有機(jī)酸柱使用手冊

有機(jī)酸分析柱使用手冊ChrompackOrganicAcidsColumn注意ChrompackOrganicAcids色譜柱填充的是聚合物材料，需要特殊的維護(hù)。向柱內(nèi)導(dǎo)入下列介紹了的以外的有機(jī)溶劑會造成聚合物材料膨脹和過分增壓。因此，你應(yīng)當(dāng)在安裝柱子以前，先用異丙醇，然后用0.1N的硫酸十分徹底地沖洗管路以徹底去除有機(jī)溶劑。在使用這個(gè)柱子之前，你要充足地熟悉這本手冊講述的內(nèi)容。未對的地使用不能享有保修待遇。介紹ChrompackOrganicAcids柱填充有氫形式的陽離子排斥樹脂，特別開發(fā)用于在低牙條件下分離涉及酒、果汁、奶制品、生物樣品、工業(yè)原料和環(huán)境樣品中的有機(jī)酸。洗脫推薦使用濃度范疇在0.002到0.05N的稀硫酸溶液。大多數(shù)的分析使用0.01N的硫酸（pH=±2.3）都能夠獲得成功。其它的強(qiáng)酸例如磷酸和高氯酸也能夠使用，但是鹵酸例如鹽酸不推薦使用，由于它們會腐蝕不銹鋼。當(dāng)有強(qiáng)酸用于柱子的洗脫液的時(shí)候，柱子就進(jìn)行了本身再生。因此，特別的再生環(huán)節(jié)是不需要的。但是這樣并不能直接對洗提強(qiáng)度和大多數(shù)有機(jī)酸的保存性質(zhì)進(jìn)行校正，較強(qiáng)的洗提強(qiáng)度普通只減少最后餾出的化合物的保存時(shí)間。在使用以前，全部的洗脫液都要用0.45μm濾膜過濾和脫氣。對于這個(gè)柱子，使用有機(jī)相修正，例如乙腈（最大20%），能夠縮短保存時(shí)間。這樣做，總是會造成背壓的升高。因此，較高的操作溫度和較低的洗提流速普通可用于避免產(chǎn)生過高壓力。注意，一旦對柱子使用了有機(jī)相修正，柱子就會保存使用了有機(jī)相修正的洗脫液的色譜特性，即使洗脫液已經(jīng)恢復(fù)到原始的100%的水相，柱子的性質(zhì)也不會回到當(dāng)時(shí)發(fā)貨時(shí)的狀態(tài)了。因此，如果你的應(yīng)用中涉及有芳香酸或不飽和酸，它們會出現(xiàn)較長的保存時(shí)間，我們推薦使用Chrompack的芳香酸柱（Cat.no.28352），它是專門設(shè)計(jì)用于這類化合物的。流量和壓力推薦用于ChrompackOrganicAcids柱的流量是0.3-0.8ml/min。任何狀況下洗脫流量都不能超出0.8ml/min，記住柱子壓力產(chǎn)生的因素有洗脫流速，柱溫，洗脫液的黏度等等。要限制洗提流速，使泵壓力不超出2200PSI。在45°C，0.6ml/min流速時(shí)，預(yù)期的壓力應(yīng)當(dāng)在600-1500PSI之間。如果在此條件下，柱壓超出了1200PSI，普通批示有污染物沉積在填充材料上，必須采用改正的方法。（樣品準(zhǔn)備保持柱子長壽的核心是進(jìn)樣前適宜的的樣品解決。你必須避免將脂肪，油脂，蛋白質(zhì)物質(zhì)和重金屬離子導(dǎo)入色譜柱，不管是流動相還是樣品。特別地，要嚴(yán)禁導(dǎo)入顆粒雜質(zhì)。這些最后都會造成操作壓力的增高并且非常困難或者不可能去除。生物樣品在注射以前必須除去蛋白質(zhì)。較好的除蛋白試劑是磺基水楊酸。柱前過濾器柱前過濾器含有0.5-2.0um的多孔不銹鋼燒結(jié)物，安裝在樣品注射器和柱子之間用于從洗脫液中去除顆粒物。這樣能夠避免分析柱產(chǎn)生壓力增高的問題，延長柱子的壽命。當(dāng)有保護(hù)柱的時(shí)候，柱前過濾器就能夠不用了。保護(hù)柱保護(hù)柱應(yīng)當(dāng)用在這個(gè)柱上，由于樣品和洗脫液污染可能會造成柱壓力的增高。樣品中諸如鹽和蛋白質(zhì)類的污染物可能會使柱效減少，在注射進(jìn)柱子以前應(yīng)當(dāng)去除。樣品量普通使用的樣品量在10-50微升的范疇內(nèi)，但是進(jìn)樣高達(dá)100微升應(yīng)當(dāng)沒有問題。進(jìn)樣500微升或者更多可能會造成峰變寬或者融合。溫度ChrompackOrganicAcids柱能夠在20-90°由于某些分離對溫度非常敏感，因此有必要認(rèn)真地操控溫度以優(yōu)化分離效果。如果在室溫使用這個(gè)柱子，洗脫流速必須減少保持泵壓不高于2200PSI。貯存柱子提供應(yīng)你的時(shí)候使用0.01N的硫酸作為平衡。這也是建議的用于貯存的洗脫液。柱子在保存的時(shí)候，一定要使用提供的螺絲和墊圈將端口密封。色譜柱必須以這種方式使用和保存，在任何時(shí)候都要確保不使柱床干涸。不對的的貯存（沒有密封）或不對的的使用，會造成填充材料部分地干涸，會發(fā)生高的柱壓。在這種情形下，能夠倒轉(zhuǎn)柱子，要以0.1ml/min的流速在90°逐步增加流速到0.5ml/min。你將會得到正常的壓力，柱子將能夠用于任意方向。如果這樣還不能解決問題，柱子可能有顆粒物或其它物質(zhì)的污染。柱效喪失的可能因素額外的峰展寬。要確保管路的長度和內(nèi)徑都保持最小。不對的的柱溫。不對的的洗脫流速。在開始洗脫的時(shí)候，平衡時(shí)間不夠。洗脫液的pH或離子強(qiáng)度不對的。不正常的陽離子（如Na+或H+）。聚合物污染。高柱壓隨著柱效減少。顆粒物積聚在燒結(jié)物或者聚合物床上。樣品來源---過濾或離心洗脫液來源---過濾洗脫液，封閉洗脫液容器。系統(tǒng)來源---沖洗整個(gè)系統(tǒng)管路和泵；安裝在線系統(tǒng)過濾器。蛋白質(zhì)類物質(zhì)的積聚微生物在樣品中生長。微生物在洗脫液中生長。正常柱壓隨著柱效減少金屬離子污染不確切的鋼合金存在于系統(tǒng)中。洗脫液含鹵素。在制備或者運(yùn)輸過程中洗脫液金屬離子污染。有機(jī)污染樣品中有脂肪，油脂，脂質(zhì)。聚合物的表面被覆蓋。從樣品中或者未對的制備的洗脫液中帶來的非特定的有機(jī)物。在洗脫液制備完畢后來帶入洗脫液中的非特定有機(jī)物，例如在運(yùn)輸時(shí)從大氣中帶來。8.床壓縮過高的洗提流速使用了不對的的有機(jī)相修正或其濃度過高。色譜柱再生使用稀硫酸（或其它強(qiáng)酸），普通這種洗脫液會將被樣品組分替代掉的氫離子補(bǔ)充回來而再生柱子。因此，不必要采用特別的再生環(huán)節(jié)。用于糾正聚合物污染或聚合物床壓縮的可能的操作制備新鮮的洗脫液在諸多狀況下，柱效的喪失會歸結(jié)為洗脫液的污染。因此，要在使用柱子以前要制備新鮮的洗脫液，沖洗全部液體管路。洗脫液在使用以前，應(yīng)當(dāng)用0.2到0.4微米的濾膜過濾。聚合物床的“放松”如果使用了不對的的高流速的話，諸多聚合物與硅膠連接會缺少硬度而能夠被壓縮或坍塌。然而，它們是能夠回彈的，在諸多狀況下，壓縮是能夠恢復(fù)的。要修復(fù)坍塌的聚合物床，關(guān)閉泵，使聚合物放松30分鐘。倒轉(zhuǎn)色譜柱，泵入洗脫液，0.1毫升流速，65°恢復(fù)色譜柱的正常條件。倒轉(zhuǎn)色譜柱如果柱效問題仍舊存在，能夠?qū)⒅拥罐D(zhuǎn)，用原則的操作條件在這個(gè)反方向操作。如果柱效恢復(fù)正常，繼續(xù)在這樣的狀態(tài)工作。如果沒有改善，聚合物可能就永久地污染了而需要更換。以下所述，清洗和再生環(huán)節(jié)的核心在某種意義下是從聚合物床上清洗污染物，從而恢復(fù)柱效。然而，重要的是在再次使用柱子之前要嘗試查找問題的本源。色譜柱清洗準(zhǔn)備25%乙腈的水溶液。設(shè)定柱溫為65°色譜柱再生準(zhǔn)備含0.05N的硫酸溶液。設(shè)定柱溫為65°色譜柱的檢查將柱溫恢復(fù)到正常。以正常的流速在正常分析條件下操作，但是要反方向。如果柱效沒有恢復(fù)，將柱子正方向安裝，重復(fù)以上環(huán)節(jié)。注意可能需要某些時(shí)間來使基線穩(wěn)定。7．色譜柱的更換以上環(huán)節(jié)只在某些狀況下能夠恢復(fù)柱效。對于這些解決手段，重金屬和某些有機(jī)物污染可能無效。在這