艾葉燃燒灰中有效成分抗自由基作用的研究

艾葉燃燒灰中有效成分抗自由基作用的研究

自由基是人類健康的主要敵人。它與人體器官和組織的反應(yīng)導(dǎo)致異常反應(yīng)，嚴(yán)重影響生物膜、酶、鈣、鎂和細(xì)胞的功能?，F(xiàn)在有許多疾病，如腫瘤、炎癥、心腦缺血和動(dòng)脈硬化與自由基有關(guān)。因此，抗自由基試劑通常被認(rèn)為是去除自由基的常用方法。目前，受關(guān)注的一般活性物質(zhì)、低毒、低毒或天然自由基試劑。艾葉燃燒生成物的甲醇提取物,有清除自由基作用,并且比人工合成的抗氧化劑BHT的抗氧化作用強(qiáng).但艾葉燃燒生成物中可清除自由基的是哪種成分,未見報(bào)道.本文分離得到艾葉燃燒灰燼中的幾個(gè)有效成分,對(duì)其抗自由基的作用進(jìn)行了研究.1材料和方法1.1試劑、儀器和測(cè)試劑艾葉原料產(chǎn)于湖北蘄春的地道中藥蘄艾的干燥葉;甲醇(分析純),天津科密歐化學(xué)試劑有限公司;甲基丙烯酸甲酯(分析純),中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑公司;過氧化二苯甲酰(BPO)(分析純),湖北大學(xué)化工廠.電子天平BS110S型,北京賽多利斯公司;數(shù)字顯示黏度計(jì)NDJ-8S,上海精密科學(xué)儀器有限公司.1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1種晶體的分離將艾葉燃燒灰燼溶于甲醇溶液,浸泡24h,粗濾,微孔濾膜精濾,蒸餾得到粗晶體,然后將粗晶體再次溶于甲醇溶液,用硅膠柱層析分離.分離的溶液依次分別濃縮結(jié)晶得到了3種晶體1號(hào)、2號(hào)、3號(hào).1.2.2實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化(1)黏度曲線的繪制分別稱取BPO(10、15、20mg)于3支小試管中,并于3試管中分別加入1mL的甲基丙烯酸甲酯溶液后置于80℃水浴中,黏度計(jì)下測(cè)量黏度.繪制黏度值與時(shí)間的曲線圖.(2)黏度曲線的繪制分別稱取相同質(zhì)量的BPO3份于3支小試管中,并于3試管中分別加入相同體積的甲基丙烯酸甲酯溶液,置于不同溫度(90、80、70℃)的水浴下,測(cè)量黏度.繪制黏度值與時(shí)間的曲線圖.1.2.3抗自由基能力測(cè)定按最佳配比,將BPO與甲基丙烯酸甲酯配成溶液,分別量取相同體積的溶液于5支小試管中.一份留作空白對(duì)照,另外幾份分別加入粗晶體和分離得到的晶體1號(hào)、2號(hào)、3號(hào).置于80℃水浴中,測(cè)量黏度.繪制黏度值與時(shí)間的曲線圖.以誘導(dǎo)期(黏度值與時(shí)間所繪制曲線的切線與橫坐標(biāo)的交點(diǎn))和單位質(zhì)量相對(duì)誘導(dǎo)期為指標(biāo)來評(píng)價(jià)抗自由基能力.單位質(zhì)量相對(duì)誘導(dǎo)期的計(jì)算公式為:單位質(zhì)量相對(duì)誘導(dǎo)期=樣品誘導(dǎo)期?空白誘導(dǎo)期樣品質(zhì)量=樣品誘導(dǎo)期-空白誘導(dǎo)期樣品質(zhì)量.2結(jié)果與討論2.1實(shí)驗(yàn)條件對(duì)誘導(dǎo)期的影響2.1.1bpo及甲基丙烯酸甲酯配比對(duì)bo誘導(dǎo)期的影響圖1顯示了BPO與甲基丙烯酸甲酯配比不同時(shí),黏度與時(shí)間的關(guān)系.由圖1中各曲線作切線得其誘導(dǎo)期,配比(mg∶mL)從10∶1、15∶1到20∶1的誘導(dǎo)期分別為38.17、26.88、23.89min.隨著引發(fā)劑量(BPO)的不斷增大,誘導(dǎo)期則不斷縮短.選取BPO與甲基丙烯酸甲酯配比為15mg∶1mL為實(shí)驗(yàn)的反應(yīng)條件.2.1.2溫度對(duì)誘導(dǎo)期的影響由圖2中各曲線作切線得水浴溫度為90、80、70℃時(shí)的誘導(dǎo)期分別為16.48、26.84、50.31min.隨著反應(yīng)溫度的不斷降低,誘導(dǎo)期則不斷延長(zhǎng).溫度太高,反應(yīng)條件不易控制;溫度過低,誘導(dǎo)期過長(zhǎng).選取80℃為實(shí)驗(yàn)的反應(yīng)溫度.2.2物理性能的誘導(dǎo)期在甲基丙烯酸甲酯的自由基聚合中,各樣品與BPO產(chǎn)生的自由基反應(yīng)而導(dǎo)致甲基丙烯酸甲酯的聚合速度減緩,這種現(xiàn)象主要體現(xiàn)在反應(yīng)的時(shí)間長(zhǎng)短上,可以通過誘導(dǎo)期的計(jì)算得出準(zhǔn)確的結(jié)果.各樣品晶體的誘導(dǎo)期見表1與圖3.由表1和圖3知,單位質(zhì)量的晶體2號(hào)的誘導(dǎo)期最長(zhǎng),其次是晶體3號(hào),粗晶體最差.說明了晶體2號(hào)的抗自由基作用最強(qiáng),但由于晶體1號(hào)在實(shí)際實(shí)驗(yàn)中得到的量比較多,質(zhì)譜與元素分析表明其分子量為526g/mol.,可以計(jì)算出單位摩爾的晶體1號(hào)的相對(duì)誘導(dǎo)期為0.583min/μmol.3單位質(zhì)量相對(duì)誘導(dǎo)期艾葉燃燒生成物的甲醇提取物,有清除自由基作用.本實(shí)驗(yàn)的粗晶體樣品相當(dāng)于大西基代實(shí)驗(yàn)所用材料,其單位質(zhì)量相對(duì)誘導(dǎo)期為0.2867min/mg.