人教版(選擇性必修三)高中生物分層訓(xùn)練AB卷第3章 基因工程（B卷·能力提升練）（原卷版）

班級姓名學(xué)號分?jǐn)?shù)第3章基因工程（B卷·能力提升練）（時間：60分鐘，滿分：100分）一、選擇題（共25小題，共50分，每小題2分，每小題只有一個正確選項）1．(2022春·內(nèi)蒙古呼倫貝爾·高一?？计谀?在基因工程中被稱為“基因的剪刀”“基因的的針線”的工具分別是

(

)A．限制酶和連接酶 B．限制酶和水解酶C．限制酶和運(yùn)載體 D．連接酶和運(yùn)載體2．(2022春·吉林·高二校聯(lián)考期末)質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體，下列關(guān)于質(zhì)粒的敘述，錯誤的是(

)A．作為載體的質(zhì)粒上有限制性內(nèi)切核酸酶的切割位點B．作為載體的質(zhì)粒上存在特殊的標(biāo)記基因C．質(zhì)粒結(jié)構(gòu)簡單，獨立于細(xì)菌擬核DNA之外D．質(zhì)粒是基因工程中的重要工具酶之一3．(2022春·湖北鄂州·高二統(tǒng)考期末)如圖為部分限制酶的酶切位點，下列相關(guān)敘述正確的是A．限制酶識別單鏈DNA分子的特定核苷酸序列B．限制酶作用于DNA分子一端后可產(chǎn)生4個游離磷酸基團(tuán)C．限制酶HindⅢ作用后，產(chǎn)生的黏性末端可表示為—AGCTTD．限制酶SpeⅠ和XbaⅠ作用后的黏性末端可被DNA連接酶連接4．(2022春·遼寧大連·高二統(tǒng)考期末)下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述錯誤的是(

)A．新鮮的豬肝、菜花、香蕉等可作為提取DNA的材料B．切碎的洋蔥加入研磨液充分研磨、過濾，保留濾液C．利用DNA不溶于酒精而某些蛋白質(zhì)溶于酒精的原理，可初步分離DNA與蛋白質(zhì)D．將白色絲狀物溶于2mol/L的NaCl溶液中，再加入二苯胺試劑，混勻后即呈藍(lán)色5．(2022春·山東日照·高二統(tǒng)考期末)質(zhì)粒是基因工程中常用的分子載體。下列敘述正確的是(

)A．作為外源DNA分子的載體，質(zhì)粒需具有限制酶能夠切割的位點B．質(zhì)粒上的抗生素合成基因可作為標(biāo)記基因用于重組質(zhì)粒的篩選和鑒定C．質(zhì)粒上的基因表達(dá)不遵循中心法則，所以可用作外源DNA分子的載體D．質(zhì)粒是獨立于細(xì)菌擬核DNA之外的鏈狀DNA分子，可在體外進(jìn)行自我復(fù)制6．(2022春·江蘇鹽城·高二江蘇省響水中學(xué)?？计谀?在基因工程操作中，科研人員利用兩種限制酶(R1和R2)處理基因載體，進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測，結(jié)果如圖所示。以下相關(guān)敘述中，正確的是(

)A．電泳時，核酸的移動方向是從正極到負(fù)極B．該載體最可能為環(huán)形DNA分子C．限制酶R1與R2的切點最短相距約400bpD．兩種限制酶在載體上識別的序列可能相同7．(2022秋·河北張家口·高二張家口市第一中學(xué)校考期中)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似(如下圖所示)。圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。下列敘述錯誤的是(

)A．用PCR方法擴(kuò)增目的基因時不必知道基因的全部序列B．設(shè)計引物時需要避免引物之間形成堿基互補(bǔ)配對而造成引物自連C．復(fù)性溫度過高可能導(dǎo)致PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物D．第四輪循環(huán)產(chǎn)物中同時含有引物A和引物B的DNA片段所占的比例為15/168．(2022秋·山東濟(jì)南·高三統(tǒng)考期中)科學(xué)家利用PCR技術(shù)搭建了世界上第一個古DNA研究的超凈室，利用現(xiàn)代人的DNA列設(shè)計并合成了一種類似磁鐵的“引子”，成功將極其微量的古人類DNA從土壤沉積物的多種生物的DNA中識別并分離出來，完成一種古人類——尼安德特人的全基因組測序。下列有關(guān)說法正確的是(

)A．設(shè)計“引子”的DNA序列信息只能來自現(xiàn)代人的核DNAB．尼安德特人的雙鏈DNA可直接與“引子”結(jié)合從而被識別C．PCR檢測古人類DNA時需“引子”，解旋酶和耐高溫的DNA聚合酶D．設(shè)計“引子”前不需要知道尼安德特人的DNA序列9．(2022春·黑龍江綏化·高二?？计谀?下列有關(guān)人胰島素基因表達(dá)載體的敘述，正確的是()A．表達(dá)載體中的胰島素基因可通過人肝細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得B．借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來C．表達(dá)載體的復(fù)制和胰島素基因的表達(dá)均啟動于復(fù)制原(起)點D．啟動子和終止密碼子均在胰島素基因的轉(zhuǎn)錄中起作用10．(2022秋·浙江·高三校聯(lián)考期中)下圖表示某轉(zhuǎn)基因動物的構(gòu)建流程圖，下列敘述正確的是(

)A．若擴(kuò)增DNA的引物序列太短，則擴(kuò)增出非目的基因片段的概率將增大B．若將重組DNA分子導(dǎo)入到大腸桿菌細(xì)胞中，一般能直接獲得具有活性的目的基因表達(dá)產(chǎn)物C．若胚胎培養(yǎng)到囊胚階段，進(jìn)行胚胎分割時可用胰蛋白酶進(jìn)行處理D．胚胎移植時需對受體進(jìn)行注射促排卵劑處理，有利于提高胚胎移植成功率11．(2022秋·河北張家口·高二張家口市第一中學(xué)校考期中)戊型肝炎病毒是一種RNA病毒，ORF2基因編碼的結(jié)構(gòu)蛋白(pORF2)位于病毒表面，構(gòu)成病毒的衣殼。我國科研人員利用基因工程技術(shù)，在大腸桿菌中表達(dá)pORF2，制備戊型肝炎疫苗，過程如圖。下列關(guān)于該疫苗的敘述，正確的是(

)A．過程①需要的酶是RNA聚合酶，原料是A、U、G、CB．重組基因表達(dá)載體上的啟動子需來源于戊型肝炎病毒C．過程⑤需要用聚乙二醇處理大腸桿菌使其處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)D．過程⑥大量制備pORF2蛋白前應(yīng)做相應(yīng)的檢測與鑒定12．(2022春·山東棗莊·高二統(tǒng)考期末)限制酶和DNA連接酶是重組DNA技術(shù)常用的工具酶，限制酶通常將DNA分子切割成帶有黏性末端的DNA片段，而DNA連接酶可縫合帶有黏性末端的DNA片段。據(jù)圖分析錯誤的是(

)A．圖示三個黏性末端一定由兩種不同的限制酶切割產(chǎn)生B．圖示中共有兩種黏性末端，其中甲與乙黏性末端相同C．a(chǎn)點核苷酸之間通過磷酸二酯鍵連接，b處核苷酸之間通過氫鍵連接D．催化甲形成的限制酶有可能不識別由甲、乙形成的重組DNA分子13．(2022秋·江蘇泰州·高三統(tǒng)考期末)下列為高中生物學(xué)中的部分實驗，相關(guān)敘述正確的是(

)①DNA的粗提取與鑒定②綠葉中色素的提取和分離③探究植物細(xì)胞的吸水和失水④生物組織中脂肪的鑒定⑤調(diào)查草地中某雙子葉植物的種群密度⑥探究抗生素對細(xì)菌的選擇作用A．①②④均必須使用相同濃度的乙醇B．③④均必須使用高倍顯微鏡才能觀察到C．①②實驗原理都有物質(zhì)的溶解度不同D．⑤⑥選取樣方、挑選菌落時均要隨機(jī)取樣14．(2022春·山東聊城·高二統(tǒng)考期末)大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和洗滌劑處理后，擬核DNA就會纏繞在細(xì)胞壁碎片上，靜置一段時間，質(zhì)粒分布在上清液中，利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA。用限制酶Ⅰ和Ⅱ處理提取的產(chǎn)物，電泳結(jié)果如圖所示。下列關(guān)于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的敘述錯誤的是(

)A．提取DNA時可加入酒精，使溶于酒精的蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解B．將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺試劑進(jìn)行鑒定C．用限制酶Ⅰ和Ⅱ處理提取產(chǎn)物的電泳結(jié)果說明未提取到質(zhì)粒D．溶菌酶能溶解大腸桿菌細(xì)胞壁，洗滌劑能瓦解其細(xì)胞膜，但對DNA沒有影響15．(2022秋·江蘇泰州·高三統(tǒng)考期末)實時熒光RT-PCR用于新冠病毒核酸檢測的原理是：在PCR復(fù)性過程中探針會先與DNA的一條模板鏈結(jié)合，探針兩側(cè)分別帶有熒光基團(tuán)和抑制熒光發(fā)出的淬滅基團(tuán)，在新鏈延伸過程中，DNA聚合酶會破壞探針，導(dǎo)致熒光基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離而發(fā)出熒光。利用RTPCR進(jìn)行核酸檢測的相關(guān)過程如下圖，下列相關(guān)敘述錯誤的是(

)A．若檢測結(jié)果有強(qiáng)烈熒光信號發(fā)出，說明被檢測者可能感染了病毒B．進(jìn)行RTPCR擴(kuò)增需要的酶有逆轉(zhuǎn)錄酶、解旋酶和熱穩(wěn)定DNA聚合酶C．還可以通過檢測病毒感染后產(chǎn)生的蛋白來檢測，其原理是抗原—抗體雜交D．PCR反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中才能進(jìn)行，必須控制好循環(huán)溫度和時間16．(2022秋·北京·高三北京四中?？计谥?噬菌體展示技術(shù)(如圖)可將某些蛋白質(zhì)呈遞至噬菌體表面，便于對目標(biāo)蛋白進(jìn)行篩選、鑒定。以下對該技術(shù)的分析錯誤的是(

)A．建立噬菌體展示庫需限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶B．可利用抗原—抗體雜交技術(shù)篩選目標(biāo)蛋白C．可用動物細(xì)胞做宿主培養(yǎng)噬菌體D．該技術(shù)可用于獲得與抗原親和力更強(qiáng)的抗體及其基因。17．(2022春·河北廊坊·高二統(tǒng)考期末)下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是(

)A．基因工程所用的工具酶是限制酶和DNA聚合酶B．在重組質(zhì)粒構(gòu)建時只能用一種酶切割質(zhì)粒和目的基因C．選用細(xì)菌作為重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞是因為細(xì)菌繁殖快D．只要目的基因進(jìn)入了受體細(xì)胞就能成功地實現(xiàn)表達(dá)18．(2022春·江蘇南通·高二金沙中學(xué)校考期中)葡萄糖異構(gòu)酶在工業(yè)上應(yīng)用廣泛，科學(xué)家將其第138位甘氨酸替換為脯氨酸后，其最適溫度提高了10℃左右。相關(guān)敘述正確的是(

)A．蛋白質(zhì)功能是由氨基酸的種類和數(shù)量決定B．改造蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)可通過改造基因結(jié)構(gòu)實現(xiàn)C．蛋白質(zhì)工程不可以定向改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)D．酶最適溫度提高是因為脯氨酸比甘氨酸更耐熱19．(2022春·福建龍巖·高二統(tǒng)考期末)某生物中發(fā)現(xiàn)一種基因的表達(dá)產(chǎn)物是具有較強(qiáng)抗菌性和溶血性的多肽P1，科研人員利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的蛋白質(zhì)藥物。下列敘述錯誤的是(

)A．多肽P1的結(jié)構(gòu)和功能符合該生物生存的需要B．抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的蛋白質(zhì)基因可以通過人工重新合成C．獲得預(yù)期的藥物首先要設(shè)計抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)D．利用抗原一抗體雜交的方法對該蛋白質(zhì)藥物的效果進(jìn)行檢測20．(2022春·福建莆田·高二莆田一中?？计谀?人葡萄糖腦苷脂酶(hGC)缺乏癥是一種常染色體隱性遺傳病，患者因缺乏hGC基因而不能合成hGC，導(dǎo)致脾臟腫大、梗死和破裂，所以通常活不過10歲。傳統(tǒng)的治療方法是從人的胎盤中提取hGC后注入人體，治療價格十分昂貴。科學(xué)家現(xiàn)已將hGC基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法成功轉(zhuǎn)入煙草中，并高效表達(dá)，其過程如下圖所示。下列說法正確的是(

)A．轉(zhuǎn)化是指將hGC基因?qū)霟煵菁?xì)胞，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程B．過程③一般采用顯微注射將農(nóng)桿菌導(dǎo)入煙草細(xì)胞C．從含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌中獲取hGC基因的表達(dá)產(chǎn)物可直接用于疾病治療D．從愈傷組織中提取蛋白質(zhì)作為抗原進(jìn)行抗原-抗體雜交檢測hGC基因是否轉(zhuǎn)錄21．(2022春·廣東肇慶·高二統(tǒng)考期末)干擾素是一種具有干擾病毒復(fù)制作用的糖蛋白，臨床上廣泛用于治療病毒感染性疾病。下圖為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細(xì)胞的流程，EcoRⅠ、BamHⅠ為限制酶。下列有關(guān)敘述錯誤的是(

)A．過程①依據(jù)的原理是DNA半保留復(fù)制，需要用到成對的引物B．過程②構(gòu)建基因表達(dá)載體時，目的基因必須位于啟動子和終止子之間C．過程③中Ti質(zhì)粒的T-DNA能攜帶目的基因整合到根瘤農(nóng)桿菌的染色體DNA中D．過程④需要控制培養(yǎng)基中植物激素的種類和比例，以防愈傷組織細(xì)胞發(fā)生分化22．(2022春·山西呂梁·高二統(tǒng)考期末)基因工程和蛋白質(zhì)工程是現(xiàn)代生物技術(shù)的兩項重要技術(shù)。下列有關(guān)敘述合理的是(

)A．基因工程和蛋白質(zhì)工程中不一定都含有轉(zhuǎn)錄和翻譯過程B．通過改造胰島素基因研發(fā)出速效胰島素屬于蛋白質(zhì)工程的應(yīng)用C．利用基因工程技術(shù)可以制造出自然界沒有的蛋白質(zhì)D．蛋白質(zhì)工程不需要對基因的堿基序列進(jìn)行改造23．(2022春·山東威?！じ叨y(tǒng)考期末)CRISPR-Cas9基因編輯是通過基因工程技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞從而實現(xiàn)對靶向基因進(jìn)行特定DNA修飾的過程。其核心功能是“向?qū)А焙汀扒懈睢?，通過轉(zhuǎn)錄出的gRNA識別受體細(xì)胞中的靶向基因序列行使“向?qū)А惫δ?，在gRNA的引導(dǎo)下Cas9蛋白特異性切割靶向基因雙鏈實現(xiàn)“切割”功能。但實際操作中常因識別序列較短、切割不精確等問題引起“脫靶效應(yīng)”，導(dǎo)致正?；蚧蚰硞€未知功能的基因被破壞，給機(jī)體正常功能的維持埋下隱患，甚至可能影響后代。dCas9蛋白是由Cas9基因突變后表達(dá)形成的失去切割功能的蛋白質(zhì)，可與靶向基因的啟動子區(qū)域結(jié)合使靶向基因失去功能，此作用可隨dCas9蛋白的脫落被解除。下列說法錯誤的是(

)A．gRNA識別受體細(xì)胞中的靶向基因序列時堿基互補(bǔ)配對方式為A-T、U-A、C-GB．dCas9蛋白不能使磷酸二酯鍵斷裂C．dCas9通過直接阻止靶基因的翻譯發(fā)揮作用D．用dCas9蛋白代替Cas9進(jìn)行基因編輯可避免因“脫靶效應(yīng)”對基因造成的破壞24．(2022秋·北京朝陽·高三統(tǒng)考期中)高溫導(dǎo)致葡萄果實潰爛，影響品質(zhì)和產(chǎn)量。為探究葡萄響應(yīng)熱脅迫的機(jī)制，研究者檢測42℃處理后葡萄幼苗中V基因表達(dá)水平，結(jié)果如圖。以下說法不正確的是(

)A．V基因表達(dá)出V蛋白的過程需要三種RNA參與B．提取葡萄的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增可檢測V基因表達(dá)水平C．實驗結(jié)果表明V蛋白與葡萄響應(yīng)熱脅迫的調(diào)控過程相關(guān)D．敲除V基因檢測葡萄的抗熱能力證明V蛋白是否參與熱脅迫25．(2022春·山東威?！じ叨y(tǒng)考期末)自然界中存在一類“單向雜交不親和性”(UCI)玉米，其花粉可以外傳并產(chǎn)生可育后代，但不接受外來的花粉。研究發(fā)現(xiàn)該類玉米中有多個UCI位點，其中之一的Ga2位點不親和是由于普通材料的花粉管在Ga2材料的花絲中延伸時受阻所致。為探究Ga2位點在玉米無隔離制種及生產(chǎn)中的應(yīng)用價值，研究人員通過回交轉(zhuǎn)育將Ga2位點導(dǎo)入雜交種“鄭單958”的雙親并通過雜交獲得“Ga2型鄭單958”。種植結(jié)果表明，含有純合Ga2位點的“鄭單958”花粉管頂端的甲酯化程度增加，可規(guī)避其他普通玉米花粉的污染而保持自身種子純度。下列說法錯誤的是(

)A．單向雜交不親和是指該類玉米無法與其他玉米雜交的現(xiàn)象B．單向雜交不親和有利于該類玉米在自然狀態(tài)下保持純種和擴(kuò)大自身基因的傳播C．含有純合Ga2位點的“鄭單958”花粉管頂端的甲酯化程度增加可以阻止普通玉米花粉管在其花絲中的延伸D．回交轉(zhuǎn)育將Ga2位點導(dǎo)入雜交種“鄭單958”的原理是基因重組二、非選擇題（共5小題，共50分）26．(2022秋·山東青島·高三青島二中?？计谥?PCR技術(shù)是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，其最大的特點是能將微量的DNA大幅增加。I.如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，簡捷地分析出已知序列兩側(cè)的序列，具體流程如圖1(以EcoRI酶切為例)所示。(1)步驟Ⅱ中所用的DNA連接酶的作用是催化形成____________，從而形成環(huán)狀DNA。(2)步驟Ⅲ中的復(fù)性溫度設(shè)定是成敗的關(guān)鍵，溫度過高會破壞______________________的堿基配對。(3)若下表所列為已知的DNA序列和設(shè)計的一些PCR引物，步驟Ⅲ選用的PCR引物必須是__________(填數(shù)字“①、②、③、④”)。DNA序列(虛線處省略了部分核苷酸序列)已知序列PCR引物①5′-AACTATGCGCTCATGA-3′

②5′-AGAGGCTACGCATTGC-3′③5′-GCAATGCGTAGCCTCT-3′

④5′-TCATGAGCGCATAGTT-3′(4)新冠病毒核酸定性檢測原理：先以病毒RNA為模板利用__________酶合成cDNA，再通過PCR技術(shù)擴(kuò)增相應(yīng)的DNA片段，然后在擴(kuò)增產(chǎn)物中加入特異的核酸探針。如果檢測到特異的雜交分子則核酸檢測為陽性。此方法為RT-PCR技術(shù)。(5)如果探針是帶有熒光標(biāo)記的，即為“實時熒光RT-PCR技術(shù)”。在PCR反應(yīng)體系中，加入的熒光探針與模板DNA的某條鏈互補(bǔ)結(jié)合，探針完整時，報告熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅熒光基團(tuán)吸收。當(dāng)子鏈延伸至探針處，探針被TaqDNA聚合酶降解，使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而發(fā)出熒光(如圖2所示)。即每擴(kuò)增1個DNA分子，就有1個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。①若最初該反應(yīng)體系中只有1個DNA分子模板，進(jìn)行第4次循環(huán)時，需要消耗熒光探針____________個。②檢測時，熒光強(qiáng)度一般要達(dá)到或超過閾值才能確診。若檢測出現(xiàn)假陰性，推測可能的一個原因__________________________________。27．(2023秋·山東棗莊·高三統(tǒng)考期末)新冠病毒(+RNA)的刺突蛋白S通過與人體黏膜細(xì)胞表面的ACE2受體結(jié)合而進(jìn)入細(xì)胞，是宿主抗體的重要作用位點。下圖1是科研人員利用新冠病毒的+RNA提取S蛋白基因和S蛋白受體結(jié)合域RBD基因作為抗原基因序列，研制新冠病毒雙抗原疫苗的技術(shù)路線。已知PCR1與PCR2要分別進(jìn)行，然后將產(chǎn)物混合，使用引物1和引物4進(jìn)行PCR3，最終獲得大量S-RBD融合基因(1300bp)。(1)PCR3過程中，片段1與片段2連接形成S-RBD融合基因，需要使用_______酶，該酶的作用是_______。(2)為使S-RBD融合基因在工程菌中表達(dá)時，先合成S蛋白，在重組pX質(zhì)粒中，引物4對應(yīng)的區(qū)段要連接在靠近_______(填“啟動子"或“終止子”)的部位，原因是_______。(3)為初步檢測過程B構(gòu)建是否成功，對重組pX系列質(zhì)粒及其酶切產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳檢測，結(jié)果如圖2。據(jù)圖可知，酶切時用到的酶是_______，重組質(zhì)粒pX2和pX5構(gòu)建成功的依據(jù)是_______。(4)在工程菌的篩選時，可先后用兩種抗生素進(jìn)行影印培養(yǎng)實驗(將首次培養(yǎng)的菌落用滅菌絨布沾取印到新培養(yǎng)基上培養(yǎng))，在第二次培養(yǎng)時存活的菌落是否含有目的基因_______(填“是”或“否”)。鑒定pX質(zhì)粒是否導(dǎo)入工程菌還可以采用的方法是_______。(5)試從免疫學(xué)角度分析此種雙抗原疫苗比常規(guī)S蛋白疫苗更具優(yōu)勢的原因_______。28．(2022秋·江蘇南通·高三海門中學(xué)?？计谥?科研小組利用基因工程技術(shù)將“抗蟲基因”轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞成功培育出抗蟲棉，該技術(shù)所用的含“抗蟲基因”的DNA與質(zhì)粒上相關(guān)限制酶的酶切位點分別如圖1、圖2所示(不同限制酶的識別序列和酶切位點：BamHI5－G↓GATCC－3'，BclI5'－T↓GATCA－3'，Sau3AI5－↓GATC－3'，HindⅢ5'－A↓AGCTT－3')。請分析并回答以下問題：(1)將抗蟲基因轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞前，可以通過PCR擴(kuò)增獲得大量抗蟲基因，PCR擴(kuò)增前應(yīng)根據(jù)______設(shè)計引物。培育轉(zhuǎn)基因棉花的核心工作是______。由圖1和圖2分析可知，研究人員應(yīng)選擇______限制酶處理含抗蟲基因的DNA片段，在處理質(zhì)粒的時候應(yīng)選擇______限制酶。(2)蛋白酶抑制劑基因也是一種抗蟲基因，某研究團(tuán)隊將胰蛋白酶抑制劑(NaPI)和胰凝乳蛋白酶抑制劑(StPin1A)的基因單獨或共同轉(zhuǎn)化，獲得轉(zhuǎn)基因植株。①將抗蟲基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)時，除了采用我國科學(xué)家獨創(chuàng)的花粉管通道法，還可以采用______法，使用該方法時，應(yīng)將抗蟲基因插入到質(zhì)粒的______區(qū)域。②標(biāo)記基因可用于檢測目的基因是否導(dǎo)入，由圖2可知，應(yīng)選含有______的培養(yǎng)基篩選含有重組質(zhì)粒的細(xì)胞。為了檢測目的基因在受體細(xì)胞中是否穩(wěn)定表達(dá)，在分子水平上的檢測方法為______。③圖3為將胰蛋白酶抑制劑(NaPI)和胰凝乳蛋白酶抑制劑(StPin1A)的基因單獨或共同轉(zhuǎn)化的實驗結(jié)果，據(jù)結(jié)果分析，____(選填“NaPI”或“StpinlA”或“NaPI＋StpinlA”)轉(zhuǎn)基因棉花的抗蟲效果最佳，得出該結(jié)論的原因是___。29．(2022秋·福建龍巖·高三上杭一中校考期末)小麥赤霉病是世界范圍內(nèi)嚴(yán)重危害小麥生產(chǎn)安全的真菌性病害，育種工作者為了選育抗赤霉病高產(chǎn)小麥，使用N品系純合抗病小麥與B1品系純合高產(chǎn)小麥作為材料進(jìn)行雜交，F(xiàn)1代與B1品系連續(xù)多代回交，逐代挑選抗赤霉病小麥，最后選育抗病高產(chǎn)小麥。(1)實驗中發(fā)現(xiàn)，回交后代中有的子代能夠抵抗赤霉菌侵入，有的子代能夠抵抗赤霉菌在體內(nèi)擴(kuò)散，且抵抗侵人或擴(kuò)散的程度在個體之間存在差異，說明抗赤霉病性狀由______決定，并且受到______影響。(