GFP轉(zhuǎn)基因骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的定向誘導(dǎo)分化及腦內(nèi)移植的實(shí)驗(yàn)研究的開題報(bào)告

GFP轉(zhuǎn)基因骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的定向誘導(dǎo)分化及腦內(nèi)移植的實(shí)驗(yàn)研究的開題報(bào)告摘要：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）因其具有較好的增殖和分化潛能，而成為近年來(lái)廣泛研究的一個(gè)熱點(diǎn)。本研究旨在通過GFP轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將GFP基因?qū)隑MSCs中，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)其定向誘導(dǎo)分化為神經(jīng)細(xì)胞的能力的研究；同時(shí)探究其在小鼠腦內(nèi)移植后對(duì)腦組織修復(fù)作用的研究?！娟P(guān)鍵詞】GFP轉(zhuǎn)基因；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；定向誘導(dǎo)分化；腦組織修復(fù)一、研究背景：近年來(lái)，隨著干細(xì)胞治療的發(fā)展，BMSCs因其來(lái)源廣泛、可定向分化的特點(diǎn)在臨床及實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)用越來(lái)越廣泛。而其在神經(jīng)系統(tǒng)修復(fù)中的應(yīng)用，則是一個(gè)備受關(guān)注的熱點(diǎn)問題。BMSCs在體內(nèi)經(jīng)過定向誘導(dǎo)分化可被分化為神經(jīng)干細(xì)胞，而神經(jīng)干細(xì)胞再進(jìn)一步分化為神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，進(jìn)而在神經(jīng)組織修復(fù)中發(fā)揮作用。由于細(xì)胞的很多功能都是基因表達(dá)的結(jié)果，因此通過近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的基因轉(zhuǎn)染技術(shù)，向細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入外源性基因已經(jīng)成為了分子生物學(xué)研究的重要手段。而GFP作為一種典型的標(biāo)記基因，在分子生物學(xué)中得到了廣泛的應(yīng)用。GFP轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用，則可以通過GFP的熒光標(biāo)定，追蹤BMSCs在體內(nèi)的遷移和分化，從而為神經(jīng)系統(tǒng)修復(fù)的研究提供了重要的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。二、研究問題和研究目的：研究問題：BMSCs能否被定向誘導(dǎo)分化為神經(jīng)細(xì)胞？其在小鼠腦內(nèi)的移植后是否能起到修復(fù)腦組織的作用？研究目的：1.將GFP轉(zhuǎn)基因技術(shù)應(yīng)用于BMSCs中，標(biāo)定BMSCs在體內(nèi)遷移和分化的過程。2.探究BMSCs對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的定向誘導(dǎo)分化，研究其影響因素。3.將定向誘導(dǎo)分化后的BMSCs移植到小鼠腦內(nèi)，觀察其在腦組織修復(fù)中的作用。三、研究?jī)?nèi)容和研究方法：研究?jī)?nèi)容：1.在BMSCs中引入GFP轉(zhuǎn)基因，標(biāo)定其在體內(nèi)遷移和分化情況。2.通過定向誘導(dǎo)分化，將BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞方向發(fā)展，觀察其影響因素。3.將定向誘導(dǎo)分化后的BMSCs移植到小鼠腦內(nèi)，觀察其在腦組織修復(fù)中的作用。研究方法：1.通過臍帶血中的BMSCs提取BMSCs，經(jīng)過鑒定并增殖到一定程度。2.對(duì)BMSCs進(jìn)行GFP轉(zhuǎn)基因技術(shù)，標(biāo)定其在體內(nèi)的分化過程。3.通過添加神經(jīng)因子等化學(xué)物質(zhì)，將BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞方向誘導(dǎo)分化。4.通過從小鼠神經(jīng)系統(tǒng)損傷模型中選擇小鼠，對(duì)定向誘導(dǎo)分化后的BMSCs進(jìn)行腦移植實(shí)驗(yàn)，觀察其在小鼠腦內(nèi)的修復(fù)作用。四、預(yù)期研究結(jié)果和意義：預(yù)期研究結(jié)果：將GFP轉(zhuǎn)基因技術(shù)應(yīng)用于BMSCs中，標(biāo)定其在體內(nèi)遷移和分化的過程；探究定向誘導(dǎo)分化后的BMSCs能否成熟至神經(jīng)細(xì)胞；將定向誘導(dǎo)分化后的BMSCs移植到小鼠腦內(nèi)，觀察其對(duì)腦組織修復(fù)的作用。預(yù)期意義：1.為干細(xì)胞治療在神經(jīng)系統(tǒng)修復(fù)中的應(yīng)用提供重要的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。2.為神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和神經(jīng)退行性疾病