(xù)泵注等容量的0.9%生理鹽水60min；I組在腦損傷模型制備成功后，經(jīng)左側(cè)股靜脈以3.49mlkg-1h-1的速度持續(xù)泵注等容量的0.9%生理鹽水60min；F組在腦損傷模型制備成功后，經(jīng)左側(cè)股靜脈以3.49mlkg-1h-1的速度持續(xù)泵注等容量的20%脂肪乳60min；L組、M組和H組在腦損傷模型制備成功后，經(jīng)左側(cè)股靜脈分別以17.46mgkg-1h-1、34.92mgkg-1h-1和69.84mgkg-1h-1的速度持續(xù)泵注丙泊酚60min。在腦損傷模型制備成功后，各藥物干預(yù)15min（T15）和60min（T60）時(shí)，每組隨機(jī)選取8只大鼠取動(dòng)脈血各1.5ml，檢測(cè)血清S100β蛋白含量，各藥物干預(yù)60min時(shí)迅速斷頭取腦，檢測(cè)腦組織總鈣含量及腦組織含水量；其余6只大鼠光鏡下觀察右側(cè)大腦皮層組織形態(tài)及病理學(xué)變化，其中2只大鼠電鏡下觀察右側(cè)大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果：1、一般情況：完成實(shí)驗(yàn)的84只大鼠，各組大鼠的體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2、血清S100β蛋白含量的比較：與S組比較，其余五組在T15和T60時(shí)血清S100β蛋白含量均明顯升高（P＜0.05）；與I組比較，在T15和T60時(shí)，L組、M組和H組血清S100β蛋白含量均顯著降低（P＜0.05）；與F組比較，在T15時(shí)和T60時(shí)L組、M組和H組血清S100β蛋白含量均顯著降低（P＜0.05）；與L組比較，在T15時(shí)H組血清S100β蛋白含量明顯升高（P＜0.05），在T60時(shí)M組和H組血清S100β蛋白含量均顯著降低（P＜0.05）；與M組比較，在T15和T60時(shí)H組血清S100β蛋白含量均明顯升高（P＜0.05）；與T15時(shí)比較，L組、M組和H組在T60時(shí)血清S100β蛋白含量均顯著減少（P＜0.05）。3、腦組織總鈣含量的比較：與S組比較，其余五組腦組織總鈣含量均明顯升高（P＜0.05）；與I組比較，L組、M組和H組腦組織總鈣含量均顯著降低（P＜0.05）；與F組比較，L組、M組和H組腦組織總鈣含量均顯著降低（P＜0.05）；與L組比較，M組和H組腦組織總鈣含量均顯著降低（P＜0.05）；與M組比較，H組腦組織總鈣含量明顯升高（P＜0.05）。4、腦組織含水量的比較：與S組比較，I組、F組和H組腦組織含水量均增多（P＜0.05）；與I組比較，L組腦組織含水量減少（P＜0.05）；與F組比較，L組腦組織含水量減少（P＜0.05）；與L組比較，H組腦組織含水量增多（P＜0.05）；與M組比較，H組腦組織含水量增多（P＜0.05）。5、大腦皮層組織光鏡結(jié)果比較：S組：細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)完整，細(xì)胞核無固縮，細(xì)胞無水腫；I組：細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)破壞，細(xì)胞核固縮，細(xì)胞嚴(yán)重水腫，神經(jīng)細(xì)胞變性壞死多見；F組：細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)破壞，細(xì)胞核固縮，細(xì)胞嚴(yán)重水腫，神經(jīng)細(xì)胞變性壞死多見，與I組無差別；L組：細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)不規(guī)整，細(xì)胞核固縮和神經(jīng)細(xì)胞變性壞死較I組和F組減少，細(xì)胞水腫較I組和F組減輕；M組：細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)較規(guī)整，細(xì)胞核固縮明顯減輕，神經(jīng)細(xì)胞變性壞死較I組和F組少見，細(xì)胞水腫較I組和F組明顯減輕，可見正常神經(jīng)細(xì)胞；H組：細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)不規(guī)整，細(xì)胞核固縮較I組和F組少見，細(xì)胞水腫較I組和F組減輕。丙泊酚各劑量組細(xì)胞核固縮、神經(jīng)細(xì)胞變性壞死以及細(xì)胞水腫程度M組最輕。6、大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)透射電鏡結(jié)果比較：S組：核膜規(guī)整，核仁均勻，染色質(zhì)均勻，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及線粒體無擴(kuò)張，無腫脹，線粒體嵴可見，突觸前膜、突觸后膜及突觸間隙清晰可見。I組：核膜不規(guī)則，嚴(yán)重內(nèi)陷，核固縮嚴(yán)重，染色質(zhì)聚集或邊集，線粒體明顯腫脹，空泡樣變，線粒體嵴斷裂，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)明顯擴(kuò)張或消失，數(shù)目減少，突觸前膜、突觸后膜不清晰，多數(shù)有融合，突觸間隙模糊不清。F組：核膜不規(guī)則，嚴(yán)重內(nèi)陷，核固縮嚴(yán)重，染色質(zhì)聚集或邊集，線粒體明顯腫脹，空泡樣變，線粒體嵴斷裂，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)明顯擴(kuò)張或消失，數(shù)目減少，突觸前膜、突觸后膜不清晰，多數(shù)有融合，突觸間隙模糊不清，與I組無差別。L組：核膜欠規(guī)則，內(nèi)陷不嚴(yán)重，核固縮，染色質(zhì)聚集或邊集，線粒體腫脹，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度擴(kuò)張，個(gè)別正常，突觸前膜、突觸后膜尚清晰，突觸間隙大致正常，少數(shù)有融合，突觸小泡增多不明顯。M組：核膜較規(guī)則，無明顯內(nèi)陷，偶見核固縮，染色質(zhì)較均勻，線粒體輕度腫脹，線粒體嵴可見，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度擴(kuò)張，數(shù)目增多，大多正常，突觸前膜、突觸后膜清晰，突觸間隙大致正常，少數(shù)有融合，突觸小泡明顯增多。H組：核膜較完整，內(nèi)陷不明顯，輕度核固縮，染色質(zhì)輕度聚集或邊集，線粒體輕度腫脹，線粒體嵴可見，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)明顯擴(kuò)張，數(shù)量增多，突觸前膜、突觸后膜尚清晰，突觸間隙大致正常，少數(shù)有融合，突觸小泡增多不明顯。結(jié)論：丙泊酚能夠減輕大