《細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)用空間密閉系統(tǒng)驗(yàn)證與應(yīng)用技術(shù)要求》征求意見(jiàn)稿

4T/SHQAP003—2023細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)用空間密閉系統(tǒng)驗(yàn)證與應(yīng)用技術(shù)要求本文件規(guī)定了細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)用空間密閉系統(tǒng)的術(shù)語(yǔ)和定義、系統(tǒng)組成及特點(diǎn)、驗(yàn)證要求、生產(chǎn)管理要求、生物去污染工藝過(guò)程對(duì)細(xì)胞影響的評(píng)估、生物安全要求等。本文件適用于細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)用空間密閉系統(tǒng)，空間密閉系統(tǒng)系一類(lèi)采用物理屏障形成密閉空間，并能對(duì)內(nèi)部空間進(jìn)行微生物和粒子凈化，為內(nèi)部操作的產(chǎn)品、物料和工藝提供無(wú)菌環(huán)境保護(hù)的設(shè)備，可避免工藝直接暴露于背景環(huán)境，包括細(xì)胞制備隔離器、配套的培養(yǎng)系統(tǒng)(如外置的蜂巢培養(yǎng)系統(tǒng)和集成培養(yǎng)系統(tǒng)等)等。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。ISO14644-3潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境-第三部分:測(cè)試方法JB/T20175無(wú)菌隔離器YY1621醫(yī)用二氧化碳培養(yǎng)箱3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1細(xì)胞制備隔離器Celltherapiesmanufacturingisolator一種以無(wú)菌隔離器為基礎(chǔ)，集成細(xì)胞治療藥物制備主要過(guò)程所需的各種儀器和設(shè)備的密閉空間系統(tǒng)。3.2蜂巢培養(yǎng)系統(tǒng)Modularincubationsystem可同時(shí)容納多臺(tái)無(wú)菌密閉培養(yǎng)箱運(yùn)行的多工位細(xì)胞培養(yǎng)箱系統(tǒng)，其在生產(chǎn)周期內(nèi)可獨(dú)立于細(xì)胞制備隔離器運(yùn)行，其各臺(tái)培養(yǎng)箱可根據(jù)工藝需求與細(xì)胞制備隔離器艙體通過(guò)快速傳遞接口進(jìn)行無(wú)菌對(duì)接和解離，實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)物的傳遞。3.3集成培養(yǎng)系統(tǒng)Integratedincubatorsystem可容納單個(gè)或多個(gè)無(wú)菌密閉培養(yǎng)空間運(yùn)行的細(xì)胞培養(yǎng)箱系統(tǒng)，其在生產(chǎn)周期內(nèi)與細(xì)胞制備隔離器保持連續(xù)對(duì)接，并通過(guò)培養(yǎng)箱艙門(mén)的開(kāi)關(guān)與細(xì)胞制備隔離器艙體實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)物的傳遞。3.4生物去污染Bio-decontamination采用汽態(tài)過(guò)氧化氫等殺孢子劑對(duì)物體表面進(jìn)行去污染處理，使其表面的微生物負(fù)載下降一定水平的殺菌方式。4系統(tǒng)的組成和運(yùn)行特點(diǎn)5T/SHQAP003—2023細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)用空間密閉系統(tǒng)一般由細(xì)胞制備隔離器、培養(yǎng)系統(tǒng)等一個(gè)或多個(gè)密閉設(shè)備組成，其目的是為滿(mǎn)足細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程工藝復(fù)雜、單批次規(guī)模小、個(gè)性化水平高等特點(diǎn)，而提供的一種定制化密閉系統(tǒng)，可為細(xì)胞治療產(chǎn)品的生產(chǎn)過(guò)程的敞口操作和培養(yǎng)過(guò)程提供無(wú)菌密閉環(huán)境，避免在生產(chǎn)過(guò)程中受到外源污染或批間交叉污染，并降低混淆和差錯(cuò)的風(fēng)險(xiǎn)。細(xì)胞制備隔離器與培養(yǎng)系統(tǒng)配合使用時(shí)，隔離器與培養(yǎng)系統(tǒng)上配置的培養(yǎng)箱之間，應(yīng)能實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)容器的無(wú)菌傳遞，確保所生產(chǎn)的細(xì)胞治療產(chǎn)品在整個(gè)生產(chǎn)周期內(nèi)均處于無(wú)菌密閉保護(hù)。其中，細(xì)胞制備隔離器以無(wú)菌隔離器為基礎(chǔ)，內(nèi)部環(huán)境達(dá)到GMPA級(jí)潔凈度條件，根據(jù)具體細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)工藝的需求，在隔離器艙體內(nèi)可配備離心機(jī)、顯微鏡、搖床、溫控模塊、廢棄物傳出口和快速傳遞接口（RTP）等設(shè)備（圖1），形成滿(mǎn)足生產(chǎn)工藝需求的細(xì)胞制備工藝平臺(tái)，為在其內(nèi)進(jìn)行的生產(chǎn)工藝操作提供密閉的無(wú)菌環(huán)境保護(hù)。艙內(nèi)所配備的儀器儀表和設(shè)備應(yīng)能耐受生物去污染過(guò)程。圖1細(xì)胞制備隔離器內(nèi)部?jī)x器設(shè)備示意圖常見(jiàn)配套的培養(yǎng)系統(tǒng)包括蜂巢培養(yǎng)系統(tǒng)和集成培養(yǎng)系統(tǒng)（圖2，圖3）。蜂巢培養(yǎng)系統(tǒng)由蜂巢式多工位模塊及配套的無(wú)菌密閉二氧化碳培養(yǎng)箱組成，二氧化碳培養(yǎng)箱在各培養(yǎng)工位應(yīng)能實(shí)現(xiàn)獨(dú)立的參數(shù)控制。工位上的各培養(yǎng)箱均采用密閉設(shè)計(jì)，培養(yǎng)期間的氣體交換均通過(guò)除菌級(jí)過(guò)濾器處理，配置快速傳遞接口（RTP）與細(xì)胞制備隔離器實(shí)現(xiàn)快速無(wú)菌對(duì)接。在生產(chǎn)開(kāi)始前，培養(yǎng)箱可與細(xì)胞制備隔離器對(duì)接聯(lián)通后通過(guò)生物去污染對(duì)內(nèi)部環(huán)境進(jìn)行凈化。在生產(chǎn)周期內(nèi)，培養(yǎng)箱可根據(jù)工藝需求與細(xì)胞制備隔離器無(wú)菌對(duì)接，進(jìn)行內(nèi)部培養(yǎng)容器的無(wú)菌傳遞。進(jìn)行培養(yǎng)工序時(shí)，培養(yǎng)箱與細(xì)胞制備隔離器分離，轉(zhuǎn)運(yùn)至蜂巢培養(yǎng)系統(tǒng)的培養(yǎng)工位內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。集成培養(yǎng)系統(tǒng)配備單個(gè)或多個(gè)可獨(dú)立控制參數(shù)的培養(yǎng)箱，采用與蜂巢培養(yǎng)系統(tǒng)類(lèi)似的密閉設(shè)計(jì)和氣體除菌處理，但采用在生產(chǎn)周期內(nèi)與細(xì)胞制備隔離器保持連續(xù)整體對(duì)接的模式，其每個(gè)培養(yǎng)箱的艙門(mén)可獨(dú)立地向細(xì)胞制備隔離器艙體進(jìn)行開(kāi)啟。在生產(chǎn)開(kāi)始前，培養(yǎng)箱與細(xì)胞制備隔離器對(duì)接聯(lián)通后進(jìn)行生物6T/SHQAP003—2023去污染，對(duì)內(nèi)部環(huán)境進(jìn)行凈化。在生產(chǎn)周期內(nèi)，培養(yǎng)箱可開(kāi)啟艙門(mén)與細(xì)胞制備隔離器對(duì)接進(jìn)行內(nèi)部培養(yǎng)容器的無(wú)菌傳遞。進(jìn)行培養(yǎng)工序時(shí)，培養(yǎng)箱關(guān)閉艙門(mén)但仍與細(xì)胞制備隔離器保持對(duì)接。圖2細(xì)胞制備隔離器與蜂巢培養(yǎng)系統(tǒng)示意圖圖3細(xì)胞制備隔離器與集成培養(yǎng)系統(tǒng)示意圖除了蜂巢和集成培養(yǎng)系統(tǒng)外，細(xì)胞制備隔離器還可與其他密閉培養(yǎng)系統(tǒng)（例如一次性生物反應(yīng)器）配套使用。5驗(yàn)證要求7T/SHQAP003—20235.1細(xì)胞制備隔離器的確認(rèn)和驗(yàn)證要求細(xì)胞制備隔離器基于無(wú)菌隔離器的平臺(tái)設(shè)計(jì)，其確認(rèn)和驗(yàn)證工作包括了對(duì)無(wú)菌隔離器的確認(rèn)和驗(yàn)證，以及對(duì)隔離器內(nèi)部配置的細(xì)胞制備工藝所需儀器和設(shè)備的確認(rèn)和驗(yàn)證。5.1.1設(shè)計(jì)確認(rèn)細(xì)胞制備隔離器設(shè)計(jì)確認(rèn)應(yīng)在設(shè)備制造前實(shí)施，對(duì)用戶(hù)需求符合性、設(shè)計(jì)文件、工藝流程圖、設(shè)備布局圖和公用工程信息等文件的確認(rèn)，并形成相應(yīng)的記錄，以保證制造出符合預(yù)期需求的隔離器。設(shè)計(jì)確認(rèn)時(shí)，建議重點(diǎn)關(guān)注以下內(nèi)容，并在后續(xù)的安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)和性能確認(rèn)中進(jìn)行核查。1）以細(xì)胞治療產(chǎn)品的質(zhì)量屬性和工藝需求為設(shè)計(jì)原則，如細(xì)胞類(lèi)型，細(xì)胞操作工序，細(xì)胞培養(yǎng)方式及生產(chǎn)規(guī)模等，規(guī)劃隔離器的整體設(shè)計(jì)。2）根據(jù)操作的細(xì)胞類(lèi)型不同，需關(guān)注：a.控溫模塊的溫度控制參數(shù)、容量等是否滿(mǎn)足生產(chǎn)工藝所需的控溫需求。b.傳遞艙的生物去污染方式是否適合活性物料（例如細(xì)胞、生物活性試劑）的傳遞。3）根據(jù)細(xì)胞操作工序，需關(guān)注：a.隔離器內(nèi)部需要集成的其他設(shè)備，如離心機(jī)、顯微鏡、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀等的類(lèi)型、數(shù)量和安裝位置。b.如有集成設(shè)備，應(yīng)確認(rèn)風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)生物去污染的有效性，如控溫模塊艙體、離心機(jī)離心艙等較難去污的位置。c.集成設(shè)備的材質(zhì)與生物去污染過(guò)程的兼容性。4）根據(jù)培養(yǎng)方式，需關(guān)注集成培養(yǎng)系統(tǒng)或蜂巢培養(yǎng)系統(tǒng)與隔離器之間的傳遞是否滿(mǎn)足防污染要求。5）根據(jù)生產(chǎn)規(guī)模情況，需關(guān)注：a.傳遞艙的容量、物料架設(shè)計(jì)，是否滿(mǎn)足細(xì)胞樣本及其他物料的傳遞需求。b.隔離器內(nèi)部的空間是否滿(mǎn)足單批次生產(chǎn)規(guī)模所需的空間和操作需求。c.廢棄物的傳出方式是否滿(mǎn)足生產(chǎn)過(guò)程所產(chǎn)生的廢棄物量的傳出需求。6）生產(chǎn)操作中的人機(jī)工學(xué)設(shè)計(jì)。5.1.2安裝確認(rèn)細(xì)胞制備隔離器的安裝確認(rèn)一般在工廠驗(yàn)收測(cè)試合格后，設(shè)備運(yùn)輸至生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)完成安裝和調(diào)試結(jié)束后實(shí)施。安裝確認(rèn)的內(nèi)容應(yīng)包含部件確認(rèn)、材質(zhì)確認(rèn)、儀器儀表的校準(zhǔn)確認(rèn)、公用工程確認(rèn)、隔離器完整性確認(rèn)（包括艙體密閉完整性、過(guò)濾器完整性、手套完整性等）和控制系統(tǒng)的硬件確認(rèn)及軟件版本確8T/SHQAP003—2023認(rèn)等。在安裝確認(rèn)中，還應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生產(chǎn)工藝的操作需求，確認(rèn)細(xì)胞制備工藝相關(guān)的儀器設(shè)備（如離心機(jī)、顯微鏡、培養(yǎng)箱對(duì)接口和溫度控制模塊等）安裝的合理性和可操作性。5.1.3運(yùn)行確認(rèn)細(xì)胞制備隔離器的運(yùn)行確認(rèn)，一般包含如下內(nèi)容：1)控制系統(tǒng)功能的確認(rèn)：報(bào)警功能、互鎖功能（例如傳遞艙的雙門(mén)互鎖、操作艙運(yùn)行時(shí)的開(kāi)門(mén)互鎖等）、權(quán)限控制、數(shù)據(jù)記錄、數(shù)據(jù)通訊接口、電子簽名、審計(jì)追蹤、系統(tǒng)備份與恢復(fù)，以及在線(xiàn)監(jiān)測(cè)功能（如懸浮粒子采樣、浮游菌采樣、風(fēng)速監(jiān)測(cè)、壓差監(jiān)測(cè)、溫濕度監(jiān)測(cè)等功能）。2)風(fēng)速、壓差、氣流流型（靜態(tài)）、粒子（靜態(tài)）、噪音和照度等確認(rèn)，可參考ISO14644-3《潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境-第三部分:測(cè)試方法》和JB/T20175《無(wú)菌隔離器》的要求進(jìn)行。3)傳遞艙快速生物去污染和傳遞功能確認(rèn)。4)如果配置離心機(jī)、顯微鏡、溫度控制模塊和廢液排出系統(tǒng)時(shí)，還應(yīng)進(jìn)行下列項(xiàng)目的確認(rèn)：a.離心機(jī)控制的集成確認(rèn)：需確認(rèn)離心機(jī)的啟停、轉(zhuǎn)速、運(yùn)行時(shí)間等是否能被隔離器系統(tǒng)的控制系統(tǒng)所集成并記錄，離心機(jī)的操作應(yīng)滿(mǎn)足審計(jì)追蹤要求。b.顯微鏡確認(rèn)：需確認(rèn)顯微鏡的成像系統(tǒng)是否能觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)情況，觀察結(jié)果是否能存儲(chǔ)。c.溫度控制模塊確認(rèn)：需確認(rèn)溫度控制模塊在裝載物料情況下的溫度控制范圍和精度是否能滿(mǎn)足細(xì)胞制備工藝過(guò)程對(duì)溫度的控制需求。d.廢液排出系統(tǒng)的防污染確認(rèn)：需確認(rèn)廢液排出系統(tǒng)防污染、防倒灌措施的有效性。5.1.4性能確認(rèn)細(xì)胞制備隔離器性能確認(rèn)項(xiàng)目包括操作艙和快速傳遞艙的生物去污染效果確認(rèn)和殺孢子劑排殘確認(rèn)，以及操作艙的潔凈度確認(rèn)。操作艙和快速傳遞艙在進(jìn)行生物去污染效果確認(rèn)前，應(yīng)根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)工藝需求，確定物料和工具的裝載量和裝載方式；生物去污染程序參數(shù)宜在考慮實(shí)際工藝裝載的情況下，通過(guò)去污染循環(huán)開(kāi)發(fā)的方式進(jìn)行確定。生物去污染效果確認(rèn)、殺孢子劑殘留測(cè)試的范圍不僅應(yīng)包括細(xì)胞制備隔離器艙體內(nèi)部的情況，還應(yīng)考慮到離心機(jī)離心艙內(nèi)部的情況，以及所對(duì)接連通去污染的培養(yǎng)箱內(nèi)部的情況。生物去污染效果確認(rèn)和殺孢子劑殘留確認(rèn)可參考中國(guó)藥典通則9206《無(wú)菌檢查用隔離系統(tǒng)驗(yàn)證和應(yīng)用指導(dǎo)原則》的要求執(zhí)行。在建立操作艙的生物去污染程序時(shí)，應(yīng)關(guān)注艙內(nèi)殺孢子劑殘留對(duì)細(xì)胞暴露工序可能造成的影響（詳見(jiàn)“7.生物去污染過(guò)程對(duì)細(xì)胞影響評(píng)估”）?？焖賯鬟f艙在建立處理細(xì)胞樣本的快速生物去污染程序時(shí)，應(yīng)關(guān)注去污染傳遞過(guò)程對(duì)細(xì)胞樣本可能造成的影響（詳見(jiàn)“7.生物去污染過(guò)程對(duì)細(xì)胞影響評(píng)估”）。細(xì)胞制備隔離器艙體內(nèi)部的潔凈環(huán)境應(yīng)進(jìn)行確認(rèn)，其懸浮粒子(靜態(tài))，沉降菌，浮游菌和表面微生物的確認(rèn)測(cè)試方法可參照《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范附錄1：無(wú)菌藥品》的要求進(jìn)行，應(yīng)符合A級(jí)空氣潔凈度的要求。9T/SHQAP003—20235.1.5無(wú)菌維持確認(rèn)（靜態(tài)）應(yīng)確認(rèn)細(xì)胞制備隔離器艙體內(nèi)部完成生物去污染并進(jìn)入生產(chǎn)狀態(tài)的情況下，A級(jí)潔凈環(huán)境所能維持的時(shí)間。無(wú)菌維持所需達(dá)到的時(shí)間，可根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)工藝中所需要的時(shí)間進(jìn)行，無(wú)菌維持能力可參照中國(guó)藥典通則9206《無(wú)菌檢查用隔離系統(tǒng)驗(yàn)證和應(yīng)用指導(dǎo)原則》的方法進(jìn)行測(cè)試。5.2培養(yǎng)系統(tǒng)的確認(rèn)和驗(yàn)證要求5.2.1設(shè)計(jì)確認(rèn)培養(yǎng)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)確認(rèn)，包括對(duì)用戶(hù)需求符合性，工藝流程圖，設(shè)備布局圖和公用工程等信息進(jìn)行確認(rèn)，并形成相應(yīng)的記錄，以確保設(shè)備滿(mǎn)足用戶(hù)的工藝需求。設(shè)計(jì)確認(rèn)時(shí)，應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注以下內(nèi)容，并在后續(xù)的安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)和性能確認(rèn)中進(jìn)行核查：1）培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度控制、氣體濃度控制是否滿(mǎn)足所生產(chǎn)的細(xì)胞的培養(yǎng)需求；2）培養(yǎng)箱的密封性設(shè)計(jì)以及泄漏率要求；3）培養(yǎng)箱內(nèi)艙體的容量和裝載架是否滿(mǎn)足單批次生產(chǎn)的培養(yǎng)容器的放置需求，內(nèi)部結(jié)構(gòu)是否方便培養(yǎng)容器的傳遞出入；4）培養(yǎng)箱內(nèi)部進(jìn)行生物去污染方式的有效性，內(nèi)部材質(zhì)與生物去污染方式的兼容性；5）生物去污染后排殘的方式，對(duì)所培養(yǎng)細(xì)胞活性的影響；6）培養(yǎng)箱的防差錯(cuò)和防混淆設(shè)計(jì)的有效性（如培養(yǎng)箱誤開(kāi)啟，蜂巢培養(yǎng)箱與培養(yǎng)工位錯(cuò)誤對(duì)接）；7）采用蜂巢培養(yǎng)系統(tǒng)時(shí)，用戶(hù)應(yīng)確認(rèn)培養(yǎng)箱與隔離器對(duì)接的方式的合理性和可操作性，以及轉(zhuǎn)運(yùn)的路徑設(shè)計(jì)的合理性；8）采用集成培養(yǎng)系統(tǒng)時(shí)，應(yīng)重點(diǎn)確認(rèn)各培養(yǎng)箱門(mén)的密閉性，以及培養(yǎng)容器在培養(yǎng)箱和隔離器艙體之間轉(zhuǎn)移的可操作性。5.2.2安裝確認(rèn)培養(yǎng)系統(tǒng)的安裝確認(rèn)一般在工廠驗(yàn)收測(cè)試合格后，設(shè)備運(yùn)輸至生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)完成安裝和調(diào)試結(jié)束后實(shí)施。安裝確認(rèn)應(yīng)包含部件確認(rèn)、材質(zhì)確認(rèn)、儀器儀表的校準(zhǔn)確認(rèn)、公用工程確認(rèn)和控制系統(tǒng)的硬件確認(rèn)及軟件版本確認(rèn)等。5.2.3運(yùn)行確認(rèn)培養(yǎng)系統(tǒng)的運(yùn)行確認(rèn)，一般包括以下工作：1)控制系統(tǒng)的功能確認(rèn)：報(bào)警功能、權(quán)限控制、數(shù)據(jù)記錄、數(shù)據(jù)通訊接口、電子簽名、審計(jì)追蹤、系統(tǒng)備份與恢復(fù)等；2)培養(yǎng)箱艙體的密封性確認(rèn)：通過(guò)泄漏測(cè)試確認(rèn)各培養(yǎng)箱艙體的單獨(dú)的密封性；3)采用蜂巢培養(yǎng)系統(tǒng)時(shí)，需確認(rèn)各培養(yǎng)箱與細(xì)胞制備隔離器進(jìn)行快速無(wú)菌對(duì)接的過(guò)程符合要求；T/SHQAP003—20234)采用集成培養(yǎng)系統(tǒng)時(shí)，需通過(guò)泄漏測(cè)試確認(rèn)培養(yǎng)系統(tǒng)各培養(yǎng)箱艙體與細(xì)胞制備隔離器對(duì)接后整體的密封性；5)當(dāng)培養(yǎng)箱采用負(fù)壓培養(yǎng)模式時(shí)，需確認(rèn)培養(yǎng)周期內(nèi)的負(fù)壓維持功能。5.2.4性能確認(rèn)培養(yǎng)系統(tǒng)配置的每個(gè)培養(yǎng)箱箱體，應(yīng)按YY1621《醫(yī)用二氧化碳培養(yǎng)箱》標(biāo)準(zhǔn)要求的內(nèi)容，進(jìn)行獨(dú)立的溫度、濕度和二氧化碳濃度等性能確認(rèn)，如培養(yǎng)箱有氧氣濃度的控制要求時(shí)，則還需確認(rèn)培養(yǎng)箱的氧濃度控制范圍、控制精度和開(kāi)門(mén)恢復(fù)時(shí)間等是否滿(mǎn)足需求。培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行性能確認(rèn)時(shí)還應(yīng)對(duì)培養(yǎng)箱與細(xì)胞制備隔離器對(duì)接狀態(tài)下實(shí)施的生物去污染效果進(jìn)行確認(rèn)，并通過(guò)微生物采樣確認(rèn)其潔凈度達(dá)到了GMPA級(jí)的水平。培養(yǎng)系統(tǒng)中的各培養(yǎng)箱在完成初次生物去污染后，在細(xì)胞培養(yǎng)周期內(nèi)一般不再對(duì)培養(yǎng)箱內(nèi)部進(jìn)行二次生物去污染，因此應(yīng)針對(duì)不同種類(lèi)的細(xì)胞治療產(chǎn)品，考慮其細(xì)胞培養(yǎng)擴(kuò)增的周期時(shí)長(zhǎng)，評(píng)估培養(yǎng)箱一次生物去污染后的無(wú)菌維持時(shí)間所能滿(mǎn)足的最長(zhǎng)細(xì)胞培養(yǎng)周期。無(wú)菌維持確認(rèn)過(guò)程中，應(yīng)模擬實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程所需的對(duì)接頻率，進(jìn)行模擬對(duì)接，并在第一次與隔離器一起生物去污染后，以及后續(xù)每次模擬對(duì)接時(shí)，對(duì)培養(yǎng)系統(tǒng)內(nèi)部進(jìn)行采樣，以評(píng)估其是否維持在無(wú)菌狀態(tài)。5.3周期性再確認(rèn)和再驗(yàn)證用戶(hù)應(yīng)對(duì)細(xì)胞制備隔離器和培養(yǎng)系統(tǒng)定期進(jìn)行再確認(rèn)，以確認(rèn)其持續(xù)保持驗(yàn)證狀態(tài)；此外，當(dāng)系統(tǒng)關(guān)鍵運(yùn)行程序發(fā)生重大變更，系統(tǒng)重要設(shè)備進(jìn)行大修或更換，或生產(chǎn)工藝進(jìn)行重大變更時(shí)，應(yīng)進(jìn)行再驗(yàn)證，再驗(yàn)證的時(shí)機(jī)和計(jì)劃應(yīng)基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估情況確定。再確認(rèn)和再驗(yàn)證的項(xiàng)目設(shè)計(jì)應(yīng)圍繞密閉系統(tǒng)的完整性、生物去污染程序的有效性、無(wú)菌狀態(tài)的維持能力和細(xì)胞工藝設(shè)備的有效性等關(guān)鍵性能進(jìn)行評(píng)估，至少包括以下內(nèi)容：1）高效過(guò)濾器完整性確認(rèn)；2）細(xì)胞制備隔離器艙體的壓差、風(fēng)速控制確認(rèn)；3）細(xì)胞制備隔離器艙體滿(mǎn)載條件下的生物去污染程序驗(yàn)證和潔凈度確認(rèn)；4）溫度控制模塊等重要的細(xì)胞工藝處理設(shè)備的確認(rèn)；5）培養(yǎng)系統(tǒng)性能確認(rèn)的各項(xiàng)目；6）RTP接口的密封性確認(rèn)。6生產(chǎn)管理要求采用空間密閉系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞治療產(chǎn)品的生產(chǎn)時(shí)，應(yīng)依據(jù)《細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)質(zhì)量管理指南（試行）》第9章的要求，對(duì)生產(chǎn)工藝進(jìn)行充分的驗(yàn)證，包括對(duì)無(wú)菌生產(chǎn)環(huán)節(jié)進(jìn)行無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)。生產(chǎn)過(guò)程中應(yīng)注意采取有效措施，防止污染和交叉污染，并防止混淆和差錯(cuò)，控制產(chǎn)品質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。6.1無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)注意事項(xiàng)T/SHQAP003—2023采用空間密閉系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞治療產(chǎn)品的生產(chǎn)時(shí)，應(yīng)結(jié)合實(shí)際生產(chǎn)工藝，設(shè)計(jì)合理的無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn),無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)可參考《無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)指南（無(wú)菌制劑）》和《藥品共線(xiàn)生產(chǎn)質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理指南》的要求，制訂對(duì)應(yīng)的實(shí)施方案，無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)除滿(mǎn)足《細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)質(zhì)量管理指南（試行）》的要求外，還應(yīng)注意以下事項(xiàng)：1）空間密閉系統(tǒng)的無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)應(yīng)至少包括自生產(chǎn)原輔料進(jìn)入細(xì)胞制備隔離器進(jìn)行生物去污染開(kāi)始，直至細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束后的收獲、制劑與分裝的全過(guò)程中的產(chǎn)品暴露工序的人工操作，如有未模擬的無(wú)菌生產(chǎn)操作，應(yīng)當(dāng)進(jìn)行充分的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，以說(shuō)明不模擬的合理性。2）采用空間密閉系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞治療產(chǎn)品的生產(chǎn)時(shí)，由于在培養(yǎng)過(guò)程中需要頻繁在細(xì)胞制備隔離器與培養(yǎng)系統(tǒng)之間進(jìn)行轉(zhuǎn)移，在無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)按確定的生產(chǎn)工藝流程模擬整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程中所有的轉(zhuǎn)移操作過(guò)程，并應(yīng)當(dāng)側(cè)重于與各系統(tǒng)連接有關(guān)的步驟（例如隔離器與培養(yǎng)系統(tǒng)的對(duì)接）。3）無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)宜按實(shí)際生產(chǎn)時(shí)間進(jìn)行模擬，如需縮短模擬某些操作(如密閉培養(yǎng))的時(shí)長(zhǎng)，則應(yīng)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估以說(shuō)明縮短的合理性并提供相關(guān)數(shù)據(jù)證明縮短時(shí)長(zhǎng)對(duì)無(wú)菌性沒(méi)有影響。4）當(dāng)采用一套細(xì)胞制備隔離器與一套培養(yǎng)系統(tǒng)（包含多個(gè)培養(yǎng)工位）進(jìn)行細(xì)胞治療產(chǎn)品的生產(chǎn)時(shí)，無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)應(yīng)考慮連續(xù)清場(chǎng)以切換生產(chǎn)不同批次產(chǎn)品的情況。在進(jìn)行實(shí)際模擬試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)考慮生產(chǎn)操作及排產(chǎn)的最差條件，以驗(yàn)證多批次共用一套設(shè)備生產(chǎn)時(shí)對(duì)無(wú)菌生產(chǎn)的影響。驗(yàn)證時(shí)，應(yīng)選擇生產(chǎn)周期最長(zhǎng)、生產(chǎn)步驟最多和無(wú)菌操作最頻繁等的情況進(jìn)行模擬試驗(yàn)。5）當(dāng)一個(gè)生產(chǎn)區(qū)域安裝有多套細(xì)胞制備隔離器和多套培養(yǎng)系統(tǒng)（每套包含多個(gè)培養(yǎng)工位）時(shí)，應(yīng)根據(jù)多批次多個(gè)工藝步驟操作的限速步驟確定滿(mǎn)負(fù)荷運(yùn)轉(zhuǎn)條件下的排產(chǎn)計(jì)劃，進(jìn)行無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)，模擬試驗(yàn)過(guò)程中，應(yīng)考慮多批次在多套設(shè)備上同時(shí)運(yùn)行的情況。6）無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)應(yīng)盡可能模擬日常無(wú)菌生產(chǎn)工藝，包括所有對(duì)無(wú)菌結(jié)果有影響的關(guān)鍵操作及生產(chǎn)中可能出現(xiàn)的各種干預(yù)和最差條件。如快速生物去污染條件下的物料傳入、管路的對(duì)接、固體/液體廢棄物處理、無(wú)菌生產(chǎn)期間的樣本取樣或物料的傳出等。7）當(dāng)工藝中包括與產(chǎn)品直接接觸，但隨后被丟棄的物料時(shí)（例如細(xì)胞換液的廢棄培養(yǎng)基等），在無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)中應(yīng)連同其包裝一并進(jìn)行培養(yǎng)，除非可以清楚地證明其不會(huì)影響產(chǎn)品的無(wú)菌性。6.2細(xì)胞產(chǎn)品生產(chǎn)工藝驗(yàn)證的前提條件在正式使用空間密閉系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)前，應(yīng)根據(jù)空間密閉系統(tǒng)的特點(diǎn)，結(jié)合產(chǎn)品的工藝特性，制定合適的生產(chǎn)工藝流程，并對(duì)生產(chǎn)工藝進(jìn)行驗(yàn)證。進(jìn)行工藝驗(yàn)證時(shí)應(yīng)當(dāng)符合以下要求：1）應(yīng)完成細(xì)胞制備隔離器、培養(yǎng)系統(tǒng)及其他配套工藝設(shè)備的確認(rèn)和驗(yàn)證，并確定各設(shè)備的運(yùn)行參2）應(yīng)完成工藝過(guò)程（例如生物去污染）對(duì)細(xì)胞影響的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，并根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估確定實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中設(shè)備的運(yùn)行參數(shù)、供體材料樣本及生產(chǎn)用原輔料的傳遞方式及其裝載方式。3）制定工藝驗(yàn)證方案時(shí)，應(yīng)考慮實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程的最差條件。如同一生產(chǎn)區(qū)域或同一房間有多套細(xì)胞制備隔離器和培養(yǎng)系統(tǒng)的，應(yīng)評(píng)估這些細(xì)胞制備隔離器和培養(yǎng)系統(tǒng)在實(shí)際生產(chǎn)時(shí)運(yùn)行能力及運(yùn)行組合，T/SHQAP003—2023同時(shí)還應(yīng)結(jié)合生產(chǎn)環(huán)境、操作人員等影響因素作為最差條件予以考慮，并經(jīng)過(guò)驗(yàn)證且對(duì)因自體供者個(gè)體差異引起的可能多批次多工序疊加的情況進(jìn)行充分的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。6.3防止污染和交叉污染控制措施根據(jù)《細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)質(zhì)量管理指南（試行）》的要求，結(jié)合空間密閉系統(tǒng)的特點(diǎn)和細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)的工藝，在細(xì)胞產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中應(yīng)當(dāng)采取適當(dāng)?shù)拇胧┍M可能防止污染和交叉污染，控制質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)采取的以下措施如：1）同一細(xì)胞制備隔離器內(nèi)不得同時(shí)進(jìn)行不同批次產(chǎn)品的操作。2）同一房間布置多臺(tái)細(xì)胞制備隔離器時(shí)，細(xì)胞制備隔離器應(yīng)配備獨(dú)立直接排風(fēng)，不應(yīng)直接向操作間內(nèi)排風(fēng)，且所有排風(fēng)不可循環(huán)使用。3）細(xì)胞制備隔離器應(yīng)配置合理的環(huán)境監(jiān)測(cè)措施，對(duì)操作艙體內(nèi)部的壓差、風(fēng)速、溫濕度、粒子、微生物等進(jìn)行在線(xiàn)監(jiān)測(cè)，以確保整個(gè)生產(chǎn)操作過(guò)程中操作艙體內(nèi)部無(wú)菌環(huán)境的有效性。所有監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)應(yīng)有記錄，并可被追溯。4）在進(jìn)行細(xì)胞產(chǎn)品生產(chǎn)前，應(yīng)確認(rèn)細(xì)胞制備隔離器、培養(yǎng)系統(tǒng)及其他配套的設(shè)備儀器的運(yùn)行狀態(tài)，并確認(rèn)設(shè)備處于有效的驗(yàn)證周期范圍內(nèi)，需要校驗(yàn)的儀器處于有效的校驗(yàn)周期范圍內(nèi)。應(yīng)在每班次生產(chǎn)前對(duì)隔離器和手套的完整性進(jìn)行確認(rèn)，且在生產(chǎn)后對(duì)手套再進(jìn)行完整性確認(rèn)。5）每批次產(chǎn)品生產(chǎn)前，需對(duì)細(xì)胞制備隔離器的隔離器內(nèi)艙體、培養(yǎng)箱內(nèi)艙體、溫控模塊艙體和離心機(jī)艙體等，進(jìn)行有效的清潔，避免污染物殘留和交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)。6）每次產(chǎn)品生產(chǎn)操作前，應(yīng)盡可能將當(dāng)次生產(chǎn)操作所需的所有材料、儀器和工器具等一次性全部放入細(xì)胞制備隔離器的隔離器操作艙體內(nèi)，按照經(jīng)驗(yàn)證的模式進(jìn)行裝載，并進(jìn)行有效的生物去污染。對(duì)于不能進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間去污染的細(xì)胞包裝，生產(chǎn)物料和儀器等，應(yīng)通過(guò)傳遞艙進(jìn)行快速的生物去污染后，再傳入隔離器操作艙內(nèi)。在進(jìn)行快速的生物去污染前，應(yīng)采用經(jīng)確認(rèn)的擦拭消毒方式對(duì)所需傳遞的表面進(jìn)行預(yù)處理。7）需與細(xì)胞制備隔離器對(duì)接的培養(yǎng)系統(tǒng)，在該批次產(chǎn)品生產(chǎn)前，應(yīng)與細(xì)胞制備隔離器對(duì)接，進(jìn)行完整性測(cè)試，并在完成生物去污染后再使用。8）在利用快速傳遞接口（RTP）進(jìn)行無(wú)菌傳遞時(shí)，對(duì)于RTP對(duì)接后形成的外露密封圈，應(yīng)及時(shí)用無(wú)菌的消毒劑進(jìn)行處理，在傳遞過(guò)程中應(yīng)遵循無(wú)菌操作要求，避免觸碰密封圈。9）單次生產(chǎn)操作結(jié)束后，應(yīng)評(píng)估操作過(guò)程中留在隔離器操作艙體內(nèi)的殘留物對(duì)背景潔凈室的污染風(fēng)險(xiǎn)，如果存在風(fēng)險(xiǎn)，則需對(duì)細(xì)胞制備隔離器的隔離器艙體進(jìn)行生物去污染后再開(kāi)啟艙門(mén)。10）當(dāng)生產(chǎn)過(guò)程中發(fā)生污染情況，應(yīng)開(kāi)啟偏差調(diào)查，對(duì)污染微生物進(jìn)行溯源調(diào)查，調(diào)查污染原因是否與細(xì)胞制備隔離器或培養(yǎng)系統(tǒng)相關(guān)，采取相應(yīng)的維修、測(cè)試、再驗(yàn)證等措施后，才能重新投入生產(chǎn)。6.4防止混淆和差錯(cuò)控制措施采用空間密閉系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞治療產(chǎn)品的生產(chǎn)操作，應(yīng)當(dāng)采取措施盡可能防止混淆和差錯(cuò)，如：T/SHQAP003—20231）空間密閉系統(tǒng)應(yīng)與產(chǎn)品追溯系統(tǒng)相關(guān)聯(lián)，整個(gè)產(chǎn)品批次生產(chǎn)過(guò)程中的設(shè)備關(guān)鍵運(yùn)行參數(shù)，應(yīng)有記錄，并與產(chǎn)品批號(hào)信息關(guān)聯(lián)，且可被追溯。2）每批次產(chǎn)品生產(chǎn)開(kāi)始前，應(yīng)當(dāng)采取有效措施核實(shí)供者材料和產(chǎn)品的標(biāo)識(shí)信息是否與所對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)任務(wù)中的信息一致，且在細(xì)胞制備隔離器和培養(yǎng)系統(tǒng)的運(yùn)行記錄信息中予以記錄。3）對(duì)于每批次產(chǎn)品，在生產(chǎn)周期內(nèi)需要多次送入細(xì)胞制備隔離器進(jìn)行操作時(shí)，每次送入時(shí)，應(yīng)對(duì)細(xì)胞制備隔離器重新建立隔離器的運(yùn)行記錄編號(hào)，并將當(dāng)前操作的產(chǎn)品信息于隔離器的運(yùn)行記錄中予以記錄。細(xì)胞制備隔離器生物去污染后，操作人員應(yīng)核對(duì)生產(chǎn)任務(wù)中的產(chǎn)品信息，確保產(chǎn)品信息準(zhǔn)確并一致后，方可進(jìn)行后續(xù)操作。每批次產(chǎn)品在細(xì)胞制備隔離器內(nèi)運(yùn)行特定工序期間形成的操作日志、報(bào)警日志、關(guān)鍵參數(shù)數(shù)據(jù)應(yīng)真實(shí)可靠地記錄在隔離器的運(yùn)行記錄中。7生物去污染過(guò)程對(duì)細(xì)胞影響評(píng)估隔離器和培養(yǎng)系統(tǒng)在細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)期間，為降低污染和交叉污染風(fēng)險(xiǎn)，宜采用汽相過(guò)氧化氫對(duì)細(xì)胞工藝操作環(huán)境、培養(yǎng)環(huán)境和物料傳遞過(guò)程進(jìn)行生物去污染，但需考慮以下因素可能造成的影響和風(fēng)1）生物去污染可能對(duì)包裝的穿透影響。在每次進(jìn)入隔離器的生產(chǎn)開(kāi)始前，需將生產(chǎn)過(guò)程中所有需使用的物料置于隔離器的隔離器艙體內(nèi)進(jìn)行生物去污染，或在生產(chǎn)過(guò)程將細(xì)胞樣本等通過(guò)快速生物去污染傳遞艙進(jìn)行快速的生物去污染處理后傳入。因此需評(píng)估生物去污染過(guò)程中，殺孢子劑可能穿透物料包裝（包括一次性使用耗材的包裝對(duì)其內(nèi)部盛放的細(xì)胞樣本、培養(yǎng)基或其他物料可能造成不利影響的風(fēng)險(xiǎn)，因此在工藝驗(yàn)證前，需對(duì)所用的包裝進(jìn)行殺孢子劑穿透測(cè)試，并評(píng)估其對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的風(fēng)險(xiǎn)。2）生物去污染時(shí)長(zhǎng)和溫度對(duì)細(xì)胞等活性物料的影響，當(dāng)細(xì)胞樣本通過(guò)快速生物去污染處理時(shí)，需評(píng)估生物去污染期間的環(huán)境溫度和等待時(shí)間對(duì)細(xì)胞可能造成的影響，在滿(mǎn)足生物去污染效果的前提下，可考慮優(yōu)化生物去污染循環(huán)參數(shù)，縮短等待時(shí)間，并減少溫度的上升，以降低對(duì)細(xì)胞的影響。3）殺孢子劑殘留對(duì)工藝的影響。當(dāng)細(xì)胞制備隔離器和配套培養(yǎng)箱在完成內(nèi)部艙體生物去污染后，可能存在一定的殺孢子劑殘留，應(yīng)對(duì)細(xì)胞操作環(huán)境、培養(yǎng)環(huán)境中的殺孢子劑殘留水平進(jìn)行評(píng)估，評(píng)估殘留對(duì)后續(xù)暴露生產(chǎn)工藝、細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程可能造成的風(fēng)險(xiǎn)，并根據(jù)評(píng)估策略制訂相應(yīng)的控制策略。生產(chǎn)企業(yè)可考慮以細(xì)胞生長(zhǎng)情況（如細(xì)胞活率、擴(kuò)增倍數(shù)等）作為考察指標(biāo)，對(duì)生產(chǎn)中生物去污染處理過(guò)程對(duì)細(xì)胞的影響進(jìn)行綜合評(píng)估。例如，可采用模擬測(cè)試，將空間密閉系統(tǒng)生物去污染處理模式下的細(xì)胞與非空間密閉系統(tǒng)操作模式下細(xì)胞的生長(zhǎng)情況進(jìn)行比對(duì)，評(píng)估實(shí)際影響是否在可接受范圍內(nèi)。對(duì)于可能產(chǎn)生不利影響的，可考慮在保證生物去污染效果的前提下，采取調(diào)整生物去污染循環(huán)參數(shù)、改進(jìn)包裝形式等措施進(jìn)行優(yōu)化，以降低生物去污染過(guò)程的對(duì)細(xì)胞的不利影響。8生物安全要求因細(xì)胞產(chǎn)品的供者材料來(lái)源于人體，其生產(chǎn)應(yīng)當(dāng)符合國(guó)家生物安全的相關(guān)規(guī)