生化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)-第一組課件

13生物科學(xué)制作者：楊金標(biāo)&趙訸甲&陳姍姍&黃芳&黃溫馨&劉亞楠實(shí)驗(yàn)結(jié)果

（第

一 組）實(shí)驗(yàn)九 糖原的提取及鑒定的實(shí)驗(yàn)結(jié)果注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)用小動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)前必須飽食，因?yàn)樵诳崭箷r(shí)肝糖原易分解而是其含量減少。肝臟離體后，肝糖原會(huì)迅速分解，所以再殺死動(dòng)物后，所得肝臟必須迅速用三氯醋酸溶液處理。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私獠⒄莆胀僖旱矸勖富盍Φ臏y(cè)定方法二、實(shí)驗(yàn)原理唾液淀粉酶能催化水解淀粉，生成分子較小的糊精和麥芽糖。本實(shí)驗(yàn)利用碘的呈色反應(yīng)來(lái)測(cè)定唾液淀粉酶水解淀粉作用的速度，從而測(cè)定唾液淀粉酶活力的大小。三、實(shí)驗(yàn)儀器和試劑1.儀器（1）多孔白瓷板

（2）50mL三角瓶（3）恒溫水浴鍋（6）100mL容量瓶（4）燒杯（7）漏斗（5）500mL容量瓶（8）吸管2.試劑（1）原碘液：稱取碘11g、碘化鉀22g，加少量蒸餾水完全溶解后，定容至500mL，于棕色瓶中保存。（2）稀碘液：吸取原碘液2mL，加碘化鉀20g，用蒸餾水溶解，定容至500mL，于棕色瓶保存。（3）標(biāo)準(zhǔn)“終點(diǎn)色”溶液①準(zhǔn)確稱取氯化鈷40.2439g、重鉻酸鉀0.4878g，加蒸餾水溶解并定容至500mL。②準(zhǔn)確稱取鉻黑T

40mg，加蒸餾水溶解并定容至100mL。?、僖?0mL與②液10mL混合，即為終點(diǎn)色。冰箱保存。四、操作步驟（1）將“標(biāo)準(zhǔn)色”溶液滴于白瓷板的左上角空穴內(nèi)，作為比較終點(diǎn)色的標(biāo)準(zhǔn)。（2）在50mL的三角瓶中，加入2％可溶性淀粉溶液20mL，加緩沖液5mL在37℃水浴中平衡約10min，加入0.5mL稀釋唾液，立即記錄時(shí)間，充分搖勻。定時(shí)用滴管取出反應(yīng)液約0.25mL，滴于預(yù)先充滿此稀碘液（約0.75mL）的調(diào)色板空穴內(nèi)，當(dāng)空穴顏色由紫色變?yōu)樽丶t色，與標(biāo)準(zhǔn)色相同時(shí)，即為反應(yīng)終點(diǎn)，記錄時(shí)間T（min）。五、計(jì)算1mL

唾液淀粉酶于

37℃

、

pH 6.8的條件下，

1h

液化可溶性淀粉的克數(shù)，稱為唾液淀粉酶的活力單位。酶活力單位=（60/T×20×2％×n）/0.5n——唾液淀粉酶稀釋倍數(shù)

60——1h（60min）0.5——吸取待測(cè)唾液淀粉酶的量（mL）2％——淀粉濃度20—