苦木生物堿的化學(xué)成分研究

苦木生物堿的化學(xué)成分研究

苦木d.donn.又名土雞和苦桐樹，屬于苦木科。20世紀(jì)七八十年代日本學(xué)者和中國學(xué)者對苦木的化學(xué)成分研究較多,證明其主要含有鐵屎米酮類生物堿、咔巴啉類生物堿和苦味素類化合物,藥理活性研究主要集中在抗菌、解熱、健胃、抗單純性皰疹病毒、降壓、抗心律失常、增加局部血流量、降低轉(zhuǎn)氨酶、抗蛇毒、抗瘧疾、抗癌等作用。《中國藥典》1977年版一部曾有收載,現(xiàn)有苦木總堿注射劑用于治療感冒、上呼吸道感染、急性扁桃體炎、腸炎、細(xì)菌性痢疾等疾病。為了進(jìn)一步研究苦木的活性成分,本實驗對苦木中的生物堿進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分及抗菌活性研究,現(xiàn)報道從苦木中分離鑒定的16個生物堿。分別是:5-甲氧基-鐵屎米酮(Ⅰ)、11-羥基-鐵屎米酮(Ⅱ)、鐵屎米酮(Ⅲ)、4,5-二甲氧基-鐵屎米酮(Ⅳ)、4-甲氧基-5-羥基-鐵屎米酮(Ⅴ)、3-甲基-鐵屎米-2,6-二酮(Ⅵ)、1-甲酰-4-甲氧基-β-咔巴啉(Ⅶ)、1-甲氧基-β-咔巴啉(Ⅷ)、1-乙基-4,8-二甲氧基-β-咔巴啉(Ⅸ)、1-甲氧甲酰-4-羥基-β-咔巴啉(Ⅹ)、1-甲基-4-甲氧基-β-咔巴啉(Ⅺ)、1-乙氧甲酰-β-咔巴啉(ⅩⅡ)、1-甲酰-β-咔巴啉(ⅩⅢ)、1-甲氧甲酰-β-咔巴啉(ⅩⅣ)、1-乙基-4-甲氧基-β-咔巴啉(ⅩⅤ)和1,2,3,4-tetrahydro-1,3,4-trioxo-β-carboline(ⅩⅥ)?；衔铫鞘状螐淖匀唤缰参镏蟹蛛x得到,化合物Ⅱ、Ⅷ、ⅩⅤ是首次從該屬植物中分離得到。1儀器和試劑Boetius熔點測定儀,Perkin-Elmer683型紅外光譜儀,Bruck400型核磁共振儀。各種色譜硅膠均為青島海洋化工廠生產(chǎn),SephadexLH-20購自SwedenGe-Healthcare,所用試劑均為分析純。苦木P.quassioides(D.Don)Benn.采自廣東省英德市,由煙臺大學(xué)藥學(xué)院趙燕燕老師鑒定。2環(huán)己烷-丙酮梯度萃取物的制備取干燥的苦木莖10.0kg,粉碎,用95%乙醇回流提取3次,每次1h,提取液合并,減壓濃縮得浸膏345g,將浸膏懸浮于水中,依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇反復(fù)萃取,將萃取液分別合并,減壓濃縮,得石油醚萃取物30g、氯仿萃取物110g,醋酸乙酯萃取物20g和正丁醇萃取物100g。取氯仿萃取物上硅膠柱,用環(huán)己烷-丙酮梯度洗脫(98∶2、96∶4、94∶6、92∶8、90∶10、87∶13、84∶16、80∶20、75∶25、70∶30、65∶35、60∶40、50∶50)。通過硅膠柱、SephadexLH-20柱反復(fù)柱色譜得化合物Ⅰ(12mg)、Ⅱ(340mg)、Ⅲ(16mg)、Ⅳ(12.6g)、Ⅴ(18mg)、Ⅵ(12mg)、Ⅶ(15mg)、Ⅷ(32mg)、Ⅸ(11mg)、Ⅹ(20mg)、Ⅺ(6mg)、ⅩⅡ(9mg)、ⅩⅢ(18mg)、ⅩⅣ(7mg)、ⅩⅤ(11mg)、ⅩⅥ(10mg)。3理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)化合物Ⅰ:無色針晶(甲醇),mp239~240℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。13C-NMR數(shù)據(jù)見表1。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的5-甲氧基-鐵屎米酮一致。化合物Ⅱ:無色針晶(丙酮),mp323~325℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。IRνKBrmaxmaxΚBr(cm-1):3228,1678,1637,1143。1H-NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:7.00(1H,d,J=10.0Hz,H-5),7.02(1H,d,J=8.0Hz,H-10),7.58(1H,td,J=8.0,0.8Hz,H-9),8.00(1H,d,J=8.0Hz,H-8),8.11(1H,d,J=5.0Hz,H-1),8.14(1H,d,J=10.0Hz,H-4),8.80(1H,d,J=5.0Hz,H-2),11.07(1H,s,C11-OH);13C-NMR數(shù)據(jù)見表1。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的11-羥基-鐵屎米酮一致?；衔铫?淡黃色棱晶(丙酮),mp155~156℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。13C-NMR數(shù)據(jù)見表1。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的鐵屎米酮一致。化合物Ⅳ:黃色針晶(丙酮),mp145~146℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。13C-NMR數(shù)據(jù)見表1。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的4,5-二甲氧基-鐵屎米酮一致?；衔铫?黃色針晶(丙酮),mp224~225℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。13C-NMR數(shù)據(jù)見表1。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的4-甲氧基-5-羥基-鐵屎米酮一致?；衔铫?桔紅色針狀結(jié)晶(氯仿),mp330℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性,13C-NMR數(shù)據(jù)見表1。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的3-甲基-鐵屎米-2,6-二酮一致?；衔铫?淡黃色針晶(丙酮),mp209~210℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。IRνKBrmax(cm-1):3365,1660,1597,1571。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:4.28(3H,s,C4-OCH3),7.39(1H,m,J=8.0Hz,H-7),7.58(1H,d,J=8.0Hz,H-8),7.58(1H,td,J=8.0,0.8Hz,H-6),8.27(1H,s,H-3),8.30(1H,d,J=8.0Hz,H-5),10.10(1H,s,-NH),10.22(1H,s,C1-CHO);13C-NMR數(shù)據(jù)見表2。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的1-甲酰-4-甲氧基-β-咔巴啉一致?；衔铫?黃色針晶(丙酮),mp258~259℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。IRνKBrmaxmaxΚBr(cm-1):3120,1658,1564,1265。1H-NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:4.21(3H,s,C1-OCH3),7.55(1H,t,J=8.0Hz,H-7),7.73(1H,t,J=8.0Hz,H-6),8.12(1H,d,J=5.0Hz,H-4),8.30(1H,d,J=8.0Hz,H-8),8.46(1H,d,J=8.0Hz,H-5),8.75(1H,d,J=5.0Hz,H-3),10.10(1H,s,-NH);13C-NMR數(shù)據(jù)見表2。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的1-甲氧基-β-咔巴啉一致?；衔铫?無色棱晶(丙酮),mp155~156℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。13C-NMR數(shù)據(jù)見表2。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的1-乙基-4,8-二甲氧基-β-咔巴啉一致。化合物Ⅹ:黃色棱晶(丙酮),mp241~242℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。13C-NMR數(shù)據(jù)見表2。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的1-甲氧甲酰-4-羥基-β-咔巴啉一致。化合物Ⅺ:無色粉末,mp179℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。IRνKBrmaxmaxΚBr(cm-1):3072,1624,1589。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:2.85(3H,s,C1-CH3),4.30(3H,s,C4-OCH3),7.33(1H,t,J=8.0Hz,H-7),7.58(1H,t,J=8.0Hz,H-6),7.58(1H,d,J=8.0Hz,H-8),8.32(1H,d,J=8.0Hz,H-5),8.20(1H,s,H-3),10.30(1H,s,-NH);13C-NMR數(shù)據(jù)見表2。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的1-甲基-4-甲氧基-β-咔巴啉一致?；衔铫?無色針晶(丙酮),mp123℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。13C-NMR數(shù)據(jù)見表2。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的1-乙氧甲酰-β-咔巴啉一致?；衔铫?黃色針晶(丙酮),mp198~200℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。13C-NMR數(shù)據(jù)見表2。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的1-甲酰-β-咔巴啉一致?；衔铫?無色針晶(丙酮),mp163℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。13C-NMR數(shù)據(jù)見表2。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的1-甲氧甲酰-β-咔巴啉一致。化合物ⅩⅤ:無色針晶(丙酮),mp177~178℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性。13C-NMR數(shù)據(jù)見表2。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的1-乙基-4-甲氧基-β-咔巴啉一致?；衔铫?黃色針晶(丙酮),mp320℃,碘化鉍鉀反應(yīng)呈陰性。IRνKBrmaxmaxΚBr(cm-1):3427,3066,1747,1664,1620。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:7.39(1H,t,J=8.0