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實(shí)驗(yàn)生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)鑒定1整理版思考題:1、糖類、脂肪、蛋白質(zhì)鑒定的實(shí)驗(yàn)原理2、常見的還原糖有哪些?取材的要求3、斐林試劑的組成,使用時(shí)的注意事項(xiàng)4、雙縮脲試劑的組成,使用時(shí)注意事項(xiàng)5、斐林試劑和雙縮脲試劑的比較6、脂肪鑒定中酒精的用法和作用7、脂肪鑒定中能否直接觀察顏色?借助什么來觀察?28、如何鑒定淀粉,顏整理版色反應(yīng)如何1.實(shí)驗(yàn)原理:化學(xué)試劑+有機(jī)化合物→特定的顏色還原糖+斐林試劑水浴加熱磚紅色沉淀脂肪+蘇丹Ⅲ→橘黃色脂肪+蘇丹Ⅳ→紅色蛋白質(zhì)
+
雙縮脲試劑
→紫色3整理版2、常見的還原糖有哪些?取材的要求還原糖:可被氧化充當(dāng)還原劑的糖。(常見的有:葡萄糖、果糖、麥芽糖、乳糖、半乳糖)注意:蔗糖不是還原糖3、斐林試劑的組成,使用時(shí)注意事項(xiàng)斐林試劑:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液使用注意事項(xiàng):等量混合,現(xiàn)配現(xiàn)用4(
NaOH+CuSO
)整理版
41.點(diǎn)撥:還原糖+斐林試劑磚紅色沉淀可溶性還原糖與斐林試劑發(fā)生作用,可生成磚紅色的Cu2O沉淀。(放在盛有50-65℃溫水的大燒杯)水浴加熱顏色變化:淺藍(lán)色棕色磚紅色5整理版1步驟:樣液制備:(取材5g,加入石英砂和5ml水)取樣液2ml于試管中加入新配制的斐林試劑1ml(和乙液等量混合均勻后再加入)盛有
50-65℃溫水的大燒杯)水浴加熱2min左右((4)觀察變化(淺藍(lán)色→棕色→磚紅色)整理版
6注意事項(xiàng):(1
)材料的選?。哼€原糖含量高,白色或近于白色,如蘋果》梨》
白蘿卜。思考:西瓜、甘蔗、甜菜可以嗎?為什么?(2)試劑:斐林試劑(等量混合、現(xiàn)配現(xiàn)用)甲液:0.1g/mL的NaOH溶液乙液:0.05g/ml的CuSO4溶液整理版
74、雙縮脲試劑組成,使用時(shí)注意事項(xiàng)8整理版雙縮脲試劑組成:A液:0.1g/mL的NaOH溶液
B液:0.01g/mL的CuSO4溶液,使用注意事項(xiàng):先加A液1mL于樣液中再加B液4滴于樣液中(1)蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑→紫色9整理版2步驟:試管中加樣液2mL加雙縮脲試劑A液1mL(造成堿性環(huán)
境),搖勻加雙縮脲試劑B液4滴,搖勻觀察顏色變化(紫色)注:①樣液濃度不宜過高,以免實(shí)驗(yàn)后黏住試管壁,洗不干凈。②B液不能過量,多余的B液會(huì)與A液反應(yīng)10成藍(lán)色,而掩蓋生成整的理版紫色。5.比較斐林試劑和雙縮脲試劑0.1g/mLNaOH0.01g/mLCuSO40.05g/m
同甲液LCuSO4還原性糖 蛋白質(zhì)等量混合后再加入先加A液1mL,搖勻,再加B液4滴50-65℃水浴加熱紫色絡(luò)合物不需加熱,搖勻11整理版磚紅色沉淀6、脂肪鑒定中酒精的用法和作用7、脂肪鑒定中能否直接觀察顏色?借助什么來觀察?12整理版3.脂肪+蘇丹Ⅲ→橘黃色脂肪+蘇丹Ⅳ→紅色13整理版(2)步驟材料的選取:含脂肪量高的組織,如花生的子葉。①取材:取一粒浸泡過的花生種子,去掉種皮②切片③制片:(切片越薄越好)將最薄的花生切片放在載玻片中央④染色:滴2~3滴蘇丹Ⅲ染液,染色3min,用吸水紙吸去染液,再滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色,再用吸水紙吸去多余的酒精(蘇丹Ⅲ易溶于酒精中,避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果),滴1~2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片⑤鏡檢觀察:光學(xué)顯微鏡對(duì)光→低倍鏡尋找著色圓形小顆?!弑剁R觀察整理染版成橘黃色的脂肪顆粒148、如何鑒定淀粉,顏色反應(yīng)如何15整理版4、淀粉
+
碘→藍(lán)色用試管取2mL待測(cè)組織樣液,向試管內(nèi)滴加1~2滴碘液,觀察顏色變化。加1~2滴碘液16整理版1.鑒定生物組織中可溶性還原糖的試劑B.雙縮脲試劑
D.蘇丹Ⅳ染液AA.斐林試劑C.蘇丹Ⅲ染液能與斐林試劑反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀的是A.淀粉
BB.果糖
C.蔗糖
D.纖維素下列哪個(gè)實(shí)驗(yàn)用到顯微鏡(
C
)A可溶性還原糖的鑒定
B.蛋白質(zhì)的鑒定C.脂肪的鑒定
D.淀粉的鑒定整理版
17B.淺藍(lán)色一磚紅色(沉淀)
C.淺藍(lán)色一藍(lán)色一磚紅色(沉淀)D.淺藍(lán)色一棕色一磚紅色(沉淀)5.下列物質(zhì)中,能被蘇丹IV染液染成)紅色的是(
A馬鈴薯塊莖
C.蛋清液4.用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時(shí),溶液顏色的變化過程為(
D
)
A.無色一磚紅色(沉淀)BB.浸軟的蓖麻種子
D.蘋果整理版
186.還原糖的實(shí)驗(yàn)中,加入斐林試劑時(shí)必須要
A.先加入斐林試劑甲液,后加入乙液
B.先加入斐林試劑乙液,后加入甲液
CC.將斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后再加
D.以上A、B、C三種操作方法都正確7.鑒定蛋白質(zhì)樣品時(shí)加雙縮脲試劑正確做法是AA.先加A液,混合后再加B液搖勻觀察
B.先加B液,混合后再加A液搖勻觀察
C.A、B液混合后加入,搖勻后觀察19D.A、B液同時(shí)加入樣液,搖勻后觀察整理版即:還原糖中的醛基(–CHO)被Cu(OH)2氧化,Cu(OH)2被還原成磚紅色的Cu2O沉淀還原糖的鑒定原理:20整理版5.比較斐林試劑和雙縮脲試劑0.1g/mL的NaOH溶液0.05g/mL的CuSO4溶液0.1g/mL的NaOH溶液0.01g/mLCuSO4溶液還原性糖蛋白質(zhì)甲液和乙液等量混合均勻后再加入先加雙縮脲試劑A液1mL,搖勻,再加雙縮脲試劑B液4滴50-65℃水
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