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茶多酚、大豆黃酮對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響
黃酮類(lèi)化合物廣泛存在于自然界。據(jù)研究,類(lèi)黃酮類(lèi)化合物具有改善血液循環(huán)、增強(qiáng)身體免疫、抗菌等作用?,F(xiàn)在人們對(duì)類(lèi)黃酮化合物的研究主要集中在具有二酚結(jié)構(gòu)的類(lèi)黃酮,由于二酚類(lèi)黃酮在芳香環(huán)上有對(duì)應(yīng)于雌激素C0位的羥基結(jié)構(gòu),所以在動(dòng)物體內(nèi)具有弱的雌激素作用,也常被稱(chēng)為植物雌激素。日糧中添加或皮下注射二酚類(lèi)黃酮物質(zhì),能顯著提高大鼠、肉仔雞、仔豬生產(chǎn)性能,但其效果似乎受動(dòng)物性別影響較大。茶多酚的主體為兒茶素,屬于多酚類(lèi)黃酮,具有很強(qiáng)的抗氧化和抗病毒、抗真菌等作用。目前尚未見(jiàn)到類(lèi)黃酮對(duì)蛋雞脂類(lèi)代謝影響的研究報(bào)道,本試驗(yàn)旨在研究日糧中添加2種類(lèi)黃酮對(duì)蛋雞脂類(lèi)代謝的影響。1材料和方法1.1試驗(yàn)材料選用茶多酚(95%),含79%兒茶素,由海南群力生物制藥有限公司惠贈(zèng)。大豆黃酮(98%),河北宣化化工廠惠贈(zèng)。1.2分組、研究方法及試驗(yàn)期限選用產(chǎn)蛋率、體重相近的30周齡海賽克斯褐殼蛋雞270只,采用單因素隨機(jī)試驗(yàn),隨機(jī)分為9個(gè)處理,每個(gè)處理5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)6只雞,預(yù)試期1周,正式試驗(yàn)從31周齡持續(xù)至38周齡,為期8周?;A(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。1.3雞舍光照測(cè)定采用密閉式雞舍,3層立體籠養(yǎng),同一列3個(gè)籠為一個(gè)重復(fù)單位,每個(gè)籠(30×45cm)分配2只蛋雞。同一處理的各重復(fù)均勻分布于雞舍。試驗(yàn)期雞舍溫度變化范圍12-21℃,濕度變化范圍50%-70%。白天為自然光照,早晚輔以人工照明,每日恒定光照為16h,光照強(qiáng)度為14lx。飼喂干粉料,自由采食、飲水。按常規(guī)防疫程序進(jìn)行防疫和雞舍消毒。1.4血樣的采集每日以重復(fù)為單位,記錄產(chǎn)蛋數(shù)、破殼蛋數(shù),總產(chǎn)蛋數(shù)減去破殼和軟殼蛋數(shù),計(jì)算產(chǎn)蛋率。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選2只雞前腔靜脈采血,離心后制備血漿(肝素鈉抗凝),用于血漿指標(biāo)分析,然后屠宰,取肝臟樣,用編號(hào)的硫酸紙包好(室溫-4℃),立即轉(zhuǎn)移到實(shí)驗(yàn)室后,-30℃冷凍保存,每個(gè)重復(fù)收集2枚雞蛋。上述每個(gè)重復(fù)內(nèi)的2只雞的樣品合二為一用與分析。1.5指標(biāo)和方法的測(cè)量1.5.1生產(chǎn)能指示器產(chǎn)蛋率、蛋重、采食量、飼料轉(zhuǎn)化率(料蛋比)。1.5.2總膽固醇ct、hdl-c、ldl-c和甘油試劑盒法,用TECHNICONRA-1000生化自動(dòng)分析儀測(cè)定。1.5.3血漿葡萄糖和雌激素用放射免疫法檢測(cè)血漿中胰島素、雌二醇水平,試劑盒購(gòu)自中國(guó)原子能科學(xué)院同位素所,儀器為FT-646A微機(jī)單頭放免儀。1.將含有30ml的詳細(xì)混淆粉末轉(zhuǎn)換為所有粉末的重量suviedprovilogy,mg,kgCu4.0,Fe40,Mn48,Zn40,I0.15,Se0.31。2.實(shí)測(cè)值的測(cè)定VA7800IU,VD32100IU,VE15IU,VK2.55mg,VB10.98mg,VB28.00mg,VB120.006mg,煙酸Niacin20.00mg,葉酸Folicacid0.97mg,泛酸鈣Pantothenicacid6.00mg,生物素Biotin0.12mg。*為實(shí)測(cè)值。Analyzedvalue.1.5.4肝脂肪氯仿-甲醇法。1.5.5pap法測(cè)定準(zhǔn)確稱(chēng)取1~2mg鮮蛋黃,用去離子水按1∶1稀釋,混勻,采用GPO-PAP法試劑盒測(cè)定。測(cè)定參數(shù):波長(zhǎng)550nm,光徑1.0cm,溫育溫度37℃,測(cè)定溫度25℃。測(cè)定儀器:UV-HP8452。1.6統(tǒng)計(jì)分析采用SAS6.12軟件包ANOVA模型進(jìn)行單因素方差分析,多重比較用DUNCAN法。2結(jié)果與討論2.1大豆黃酮添加量對(duì)黃酮產(chǎn)蛋率的影響日糧中添加茶多酚、大豆黃酮對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋率有不同程度的改善。隨著茶多酚添加水平升高,產(chǎn)蛋率有相應(yīng)提高的趨勢(shì),當(dāng)添加量為40mg/kg時(shí),產(chǎn)蛋率提高了5%,見(jiàn)表2。日糧中添加大豆黃酮對(duì)產(chǎn)蛋率有較大幅度提高,添加10mg/kg大豆黃酮時(shí),產(chǎn)蛋率顯著提高7.2%(P<0.05),日糧中添加40mg/kg大豆黃酮時(shí),產(chǎn)蛋率下降。從促進(jìn)生產(chǎn)性能和經(jīng)濟(jì)效益上考慮,添加10mg/kg大豆黃酮較好。日糧中添加這兩種類(lèi)黃酮物質(zhì),對(duì)蛋重沒(méi)有顯著作用(P>0.05)。茶多酚似乎有減少耗料量的趨勢(shì)。日糧中添加20mg/kg茶多酚和10mg/kg大豆黃酮,料蛋比達(dá)到最佳,分別為2.43和2.46。2.2外源激素對(duì)產(chǎn)蛋期雞蛋血工酶活性的影響本試驗(yàn)條件下,日糧添加茶多酚和大豆黃酮對(duì)血脂指標(biāo)沒(méi)有顯著影響(P>0.05),見(jiàn)表3。只是40mg/kg茶多酚和10mg/kg大豆黃酮3個(gè)處理組的血漿甘油三脂、總膽固醇和LDL-C表現(xiàn)出降低的趨勢(shì)。有研究表明,日糧添加40mg/kg茶多酚或10mg/kg大豆黃酮顯著降低血漿甘油三酯、總膽固醇和LDL-C(P<0.05)。本試驗(yàn)2種類(lèi)黃酮對(duì)血脂的影響不顯著,分析其原因可能是:(1)目前得出類(lèi)黃酮物質(zhì)降低血脂的研究大多是在機(jī)體雌激素水平不高或相對(duì)產(chǎn)蛋高峰蛋雞較低的動(dòng)物上進(jìn)行的,如去子宮小鼠、性不成熟的肉仔雞、雄性動(dòng)物或絕經(jīng)婦女,大豆黃酮或茶多酚在體內(nèi)的作用不涉及或很少涉及到與高水平雌激素相互作用。據(jù)報(bào)道,外源雌激素使未達(dá)到性成熟的蛋雞血脂升高,表明雌激素具有維持產(chǎn)蛋高峰期蛋雞高血脂的作用。(2)茶多酚、大豆黃酮對(duì)雌激素具有調(diào)節(jié)作用。大豆黃酮具有弱的雌激素作用和抗雌激素作用,其作用取決于體內(nèi)的雌激素水平,對(duì)于在體內(nèi)雌激素水平較低的個(gè)體表現(xiàn)出雌激素的作用,對(duì)于雌激素水平較高的個(gè)體則表現(xiàn)出抗雌激素作用,產(chǎn)蛋高峰期蛋雞體內(nèi)雌激素水平較高,大豆黃酮主要表現(xiàn)為抗雌激素的作用。據(jù)推測(cè)添加特定量大豆黃酮,使其與雌激素競(jìng)爭(zhēng)受體的同時(shí),又不至于引起雌激素反饋性分泌大量增加,其降血脂作用才可以充分地表現(xiàn)出來(lái),當(dāng)超過(guò)一定量時(shí),其抗雌激素作用引起體內(nèi)雌激素分泌大量增強(qiáng),則其對(duì)血脂的調(diào)節(jié)作用被雌激素保持高水平血脂的作用所掩蓋,無(wú)法表現(xiàn)出來(lái)。茶多酚不具有雌激素作用,但是其降血脂作用與雌激素維持高血脂的作用勢(shì)必會(huì)發(fā)生沖突,必須通過(guò)調(diào)節(jié)雌激素,消弱雌激素維持高血脂的作用,才能表現(xiàn)其作用。因此,對(duì)于產(chǎn)蛋高峰蛋雞,類(lèi)黃酮可能只有在特定添加量時(shí)才具有降血脂和調(diào)節(jié)脂蛋白水平功能。(3)產(chǎn)蛋高峰蛋雞,個(gè)體血脂水平變異較大,也是導(dǎo)致類(lèi)黃酮對(duì)蛋雞血脂影響不顯著的原因之一??傊?本試驗(yàn)2種類(lèi)黃酮未能顯著降低血脂,可能與蛋雞正處于產(chǎn)蛋高峰,血脂水平相對(duì)較高且變異較大,而且機(jī)體維持高水平血脂的能力很強(qiáng)有關(guān)。2.3其它指標(biāo)的影響日糧中添加茶多酚和大豆黃酮,顯著降低了蛋黃中甘油三酯的含量(P<0.05)。茶多酚降低蛋黃甘油三酯的最低有效劑量為10mg/kg,添加20mg/kg時(shí),甘油三酯含量降低了14.7%(P<0.05),添加量進(jìn)一步增加,甘油三酯水平?jīng)]有進(jìn)一步下降。大豆黃酮降蛋黃甘油三酯的最低有效劑量為5mg/kg,并在10-20mg/kg時(shí)甘油三酯含量達(dá)到一個(gè)穩(wěn)定點(diǎn),較對(duì)照組降低16.7%(P<0.05),見(jiàn)表4。隨著茶多酚添加水平升高,肝脂肪含量呈下降趨勢(shì)。大豆黃酮對(duì)肝脂肪的影響未表現(xiàn)出明顯的規(guī)律性。說(shuō)明茶多酚和大豆黃酮調(diào)節(jié)蛋雞脂類(lèi)代謝的機(jī)理并不完全一致,其中差別可能與二酚類(lèi)黃酮(大豆黃酮)具有弱的雌激素作用有關(guān),這方面有待于進(jìn)一步的研究。2.4代謝的2種主要激素對(duì)雞蛋生產(chǎn)性能和血脂水平的影響雌激素和胰島素是蛋雞體內(nèi)協(xié)調(diào)各種生理功能、調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝的2種最重要激素,與蛋雞生產(chǎn)性能和血脂水平密切相關(guān)??梢詮牟瓒喾印⒋蠖裹S酮對(duì)蛋雞血漿這2種激素水平的影響,揭示2種類(lèi)黃酮對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、脂質(zhì)代謝作用的可能機(jī)理。2.4.1大豆黃酮對(duì)雞血漿胰島素水平的影響從表5中可以看到,添加5mg/kg茶多酚、大豆黃酮對(duì)雌二醇水平?jīng)]有影響(P>0.05),茶多酚添加10mg/kg時(shí),雌二醇水平達(dá)到最高點(diǎn),較對(duì)照組提高96%(P<0.05)。大豆黃酮在添加10mg/kg時(shí),雌二醇水平顯著升高(P<0.05),并在添加20mg/kg時(shí),雌二醇水平達(dá)到最高點(diǎn),較對(duì)照組提高70%(P<0.05)。大豆黃酮具有弱的雌激素作用,其效能大約是雌二醇的1/500000,在體內(nèi)和雌二醇競(jìng)爭(zhēng)靶器官細(xì)胞膜上的受體,類(lèi)黃酮與雌激素受體結(jié)合,并產(chǎn)生弱的雌激素效應(yīng),這種弱的雌激素作用在一定濃度下會(huì)表現(xiàn)出抗雌激素活性。不同種動(dòng)物,同種動(dòng)物不同性別,同種性別不同的靶組織,同一靶組織不同的功能狀態(tài)以及給藥途徑,都會(huì)使二酚類(lèi)黃酮呈現(xiàn)出不同雌激素活性。放射免疫受體分析表明,飼喂3mg/kg大豆黃酮能使肉雞下丘腦、垂體的雌二醇受體(E2-R)的最大結(jié)合容量和平衡解離常數(shù)(Kd)有不同程度的提高,揭示了大豆黃酮能與下丘腦和垂體E2-R結(jié)合干擾內(nèi)源雌二醇的反饋調(diào)節(jié),從而影響內(nèi)源激素水平。這表明大豆黃酮可以首先通過(guò)提高靶組織雌二醇受體(E2-R)的最大結(jié)合容量和平衡解離常數(shù)來(lái)與雌激素受體結(jié)合,發(fā)揮自己的作用。隨著植物雌激素在動(dòng)物體內(nèi)的濃度增加,其取代雌激素與受體結(jié)合的程度越高。當(dāng)大豆黃酮超過(guò)這一限度時(shí),通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)受體,反饋調(diào)控雌激素的水平,使雌激素水平升高??梢钥闯?二酚類(lèi)黃酮實(shí)際上對(duì)雌激素具有雙重調(diào)節(jié)作用,以維持機(jī)體適宜的雌激素水平,雌激素通過(guò)與靶細(xì)胞結(jié)合,發(fā)揮其在體內(nèi)廣泛的調(diào)節(jié)作用。大豆黃酮能與下丘腦、垂體等E2受體不同程度地結(jié)合,影響動(dòng)物的神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的性軸,同時(shí)也影響生長(zhǎng)軸,增強(qiáng)機(jī)體同化作用。本試驗(yàn)中胰島素水平增強(qiáng)驗(yàn)證了這一觀點(diǎn)。茶多酚屬于多酚類(lèi)黃酮,它對(duì)雌激素的作用機(jī)理,目前尚不清楚,有待進(jìn)一步的研究。雌激素在下丘腦內(nèi)經(jīng)2-羥化酶的作用形成兒茶酚雌二醇或兒茶酚雌酮。這類(lèi)激素具有兒茶酚胺與雌激素的雙重作用,它可一方面通過(guò)抑制酪氨酸羥化酶與兒茶酚-0-位甲基轉(zhuǎn)換酶的活性,從而增強(qiáng)腦內(nèi)去甲腎上腺素的作用,促進(jìn)促性腺素釋放激素的釋放,另一方面,它又由于結(jié)構(gòu)上與雌激素相似,可在下丘腦、垂體同雌激素競(jìng)爭(zhēng)受體,抵消雌激素對(duì)下丘腦與垂體的負(fù)反饋?zhàn)饔?增加垂體對(duì)促性腺素釋放激素的敏感性。茶多酚主體為兒茶素,有可能在體內(nèi)通過(guò)影響兒茶酚胺或兒茶酚雌激素的合成,調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的活動(dòng)。日糧中添加茶多酚或大豆黃酮,顯著升高血漿胰島素水平(P<0.05),見(jiàn)表5,與先前報(bào)道的結(jié)果基本一致。茶多酚在添加10mg/kg時(shí),胰島素達(dá)到最高水平,比對(duì)照組提高120%(P<0.05)。大豆黃酮的添加量從20mg/kg升高到40mg/kg時(shí),胰島素水平突然升高20多倍,其機(jī)理有待于進(jìn)一步研究,其生理意義也有待于探討。2.4.2加強(qiáng)對(duì)組織中vtg、vldl-1、3-四氫-3-醇的誘導(dǎo)轉(zhuǎn)染,誘導(dǎo)細(xì)胞不轉(zhuǎn)引,一般可提高人體生物系統(tǒng)水平,有利于提高抗氧化性產(chǎn)蛋高峰蛋雞保持較高的產(chǎn)蛋率,機(jī)體同化作用很強(qiáng)。雌激素和胰島素水平在很大程度影響蛋雞的生產(chǎn)性能。雌激素調(diào)控多種脂蛋白和載脂蛋白在肝臟合成,這些脂蛋白和載脂蛋白對(duì)于蛋雞體內(nèi)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和蛋黃的形成至關(guān)重要。卵黃生成素(VTG)和VLDL是家禽蛋黃脂蛋白的主要前體,由肝臟合成,其基因轉(zhuǎn)錄受雌激素的調(diào)控,分泌進(jìn)入血液后,轉(zhuǎn)運(yùn)至卵母細(xì)胞,通過(guò)受體介導(dǎo)的胞吞作用被生長(zhǎng)中的卵母細(xì)胞吸收。家禽體內(nèi)VTG和VLDL兩種脂蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)對(duì)雌激素的作用都產(chǎn)生快速反應(yīng),雌激素不但誘導(dǎo)VTG的合成,也增加肝臟VLDL的合成。另外,雌激素極大地加強(qiáng)肝臟脂肪合成,以滿足卵黃生成素合成的需要。胰島素加強(qiáng)機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收,在蛋白質(zhì)、碳水化合物和脂類(lèi)物質(zhì)的代謝中發(fā)揮重要作用,加強(qiáng)脂類(lèi)物質(zhì)的合成,加強(qiáng)糖類(lèi)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為脂類(lèi)物質(zhì)以滿足現(xiàn)代高產(chǎn)蛋雞產(chǎn)蛋對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要。蛋雞產(chǎn)蛋高峰,體內(nèi)脂類(lèi)物質(zhì)合成、轉(zhuǎn)化及其轉(zhuǎn)運(yùn)非常強(qiáng),作為機(jī)體脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)渠道,血脂水平高就不難理解。類(lèi)黃酮是自然界中一類(lèi)重要的植物活性物質(zhì),是許多植物藥的主要活性成分。目前在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的大量研究中并未發(fā)現(xiàn)常規(guī)劑量的類(lèi)黃酮具有毒性作用。茶多酚、大豆黃酮分別是人類(lèi)飲食中的茶葉和大豆中的類(lèi)黃酮,具有更好的安全性,而且這兩種物質(zhì)對(duì)人體預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化有積極作用。當(dāng)然今后仍有必要對(duì)類(lèi)黃酮在蛋品中的沉積及對(duì)人類(lèi)健康的作用進(jìn)行深入研究。3降低血漿總膽固醇、糖脂質(zhì)和ldl-c、多糖含量3.1茶多酚和大豆黃酮兩種類(lèi)黃酮有提高產(chǎn)蛋率的作用,尤其是添加10mg/kg大豆黃酮時(shí),產(chǎn)蛋率顯著提高7.2%(P<0.05)。3.2茶多酚和大豆黃酮分別在添加40mg/kg和10mg/kg的添加量時(shí)有降低血漿總膽固醇、甘油三酯、LDL-C的作用,本試驗(yàn)此作用不顯著,可能與蛋雞高峰期血脂
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