生殖系統(tǒng)模型

生殖系統(tǒng)

—前列腺炎動物模型的建立1.建模意義:我國超過三分之一的男性都被前列腺炎糾纏，前列腺健康問題十分突出。而由于目前列腺炎治療方式落后、治愈率低、復(fù)發(fā)率高，造成很多患者都因?yàn)橹委煵划?dāng)惡化成了前列腺癌、尿毒癥等惡性疾病。通過在實(shí)驗(yàn)動物上建立病理學(xué)模型，借此研究前列腺疾病的發(fā)生開展，為獲得更好的治療手段和預(yù)防方法，如今已受到越來越多的重視2.定義:前列腺炎(Prostatitis)指發(fā)生于前列腺組織的炎癥。是指前列腺特異性和非特異感染所致的急慢性炎癥，從而引起的全身或局部病癥。由于前列腺在一定水平血睪丸酮作用下形成，女性僅找到組織胚胎學(xué)意義上的前列腺痕跡；沒有人體解剖學(xué)意義上的前列腺，前列腺炎屬于男性疾病。

3.建模依據(jù)：細(xì)菌性前列腺炎模型：主要用大腸桿菌注入大小鼠前列腺器官中制得。非細(xì)菌性前列腺炎模型：主要用化學(xué)制劑或生物制劑誘導(dǎo)而成。前列腺炎動物模型4.細(xì)菌性前列腺炎模型：建模方法目的原理本卷須知細(xì)菌性前列腺炎模型材料5.目的復(fù)制前列腺炎動物模型的細(xì)菌性前列腺炎模型原理通過手術(shù)途徑將大腸桿菌注入大鼠前列腺器官中，使大鼠前列腺發(fā)炎材料250-300g大鼠標(biāo)準(zhǔn)大腸埃希菌液外科手術(shù)器材6.取體重250-300g大鼠，腹腔麻醉，腹部去毛消毒后，沿腹壁中線切開皮膚和肌肉，打開腹腔，暴露附于膀胱頸外側(cè)的前列腺從前列腺背葉進(jìn)針，注入O．05ml大腸桿菌，碘伏棉球輕輕按壓針眼后縫合腹壁肌肉和皮膚，放回鼠籠，自由飲食在造模后第1、3、5和7d解剖大鼠，觀察大鼠前列腺大小、硬度和色澤、是否有粘連.并做病理切片，顯微鏡下觀察組織細(xì)胞的改變造模方法：7.大鼠前列腺左右兩側(cè)都可見腫大，約增加1／2,體積。左側(cè)前列腺可見少許深褐色斑點(diǎn)，右側(cè)除腫大外其他外觀沒有明顯改變前列腺左側(cè)（即注射側(cè)）腫大約為正常的3倍，右側(cè)腫大略小。左側(cè)顏色為灰黃色，質(zhì)地較硬。右側(cè)前列腺質(zhì)地稍軟，沒有光澤，失去紅潤前列腺左側(cè)腫大約為正常的2倍，質(zhì)地較硬，腺體顏色為灰黃色。右側(cè)腺體稍微腫大，質(zhì)地較軟，沒有光澤，組織表面顯蒼白兩側(cè)前列腺明顯萎縮，左側(cè)腺體明顯可見包裹的被膜，質(zhì)地略硬，顏色為灰黃色，右側(cè)腺體質(zhì)地較軟，沒有光澤，組織表面顯蒼白肉眼觀察結(jié)果：造模1d造模3d造模5d造模7dwps/moban8.切片HE染色結(jié)果:造模第一天：可見腺腔和間質(zhì)有些水腫，腺腔形態(tài)有些不規(guī)那么，間質(zhì)有炎癥細(xì)胞浸潤；造模三天：腺腔、間質(zhì)水腫，腔內(nèi)和間質(zhì)都有大量炎癥細(xì)胞浸潤；造模五天：腔內(nèi)和間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤增多，有膿腫形成，腺腔上皮細(xì)胞明顯壓扁，少數(shù)被破壞；造模七天，腔內(nèi)和間質(zhì)彌漫著炎癥細(xì)胞，多數(shù)需腺腔形成膿腫，局部腺腔上皮細(xì)胞被破壞，僅剩腺腔的輪廓wps/moban9.細(xì)菌性大鼠前列腺炎模型組織HE染色結(jié)果組別腺腔形態(tài)改變腔內(nèi)炎細(xì)胞浸潤間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤間質(zhì)水腫腺腔水腫肉芽組織正常－－－－－－造模1d＋＋－＋＋＋＋＋＋－造模3d＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋造模5d＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋造模7d＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋10.TextTet正常大鼠前列腺組織HE染色×100大腸桿菌造模7d大鼠前列腺組織HE染色×10011.本卷須知:必須嚴(yán)格無菌手術(shù)操作，防止手術(shù)繼發(fā)感染，影響模型建立。模型大鼠體重至少200g以上，以免因動物本身的前列腺過小及前列腺包膜薄嫩影響模型操作一二12.非細(xì)菌性前列腺炎模型自發(fā)性自身免疫性年齡相關(guān)遺傳傾向wps/moban13.目的復(fù)制前列腺炎動物模型的非細(xì)菌性前列腺炎模型。原理前列腺炎的發(fā)生與自體免疫有關(guān)的學(xué)說材料SD雄性大鼠雄性C57BL/6小鼠完全弗氏佐劑和百白破疫苗非細(xì)菌性前列腺炎模型：14.抗原制備：取240—260g的SD雄性大鼠，無菌獲得前列腺組織，清洗，勻漿，取上清液，蛋白定量；免疫佐劑:完全弗氏佐劑和百白破疫苗;成年雄性C57BL/6小鼠經(jīng)腹腔注射完全福式佐劑〔CFA〕0.5ml,第二日皮下注視0.5ml純化的SD大鼠前列腺抗原蛋白〔劑量為1.0g/L〕,同時腹腔注射百白破疫苗0.1ml。第8周時，模型動物可出現(xiàn)前列腺慢性炎癥病癥。造模方法：wps/moban15.剝離SD大鼠前列腺時盡可能把周圍組織剔除干凈以利于抗原制備的純化.1注射應(yīng)多點(diǎn)皮下注射，以減少局部刺激，加快藥液吸收，防止因局部刺激過大而造成局部組織壞死形成潰瘍等不良后果2本卷須知：16.實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定1.剖檢：前列腺呈飽滿、增大、質(zhì)軟。病程長者，前列腺縮小、變硬、不均勻，有小硬結(jié)。同時應(yīng)用前列腺按摩獲取前列腺液送檢驗(yàn)。2.前列腺液檢查：前列腺液白細(xì)胞>10個/高倍視野，卵磷脂小體減少，可診斷為前列腺炎。分段尿及前列腺液培養(yǎng)檢查：檢查前充分飲水，取初尿10ml(VB1)，再排尿200ml后取中段尿10ml(VB2)。此后，作前列腺按摩，收集前列腺液(EPS)