綠僵菌新制劑對(duì)花生主要天敵的田間防治效果

綠僵菌新制劑對(duì)花生主要天敵的田間防治效果

蠕蟲(chóng)屬于下一個(gè)金屬蟲(chóng)科。主要為害植物的地下部分,具有一定的隱蔽性且分布廣泛,其危害性在地下害蟲(chóng)中居首位,是一類世界性難防的地下害蟲(chóng)。目前危害我國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的花生蠐螬主要是銅綠異麗金龜(Anomalacorpulenta),暗黑鰓金龜(Holotrichiaparallela)和華北大黑鰓金龜(Holotrichiaoblita)。近年來(lái),蠐螬在我國(guó)主要花生產(chǎn)區(qū)山東、河南等省,發(fā)生面積擴(kuò)大,危害加重。傳統(tǒng)使用的高毒農(nóng)藥特丁硫磷、呋喃丹等因環(huán)境污染嚴(yán)重已被禁用,而替代化學(xué)農(nóng)藥辛硫磷、毒死蜱等用于防治花生蠐螬,亦存在土壤、水體污染問(wèn)題和殘留問(wèn)題。金龜子綠僵菌(Metarhiziumanisopliae)是一類重要的生防真菌,在生產(chǎn)上已得到廣泛應(yīng)用,全世界約有200多種昆蟲(chóng)能被綠僵菌的不同菌株感染致死。國(guó)外已有綠僵菌登記產(chǎn)品防治地下害蟲(chóng)的報(bào)道,國(guó)內(nèi)目前尚無(wú)蠐螬綠僵菌商業(yè)化制劑登記的報(bào)道。重慶大學(xué)于2007年從花生地蠐螬僵蟲(chóng)和土壤中分離得到一株高效抗逆的金龜子綠僵菌,編號(hào)CQMa128。依據(jù)形態(tài)學(xué)特征和分子鑒定序列比對(duì)結(jié)果將其鑒定為金龜子綠僵菌大孢變種(Metarhiziumanisopliaevar.majus)。室內(nèi)生測(cè)結(jié)果表明其對(duì)花生主要蠐螬種類銅綠異麗金龜、暗黑鰓金龜和華北大黑鰓金龜?shù)挠紫x(chóng)等都具有較高的致病力。本文研究了重慶大學(xué)研制的綠僵菌CQMa128微粒劑和乳粉劑對(duì)田間花生蠐螬的防治效果、使用技術(shù)以及對(duì)蠐螬主要天敵昆蟲(chóng)臀鉤土蜂(Tiphiidae)的影響,以期為開(kāi)發(fā)安全有效的綠僵菌生物制劑奠定基礎(chǔ)并提供試驗(yàn)依據(jù)。1材料和方法1.1與前作生長(zhǎng)關(guān)聯(lián)的花生及安全性試驗(yàn)田間試驗(yàn)設(shè)在山東省日照市三莊鎮(zhèn)“千畝國(guó)家無(wú)公害花生示范生產(chǎn)基地”(E119°27′,N36°47′)。前作均為花生,常年蠐螬發(fā)生嚴(yán)重,蠐螬蟲(chóng)口基數(shù)15~26頭/m2。試驗(yàn)地花生品種為主栽大花生抗病優(yōu)良品種‘日花1號(hào)’?；ㄉ擉┲饕獮殂~綠異麗金龜和暗黑鰓金龜幼蟲(chóng)。試驗(yàn)區(qū)土壤為沙質(zhì)土,肥力中等,pH為5.5~6.5。1.2產(chǎn)品及藥劑10億孢子/g綠僵菌CQMa128微粒劑(農(nóng)藥劑型代碼:MG);100億孢子/g綠僵菌CQMa128乳粉劑(農(nóng)藥劑型代碼:EP);上述供試產(chǎn)品全部由重慶大學(xué)生物工程學(xué)院研制,委托重慶重大生物技術(shù)發(fā)展有限公司生產(chǎn)。對(duì)照化學(xué)藥劑:15%毒死蜱顆粒劑(山東聯(lián)合農(nóng)藥有限公司);48%毒死蜱乳油(山東聯(lián)合農(nóng)藥有限公司)。毒死蜱是一種高效、低毒、低殘留的有機(jī)磷含氮雜環(huán)類殺蟲(chóng)殺螨劑,對(duì)地下害蟲(chóng)具有較好的防治效果?？瞻讓?duì)照為不施藥,微粒劑以相同數(shù)量的沙土替代;乳粉劑以相同數(shù)量的清水替代。1.3調(diào)查方法及調(diào)查條件(1)花生播種期(2009年4月及2010年4月施藥),采用10億孢子/g綠僵菌CQMa128緩釋型微粒劑對(duì)花生田中2008年和2009年越冬的3齡蠐螬老熟幼蟲(chóng)進(jìn)行防控,施藥劑量分別為225、300、375kg/hm2,采用拌土方式進(jìn)行施藥處理,并設(shè)15%毒死蜱顆粒劑15kg/hm2化學(xué)藥劑對(duì)照和沙土空白對(duì)照,定期調(diào)查田間蟲(chóng)口數(shù)量變化。整個(gè)試驗(yàn)共設(shè)20個(gè)小區(qū),分為5個(gè)區(qū)組。每小區(qū)設(shè)1個(gè)處理,每個(gè)區(qū)組含5個(gè)不同處理的小區(qū)(相當(dāng)于每個(gè)處理4次重復(fù))。區(qū)組內(nèi)的小區(qū)隨機(jī)排列,小區(qū)面積134m2,各小區(qū)間設(shè)2m以上的保護(hù)行,以防小區(qū)間互相干擾,所有試驗(yàn)小區(qū)間的栽培管理?xiàng)l件均基本保持一致。(2)花生幼果期是花生蠐螬為害的高峰期,有必要在微粒劑施藥的基礎(chǔ)上進(jìn)行下一輪防治。分別于2009年7月及2010年7月采用100億孢子/g綠僵菌CQMa128乳粉劑對(duì)當(dāng)年的1~2齡蠐螬進(jìn)行防控,施藥劑量為2.5、5、7.5kg/hm2,采用灌墩方式進(jìn)行施藥處理,同時(shí)設(shè)化學(xué)藥劑對(duì)照48%毒死蜱乳油4.5L/hm2和清水空白對(duì)照。定期調(diào)查田間蟲(chóng)口數(shù)量變化。試驗(yàn)小區(qū)排列設(shè)計(jì)和試驗(yàn)條件同微粒劑施藥處理。施藥時(shí)間選擇在傍晚17:00-19:00進(jìn)行,以減輕夏日陽(yáng)光紫外線對(duì)綠僵菌孢子的殺傷。(3)在綠僵菌CQMa128微粒劑防治試驗(yàn)中,分別于施藥后7、14、21、28d,調(diào)查各處理區(qū)每200株花生植株中花生蠐螬寄生性天敵臀鉤土蜂蛹的數(shù)量變化。在綠僵菌CQMa128乳粉劑的防治試驗(yàn)中,分別于施藥后7、14、21、28d,調(diào)查各處理區(qū)每200株花生植株中臀鉤土蜂成蟲(chóng)數(shù)量,觀察綠僵菌CQ-Ma128制劑的施用是否對(duì)臀鉤土蜂的種群存活變化存在影響。1.4調(diào)查內(nèi)容及方法在綠僵菌微粒劑防控試驗(yàn)中,分別于施藥后10、20、30、40、50d進(jìn)行防治效果調(diào)查。在綠僵菌乳粉劑防控試驗(yàn)中,分別于施藥后10、15、20、25、30d進(jìn)行防治效果調(diào)查。根據(jù)各處理小區(qū)的蟲(chóng)口減退率計(jì)算出各處理的平均校正防效,并在花生成熟收獲期調(diào)查各處理的保果效果,測(cè)算出平均保果率和平均花生產(chǎn)量鮮重。調(diào)查方法為在每小區(qū)內(nèi)采取平行跳躍式5點(diǎn)取樣法,每點(diǎn)40墩花生,重復(fù)3次,調(diào)查總面積為9m2,根據(jù)調(diào)查結(jié)果計(jì)算各處理的蟲(chóng)口減退率、平均校正防治效果及保果率。計(jì)算公式如下:蟲(chóng)口減退率=(處理區(qū)施藥前蟲(chóng)數(shù)-處理區(qū)施藥后蟲(chóng)數(shù))∕處理區(qū)施藥前蟲(chóng)數(shù)×100%;校正防治效果=(處理區(qū)蟲(chóng)口減退率-對(duì)照區(qū)蟲(chóng)口減退率)∕(100%-對(duì)照區(qū)蟲(chóng)口減退率)×100%;保果率=(對(duì)照區(qū)被害果率-處理區(qū)被害果率)/對(duì)照區(qū)被害果率×100%。1.5統(tǒng)計(jì)分析方法采用MicrosoftExcel2003軟件和DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)(2008版)對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理,并用Duncan新復(fù)極差法對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性差異分析比較。2結(jié)果與分析2.1田間試驗(yàn)結(jié)果在綠僵菌CQMa128微粒劑施藥后進(jìn)行田間藥效調(diào)查,最早可在施藥后20d左右發(fā)現(xiàn)有被侵染的蠐螬僵蟲(chóng)出現(xiàn),表明綠僵菌CQMa128能在當(dāng)?shù)赝寥乐杏行Т婊畈⑶秩鞠擉┲滤?。且在每個(gè)防治效果調(diào)查時(shí)間段(10、20、30、40、50d)調(diào)查沙土空白對(duì)照的蟲(chóng)口變化情況,其蟲(chóng)口減退率均小于3%。連續(xù)2年(2009—2010年)的田間試驗(yàn)結(jié)果(表1)表明,CQMa128微粒劑施藥后的各處理均能對(duì)田間3齡花生蠐螬產(chǎn)生持續(xù)的防治效果。高劑量處理區(qū)(375kg/hm2)在施藥后30~40d內(nèi),其平均校正防效達(dá)到最大值(75.58%~80.03%),且與同時(shí)期化防對(duì)照處理區(qū)(15%毒死蜱顆粒劑)的平均校正防效83.61%~87.96%之間沒(méi)有顯著性差異(p≥0.05),說(shuō)明高劑量(375kg/hm2)綠僵菌CQMa128緩釋性微粒劑在施藥后30~40d對(duì)田間3齡花生蠐螬的防治效果最好。微粒劑施藥50d后,各處理的平均校正防效均有下降趨勢(shì),這是因?yàn)榇藭r(shí)接近金龜子產(chǎn)卵期,田間花生蠐螬基數(shù)開(kāi)始上升,所以有必要花生幼果期對(duì)田間1~2齡的蠐螬進(jìn)行二次防控,確保花生產(chǎn)量和品質(zhì)。2.2粉劑對(duì)32齡花生的+x-4防治效果每年6-7月間的花生幼果期是田間金龜子成蟲(chóng)產(chǎn)卵的高峰期,此時(shí)金龜子成蟲(chóng)集中于花生根部土層中產(chǎn)卵,致使田間各處理中1~2齡蠐螬數(shù)量大幅增加,并集中為害花生幼果,因此幼果期是藥劑防治花生蠐螬的關(guān)鍵時(shí)期。在綠僵菌CQMa128乳粉劑施藥后進(jìn)行田間藥效調(diào)查,最早可在施藥后10d左右發(fā)現(xiàn)有被侵染的蠐螬僵蟲(chóng)出現(xiàn),表明乳粉劑對(duì)田間花生蠐螬的侵染效果較好。且在每個(gè)防治效果調(diào)查時(shí)間段(10、15、20、25、30d)調(diào)查清水空白對(duì)照的蟲(chóng)口變化情況,其蟲(chóng)口減退率均小于1%。連續(xù)2年(2009-2010年)的試驗(yàn)結(jié)果(表2)表明,CQMa128乳粉劑施藥后能產(chǎn)生持續(xù)的侵染效果,各處理均能對(duì)田間1~2齡花生蠐螬產(chǎn)生一定的防治效果。其中高劑量處理區(qū)(7.5kg/hm2),在施藥后15~20d內(nèi),其平均校正防效就達(dá)到最大值(77.59%~86.46%),且與同時(shí)期化防對(duì)照處理區(qū)(48%毒死蜱乳油)的平均校正防效87.65%~92.37%之間沒(méi)有顯著性差異(p≥0.05)。高劑量處理區(qū)(7.5kg/hm2)在施藥30d后其最終防效保持在80%以上(表2),表明高劑量綠僵菌CQ-Ma128乳粉劑在施藥后30~40d對(duì)田間1~2齡花生蠐螬的防治效果最好,能夠有效減輕田間蠐螬對(duì)花生幼果的危害。2.3保果顯著活性在花生成熟收獲時(shí)節(jié),對(duì)各混合處理小區(qū)(微粒劑和乳粉劑先后施藥,高、中、低3個(gè)劑量處理)的花生正常果數(shù)和被害果數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)調(diào)查,計(jì)算出各處理的平均保果率(表3)。同時(shí)對(duì)各處理花生產(chǎn)量鮮重進(jìn)行測(cè)定。連續(xù)2年(2009-2010年)的試驗(yàn)結(jié)果表明,在高劑量的綠僵菌CQMa128微粒劑(375kg/hm2)和乳粉劑(7.5kg/hm2)混合處理區(qū)中,平均保果率能達(dá)到85.76%~87.13%,保果效果與化防對(duì)照相當(dāng)(p≥0.05),保果效果顯著。花生產(chǎn)量鮮重測(cè)定結(jié)果表明,高劑量的綠僵菌CQMa128微粒劑(375kg/hm2)和乳粉劑(7.5kg/hm2)處理區(qū)中花生產(chǎn)量鮮重比空白對(duì)照處理區(qū)平均高出832.5~916.4kg/hm2,增產(chǎn)效果明顯,顯著減輕了花生產(chǎn)量的損失(表3)。2.4不同處理區(qū)域平面生長(zhǎng)情況在10億孢子/g綠僵菌CQMa128微粒劑施藥后每隔7d,連續(xù)4周,分別調(diào)查各處理區(qū)中臀鉤土蜂蛹的存活數(shù)量。綜合連續(xù)2年(2009-2010年)的調(diào)查結(jié)果,得出3個(gè)不同處理區(qū)域中臀鉤土蜂蛹在各個(gè)處理中的平均分布情況(圖1)。結(jié)果表明,存活的臀鉤土蜂蛹數(shù)量在10億孢子/克綠僵菌CQMa128微粒劑處理區(qū)域與空白對(duì)照之間沒(méi)有顯著差異(p≥0.05),大致平均數(shù)量為8~10頭/200株花生。而15%毒死蜱顆粒劑處理區(qū)的臀鉤土蜂蛹數(shù)量呈顯著減少趨勢(shì),臀鉤土蜂蛹存活率下降60%~70%(圖1)。在100億孢子/g綠僵菌CQMa128乳粉劑施藥后每隔7d,連續(xù)4周,分別調(diào)查各處理區(qū)臀鉤土蜂成蟲(chóng)的存活數(shù)量變化情況。綜合連續(xù)2年(2009-2010年)的調(diào)查結(jié)果,得出3個(gè)不同處理區(qū)域中臀鉤土蜂成蟲(chóng)平均分布情況(圖2)。結(jié)果表明,存活的臀鉤土蜂成蟲(chóng)數(shù)量分布在100億孢子/克綠僵菌CQMa128乳粉劑處理區(qū)域與空白對(duì)照之間沒(méi)有顯著差異(p≥0.05),大致平均數(shù)量為14~16頭/200株花生。而48%毒死蜱乳油處理區(qū)臀鉤土蜂成蟲(chóng)數(shù)量呈顯著減少趨勢(shì),臀鉤土蜂成蟲(chóng)存活率下降50%~60%(圖2)。3田間防治技術(shù)研究金龜子綠僵菌(Metarhiziumanisopliae)寄主廣泛,能寄生直翅目、膜翅目、同翅目、雙翅目、鱗翅目、鞘翅目以及半翅目等7個(gè)目、42個(gè)科、約200余種昆蟲(chóng)、線蟲(chóng)及螨類。在對(duì)地下害蟲(chóng)的防治應(yīng)用方面,尤其對(duì)蠐螬類的致病作用一直是綠僵菌高效殺蟲(chóng)菌株篩選的重要內(nèi)容。目前,國(guó)內(nèi)已有利用綠僵菌防治蠐螬的報(bào)道,但是利用綠僵菌商業(yè)化制劑對(duì)蠐螬進(jìn)行田間大規(guī)模防控方面國(guó)內(nèi)尚無(wú)相關(guān)研究報(bào)道。本研究連續(xù)2年(2009-2010年)采用金龜子綠僵菌CQMa128新制劑對(duì)花生蠐螬進(jìn)行綜合防控,取得了良好的田間防治效果,為今后綠僵菌新制劑在田間大面積推廣應(yīng)用提供了試驗(yàn)基礎(chǔ)。研究結(jié)果表明在花生播種期(4-5月),采用10億孢子/g綠僵菌CQMa128微粒劑(施藥量為375kg/hm2)拌土施藥,可以對(duì)花生田間上一年越冬的3齡花生蠐螬老熟幼蟲(chóng)進(jìn)行有效防治;在花生幼果期(6-7月)采用100億孢子/g綠僵菌CQMa128乳粉劑(施藥量為7.5kg/hm2)灌墩施藥,可以有效防治此時(shí)田間盛發(fā)的1~2齡花生蠐螬。田間試驗(yàn)結(jié)果充分驗(yàn)證了在花生作物生長(zhǎng)的不同時(shí)期采取以上綜合防治方法,可以顯著減輕蠐螬對(duì)花生植株生長(zhǎng)的危害以及花生果莢產(chǎn)量的損失。本研究證實(shí)了金龜子綠僵菌CQMa128對(duì)田間花生蠐螬的主要天敵鰓金龜臀鉤土蜂(Tiphiaphyllophaga)沒(méi)有毒害作用,故在實(shí)際防控中可結(jié)合保護(hù)利用蠐螬天敵并采用其他生物防治的手段來(lái)綜合防治花生田蠐螬,實(shí)現(xiàn)不同生