水質(zhì)微生物檢測基礎(chǔ)

微生物根底知識

培訓(xùn)1整理ppt微生物的定義

微生物〔microorganism,microbe〕:存在于自然界中的一群體型細小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼看不見，必須借助于特殊儀器放大后才能觀察到的微小生物按其結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及生活習(xí)性可分為:★原核類:僅有原始核質(zhì)，無核仁或核膜，細胞器很不完善。如細菌、放線菌、支原體、立克次氏體、衣原體、螺旋體★真核類:細胞核的分化程度較高，有核膜、核仁和染色體，細胞器完整。如真菌〔酵母菌和霉菌〕、原生動物、藻類★非細胞類:體積微小，能通過除菌過濾器。如病毒和朊病毒等按其致病性可分為:★病原性微生物★非病原性微生物2整理ppt微生物的特點個體小,面積大：小于0.1mm。肉眼不可見。分布廣,種類多〔10萬多種〕：自然界中到處都有，如水、空氣、土壤等,土壤中的數(shù)量最多。代謝強，轉(zhuǎn)化快：發(fā)酵乳糖的細菌在1小時內(nèi)可分解其自重1000～10000倍的乳糖；產(chǎn)朊假絲酵母合成蛋白質(zhì)的能力比食用公牛強10萬倍生長旺，繁殖快：微生物有驚人的繁殖速度，大多數(shù)微生物幾十分鐘內(nèi)就可以繁殖一代適應(yīng)性強，易變異〔耐藥性產(chǎn)生的原因〕3整理ppt葡萄球菌

酵母菌〔芽痕〕棒狀桿菌大腸桿菌弧狀菌鏈球菌4整理ppt菌落單位菌落單位----CFU

由單個菌細胞或幾個同種菌細胞在培養(yǎng)基上長成肉眼可見的菌落，每個菌落就是1CFU光滑型菌落粗糙型菌落5整理ppt微生物的分布土壤：是微生物生活的最適環(huán)境水：僅次于土壤的微生物分布、定居的第二場所空氣：空氣中的微生物主要來源于帶有微生物菌體及孢子的灰塵，這類微生物大多數(shù)是腐生性的，還來源于人和動物，它們大多數(shù)是通過呼吸道排出的，其中也包含有病原微生物，懸浮在大氣中。

6整理ppt微生物的類群和形態(tài)結(jié)構(gòu)

一、細菌細菌是一類細胞細而短、結(jié)構(gòu)簡單、細胞壁堅韌，以二分裂方式無性繁殖的原核微生物，分布廣泛。細菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)〔1〕球菌多數(shù)球菌直徑在1微米左右，外觀呈球形或近似球形。由于繁殖時分裂平面不同可形成不同的排列方式，分為雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌等?！?〕桿菌形態(tài)多數(shù)呈直桿狀，也有的菌體稍彎，多數(shù)呈分散存在，也有的呈鏈狀排列，分為棒狀桿菌、鏈狀桿菌、球桿菌等?！?〕螺形菌菌體彎曲，呈弧形或螺旋形。如幽門螺桿菌。細菌雖小，仍具有一定的細胞結(jié)構(gòu)和功能。細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)和核質(zhì)等各種細菌都有，是細菌的根本結(jié)構(gòu)。7整理ppt球菌(coccus)腦膜炎奈瑟菌肺炎鏈球菌8整理ppt桿菌(bacillus)不同桿菌的大小、長短、粗細很不一致。炭疽芽胞桿菌3-10μm大中大腸埃希菌2-3μm小布魯菌0.6-1.5μm9整理ppt細菌的繁殖細菌生長速度很快，一般約20min分裂一次。假設(shè)按此速度計算，細菌群體將龐大到難以想象的程度。但事實上由于細菌繁殖中營養(yǎng)物質(zhì)的逐漸消耗，有害代謝產(chǎn)物的逐漸積累，細菌不可能始終保持高速度的無限繁殖。經(jīng)過一段時間后，細菌繁殖速度逐漸減慢，死亡菌數(shù)增多，活菌增長率隨之下降并趨于停滯。10整理ppt熱原與內(nèi)毒素許多細菌、病毒和真菌〔如酵母菌〕都能產(chǎn)生熱原。熱原是微量即可引起恒溫動物體溫異常升高的物質(zhì)的總稱。主要物質(zhì)為細菌內(nèi)毒素、胞壁酰二肽及其他抗原抗體復(fù)合物、半抗體原物質(zhì)和某些藥物〔類固醇〕等。1、細菌內(nèi)毒素一般指革蘭陰性細菌細胞壁的結(jié)構(gòu)成分，主要是脂多糖。2、細菌內(nèi)毒素生物學(xué)活性可分為兩類：一是致病作用，一是保護性反響。3、其他理化特性①耐熱性：120℃加熱4h，可破壞98%。180℃加熱2h或250℃加熱30min，才可徹底破壞。②濾過性：其體積小，約在1~5nm之間，故能通過濾器進入濾液中。③具有水溶性及不揮發(fā)性。④能被強酸、強堿和氧化劑破壞11整理ppt消毒與滅菌以下術(shù)語常用于表示物理或化學(xué)方法對微生物的殺滅程度消毒：殺死物體上病源微生物的方法,并不一定能殺死細菌的芽胞。消毒所用的試劑稱為消毒劑。滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒要求高，包括殺滅細菌芽孢在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。抑菌：抑制體內(nèi)或體外細菌的生長繁殖。常用的抑菌劑為各種抗生素，可抑制細菌的繁殖。防腐：防止或抑制體外細菌生長繁殖的方法，細菌一般不死亡。同一種化學(xué)藥品在高濃度時為消毒劑，低濃度時常為防腐劑。無菌：不存在活的細菌。防止細菌進入人體或其他物品的操作技術(shù)，為無菌操作。12整理ppt消毒與滅菌輻射滅菌法

1、紫外線：波長200-300nm的紫外線具有殺菌作用。穿透物質(zhì)的能力很差，一般要求紫外燈距離照射物不超過1.0米為宜

2、電離輻射高速電子、X射線、γ射線

3、微波波長1mm~1m熱力滅菌法：使蛋白質(zhì)、酶及核酸永久性破環(huán)，細胞膜溶解，導(dǎo)致細胞發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的死亡。1、干熱滅菌法—采用灼燒或干熱空氣滅菌，使用方便，適用于玻璃器皿和瓷器等耐高溫的固體物的滅菌。2、濕熱滅菌法—利用熱蒸汽殺死微生物。

高壓蒸汽滅菌：利用高溫高壓蒸汽進行滅菌的方法，蒸汽的穿透力較熱空氣強可以殺死一切微生物，包括細菌的芽孢，真菌的孢子或休眠體等耐高溫的個體。最可靠最適用最廣泛的滅菌方法。13整理ppt水質(zhì)微生物采樣·自來水：現(xiàn)將自來水龍頭用火焰燒灼3min，滅菌；再翻開水龍頭防水5min〔常用的水龍頭可以防水2~3min〕；采樣水置于無菌錐形瓶中，采樣總量占錐形瓶的80%左右，以便搖勻。·水源水：選取可疑及有代表性的水域，一般距離水面10~15cm采樣；河道水采樣時，將瓶口朝向、水流方向，在指定位置翻開瓶蓋?！げ蓸咏Y(jié)束后，樣品冷藏運輸，盡快檢測。14整理ppt樣品處理、實驗準(zhǔn)備、實驗步驟及報告詳見作業(yè)指導(dǎo)書15整理ppt染色16整理ppt革蘭氏染色法革蘭染色法是丹麥內(nèi)科醫(yī)生ChristainGram于1884年創(chuàng)立的一種細菌復(fù)染色方法，已有130多年的歷史，仍在廣泛使用。17整理ppt結(jié)晶紫盧戈碘液液95%乙醇復(fù)紅G-菌：類脂質(zhì)多肽聚糖少G+菌：肽聚糖多交聯(lián)度大類脂質(zhì)少通透性學(xué)說、等電學(xué)說、化學(xué)學(xué)說18整理ppt鑒別細菌：把細菌分成G+和G-兩大類。選擇抗菌藥物：例如G+球菌對青霉素敏感,G-桿菌耐藥。了解細菌的致病機理：G+菌大多產(chǎn)生外毒素,G-菌產(chǎn)生內(nèi)毒素。革蘭染色的步驟涂片→枯燥→固定→染色紫碘酒紅，分分半半意義19整理ppt滅菌接種環(huán)無菌操作↑細菌適宜

↑細菌較多①接種環(huán)取鹽水3ul×2滴,水滴間距小于2cm。②取菌苔少許〔1mm小菌落半個〕與鹽水混勻，涂成大于1cm2均勻涂膜。③涂畢→環(huán)移至涂膜中央側(cè)立，