GFP轉(zhuǎn)基因骨髓間充質(zhì)干細胞的定向誘導分化及腦內(nèi)移植的實驗研究的開題報告

GFP轉(zhuǎn)基因骨髓間充質(zhì)干細胞的定向誘導分化及腦內(nèi)移植的實驗研究的開題報告摘要：骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSCs）因其具有較好的增殖和分化潛能，而成為近年來廣泛研究的一個熱點。本研究旨在通過GFP轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將GFP基因?qū)隑MSCs中，從而實現(xiàn)對其定向誘導分化為神經(jīng)細胞的能力的研究；同時探究其在小鼠腦內(nèi)移植后對腦組織修復作用的研究。【關(guān)鍵詞】GFP轉(zhuǎn)基因；骨髓間充質(zhì)干細胞；定向誘導分化；腦組織修復一、研究背景：近年來，隨著干細胞治療的發(fā)展，BMSCs因其來源廣泛、可定向分化的特點在臨床及實驗室中應(yīng)用越來越廣泛。而其在神經(jīng)系統(tǒng)修復中的應(yīng)用，則是一個備受關(guān)注的熱點問題。BMSCs在體內(nèi)經(jīng)過定向誘導分化可被分化為神經(jīng)干細胞，而神經(jīng)干細胞再進一步分化為神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞，進而在神經(jīng)組織修復中發(fā)揮作用。由于細胞的很多功能都是基因表達的結(jié)果，因此通過近年來發(fā)展起來的基因轉(zhuǎn)染技術(shù)，向細胞內(nèi)導入外源性基因已經(jīng)成為了分子生物學研究的重要手段。而GFP作為一種典型的標記基因，在分子生物學中得到了廣泛的應(yīng)用。GFP轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用，則可以通過GFP的熒光標定，追蹤BMSCs在體內(nèi)的遷移和分化，從而為神經(jīng)系統(tǒng)修復的研究提供了重要的實驗基礎(chǔ)。二、研究問題和研究目的：研究問題：BMSCs能否被定向誘導分化為神經(jīng)細胞？其在小鼠腦內(nèi)的移植后是否能起到修復腦組織的作用？研究目的：1.將GFP轉(zhuǎn)基因技術(shù)應(yīng)用于BMSCs中，標定BMSCs在體內(nèi)遷移和分化的過程。2.探究BMSCs對神經(jīng)細胞的定向誘導分化，研究其影響因素。3.將定向誘導分化后的BMSCs移植到小鼠腦內(nèi)，觀察其在腦組織修復中的作用。三、研究內(nèi)容和研究方法：研究內(nèi)容：1.在BMSCs中引入GFP轉(zhuǎn)基因，標定其在體內(nèi)遷移和分化情況。2.通過定向誘導分化，將BMSCs向神經(jīng)細胞方向發(fā)展，觀察其影響因素。3.將定向誘導分化后的BMSCs移植到小鼠腦內(nèi)，觀察其在腦組織修復中的作用。研究方法：1.通過臍帶血中的BMSCs提取BMSCs，經(jīng)過鑒定并增殖到一定程度。2.對BMSCs進行GFP轉(zhuǎn)基因技術(shù)，標定其在體內(nèi)的分化過程。3.通過添加神經(jīng)因子等化學物質(zhì)，將BMSCs向神經(jīng)細胞方向誘導分化。4.通過從小鼠神經(jīng)系統(tǒng)損傷模型中選擇小鼠，對定向誘導分化后的BMSCs進行腦移植實驗，觀察其在小鼠腦內(nèi)的修復作用。四、預期研究結(jié)果和意義：預期研究結(jié)果：將GFP轉(zhuǎn)基因技術(shù)應(yīng)用于BMSCs中，標定其在體內(nèi)遷移和分化的過程；探究定向誘導分化后的BMSCs能否成熟至神經(jīng)細胞；將定向誘導分化后的BMSCs移植到小鼠腦內(nèi)，觀察其對腦組織修復的作用。預期意義：1.為干細胞治療在神經(jīng)系統(tǒng)修復中的應(yīng)用提供重要的實驗基礎(chǔ)。2.為神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和神經(jīng)退行性疾病