農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程 發(fā)芽試驗

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1.主題內(nèi)容與適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了種子發(fā)芽試驗的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于農(nóng)作物種子質(zhì)量的檢測。2引用標(biāo)準(zhǔn)

GB/T3543.2農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程扦樣GB/T3543.3農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程凈度分析3術(shù)語3.1發(fā)芽

在試驗室內(nèi)幼苗出現(xiàn)和生長達(dá)到一定階段，幼苗的主要構(gòu)造說明在田間的適合條件下能否進(jìn)一步生長成為正常的植株。3.2發(fā)芽率

在規(guī)定的條件和時間內(nèi)(見表1)長成的正常幼苗數(shù)占供檢種子數(shù)的百分率。3.3幼苗的主要構(gòu)造

因種而異，由根系、幼苗中軸(上胚軸、下胚軸或中胚軸)、頂芽、子葉和芽鞘等構(gòu)造組成。3.4正常幼苗

在良好土壤及適合水分、溫度和光照條件下，具有繼續(xù)生長發(fā)育成為正常植株的幼苗。

3.5不正常幼苗

生長在良好土壤及適合水分、溫度和光照條件下，不能繼續(xù)生長發(fā)育成為正常植株的幼苗。3.6復(fù)胚種子單位

能夠產(chǎn)生一株以上幼苗的種子單位，如傘形科未分開的分果，甜菜的種球等。3.7未發(fā)芽的種子

在表1規(guī)定的條件下，試驗?zāi)┢谌圆荒馨l(fā)芽的種子，包括硬實、新鮮不發(fā)芽種子、死種子(尋常變軟、變色、發(fā)霉，并沒有幼苗生長的跡象)和其他類型(如空的、無胚或蟲蛀的種子)。3.8新鮮不發(fā)芽種子

由生理休眠所引起，試驗期間保持清潔和一定硬度，有生長成為正常幼苗潛力的種子。4發(fā)芽床

按表1規(guī)定，尋常采用紙和砂作為發(fā)芽床。除6.2條所述的特別狀況外，土壤或其他介質(zhì)不宜用作初次試驗的發(fā)芽床。潮濕發(fā)芽床的水質(zhì)應(yīng)純凈、無毒無害，pH值為6.0-7.5。4.1紙床

4.1.1一般要求

具有一定的強(qiáng)度、質(zhì)地好、吸水性強(qiáng)、保水性好、無毒無菌、清潔清白，不含可溶性色素或其他化學(xué)物質(zhì)，pH值為6.0-7.5?？梢杂脼V紙、吸水紙等作為紙床。

4.1.2生物毒性測定

利用梯牧草、紅頂草、彎葉畫眉草、紫羊茅和獨行菜等種子發(fā)芽時對紙中有毒物質(zhì)繁感的特性，將品質(zhì)不明和品質(zhì)合格的紙進(jìn)行發(fā)芽比較試驗，依據(jù)幼苗根的生長狀況進(jìn)行鑒定。在表1規(guī)定的第一次計數(shù)時或提前觀測根部病癥。若根縮

短(有時出現(xiàn)根尖變色，根從紙上翹起，根毛成束)或(禾本科)幼苗的芽鞘扁平縮短等病癥，則表示該紙含有有毒物質(zhì)。4.2砂床

4.2.1一般要求

砂粒大小均勻，其直徑為0.05-0.80mm。無毒無菌無種子。持水力強(qiáng)，pH值為6.0-7.5。使用前必需進(jìn)行洗滌和高溫消毒?；瘜W(xué)藥品處理過的種子樣品發(fā)芽所用的砂子，不再重復(fù)使用。4.2.2生物毒性測定4.3土壤

土質(zhì)疏松良好、無大顆粒、不含種子、無毒無菌、持水力強(qiáng)、pH值為6.0-7.5。使用前，必需經(jīng)過消毒，一般不重復(fù)使用。5儀器與試劑5.1儀器

5.1.1數(shù)種設(shè)備

數(shù)粒板、活動數(shù)粒板、真空數(shù)種器或電子自動數(shù)粒儀等。5.1.2發(fā)芽器具

a.發(fā)芽箱：有光照、控溫范圍10-40℃。b.雅可勃遜發(fā)芽器。

c.發(fā)芽室：室內(nèi)具有可調(diào)理溫度和光照的條件。d.發(fā)芽器皿：發(fā)芽皿、發(fā)芽盤等。5.1.3冰箱5.2試劑

硝酸、硝酸鉀、赤霉酸、雙氧發(fā)。6試驗程序

6.1數(shù)取試驗樣品

從經(jīng)充分混合的凈種子中，用數(shù)種設(shè)備或手工隨機(jī)數(shù)取400粒。尋常以100粒為一次重復(fù)，大粒種子或帶有病原菌的種子，可以再分為50粒、甚至25粒為一副重復(fù)。

6.2選用發(fā)芽床

各種作物的適合發(fā)芽床已在表1中作了規(guī)定。尋常小粒種子選用紙床；大粒種子選用砂床或紙間；中粒種子選用紙床、砂床均可。

表1農(nóng)作物種子發(fā)芽的技術(shù)規(guī)定種名學(xué)名發(fā)芽床溫度初次計末次計附加數(shù)天數(shù)d數(shù)天數(shù)d說明124玉米ZeamaysL.紙間砂20-302025476.2.1紙床紙床包括紙上和紙間。

紙上(TP)是將種子放在一層或多層紙上發(fā)芽，紙可放在：a.培養(yǎng)皿內(nèi)。

b.光照發(fā)芽箱內(nèi)，箱內(nèi)的相對濕度接近飽和。c.雅可勃遜發(fā)芽器上。

紙間(BP)是將種子放在兩層紙中間?？捎靡韵路椒ǎ篴.另外用一層紙松松地蓋在種子上。b.紙卷，把種子均勻置放在潮濕的發(fā)芽紙上，再用另一張同樣大小的發(fā)芽紙覆蓋在種子上，然后卷成紙卷，兩端用皮筋扣住，豎放。紙間可直接放在保濕的發(fā)芽箱盤內(nèi)。6.2.2砂床砂床包括：

a.砂上(TS)：種子壓入砂的表面。

b.砂中(S)：種子播在一層平整的濕砂上，然后根據(jù)種子大小加蓋10-20mm厚度的松散砂。6.2.3土壤

當(dāng)在紙床上幼苗出現(xiàn)植物中毒病癥或?qū)τ酌玷b定發(fā)生懷疑時，為了比較或有某些研究目的，才采用土壤作為發(fā)芽床。6.3置床培養(yǎng)

按6.2的要求，將數(shù)取的種子均勻地排在潮濕的發(fā)芽床上，粒與粒之間應(yīng)保持一定的距離。在培養(yǎng)器具上貼上標(biāo)簽，按表1規(guī)定的條件進(jìn)行培養(yǎng)。發(fā)芽期間要經(jīng)常檢查溫度、水分和通氣狀況。如有發(fā)霉的種子應(yīng)取出沖洗，嚴(yán)重發(fā)霉的應(yīng)更換發(fā)芽床。見表１6.4控制發(fā)芽條件6.4.1水分和通氣

根據(jù)發(fā)芽床和種子特性決定發(fā)芽床的加水量。如砂床加水為其飽和含水量的60%-80%(禾谷類等中小粒種子為60%，豆類等大粒種子為80%)；如紙床，吸足水分后，瀝去多余水即可；如用土壤作發(fā)芽床，加水至手握土粘成團(tuán)，再手指輕輕一壓就碎為宜。發(fā)芽期間發(fā)芽床必需始終保持潮濕。發(fā)芽應(yīng)使種子周邊有足夠的空氣，注意通氣。特別是在紙卷和砂床中應(yīng)注意：紙卷須相當(dāng)疏松；用砂床和土壤試驗時，覆蓋種子的砂或土壤不要緊壓。6.4.2溫度

發(fā)芽應(yīng)按表1規(guī)定的溫度進(jìn)行，發(fā)芽器、發(fā)芽箱、發(fā)芽室的溫度在發(fā)芽期間應(yīng)盡可能一致。表1規(guī)定的溫度為最高限度，有光照時，應(yīng)注意不應(yīng)超過此限度。儀器的溫度變幅不應(yīng)超過±1℃。

當(dāng)規(guī)定用變溫時，尋常應(yīng)保持低溫16h及高溫8h。對非休眠的種子，可以在3h內(nèi)逐漸變溫。如是休眠種子，應(yīng)在1h或更短時間內(nèi)完成急劇變溫或?qū)⒃囼炓频搅硪粋€溫度較低的發(fā)芽箱內(nèi)。6.4.3光照

表1中大多數(shù)種的種子可在光照或黑暗條件下發(fā)芽，但一般采用光照。需光種子的光照強(qiáng)度為750-1250勒克司(Lx)，如在變溫條件下發(fā)芽，光照應(yīng)在8h高溫時進(jìn)行。

6.5休眠種子和處理

當(dāng)試驗終止還存在硬實或新鮮不發(fā)芽種子時，可采用以下一種或幾種方法進(jìn)行處理(詳見表1)。

6.5.1破除生理休眠的方法a.預(yù)先冷凍b.硝酸處理c.硝酸鉀處理

d.赤霉酸處理e.雙氧水處理f.去稃殼處理g.加熱枯燥

表2各種作物種子加熱枯燥的溫度和時間

作物名稱溫度，℃時間,d大麥，小麥30-353-5高粱302水稻405-7花生4014大豆300．5向日葵307棉花401煙草30-407-10胡羅卜、芹菜、菠菜、洋303-5蔥、黃瓜、甜瓜、西瓜6.5.2破除硬實的方法

a.開水燙種b.機(jī)械損傷

6.5.3除去抑制物質(zhì)的方法

甜菜、菠菜等種子單位的果皮或種皮內(nèi)有發(fā)芽抑制物質(zhì)時，可把種子浸在溫水或流水中預(yù)先洗滌，甜菜復(fù)胚種子洗滌2h，遺傳單胚種子洗滌4h，菠菜種子洗滌1-2h。然后將種子枯燥，枯燥最高溫度不得超過25℃。6.6幼苗鑒定

6.6.1試驗持續(xù)時間

每個種的試驗持續(xù)時間詳見表1。試驗前或試驗間用于破除休眠處理所需時間不作為發(fā)芽試驗時間的一部分。

假使樣品在規(guī)定試驗時間內(nèi)只有幾粒種子開始發(fā)芽，則試驗時間可延長7d，或延長規(guī)定時間的一半。根據(jù)試驗狀況，可增加計數(shù)的次數(shù)。反之，假使在規(guī)定試驗時間終止前，樣品已達(dá)到最高發(fā)芽率，則該試驗可提前終止。6.6.2鑒定

每株幼苗都必需按附錄A(補(bǔ)充件)規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行鑒定。鑒定要在主要構(gòu)造已發(fā)育到一定時期進(jìn)行。

在計數(shù)過程中，發(fā)育良好的正常幼苗應(yīng)從發(fā)芽床中揀出，對可疑的或損傷、畸形或不均衡的幼苗，尋常到末次計數(shù)。嚴(yán)重腐爛的幼苗或發(fā)霉的種子應(yīng)從發(fā)芽床中除去，并隨時增加計數(shù)。6.7重新試驗

當(dāng)試驗出現(xiàn)以下狀況進(jìn)，應(yīng)重新試驗。

a.懷疑種子有休眠(即有較多的新鮮不發(fā)芽種子)，可采用表2或6.5所述的方法進(jìn)行試驗，將得到的最正確結(jié)果填報，應(yīng)注明所用的方法。

b.由于真菌或細(xì)菌的曼延而使試驗結(jié)果不一定可*時，可采用砂床或土壤進(jìn)行試驗。如有必要，應(yīng)增加種子之間的距離。

c.當(dāng)正確鑒定幼苗數(shù)有困難時，可采用表1中規(guī)定的一種或幾種方法在砂床或土壤上進(jìn)行重新試驗。d.當(dāng)發(fā)現(xiàn)試驗條件、幼苗鑒定或計數(shù)有過錯時，應(yīng)采用同樣方法進(jìn)行重新試驗。

e.當(dāng)100粒種子重復(fù)間的差距超過表3最大容許差距時，應(yīng)采用同樣的方法行重新試驗。假使其次次結(jié)果與第一次結(jié)果相一致，即其差異不超過表4中所示的容許差距，則將兩次試驗的平均數(shù)填報在結(jié)果單上。假使其次次結(jié)果與第一次結(jié)果不相符合，其差異超過表4所示的容許差距，則采用同樣的方法進(jìn)行第三次試驗，填報符合要求的結(jié)果平均數(shù)。

表3同一發(fā)芽試驗四次重復(fù)間的最大容許差距

(2.5%顯著水平的兩尾測定)

平均發(fā)芽率最大容許差50%以上50%以下距992598369747

9658

9569

93-947-810

91-929-1011

89-9011-1212

87-8813-1413

84-8615-1714

81-8318-2015

78-8021-2316

73-7724-2817

67-7229-3418

56-6635-4519

51-5546-5020

表4同一或不同試驗室來自一致或不同送驗樣品間發(fā)芽試驗的容許差距

(2.5%顯著水平的兩尾測定)

平均發(fā)芽率50%以上50%以下98-992-395-974-691-947-1085-9011-1677-8417-24最大容許差距2345660-7625-41751-5942-508

7結(jié)果計算和表示

試驗結(jié)果以粒數(shù)的百分率表示。當(dāng)一個試驗的四次重復(fù)(每個重復(fù)以100粒計，相鄰的副重復(fù)合并成100粒的重復(fù))正常幼苗百分率都在最大容許差距內(nèi)(表3)，則其平均數(shù)表示發(fā)芽百分率。不正常幼苗、硬實、新鮮不發(fā)芽種子和死種子的百分率按四次重復(fù)平均數(shù)計算。正常幼苗、不正常幼苗和未發(fā)芽種子百分率的總和必需為100，平均數(shù)百分率修約到最近似的整數(shù)，修約0.5進(jìn)入最大值中。8結(jié)果報告

填報發(fā)芽結(jié)果時，須填報正常幼苗、不正常幼苗、硬實、新鮮不發(fā)芽種子和死種子的百分率。假使其中任何一項結(jié)果為零，則將符號“-0-〞填入該格中。同時還須填報采用的發(fā)芽床和溫度、試驗持續(xù)時間以及為促進(jìn)發(fā)芽所采用的處理方法。

表5同一或不同試驗室不同送驗樣品間發(fā)芽試驗的容許差距

(5%顯著水平的一尾測定)

平均發(fā)芽率最大容許差距

50%以上50%以下

99,22

97-983-43

94-955-74

91-938-105

87-