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文檔簡介
第二章 細菌的生理退出1上頁下頁返回退出醫(yī)學微生物學一、細菌的化學組成1、水:75-90%細胞重量2、有機物:C,H,O,N,P,S,蛋白質(zhì),脂類,核酸等3、無機離子:K、Na、Fe、Mg、Ca,等4、特有成分:肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、D型氨基酸、吡啶二羧酸、二氨基庚二酸(DAP)退出2上頁下頁返回退出第一節(jié) 細菌的理化性狀(自學)光學性質(zhì):半透明體,比濁法計數(shù)表面積大:直徑1μm葡萄球菌:
1cm3表面積60000cm2直徑1cm生物體:
1cm3表面積6cm2意義:物質(zhì)交換退出3上頁下頁返回退出二、細菌的物理性狀3
帶電現(xiàn)象退出4上頁下頁返回退出G+菌等電點為pH2-3G-菌等電點為pH4-5近中性或弱堿性環(huán)境中,細菌均帶負電荷,G+菌帶得更多意義:與細菌的染色反應、凝集反應、抑菌、殺菌作用密切相關。菌體成分50-80%為蛋白質(zhì)4
半透性物質(zhì)交換吸收營養(yǎng),排出廢物5
透壓高 ,G+菌(20-25大氣壓)大于G-
(5-6)菌意義:高鹽高糖保存食物退出5上頁下頁返回退出一、細菌的營養(yǎng)物質(zhì)水:營養(yǎng)物質(zhì)必須先溶于水,營養(yǎng)的吸收與代謝均需有水才能進行。氮源:來源于氨基酸、蛋白質(zhì)等,合成菌體成分。碳源:來源于糖類,提供能量。無機鹽:鉀、鈉、鈣、鎂、磷、硫等。生長因子:生長必需但自身不能合成的物質(zhì),如維生素、氨基酸等。退出6上頁下頁返回退出第二節(jié)細菌的營養(yǎng)與生長繁殖二、細菌攝取營養(yǎng)物質(zhì)的機制-自學被動擴散主動轉(zhuǎn)運三、細菌的營養(yǎng)類型-自學自養(yǎng)菌(autotroph)異養(yǎng)菌(heterotroph)病原菌都是異養(yǎng)菌退出7上頁下頁返回退出第二節(jié)細菌的營養(yǎng)與生長繁殖四、影響細菌生長的因素退出8上頁下頁返回退出營養(yǎng)物質(zhì)氫離子濃度(pH)多數(shù)病原菌最適pH為7.2~7.6溫度多數(shù)病原菌最適37℃4.氣體退出9上頁下頁返回退出(1)專性需氧菌
eg:結(jié)核分枝桿菌(2)微需氧菌低氧:5-6%,大于10%不生長eg:空腸彎曲菌、幽門螺桿菌(3)兼性厭氧菌大多數(shù)病原菌(4)專性厭氧菌eg:破傷風梭菌、脆弱類桿菌厭氧菌為什么不能在有氧的環(huán)境中生長?原因:缺乏過氧化氫酶、過氧化物酶、超氧化物歧化酶或氧化還原電勢高的呼吸酶類。5.
透壓嗜鹽菌需適量的氯化鈉退出10上頁下頁返回退出如:副溶血性弧菌需3%氯化鈉五、細菌的生長繁殖(一)細菌個體的生長繁殖1
方式:二分裂無性繁殖方式代時:細菌分裂數(shù)量倍增所需的時間。一般為20-30min例外:TB退出11上頁下頁返回退出12退出上頁下頁返回退出(二)細菌群體的生長繁殖(生長曲線)退出上頁下頁返回退出(1)遲緩期(2)對數(shù)期1-4h8-18h穩(wěn)定期:產(chǎn)生芽孢、外毒素和抗生素衰退期13細菌新陳代謝包括分解代謝與合成代謝分解代謝:營養(yǎng)物質(zhì)分解和轉(zhuǎn)化為能量的過程
合成代謝:所產(chǎn)生的能量和少數(shù)簡單的前體用于細胞組分的合成退出上頁下頁返回退出第三節(jié) 細菌的新陳代謝14第三節(jié) 細菌的新陳代謝一、細菌的能量代謝—自學1、EMP途徑(糖酵解)2、磷酸戊糖途徑3、需氧呼吸:以分子氧為受氫體的代謝過程1分子葡萄糖產(chǎn)生38分子ATP4、 厭氧呼吸:以其他無機物為受氫體的代謝過程退出1分子葡萄糖產(chǎn)生2分子ATP15上頁下頁返回退出二、細菌的代謝產(chǎn)物分解代謝產(chǎn)物和生化反應細菌對糖、蛋白質(zhì)的分解能力的不同,因而代謝產(chǎn)物各異,利用生物化學方法鑒
別不同細菌稱為細菌的生化反應。退出16上頁下頁返回退出第三節(jié) 細菌的新陳代謝糖發(fā)酵試驗:乳糖乳酸乳糖酶葡萄糖發(fā)酵試驗:細
菌葡萄糖
丙酮酸各種酸類甲解氫酶酸
H2
+
CO2退出17上頁下頁返回退出第三節(jié) 細菌的新陳代謝吲哚試驗(Indole
test):色氨酸氨基苯甲醛玫瑰吲哚甲基紅試驗(Methy
red
test):葡萄糖 丙酮酸乙酰甲基甲醇(中性)pH≥5.4pH≤4.5桔黃色:陰性紅
色: 陽性色氨酸酶退出18上頁下頁返回退出細菌 脫羧第三節(jié) 細菌的新陳代謝VP試驗:細菌脫羧氧化乙酰甲基甲醇葡萄糖丙酮酸枸櫞酸鹽利用試驗(Citrate
utilizatio):枸櫞酸鹽銨
鹽碳酸鹽
氨(堿性)含胍基化合物溴麝香草酚藍由淡綠變深藍退出19上頁下頁返回退出二乙酰紅色的化合物(
VP試驗陽性)第三節(jié) 細菌的新陳代謝IMViC試驗大腸桿菌:++--產(chǎn)氣桿菌:--++退出20上頁下頁返回退出硫化氫試驗:分解含硫氨基酸尿素酶試驗:分解尿素(二)合成代謝產(chǎn)物及其在醫(yī)學上的意義(1)熱原質(zhì)(pyrogen)/致熱原a)概念:熱原質(zhì)是細菌合成的、可引起人/動物發(fā)生發(fā)熱反應的物質(zhì)。多數(shù)G-菌:LPS退出21上頁下頁返回退出第三節(jié) 細菌的新陳代謝a)毒素B)性質(zhì):耐高熱、高壓蒸氣滅菌不被破壞
250℃干烤吸咐劑/特殊石棉濾板蒸餾法(2)毒素與侵襲性酶內(nèi)毒素:G-菌LPS,菌體死亡游退出22上頁下頁返回退出外毒素:多數(shù)G+菌,少數(shù)G-菌分泌產(chǎn)生的蛋白質(zhì)。離出來。第三節(jié) 細菌的新陳代謝b)侵襲性酶透明質(zhì)酸酶、鏈激酶、鏈道酶等(3)色素水溶性色素:銅綠假單胞菌脂溶性色素:金黃色葡萄球菌退出23上頁下頁返回退出第三節(jié) 細菌的新陳代謝抗生素大多由真菌和放線菌產(chǎn)生細菌素某些菌株產(chǎn)生的一類具有抗菌作用的蛋白質(zhì)。維生素大腸埃希菌:VitB、VitK退出24上頁下頁返回退出第三節(jié) 細菌的新陳代謝代謝產(chǎn)物的實際意義:供鑒別細菌的代謝產(chǎn)物細菌的生化反應細菌的色素:顏色、性質(zhì)(水溶性 脂溶性)細菌素與致病性有關的代謝產(chǎn)物毒素、侵襲性酶、熱原質(zhì)供治療用的代謝產(chǎn)物抗生素、維生素退出25上頁下頁返回退出第三節(jié) 細菌的新陳代謝三、細菌的分泌系統(tǒng)-自學細菌依賴分泌通路進行蛋白質(zhì)的跨胞質(zhì)膜轉(zhuǎn)運系統(tǒng)。四、細菌的免疫系統(tǒng)—自學限制修飾系統(tǒng)流產(chǎn)感染系統(tǒng)毒素-抗毒素系統(tǒng)CRISPR-Cas系統(tǒng)退出26上頁下頁返回退出第三節(jié) 細菌的新陳代謝第四節(jié) 細菌的人工培養(yǎng)-實驗課講退出27上頁下頁返回退出一、消毒滅菌的常用術語1、滅菌(sterilization)殺滅物體上所有微生物的方法,包括殺滅細菌芽胞、病毒和霉菌在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。2、消毒(disinfection)殺滅物體上或環(huán)境中的病原微生物、并不一定殺死細菌芽胞或非病原微生物的方法。退出28消毒劑(disinfectant):用以消毒的藥品上頁下頁返回退出第五節(jié) 抑制或殺滅微生物的理化因素3、防腐(antisepsis)退出其他物品的操作技術。29上頁下頁返回退出防止或抑制微生物生長繁殖的方法。細菌不死亡。防腐劑(antiseptic):用以防腐的藥物。4、清潔(cleaning)去除塵埃,減少微生物數(shù)量5、無菌:不存在活菌,多是滅菌的結(jié)果6、無菌操作:防止細菌及其他微生物進入人體或總目錄
下頁退出物理消毒滅菌法消毒、滅菌的方法一般可分為:熱力滅菌法干燥與低溫抑菌法化學消毒滅菌法30輻射殺菌法濾過除菌法二、物理消毒滅菌法(二)輻射殺菌法(一)熱力滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法紫外線
電離輻射微波(三)濾過除菌法退出上頁下頁返回退出二、物理消毒滅菌法31(一)熱力滅菌法退出上頁下頁返回退出1、干熱滅菌法①焚燒32②燒灼33退出上頁下頁返回退出退出③干烤④紅外線烤箱160℃2h,121℃16h170℃15
℃170℃15
℃170℃20
℃34上頁下頁返回退出同一溫度,濕熱好于干熱①菌體蛋白易凝固變性②穿透力大③蒸汽有潛熱效應,水由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時釋放潛熱潛退出上頁下頁返回退出熱2、濕熱滅菌法:35①巴氏消毒法(
pasteurization
):61.1~62.8℃
30min或71.7℃15~30s用于酒類、牛奶的消毒。②煮沸法2%碳酸氫鈉退出上頁下頁返回退出100℃,5-10min;加入2%碳酸氫鈉沸點為105℃,防金屬物品生銹。36③流動蒸汽消毒法退出上頁下頁返回退出
100℃,15-30min
不能殺滅全部細菌芽孢④間歇蒸氣滅菌法
100℃,15-30min,37℃過夜(3次)37⑤高壓蒸汽滅菌法103.4kPa(1.05kg/cm2)(121.3℃,維持15-20min
)滅菌效果最好。用于一般培養(yǎng)基、生理鹽水、手術敷料等退出上頁下頁返回退出耐高溫、耐濕物品的滅菌。38㈡ 輻射殺菌法1、紫外線:紫外線DNA T
-T二聚體波長:240-300nm,265-266nm最強DNA不能復制與轉(zhuǎn)錄變異與死亡39退出上頁下頁返回退出紫外線殺菌特點:
穿透力弱;
只能殺死細菌的繁殖體,不能殺死細菌的芽胞。
常用于空氣或不耐熱物品的表面消毒。40退出上頁下頁返回退出機制:干擾DNA的合成、破壞細胞膜、產(chǎn)生H2O2等特點:穿透力強,不升高溫度;用途:大量一次性醫(yī)用塑料制品、食品、藥品、生物制品的消毒。3、微波41退出上頁下頁返回退出2、電離輻射:包括β射線和γ射線(三) 濾過除菌法:退出上頁下頁返回退出
孔徑0.22μm或0.45μm濾膜。
用于血清、毒素、抗生素、空氣等的除菌。
不能除去病毒、支原體、衣原體和有些L型細菌。(五) 干燥與低溫抑菌法:
干燥法:保存食物
低溫:保存菌種。常用冷凍真空干燥法。42三、化學消毒滅菌法退出上頁下頁返回退出(一)殺菌機制1、促進菌體蛋白變性或凝固2、干擾細菌酶系統(tǒng)及代謝3、損傷菌細胞膜431、高效消毒劑范圍: 殺滅所有微生物(包括芽胞)適用:不耐熱,但要進入人體內(nèi)部物品舉例:含氯消毒劑;過氧化物、醛類和環(huán)氧乙烷
2、中效消毒劑范圍: 殺滅細菌繁殖體、真菌及大多數(shù)病毒適用:不耐熱,但要進入人體帶菌部位物品3、低效消毒劑退出上頁下頁返回退出范圍: 殺滅多數(shù)細菌繁殖體、部分真菌及病毒適用:物體及機體表面(二)根據(jù)殺菌能力分類44四、消毒滅菌的運用退出上頁下頁返回退出
醫(yī)療器械物品的消毒滅菌
室內(nèi)空氣消毒滅菌:紫外線、濾過除菌;化學消毒劑噴霧、熏蒸
手和皮膚消毒:75%乙醇、2%碘酊、0.5%洗必泰
黏膜消毒:3%H2O2、0.1%高錳酸鉀等、0.5%洗必泰
病人排泄物與分泌物:等量的20%漂白粉、5%石炭酸或2%來蘇兒攪拌均勻,作用2小時
病人污染物品的消毒
飲水消毒:氯氣、漂白粉
環(huán)境的消毒45五、影響消毒滅菌效果的因素退出上頁下頁返回退出
微生物種類;
微生物的生理狀態(tài);
微生物的數(shù)量;
消毒劑性質(zhì)、濃度與作用時間;多數(shù):高濃度殺菌作用強大乙醇例外:70-75%最好
溫度:溫度升高提高消毒效果
酸堿度;
有機物。46一、細菌的分類原則與層次傳統(tǒng)分類據(jù)生物學性狀分類種系分類(phylogenic
classification
)自然分類法
(natural
classification)以細菌的發(fā)育進化關
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