DB5307T 50-2023麗薯系列馬鈴薯原原種生產技術規(guī)程

ICS65.020.20CCSB21DB5307DB5307/T50—2023TechnicalProceduresofOrignalSeedProductionofPotatoLishuSeriesIDB5307/T50—2023本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由麗江市農業(yè)科學研究所提出。本文件由麗江市農業(yè)農村局歸口。本文件起草單位：麗江市農業(yè)科學研究所。本文件主要起草人：和習瓊、王菊英、和曉堂、方子松、李朝鳳、夏菊香、石濤、和平根、李光達、李昊、和立宣。DB5307/T50—2023麗薯系列馬鈴薯是麗江市主要推廣的馬鈴薯品種，為規(guī)范麗江市馬鈴薯原原種生產，打造最干凈種薯基地，麗江市農業(yè)科學研究所通過不斷摸索，整理出一套適合本地條件的馬鈴薯麗薯系列原原種規(guī)范化生產的關鍵技術，為加快關鍵技術在生產企業(yè)和新型經營主體的應用，特制定本規(guī)程。文件的發(fā)布機構提請注意，聲明符合本文件時，可能涉及到6.2條“一種組培接種用具冷卻及擺放支座”（中國實用新型專利，專利號ZL201420730394.1）及11.6條“馬鈴薯原原種生產過程中的植株調控方法”（中國發(fā)明專利，專利號ZL201610100706.4）專利。本文件的發(fā)布對于該專利的的真實性、有效性和范圍無任何立場。該專利持有人已經向本文件的發(fā)布機構承諾，他愿意同任何申請人在合理且無歧視的條款和條件下，就專利授權許可進行談判，該專利持有人的聲明已在本文件的發(fā)布機構備案，相關信息可通過以下聯系方式獲得：專利持有人姓名：麗江市農業(yè)科學研究所地址：麗江市古城區(qū)祥和路229號聯系電話注意除上述專利外，本文件的某些內容仍可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別這些專利的責任。1DB5307/T50—2023麗薯系列馬鈴薯原原種生產技術規(guī)程本文件規(guī)定了麗薯系列馬鈴薯原原種的術語和定義、脫毒試管苗組培室建設、培養(yǎng)基制作、接種、試管苗培養(yǎng)、原原種生產溫網室環(huán)境要求、移栽前的準備、移栽、移栽后管理、收獲、種薯分級及包裝、貯藏的技術要求。本文件適用于麗薯系列馬鈴薯原原種的生產。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB5084農田灌溉水質標準GB15618土壤環(huán)境質量農用地土壤污染風險管控標準（試行）GB18133馬鈴薯種薯GB20464農作物種子標簽通則GB/T29375馬鈴薯脫毒試管苗繁育技術規(guī)程GB/T29378馬鈴薯脫毒種薯生產技術規(guī)程3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1馬鈴薯麗薯系列以育成的麗薯系馬鈴薯品種麗1號、麗2號、麗6號、麗7號、麗10號等14個品種。3.2原原種符合GB18133馬鈴薯種薯標準，用于生產原種的種薯。3.3二次培養(yǎng)第一次培養(yǎng)的麗薯系列脫毒試管苗剪苗時留下最底部的腋芽，在原瓶加入營養(yǎng)液，再次放入培養(yǎng)室培養(yǎng)后，作為基礎苗再次擴繁。3.4免扦插法即不用扦插，直接將剪好的基礎苗節(jié)段均勻地撒入培養(yǎng)瓶中，倒入已滅菌營養(yǎng)液，蓋上瓶蓋放入培養(yǎng)室培養(yǎng)。4脫毒試管苗組培室建設2DB5307/T50—2023組培室建設在周圍沒有污染源，與大田隔離，具備向陽、通風、干燥、清潔的環(huán)境。應設置清洗室、更衣室、配置滅菌室、接種室、培養(yǎng)室等功能區(qū)，培養(yǎng)室面積按生產麗薯系列馬鈴薯試管苗3000株/m2~4000株/m2設計，接種室、組培室每25m2配備兩盞紫外燈或一臺臭氧發(fā)生機和一臺除濕機。5培養(yǎng)基制作5.1配制培養(yǎng)基母液：配方參見附錄A，硫酸亞鐵儲備液配制濃度為200倍，其余成分配制濃度為100倍。培養(yǎng)基：MS+白糖30g/L+卡拉膠（瓊脂）6g/L+活性碳粉1g/L+植物激素B9，pH5.8。調制過程：先加入除CaCl2外的其他母液，依次加入白糖、卡拉膠、活性炭粉、植物激素B9，用冷水調成糊狀，再加入燒開的自來水調制，加至2/3后，加入CaCl2母液，定容，用HCl（HNO3）或NaOH將pH值調至5.8。營養(yǎng)液：無固化劑3倍-4倍MS配方加適當植物激素B9，配制過程同上。5.2培養(yǎng)基分裝、滅菌和保存配制好的培養(yǎng)基分裝在組培瓶中，封裝后，在121℃、壓強103.4kPa條件下高壓蒸汽滅菌30min，冷卻后移入接種室或無菌室保存，培養(yǎng)基最好在滅菌后14d內用完，最多不超過30d。營養(yǎng)液分裝、滅菌和保存過程同上。6接種6.1接種前準備a)接種用具消毒：剪刀、鑷子用牛皮紙包好、扎緊，與培養(yǎng)基共同滅菌。b)接種室日常消毒：使用紫外燈或臭氧發(fā)生機消毒，干季每7d開一次，濕季每3d～5d開一次，紫外燈每次10h～12h，臭氧發(fā)生機每次0.5h～1h。每周用3.8%～5.1%84消毒液稀釋50倍清潔地板，接種室保持門窗緊閉?？諝鉂穸瘸^60%時，用除濕器除濕8h-24h。c)工作人員準備：用肥皂洗手，換上已消毒的工作服，戴醫(yī)用乳膠手套，操作前用75%酒精消d)設備消毒：接種前用75%酒精擦拭超凈工作臺及所有工具，準備兩套鑷子、剪刀，酒精浸泡30s后備用。啟動超凈工作臺及接種室紫外燈，20min～30min后關閉所有紫外燈。e)接種準備階段：從培養(yǎng)室取出已培養(yǎng)25d以上，無污染的麗薯系列基礎苗瓶，用75%酒精擦拭培養(yǎng)基瓶周身，方可放入工作臺。6.2接種將準備好的兩套滅菌后接種用具，交替插入高溫消毒器300℃,10s后拿出倒插在組培接種用具冷卻及擺放支座（專利號ZL201420730394.1）上冷卻備用。打開基礎苗瓶進行瓶內剪苗，一芽一段，剪苗部位選擇在腋芽往下莖桿2/3處，剪完后用鑷子分裝至新培養(yǎng)基瓶中，無需扦插，按0.6段/cm2-0.8段/cm2，計算單瓶接苗數，均勻平鋪在培養(yǎng)基上，添加5ml～10ml營養(yǎng)液后進行培養(yǎng)；剪苗后的原苗瓶添加5ml～10ml營養(yǎng)液，二次培養(yǎng)；接種完成后，所有的培養(yǎng)基瓶標注編碼轉移至培養(yǎng)架上培養(yǎng)。7試管苗的培養(yǎng)3DB5307/T50—2023苗瓶均勻整齊排放在培養(yǎng)架上，行間距留有3cm～5cm間隙。培養(yǎng)條件：白天溫度20℃~24℃,夜晚溫度16℃~18℃,光照時間10h/d～12h/d，光照強度2000Lux～3000Lux。污染瓶及時移出處理，室內消毒方法同6.1接種室消毒8原原種生產溫網室環(huán)境要求8.1溫網室外部環(huán)境要求宜選擇在麗江地區(qū)海拔2200m～3200m之間，氣候冷涼、給排水條件好的區(qū)域；周圍無大面積種植茄科植物或易吸引蚜蟲的作物；土壤質量應符合GB15618要求，水源符合農田灌溉水質標準GB5084要求。8.2消毒緩沖間地面每隔10d撒石灰粉0.1cm～0.2cm消毒；大棚生產工具專棚專用，防止病害交叉感染。9移栽前準備9.1大棚和苗床（基質）消毒大棚和苗床使用前1個月，使用98%棉隆微粒劑熏蒸20d,通風10d以上,詳細參見附錄B。9.2基質苗床鋪經滅菌的基質10cm～12cm，移栽前1d澆透苗床，對畦面進行耙松處理。10移栽10.1移栽時間移栽時間為3月底～8月上旬。10.2移栽密度移栽密度為120株/m2～140株/m2。10.3移栽試管苗標準培養(yǎng)15d～20d、苗高5cm～7cm、健壯無污染的脫毒試管苗。10.4移栽方法在苗床上橫向開4cm～5cm左右小溝，放入試管苗，由溝的兩邊往中間輕輕培土，盡量保證苗直立，定植深度3cm～4cm，移栽后及時以噴霧方式澆透定根水。11移栽后管理11.1遮陽4DB5307/T50—2023移栽試管苗5d～7d內，拉遮光率65%的遮陽網。11.2水份管理移栽試管苗5d～7d內，土壤含水量保持在80%以上，苗長新根后至開花期逐漸控水至土壤含水量60%，結薯期須增加土壤含水量至70%～80%，成熟期逐漸減少到50%～60%，收挖前適時停止?jié)菜寥篮康陀?0%后收挖。11.3環(huán)境溫度控制日間棚內溫度超過25℃時，需及時開窗通風散熱；后期如遇氣溫驟降需關棚保溫。11.4施肥根據苗情進行合理追肥1次～3次，每次施復合肥（17-17-17）3kg～8kg。11.5主要病、蟲害及草害防治馬鈴薯主要病、蟲害及草害防治方法參見附錄B11.6植株高度調控移栽后40d～50d，植株高度30cm～40cm時，采用“馬鈴薯原原種生產過程中的植株調控方法（ZL201610100706.4）進行調控，噴施1次～2次。12收獲完全成熟前兩周，選擇晴天進行收挖。當日晾曬待表皮干燥后剔除帶病、帶蟲及損傷塊莖再裝袋，每袋做好標記。13種薯分級及包裝分裝時按馬鈴薯原原種單薯重量進行分級，分級方法參見附錄C（馬鈴薯原原種重量分級表），分級包裝后，內外懸掛品種、等級、收獲日期等標簽。14貯藏使用冷庫儲藏，溫度調至2℃~7℃,種薯堆放高度不超過1.5m，行與行間留30cm通氣道。5DB5307/T50—2023（資料性）MS培養(yǎng)基配方表A.1MS培養(yǎng)基配方類別試劑分子量磷酸二氫鉀（KHPO）硼酸（HBO）糖6DB5307/T50—2023（