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文檔簡介

免疫學(xué)復(fù)習資料一、名詞解釋(英文--中文--翻譯)10*2=20分1、免疫(immunit)是指機體識別本身與非本身的抗原,對本身成分形整天然免疫耐受,對非本身抗原發(fā)生排斥作用的一種生理功效。免疫學(xué)(immunology)是研究免疫系統(tǒng)的機構(gòu)與功效,并通過對其在免疫應(yīng)答過程中所產(chǎn)生的免疫保護與免疫損傷機制的研究,探討有效的免疫方法,實現(xiàn)以防病、治病為目的的一門當代醫(yī)學(xué)學(xué)科。免疫細胞(immunitycell)凡參加免疫應(yīng)答或與免疫應(yīng)答有關(guān)的細胞統(tǒng)稱為免疫細胞。免疫應(yīng)答(Immuneresponse)是指機體免疫系統(tǒng)接受抗原刺激發(fā)生一系列反映,并以排出或分解該抗原為目的的過程。抗原(antigen)一類能刺激機體免疫系統(tǒng),隨之產(chǎn)生免疫應(yīng)答,涉及激發(fā)機體產(chǎn)生特異性抗體,或致敏淋巴細胞,并能與它激發(fā)產(chǎn)生的抗體或致敏淋巴細胞特異性反映的物質(zhì)。抗體(antibody)機體在抗原刺激下形成的一類含有與對應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合反映的特定構(gòu)造球蛋白。抗原抗體反映(antigen-antibody)是指抗原與對應(yīng)抗體在體內(nèi)或體外發(fā)生的特異性結(jié)合反映。可發(fā)生于體內(nèi),也可發(fā)生于體外。帶現(xiàn)象(zonephenomenon)抗原抗體濃度的最適比,稱為等價帶。在等價帶的前后,由于抗體和抗原過量,形成的沉淀物少,上清液中可測出游離的抗體或抗原,這種現(xiàn)象稱為帶現(xiàn)象。當抗體過量時稱為前帶(prezone),抗原過量時稱為后帶(postzone).9、魚鉤效應(yīng)(hookeffect)雙位點一步法中,當待測抗原濃度過高時,過量的抗原可分別同固相抗體和酶標記抗體結(jié)合而克制夾心復(fù)合物的形成,出現(xiàn)鉤狀效應(yīng),顯色減少,嚴重時可出現(xiàn)假陰性成果。10、免疫原(immunogen)即抗原能誘導(dǎo)機體產(chǎn)生抗體,又能與抗體在體內(nèi)發(fā)生特異性反映的物質(zhì),因而制備合格免疫原是制備高品質(zhì)抗體的前提條件。免疫佐劑(immunoadjuvant)先于抗原或與抗原同時注入體內(nèi),可增強機體對該抗原的免疫應(yīng)答或變化免疫應(yīng)答類型的物質(zhì)被稱為免疫佐劑,簡稱佐劑(adjuvant),佐劑本身含有免疫原性,也可無免疫原性。抗血清(antiserum)又稱多克隆抗體(PcAb)亦稱免疫血清,用抗原以不同途徑免疫動物,從動物血清中獲取抗體,該類含有抗體的血清稱為抗血清。由于免疫動物的抗原往往含有多個抗原表位,可激活體內(nèi)多個B細胞克隆產(chǎn)生針對抗原多個表位的混合抗體,因而抗血清也稱為多克隆抗體(polycloalantibody,PcAb)。單克隆抗體(McAb)設(shè)法將單個B細胞分離出來加以增值形成一種克隆群落,該B細胞克隆產(chǎn)生出針對單一表位、構(gòu)造相似、功效均一的抗體,成為單克隆抗體(monoclonalantibody,McAb)凝集反映(agglutinationreaction)是指細菌和紅細胞等顆粒性抗原或表面包被可溶性抗原(或抗體)的顆粒性載體與對應(yīng)抗體(或抗原)特異性結(jié)合后,在適宜電解質(zhì)存在下,出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。直接凝集反映(directagglutinationreaction)在適宜電解質(zhì)參加下,細菌、螺旋體和紅細胞等顆??乖苯优c對應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象,稱為直接凝集反映。間接凝集反映(indirectagglutination)將可溶性抗原(或抗體)先吸附于適宜大小的顆粒性載體的表面,然后與對應(yīng)抗體(或抗原)作用,在適宜的電解質(zhì)存在條件下,出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象,稱間接凝集反映(indirectagglutination)或被動凝集反映(passiveagglutination)。沉淀反映(precipitationreaction)抗原能夠是多糖、蛋白質(zhì)、類脂等。同對應(yīng)的抗體比較,抗原的分子小,單位體積內(nèi)含有的抗原量多。在做定量實驗時,為了不使抗原過剩,應(yīng)稀釋抗原,并以抗原的稀釋度作為沉淀反映的效價。移植(transplantation)是指將健康細胞、組織或器官從其原部位移植到自體或異體的一定部位、用以替代或補嘗機體所喪失的構(gòu)造和(或)功效的當代醫(yī)療手段。被移植的細胞、組織或器官稱移植物,提供移植物的個體稱為供體,接受移植物的個體稱為受體或宿主。移植排斥反映(tranlplantationrefection)是針對移植抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答,從而造成移植物功效喪失或受者機體損害的過程。標記免疫分析(analysisofimmunemarkers)用標記物標記抗體或抗原進行抗原抗體反映,借以提高免疫學(xué)診療的敏感性。涉及放射免疫技術(shù)、酶免疫技術(shù)、免疫熒光技術(shù)。21、超敏反映(hypersensitivity)又稱變態(tài)反映,是指機體再次接受相似抗原刺激后,發(fā)生的以組織細胞損傷或生理功效紊亂為主的特異性免疫應(yīng)答。引發(fā)超敏反映的抗原稱之為變應(yīng)原(allergen)。22、腫瘤抗原(tumorantigen)在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中新出現(xiàn)的或過分體現(xiàn)的抗原物質(zhì)。腫瘤抗原大多數(shù)存在于腫瘤細胞表面,少數(shù)在細胞質(zhì)和細胞核內(nèi)。而與腫瘤免疫有關(guān)的抗原重要在細胞表面,這類抗原與細胞膜結(jié)合不易脫落,含有一定的免疫原性,可被宿主免疫系統(tǒng)識別。腫瘤特異性抗原(tumorspecificantigen,TSA)腫瘤細胞所特有的抗原,只存在于腫瘤細胞表面,而不存在于正常組織或細胞的大分子物質(zhì)。多為突變基因產(chǎn)物,如突變的ras癌基因產(chǎn)物。曾被稱為腫瘤特異性移植抗原(tumorspecifictransplantation,TSTA)或腫瘤排斥抗原(tumorrejectionantigen,TRA)腫瘤有關(guān)抗原(tumorassociatedantigen,TAA)非腫瘤細胞所特有的,正常組織或細胞也可體現(xiàn)的抗原物質(zhì),但這類抗原在癌變細胞的體現(xiàn)水平遠遠超出正常細胞。(22--24,三選一)免疫增殖性疾?。╥mmunoproliferativedisease)免疫器官、免疫細胞或免疫細胞(重要是淋巴細胞)異常增生所致的一組疾病稱為免疫增殖性疾病。宿主抗移植物反映(hostversusgraftreaction,HVGR)重要是受者T淋巴細胞識別移植抗原,并激活免疫系統(tǒng),產(chǎn)生細胞和體液免疫應(yīng)答,攻擊和破壞移植物。

移植物抗宿主反映(graftversushostreaction,GVHR)

當受者處在免疫無能或免疫克制狀態(tài)時,移植物內(nèi)含有較多成熟的供者T細胞,通過識別受者抗原而產(chǎn)生攻擊受者的免疫應(yīng)答。常見于骨髓移植、小腸移植及免疫器官移植。本身免疫(autoimmunity)是指機體免疫系統(tǒng)對本身成分(本身Ag)發(fā)生免疫應(yīng)答的現(xiàn)象。本身免疫性疾?。╝utoimmunitydisease)由于本身免疫引發(fā)本身組織器官損傷而出現(xiàn)的疾病稱為本身免疫病。本身耐受(selftolerance)是指機體免疫系統(tǒng)對本身Ag不發(fā)生免疫應(yīng)答,無免疫排斥的現(xiàn)象。31、免疫應(yīng)答(immuneresponse)是指機體受抗原刺激后,免疫活性細胞(T、B細胞)識別抗原、本身活化、增值、分化及產(chǎn)生特異性免疫效應(yīng)的過程?;瘜W(xué)發(fā)光劑(chemiluminesentagent)在化學(xué)發(fā)光反映中參加能量轉(zhuǎn)移并最后以發(fā)射光子的形式釋放能量的化合物,稱為化學(xué)發(fā)光劑或發(fā)光底物。細胞因子(cytokine)是由機體活化的免疫細胞及某些基質(zhì)細胞分泌的小分子蛋白質(zhì),通過結(jié)合細胞表面的對應(yīng)受體發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。細胞黏附因子(cell-sdhesionmolecules)是由細胞產(chǎn)生、介導(dǎo)細胞與細胞間或細胞與基質(zhì)間互相接觸和結(jié)合的分子。發(fā)光免疫分析(chemiluminescenceimmuneanalysis)將發(fā)光分析和免疫反映相結(jié)合而建立起來的一種新的檢測微量抗原或抗體的新型標記免疫分析技術(shù)??贵w依賴性細胞介導(dǎo)的細胞毒作用(ADCC)指體現(xiàn)IgGFc受體的NK細胞、巨噬細胞和中性粒細胞等,通過與已結(jié)合在病毒感染細胞和腫瘤細胞等靶細胞表面的IgG抗體的Fc段結(jié)合,而殺傷這些靶細胞的作用。選擇題40分1、免疫組織與器官(免疫組織又稱淋巴結(jié)在組織)中樞免疫器官:是免疫細胞產(chǎn)生、分化和成熟的場合。由骨髓、胸腺構(gòu)成。(禽類—法氏囊)外周免疫器官及組織:是免疫應(yīng)答的場合,由淋巴結(jié)、脾臟、扁桃體、粘膜有關(guān)淋巴組織、皮膚有關(guān)淋巴組織等構(gòu)成。骨髓:B淋巴細胞發(fā)育成熟的場合。胸腺:T淋巴細胞發(fā)育成熟的場合。(粘膜隨著的淋巴組織——扁桃體、闌尾、小腸的派氏集合淋巴結(jié))2、免疫細胞:干細胞系、淋巴細胞、單核吞噬細胞、其它APC(抗原遞呈細胞)、其它吞噬細胞。按免疫細胞在體內(nèi)的作用不同分為三大類:第一類為淋巴細胞,涉及能特異性識別抗原,能增殖分化并產(chǎn)生免疫效應(yīng)的T細胞、B細胞和NK細胞;第二類為單核巨噬細胞,涉及血液中的單核細胞和組織中的巨噬細胞,它們構(gòu)成單核巨噬系統(tǒng),在免疫反映中起輔佐作用;第三類為參加免疫應(yīng)答的細胞,涉及中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞和肥大細胞等,它們參加免疫應(yīng)答中的某一環(huán)節(jié)。3、免疫分子:重要是由某些免疫活性細胞或有關(guān)細胞分泌的蛋白質(zhì)及小分子多肽物質(zhì)構(gòu)成,它們參加機體的免疫反映或免疫調(diào)節(jié)。重要涉及免疫球蛋白、補體、細胞因子、細胞粘附分子和人類白細胞分化抗原等。免疫分子T細胞受體(TCR)、B細胞受體(BCR)、CD分子、粘附分子、MHC、其它免疫球蛋白、補體分子、細胞因子免疫系統(tǒng)功效:免疫防御、免疫自穩(wěn)、免疫監(jiān)視。免疫應(yīng)答分3個階段:識別階段、活化階段、效應(yīng)階段??乖贵w結(jié)合力范德華力最小,疏水結(jié)合力最大。半抗原(hapten):僅有抗原性而無免疫原性的物質(zhì),如多肽、甾體激素、核苷、某些藥品等小分子物質(zhì)均屬于半抗原,這些小分子物質(zhì)無免疫原性,只有與載體結(jié)合后才含有免疫原性。半抗原+載體=完全抗原凝膠過濾(分子篩):按分子大小將蛋白質(zhì)分離。凝膠是含有三維空間多孔網(wǎng)狀構(gòu)造的物質(zhì)。含有多個分子的樣品液緩慢流經(jīng)凝膠柱,大分子物質(zhì)不易進入凝膠微孔中,在凝膠顆粒之間的空隙很快通過,首先被洗脫出來;小分子物質(zhì)進入凝膠的微孔中,重復(fù)洗脫后緩慢流出。半抗原與載體結(jié)合的數(shù)目與免疫原性親密有關(guān),普通認為一種載體分子上最少要連接20個以上的半抗原分子,才干有效地刺激免疫動物產(chǎn)生抗體。組織抗原:高速搗碎法、研磨法細胞抗原:重復(fù)凍融法、超聲破碎法、自溶法、酶解決法、表面活性劑解決法11、抗原純化辦法:超速離心法、選擇性沉淀法、凝膠過濾法、離子交換層析法、親和層析法、電泳法等12、純化抗原的鑒定:重要涉及含量測定、分子量鑒定、純度鑒定和免疫學(xué)活性鑒定等。13、抗血清的鑒定:抗體特異性、效價、純度、親和力等14、抗血清保存辦法:=1\*GB3①4度保存:可保存三個月或六個月=2\*GB3②冷凍保存:可保存2~3年=3\*GB3③真空干燥保存:5~,保存時間最長。15、抗體特異性:抗體對對應(yīng)的抗原及構(gòu)造相似抗原的識別能力。辦法:雙向免疫瓊脂擴散技術(shù)16、?抗血清的制備流程:選擇免疫動物--免疫動物(免疫辦法和途徑)--動物采血--分離血清17、最常應(yīng)用于動物的佐劑是弗氏佐劑:分為弗氏不完全佐劑:油劑+氧化劑弗氏完全佐劑:弗氏不完全佐劑+卡介苗18、佐劑的作用機制:=1\*GB3①變化抗原的物理性狀,延緩抗原降解和排除,從而更有效地刺激免疫系統(tǒng)。=2\*GB3②刺激單核-吞噬細胞系統(tǒng),增強其解決和提呈抗原的能力;活化APC=3\*GB3③刺激淋巴細胞增殖和分化,可提高機體初次和再次免疫應(yīng)答的抗體滴度;=4\*GB3④變化抗體的產(chǎn)生類型以及誘導(dǎo)遲發(fā)型超敏反映。19、雜交瘤細胞選擇培養(yǎng)基(HAT培養(yǎng)基)成分:H-雌黃嘌呤;A-氨甲喋呤;T-胸腺嘧啶核苷20、凝集反映發(fā)生分兩個階段:=1\*GB3①抗原抗體的特異性結(jié)合階段,此階段反映快,僅需數(shù)秒至數(shù)分鐘,但不出現(xiàn)可見反映。=2\*GB3②出現(xiàn)可見的凝集反映階段,此階段反映慢,普通需要數(shù)分鐘至數(shù)小時。21、在免疫學(xué)技術(shù)中,凝集反映可分為直接凝集反映和間接凝集反映兩大類。22、間接凝集反映類型正向間接凝集反映:用可溶性抗原致敏載體以檢測標本中的待檢抗體,以反映數(shù)分鐘出現(xiàn)凝集為陽性。反向間接凝集反映:用特異性抗體致敏載體以檢測標本中的待檢抗原。間接凝集克制反映:用抗原致敏的顆粒載體及對應(yīng)的抗體作為診療試劑,檢測標本中與否存在于致敏抗原相似的抗原。協(xié)同凝集反映(co-agglutination):以葡萄球菌蛋白A(SPA)蛋白作載體,SPA含有與IgG的Fc段結(jié)合的特異性,當葡萄球菌與IgG抗體連接時,F(xiàn)ab暴露,可與對應(yīng)抗原結(jié)合,葡萄球菌就稱為抗體致敏的顆粒載體,與對應(yīng)抗原接觸,出現(xiàn)反向間接凝集反映。用于細菌、病毒的直接檢測。23、凝集反映的特點:定性檢測辦法,即根據(jù)凝集現(xiàn)象的出現(xiàn)與否鑒定成果陽性或陰性。也能夠進行半定量檢測,即將標本作一系列倍比稀釋后進行反映,以出現(xiàn)陽性反映的最高稀釋度作為滴度。24、抗球蛋白實驗(antiglobulintest):是抗球蛋白參加的間接血凝實驗,又稱Coombs實驗,用于檢測抗紅細胞不完全抗體。25、不完全抗體多半是7S的IgG類抗體,能與對應(yīng)的抗原牢固結(jié)合,但因其分子量較小,體積小,不能起到橋聯(lián)作用,在普通條件下不出現(xiàn)可見反映。26、直接Coombs實驗:慣用于檢測新生兒溶血癥、本身免疫性溶血癥、特發(fā)性本身免疫性貧血和醫(yī)源性溶血等疾病的患者紅細胞上不完全抗體。間接Coombs實驗:用于檢測母體Rh(D)抗體和因紅細胞不相容的輸血所產(chǎn)生的血型抗體;也可用專一特異性抗球蛋白血清分析與紅細胞結(jié)合的不完全抗體的Ig亞類。27、沉淀反映分兩個階段,第一階段為抗原抗體特異性結(jié)合,此階段能夠在幾秒到幾十秒內(nèi)瞬間完畢出現(xiàn)不可見的可溶性復(fù)合物,重要受抗原抗體特異性和結(jié)合力的影響。第二階段為形成可見的免疫復(fù)合物,反映慢,約需幾十分鐘到數(shù)小時完畢,受抗原抗體比例、分子大小、親和力、絕對濃度、電解質(zhì)濃度和反映溫度的影響。28、沉淀反映分類液相內(nèi)沉淀實驗分類:環(huán)狀沉淀、絮狀沉淀、免疫濁度沉淀(投射、散射比濁)凝膠內(nèi)沉淀實驗分類:單向瓊脂擴散實驗、雙向瓊脂擴散實驗?zāi)z免疫電泳技術(shù)a對流免疫電泳:雙向免疫擴散+電泳b免疫電泳:雙向免疫擴散+區(qū)帶電泳c火箭免疫電泳:單向免疫擴散+電泳d免疫固定電泳:沉淀反映+區(qū)帶電泳29、雙向免疫擴散實驗原理:將抗原和抗體溶液分別加在同一凝膠板的對應(yīng)孔中,兩者均在凝膠中自由擴散,相遇后特異性結(jié)合,在比例適宜處形成白色沉淀線。觀察沉淀線的位置、形狀以及對比關(guān)系,可對抗原或抗體進行定性分析。應(yīng)用:(1)判斷抗原或抗體的存在以及預(yù)計相對含量:沉淀線靠近濃度低的一方分析抗原或抗體相對分子量:分子量越小擴散越快,反之越慢。分析抗原的性質(zhì):兩種待檢抗原的性質(zhì)有完全相似、部分相似或完全不同三種狀況,在雙向擴散實驗中體現(xiàn)a兩條沉淀線互相吻合相連,表明抗體與兩個抗原中的相似表位結(jié)合形成沉淀,但不能闡明兩個抗原完全相似;b兩條沉淀線交叉,闡明兩個抗原完全不同;c兩條沉淀線相切,提示有兩個抗原之間有部分相似抗體效價的滴定:鑒定抗原或抗體純度30、免疫技術(shù)分為:放射免疫技術(shù)、熒光免疫技術(shù)、酶免疫技術(shù)31、均相酶免疫測定的類型及原理32、酶免疫技術(shù)的辦法學(xué)評價33、酶免疫技術(shù)的慣用酶和底物標記酶:堿性磷酸酶底物:4-甲基傘形酮(4MUP)β-半乳糖苷酶4MUG辣根過氧化物酶HPA34、HCG:免疫膠體金技術(shù)35、超敏反映的特點:(1)是病理性免疫應(yīng)答。(2)與抗原的性狀及進入途徑有關(guān)。(3)與抗體的遺傳或機體的反映性有關(guān)。(4)可造成機體的組織損傷和功效障礙。36、抗Sm抗體是系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的標記抗體。37、抗dsDNA抗體是SLE患者的特性性標志抗體,是SLE的重要診療原則之一,抗dsDNA抗體滴度與疾病活動度有關(guān),抗體滴度的動態(tài)測定可監(jiān)控治療。38、間接免疫熒光法的熒光模型:作為總ANA篩查實驗,現(xiàn)在最慣用核質(zhì)豐富的培養(yǎng)細胞---HEP-2細胞作為抗原(人喉癌上皮細胞)39、常見的抗核抗體(ANA)熒光圖形:均質(zhì)型(H)、斑點型(S):又稱顆粒型、核仁型(N)、核膜型(M)、核包膜型、著絲點型、胞漿型40、抗ENA抗體涉及:抗核糖核蛋白抗體(nRNP)、抗Sm抗體、抗SSA抗體、抗SSB抗體、Jo-1抗體、Scl-70抗體41、抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體(ANCA)重要有兩型:胞質(zhì)型(cANCA)和周邊型(pANCA)。cANCA的靶抗原重要是蛋白酶3(PR3),,pANCA的靶抗原重要是髓過氧化物酶(MOP)42、本身免疫性病的分類:按本身抗原分布范疇分:器官特異性本身免疫性疾病,如胰島素依賴型糖尿病,重癥肌無力,多發(fā)性硬化癥等。器官非特異性本身免疫性疾病,如SLE,類風濕性關(guān)節(jié)炎等。按發(fā)病部位的解剖系統(tǒng)分類:可分為結(jié)締組織、內(nèi)分泌系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、血液系統(tǒng)等本身免疫病。按發(fā)病因素分類:原發(fā)性和繼發(fā)性。43、本身免疫性疾病的基本特性;1:多數(shù)病因不詳,可有誘因,可無誘因。2:以女性居多,有遺傳傾向。3:血清中存在本身抗體或致敏淋巴細胞。5:疾病有重疊現(xiàn)象。6:病程較長,多遷延為慢性。病情發(fā)展緩和重復(fù)交替。7:病損部位有淋巴、漿細胞、中性粒細浸潤。8:免疫克制劑有一定療效。44、本身免疫病的免疫損傷機制:類似于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型超敏反映45、本身免疫病的檢查辦法:對流免疫電泳及免疫雙擴散法(CIE,ID)免疫熒光測定法(IFA)酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)免疫印跡法(IB)免疫斑點法放射性核素法免疫沉淀法被動凝集實驗46、本身免疫病發(fā)生的有關(guān)因素:(1)本身抗原:隱蔽抗原的釋放、本身成分的變化、共同抗原引發(fā)的交叉反映(2)免疫調(diào)節(jié)異常(3)遺傳因素47、本身抗體的檢測及其臨床意義抗核抗體(ANA)抗dsDNA抗體:系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)抗RNP抗體:混合性結(jié)締組織?。∕CTD)抗Sm抗體:SLE特異性標志抗SS-A抗體、抗SS-B抗體:干燥綜合征(SS)、SLE抗rRNP抗體是SLE的高度特異性抗體,與中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變發(fā)生率高度有關(guān)。抗中性粒細胞漿抗體(ANCA)cANCA(重要靶抗原是蛋白酶3(PR3),PR3為中性粒細胞嗜天青顆粒的重要成分)cANCA+抗PR3抗體→韋格納肉芽腫(WG)pANCA(重要靶抗原是髓過氧化物酶(MPO),MPO為中性粒細胞嗜天青顆粒的另一種成分)pANCA:血管炎抗磷脂抗體(APLA)中的抗心磷脂抗體(ACLA、ACL抗體)→抗磷脂綜合征(APS)類風濕性關(guān)節(jié)炎(RA):類風濕因子(RF)、抗角蛋白抗體(AKA)48、肝臟是免疫特惠器官49、各惡性腫瘤的重要標志物前列腺癌(PSA);乳腺癌(CA15-3);肺癌(NSE);卵巢癌(CA125);胰腺癌(CA19-9);原發(fā)性肝癌(AFP);結(jié)直腸癌(CEA);胃癌(CA72-4);淋巴瘤(β2-微球蛋白);黑色素瘤(黑色素瘤抗原)50、根據(jù)被移植骨髓的來源,分為自體骨髓移植、同基因骨髓移植、同種異基因骨髓移植。51、HLA(人類白細胞抗原)分子生物學(xué)分型法:RFLP與PCR-RFLP分型法、PCR-SSO分型法、PCR/SSP分型法、PCR-SSCP分型法、SBT分型法(慣用)。52、HIV抗體檢測:確認實驗重要用免疫印跡法53、直接檢測病毒或其組分,普通不用作常規(guī)診療。54、HIV初篩、確認查的都是抗體HIV抗體檢測:初篩——復(fù)檢——確認初篩:ELISA法:第三代、第四代(第四代含P24Ag)快速檢測試劑(RAPID):金標、硒標明膠顆粒凝集實驗(PA)確認:免疫印跡法(WB)免疫熒光實驗(IFA)55、免疫缺點病的分類原發(fā)性~:體液免疫~(50%、為主)、細胞免疫~、聯(lián)合免疫~、非特異性~繼發(fā)性~:營養(yǎng)不良、腫瘤、感染(HIV)56、梅毒快速血漿反映素環(huán)狀卡實驗(RPR)隨病情變化,有變化。確認實驗:熒光密螺旋體吸取實驗(FTA-ABS)、免疫印跡法(WB)梅毒螺旋體熒光抗體雙染色實驗(FTA-ABS-DS)、ELISA57、化學(xué)發(fā)光劑的種類及發(fā)光原理(1)熒光色素:異硫氰酸熒光素FITC:最大吸取光波長為490~495nm,最大發(fā)射光波長520~530nm,可呈明亮的黃綠色熒光。是應(yīng)用最廣泛的熒光素,其重要優(yōu)點在于人眼對黃綠色較為敏感,并且由于標本中的綠色熒光較少,熒光染色時背景干擾小。四乙基羅丹明RB200:最大吸取光波長為570nm,最大發(fā)射光波長為595~600nm,呈橘紅色熒光??膳cFITC的綠色熒光形成鮮明的對比,慣用于雙重標記或?qū)Ρ热旧?,但RB200熒光效率較低。藻紅蛋白PE:最大吸取光波長為565nm,最大發(fā)射光波長為578nm。由于它在488nm處的光吸取率為565nm處的75%,因此PE與FITC可用于雙標記免疫熒光染色。(2)其它熒光物質(zhì):鑭系螯合物、酶作用后產(chǎn)生的熒光物質(zhì)58、臨床慣用的細胞因子與細胞黏附因子的免疫學(xué)檢測辦法:酶聯(lián)免疫吸附實驗辦法、流式細胞分析法、酶聯(lián)免疫斑點實驗59、簡述免疫應(yīng)答的基本過程及特點。(1)特異性:抗原—效應(yīng)T細胞/抗體(2)記憶性:初次應(yīng)答再次應(yīng)答(3)放大性:少量抗原全身性免疫應(yīng)答(4)MHC限制性60、血清免疫球蛋白的測定辦法重要有哪些?各有何特點?臨床上慣用速率散射免疫比濁法檢測IgG、IgA、IgMIgD的測定辦法有放射免疫分析法、乳膠顆粒免疫比濁分析法、酶聯(lián)免疫吸附實驗??侷gE的測定辦法有化學(xué)發(fā)光免疫分析法、放射免疫分析法、乳膠顆粒免疫比濁法特異性IgE的檢測辦法重要有免疫斑點法和酶聯(lián)免疫吸附實驗。IgG的測定辦法有放射免疫法、酶聯(lián)免疫吸附實驗、單向環(huán)狀免疫擴散法、速率散射免疫比濁法M蛋白:血清蛋白區(qū)帶電泳、血清免疫球蛋白定量測定、免疫電泳、免疫固定電泳冷球蛋白測定:定性測定,即血細胞比容管法。定量測定,為分光光度法。問答題5~6道抗原、抗體反映的特點??乖贵w反映的特點涉及特異性、可逆性、比例性和階段性。特異性(specificity):抗原與抗體結(jié)合反映的專一性稱為特異性,這種特異性是由抗原表位與抗體分子超變區(qū)之間空間構(gòu)型的互補性決定的??赡嫘?reversibility):抗原與對應(yīng)抗體結(jié)合形成復(fù)合物后,在一定條件下又可解離為游離抗原與抗體的特性稱為抗原抗體結(jié)合的可逆性。比例性(proportionality):是指抗原與抗體發(fā)生可見反映需遵照一定的量比關(guān)系。階段性:抗原抗體反映分為兩個階段,第一階段是抗原與抗體特異性結(jié)合階段;第二階段為反映可見階段。2、抗原、抗體反映的影響因素。影響因素:首先是抗原、抗體反映物的本身因素,另首先是反映的環(huán)境因素。(一)反映物本身因素:1.抗原Ag:理化特性;Ag決定簇數(shù)量;Ag決定簇種類;2.抗體Ab:來源;特異性與親和力;濃度;(二)環(huán)境條件:1.電解質(zhì):慣用0.85%Nacl溶液或多個緩沖液作為抗原、抗體的稀釋液2.酸堿度:抗原抗體反映普通在PH6—9進行3.溫度:抗原抗體反映必須在適宜的溫度中進行,普通在15—40℃為宜,最適溫度為37℃。單克隆抗體技術(shù)的基本原理(B細胞雜交瘤技術(shù)原理)將抗原免疫的小鼠脾細胞與含有體外長久繁殖能力的小鼠骨髓瘤細胞通過融合劑(聚乙二醇,PEG)融為一體,在HAT選擇性培養(yǎng)基的作用下,只讓融合成功的雜交瘤細胞生長,通過重復(fù)的免疫學(xué)檢測、篩選和單個細胞培養(yǎng)(克隆化),最后獲得既能產(chǎn)生所需單克隆抗體,又能體外長久繁殖的雜交瘤細胞系,將這種雜交瘤細胞擴大培養(yǎng),接種于小鼠腹腔,從小鼠腹腔積液中獲取高效價的單克隆抗體。多克隆抗體和單克隆抗體的比較PcAbMcAb抗原識別特異性識別多個抗原決定簇特異性識別單一抗原決定簇特異性與親和力批與批不同特異性高反映能力強弱,弱凝集/不呈現(xiàn)沉淀反映成分不均一,成分混雜高度均一性環(huán)境敏感性弱強間接凝集克制實驗原理用抗原致敏的顆粒載體及對應(yīng)的抗體作為診療試劑,檢測標本中與否存在與致敏抗原相似的抗原相似的抗原。先將待測抗原標本與對應(yīng)抗體作用,然后再加入致敏的載體,若出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,則闡明標本中不存在相似抗原,抗體試劑未被結(jié)合,仍可與載體上的抗原起作用。若存在相似抗原,抗體與之結(jié)合,凝集反映被克制。同理用抗體致敏的載體及對應(yīng)的抗原檢測標本中的抗體,則稱反向間接凝集克制反映。凝集反映和沉淀反映有何異同?凝集反映沉淀反映抗原性質(zhì)顆粒性抗原可溶性抗原反映物凝集物(振搖后不渾濁)沉淀物(振搖后渾濁)反映時間幾分鐘至十幾分鐘數(shù)小時至數(shù)天放射免疫技術(shù)分析的原理放射免疫分析原理而言屬于競爭性分析,基于標記抗原和非標記抗原對同一抗體有相似親和力,則兩者在同一系統(tǒng)中發(fā)生于特異性抗體的競爭性結(jié)合。將放射性核素標記在抗原分子上,當待測物(Ag)和標記抗原(*Ag)同時與特異性抗體作用時,發(fā)生以下反映:Ag+*Ag+Ab==AgAb+*AgAb(Ag—抗原、*Ag—標記有放射性的抗原、Ab—抗體)當特異性抗體限量且總結(jié)合位點數(shù)不不大于Ag或*Ag量,但不大于Ag和*Ag的總和時,Ag和*Ag與特異性抗體發(fā)生競爭性結(jié)合。當標本中無待檢Ag時,抗體全部與*Ag結(jié)合,并有游離的*Ag存在;當標本中有待檢Ag時,*Ag與抗體結(jié)合將受到克制,標本中待測Ag的與能夠測量的結(jié)合標記物*AgAb的量形成某種反比函數(shù)關(guān)系。Ag與*AgAb之間的關(guān)系:由于上述反映是競爭結(jié)合機制,即,Ag越多,產(chǎn)生AgAb也越多,產(chǎn)生*AgAb就越少,反之亦然,因此Ag與*AgAb之間呈一定的函數(shù)關(guān)系。8、免疫放射分析IRMA與放射免疫分析RIA的異同點RIAIRMA標記物抗原抗體原理競爭性結(jié)合非競爭性結(jié)合反映體系A(chǔ)g*、Ag、Ab固相Ab、Ab*Ag反映動力學(xué)慢快敏捷度相對低高檢測范疇窄寬1~2數(shù)量級特異性差優(yōu)原則曲線結(jié)合率與測值成反比結(jié)合率與測值成正比待測原理大小分子兩抗原決定簇化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型和原理直接化學(xué)發(fā)光免疫分析:是用化學(xué)發(fā)光劑(如吖啶酯)直接標記抗體(抗原),與待測標本中對應(yīng)的抗原(抗體)發(fā)生免疫反映后,形成固相包被抗體-待測抗原-吖啶酯標記抗體復(fù)合物,這時只需加入氧化劑(H2O2)和pH糾正液(NaOH)成為堿性環(huán)境,吖啶酯即可在不需要催化劑的狀況下分解、發(fā)光。化學(xué)酶免疫分析:用參加催化某一化學(xué)發(fā)光反映的酶如辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶來標記抗體(或抗原)。與待測標本中對應(yīng)的抗原(抗體)發(fā)生免疫反映后,形成固相包被抗體-待測抗原-酶標記抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,加入底物(發(fā)光劑),酶催化和分解底物發(fā)光。電化學(xué)發(fā)光免疫分析:以電化學(xué)發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕標記抗體(抗原),以三丙胺為電子供體,在電場中因電子轉(zhuǎn)移而發(fā)生特異性化學(xué)發(fā)光反映,它涉及電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個過程。簡述ELISA的基本原理和辦法類型原理:把抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性,也就是形成固相抗原或抗體,它既保存了免疫活性,又保存了酶的活性;;測定時將受檢樣品(含待測抗原或抗體)和酶標記抗原或抗體按一定程序與結(jié)合在固相載體上的抗原或抗體反映形成固相化抗原抗體-酶復(fù)合物;用洗滌的辦法將固相載體上形成的抗原抗體-酶復(fù)合物與其它成分分離,結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例;加入底物后,底物被固相載體上的酶催化生成有色產(chǎn)物。通過定性或定量檢測有色產(chǎn)物的量即可擬定樣品中待測物質(zhì)的含量。辦法類型:=1\*GB3①檢測抗原的辦法:雙抗體夾心法(臨床慣用于乙型肝炎表面抗原、甲胎蛋白、HCG的檢測);雙位點一步法;競爭法=2\*GB3②檢測抗體的辦法:間接法(用于丙型肝炎病毒抗體、人免疫缺點病毒抗體和梅毒螺旋體抗體的檢測);雙抗原夾心法(乙型肝炎表面抗體的測定);競爭法(HBeAb和HBcAb檢測)時間分辨熒光免疫測定的原理?哪些辦法類型?是以鑭系元素標記抗原或抗體,并與時間分辨測定技術(shù)相結(jié)合而建立起來的一種新型非放射性微量分析技術(shù)。辦法類型:雙抗體夾心法、固相抗體競爭法、固相抗原競爭法熒光偏振免疫測定的原理運用抗原抗體競爭反映原理,根據(jù)熒光素標記抗原與熒光素抗原抗體復(fù)合物之間熒光偏振程度的差別,測定體液中小分子抗原物質(zhì)的含量。熒光酶免疫測定的原理?有哪些類型?采用堿性磷酸酶標記抗體(或抗原),以4-甲基傘形酮磷酸鹽(4-MUP)為堿性磷酸酶反映熒光底物,堿性磷酸酶分解4-MUP,脫磷酸根基團后形成4-甲基傘型酮(4-MU)。4-MU經(jīng)360nm激發(fā)光照射,發(fā)出450nm的熒光,通過熒光檢測儀測定熒光強度,并推算待檢抗原或抗體的含量。辦法分類:雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、固相抗原競爭法腫瘤細胞的免疫逃逸機制與腫瘤細胞有關(guān)的因素:(1)腫瘤細胞的抗原缺失和抗原調(diào)變腫瘤細胞的“漏逸”腫瘤細胞的MHCI類分子體現(xiàn)低下或缺失腫瘤細胞造成的免疫克制腫瘤細胞缺少共刺激信號腫瘤細胞抗凋亡與宿主免疫系統(tǒng)有關(guān)的因素:機體免疫系統(tǒng)功效低下或缺點機體的免疫耐受狀態(tài)B細胞與T細胞的檢測實驗B細胞缺點病的檢測:(1)血清Ig的測定:IgG、IgM、IgA重要采用免疫濁度法同種血型凝集素的測定:特異性抗體產(chǎn)生能力測定噬菌體實驗B細胞表面膜免疫球蛋白的檢測CD抗原檢測T細胞缺點病的檢測:T細胞功效檢測(皮膚實驗、T細胞功效體外實驗);T細胞數(shù)量及其亞群檢測21、比較初次免疫應(yīng)答和再次免疫應(yīng)答的不同。特性初次應(yīng)答再次應(yīng)答APCDC、MfΦB細胞抗原濃度高低抗體潛伏期5-10天1-3天高峰濃度較低較高維持時間短長Ig類別重要為IgMIgG、A親和力低高無關(guān)抗體多少新生兒溶血癥屬于哪種超敏反映類型,簡述其發(fā)生機制。新生兒溶血屬于II型超敏反映,母子間Rh血型不符是引發(fā)新生兒溶血癥的重要因素。初次妊娠分娩時,胎兒Rh+紅細胞進入Rh—的母體內(nèi);胎兒Rh+紅細胞表面抗原刺激機體產(chǎn)生對應(yīng)的抗Rh抗體(IgG);當母體再次妊娠時,抗Rh抗體通過胎盤進入胎兒體內(nèi),與Rh+紅細胞結(jié)合,造成紅細胞破壞,發(fā)生新生兒溶血癥。26、補體系統(tǒng)激活三步途徑的比較典型的激活途徑激活劑:重要是IgG123型,和IgM類抗體與對應(yīng)抗原形成的抗原抗體復(fù)合物始動因子從C1開始攻膜復(fù)合體:C5b6789激活過程:1、識別階段C1識別免疫復(fù)合物至C1s形成的階段。2、活化階段C1s依次裂解C4和C2,形成含有酶活性的C3轉(zhuǎn)化酶和C5轉(zhuǎn)化酶(二)替代途徑激活劑細菌細胞壁成分脂多糖、酵母多糖和凝集的IgA等激活過程1、旁路途徑激活的準備階段2、激活階段(三)MBL途徑激活物:甘露聚糖結(jié)合凝集素(MBL)和C反映蛋白MBL(甘露聚糖結(jié)合凝集素)是一種鈣依賴性糖結(jié)合蛋白可與甘露糖殘基結(jié)合血清CH50測定原理及其臨床意義原理:綿羊紅細胞與對應(yīng)抗體(溶血素)結(jié)合后,形成的免疫復(fù)合物可激活血清中的補體,造成綿羊紅細胞表面形成跨膜小孔,使細胞外水分滲入,引發(fā)紅細胞腫而發(fā)生溶血。在特定的反映體系中,溶血的程度與補體的活性呈正有關(guān)。以溶血百分率為縱坐標,對應(yīng)血清含量為橫坐標,可見在輕微溶血和靠近完全溶血時,對補體含量的變化敏感度下降,形成一特殊的S形曲線。S形曲線在30%~70%之間斜度最陡,幾乎成始終線,補體量的細微變化也會引發(fā)溶血程度的明顯變化,故取50%溶血作為鑒定終點,這一辦法稱為補體50%溶血實驗,即CH50。引發(fā)50%溶血所需要的最小補體量為一種CH50單位(U),通過計算可測定出血清中總的補體溶血活性,以CH50(U/ml)表達。臨床意義:本身免疫性疾病患者如SLE、類風濕關(guān)節(jié)炎和強直性脊柱炎等,補體含量下降;在嚴重或營養(yǎng)不良時,血清補體下降,補體的檢測可用于某些疾病的診療、治療效果檢測、預(yù)后判斷的參考指標。在糖尿病、大葉性肺炎、心肌梗死、甲狀腺炎、妊娠等時,血清補體含量可升高。補體結(jié)合實驗原理及成果解釋運用抗原抗體免疫復(fù)合物可激活補體的特點,用一定量的補體和致敏綿羊紅細胞來檢測有無抗原抗體特異性結(jié)合的一類實驗。實驗中有5種成分參加反映,分屬3個系統(tǒng):反映系統(tǒng):已知抗原(或抗體)與待測抗體(或抗原)。批示體系:綿羊紅細胞與對應(yīng)溶血素結(jié)合,成為致敏綿羊紅細胞.補體系統(tǒng)慣用豚鼠新鮮血清.反映體系與補體體系先發(fā)生反映,然后再加入批示系統(tǒng),根據(jù)致敏綿羊紅細胞有無溶血來判斷實驗成果.若反映系統(tǒng)中有對應(yīng)的抗原或抗體存在,形成的抗原抗體復(fù)合物與補體結(jié)合,補體被消耗,則補體不能與后加入的致敏綿羊紅細胞結(jié)合,致敏綿羊紅細胞不發(fā)生溶血,為補體結(jié)合實驗陽性.反之,反映系統(tǒng)中無對應(yīng)的抗原或抗體存在,則補體未被消耗,他能使致敏綿羊紅細胞發(fā)生溶血,為補體結(jié)合實驗陰性.29、超敏反的類型及其特點類型慣用名特點I型速發(fā)型,過敏型,IgE型1.發(fā)生快,消失也快2.抗體

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