egcg對(duì)營養(yǎng)性肥胖大鼠脂肪分布和代謝異常的預(yù)防作用

egcg對(duì)營養(yǎng)性肥胖大鼠脂肪分布和代謝異常的預(yù)防作用

香茶素素（ecgg）是茶葉的一種獨(dú)特的兒茶素。作為茶多酚的主體部分，兒茶素賦予了茶葉獨(dú)特的口感和保健功能。EGCG占茶多酚制品的40%～50%,被納入新興的醫(yī)藥食品應(yīng)用領(lǐng)域。多年來的研究發(fā)現(xiàn),EGCG對(duì)癌癥、肥胖、糖尿病、心血管疾病都具有預(yù)防功效,其中有關(guān)其抗腫瘤作用機(jī)制的研究較多,如EGCG抑制促癌劑作用,誘導(dǎo)p21表達(dá)抑制癌細(xì)胞的增殖,抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ、拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ等腫瘤相關(guān)酶活性,誘導(dǎo)癌細(xì)胞的凋亡,影響凋亡相關(guān)基因bc1-2表達(dá)等,關(guān)于EGCG對(duì)肥胖的影響目前國內(nèi)報(bào)道較少。為探討EGCG對(duì)肥胖的影響,本實(shí)驗(yàn)對(duì)肥胖高脂血癥模型大鼠給予EGCG,觀察其對(duì)動(dòng)物體重、體內(nèi)脂肪重量(睪丸及腎周圍脂肪墊)及血清和下丘腦瘦素水平的影響,探索EGCG更廣泛的功效作用,為其開發(fā)利用提供理論依據(jù)。1材料和方法1.1實(shí)驗(yàn)對(duì)象EGCG由上海諾德生物科技有限公司提供。1.2動(dòng)物飼料的制備基礎(chǔ)飼料由南京安立默科技有限公司提供,高脂飼料由80%基礎(chǔ)飼料、10%豬油和10%蛋黃粉組成。1.3模型動(dòng)物分組、模型設(shè)計(jì)及模型人工雄性健康成年SD清潔級(jí)大鼠(上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供)40只,體重180～210g,基礎(chǔ)飼料適應(yīng)喂養(yǎng)1周后,取8只動(dòng)物作為基礎(chǔ)飼料對(duì)照組,其余均給予高脂飼料。1個(gè)月后,高脂飼料大鼠按體重隨機(jī)分為模型對(duì)照組,EGCG低、中、高劑量組(分別給予EGCG50、100、300mg·kg-1)4個(gè)組?；A(chǔ)飼料對(duì)照組繼續(xù)進(jìn)食基礎(chǔ)飼料,其余各組繼續(xù)進(jìn)食高脂飼料?；A(chǔ)飼料對(duì)照組和模型對(duì)照組給予蒸餾水灌胃,EGCG各組給予相應(yīng)劑量的EGCG灌胃,均連續(xù)灌胃30d,灌胃容量為10mg·kg-1。各組動(dòng)物分籠飼養(yǎng),室溫控制在(22±2)℃,自然光照,自由進(jìn)食進(jìn)水,每周測(cè)體重和體長(zhǎng)1次,并計(jì)算Lee′s指數(shù),計(jì)算公式為:Lee′s指數(shù)=體重(g)×103體長(zhǎng)(cm)??????√3=體重(g)×103體長(zhǎng)(cm)330d后,大鼠股動(dòng)脈取血,分離血清,測(cè)定血清游離脂肪酸和血清瘦素。處死動(dòng)物,取腎和睪丸周圍脂肪墊組織,稱重。鈍性剝離大鼠顱骨,使大鼠腦部全部露出,用眼科剪輕輕取出下丘腦組織,-20℃冷凍,備測(cè)瘦素。1.4試劑盒和試劑盒血清游離脂肪酸測(cè)定采用比色法,試劑盒購自南京建成生物工程研究所。血清和下丘腦瘦素測(cè)定采用RIA法,試劑盒購自中國原子能科學(xué)研究院。1.5統(tǒng)計(jì)處理本次實(shí)驗(yàn)所收集的數(shù)據(jù)采用SAS軟件包進(jìn)行方差分析,各組間的比較分析采用Dunnett′st檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1大鼠肥模型模型成功的檢驗(yàn)見表1。由表1可見,實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),模型對(duì)照組動(dòng)物體重、睪丸周圍脂肪墊重量、睪丸周圍脂肪墊重量/體重值、腎周圍脂肪墊重量、腎周圍脂肪墊重量/體重值和Lee′s指數(shù)均高于基礎(chǔ)飼料對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),說明大鼠肥胖模型造模成功。同時(shí)EGCG低劑量組僅腎周圍脂肪墊重量、腎周圍脂肪墊重量/體重值低于模型對(duì)照組(P<0.05),而隨著劑量增加,睪丸周圍脂肪墊重量、睪丸周圍脂肪墊重量/體重值、腎周脂肪墊重量、腎周圍脂肪重量/體重值和Lee′s指數(shù)均較模型對(duì)照組進(jìn)一步降低(P<0.05),說明EGCG對(duì)肥胖大鼠具有減肥的作用,且有劑量依賴性。2.2各組大鼠血清游離脂肪酸和腦氧生物活性比較見表2。由表2可見,模型對(duì)照組動(dòng)物血清中游離脂肪酸和血清瘦素水平均高于基礎(chǔ)飼料對(duì)照組,且下丘腦瘦素水平低于基礎(chǔ)飼料對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。EGCG中、高劑量組血清游離脂肪酸和下丘腦瘦素水平與模型對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),EGCG高劑量組血清瘦素與模型對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。說明高脂飼料可以導(dǎo)致大鼠血清游離脂肪酸增高,EGCG可以降低繼續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料肥胖大鼠的血清游離脂肪酸水平,同時(shí)可降低血清中瘦素水平,提高下丘腦瘦素的水平。3ecgg對(duì)肥肥大鼠血清肥素的影響國內(nèi)長(zhǎng)期以來對(duì)EGCG的研究多集中于抗腫瘤、抗氧化、抗紫外輻射、抑菌除臭等方面,本實(shí)驗(yàn)研究彌補(bǔ)了國內(nèi)在EGCG對(duì)肥胖影響作用方面的空白。國外有實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),EGCG可以減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物食物的攝入量和脂肪的吸收量,有效地降低動(dòng)物體重及血脂、血清甘油三酯、膽固醇和血清瘦素水平,并能促進(jìn)能量消耗,加速脂肪氧化,提高高密度脂蛋白(HDL)水平,增加脂肪排泄,從而起到減肥的作用。本次研究參照衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》的有關(guān)實(shí)驗(yàn)方法,利用自行配制的高脂飼料喂養(yǎng)SD大鼠,成功建立了肥胖模型。在我們的實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn),EGCG可以降低肥胖大鼠血清瘦素的水平,但是過去的研究并未探討EGCG通過下丘腦神經(jīng)等對(duì)動(dòng)物減肥發(fā)揮作用的情況。在本次實(shí)驗(yàn)中我們觀察到EGCG對(duì)肥胖大鼠下丘腦瘦素具有干預(yù)作用。EGCG的減肥機(jī)制目前尚不清楚。有分子實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果提示,EGCG通過以下途徑發(fā)揮減肥作用:(1)降低消化酶活力,減少食物攝入和能量的吸收;(2)增加脂肪分解、氧化和燃燒;(3)調(diào)節(jié)脂蛋白的表達(dá);(4)減少前脂肪細(xì)胞和脂肪細(xì)胞的數(shù)量,使得體重下降。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,各EGCG劑量組大鼠的體重、脂肪重量/體重值、Lee′s指數(shù)均低于模型對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。瘦素是肥胖基因(ob)的編碼產(chǎn)物,它是由脂肪細(xì)胞分泌的一種循環(huán)激素,可以通過多種途徑發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。瘦素主要通過瘦素受體激活JAK-STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑來發(fā)揮作用,瘦素受體主要位于下丘腦,瘦素與下丘腦的瘦素受體結(jié)合后調(diào)節(jié)下丘腦的體重調(diào)節(jié)中樞,可引起食欲降低,能量消耗增加,促進(jìn)脂肪代謝,降低血清游離脂肪酸水平等。我們還發(fā)現(xiàn),各EGCG組下丘腦瘦素水平明顯高于模型對(duì)照組,表明EGCG在降低肥胖大鼠體重的同時(shí),提高了下丘腦瘦素受體結(jié)合瘦素的水平,從而提高了下丘腦中瘦素的水平,發(fā)揮其控制體重、減肥的作用,這可能是EGCG減肥作用的機(jī)制之一,但具體作用途徑有待于進(jìn)一步研究。茶在飲用食品中占據(jù)相當(dāng)重要的地位,尤其在我國擁有悠久的飲茶歷史,飲茶已成為人們心目中修身養(yǎng)性的佳品。隨著科技進(jìn)步,茶的功能和作用機(jī)制的研究日趨深入和完善。EGCG作為茶中重要的功