生物制藥工藝學(xué)試題及答案

生物制藥工藝學(xué)名詞解釋第一章：1.藥品：一定劑型和規(guī)格的藥品并賦予一定的形式（如包裝），并且通過(guò)有關(guān)部門(mén)的同意，有明確的作用用途。藥品：能影響機(jī)體生理、生化和病理過(guò)程，用以防止、診療、治療疾病和計(jì)劃生育的化學(xué)物質(zhì)。2.生物藥品Biopharmaceuticals：以生物體、生物組織或其成分為原料綜合應(yīng)用生物學(xué)、物理化學(xué)與當(dāng)代藥學(xué)的原理與辦法加工制成的藥品。3.生物活性Biologicalactivity,Bioactivity：對(duì)活組織如疫苗有影響的特性。4.酶工程enzymeengineering：酶學(xué)與工程學(xué)互相滲入結(jié)合，發(fā)展形成的生物技術(shù)，它是從應(yīng)用目的出發(fā)，研究酶和應(yīng)用酶的特異催化功效，并通過(guò)工程化過(guò)程將對(duì)應(yīng)原料轉(zhuǎn)化成所需產(chǎn)物的技術(shù)。5.固定化酶immobilizedenzyme：是指借助于物理和化學(xué)的辦法把酶束縛在一定空間內(nèi)并含有催化活性的酶制劑。6.組合生物合成combinatorialbiosynthesis（組合生物學(xué)combinatorialbiology）：應(yīng)用基因重組技術(shù)重新組合微生物藥品的基因簇，產(chǎn)生某些非天然的化合物。7.藥品基因組學(xué)：一門(mén)研究個(gè)人的基因遺傳如何影響身體對(duì)藥品反映的科學(xué)。8.凝聚作用coagulation：指在電解質(zhì)作用下，膠粒粒子的擴(kuò)散雙電子層排斥電位減少，破壞了膠體系統(tǒng)的分散狀態(tài)，使膠體粒子發(fā)生聚集的過(guò)程。9.萃取extraction：將物質(zhì)從基質(zhì)中分離出來(lái)的過(guò)程。普通指有機(jī)溶劑將物質(zhì)從水相轉(zhuǎn)移到有機(jī)相的過(guò)程。10.反萃取stripping/backextraction：將萃取液與反萃取劑相接觸，使某種被萃入有機(jī)相的溶質(zhì)轉(zhuǎn)入水相的過(guò)程。11.萃取因素/萃取比：萃取溶質(zhì)進(jìn)入萃取相的總量與該溶質(zhì)在萃余相中總量之比。12.分離因素separationfactor：在同一萃取體系內(nèi)兩種溶質(zhì)在同樣條件下分派系數(shù)的比值。13.雙相萃取技術(shù)two-aqueousphaseextraction：運(yùn)用不同的高分子溶液互相混合可產(chǎn)兩相或多相系統(tǒng)，靜置平衡后，分成互不相溶的兩個(gè)水相，運(yùn)用物質(zhì)在互不相溶的兩水相間分派系數(shù)的差別來(lái)進(jìn)行萃取的辦法。14.超臨界流體萃取技術(shù)：運(yùn)用處在臨界壓力和臨界溫度以上的某些溶劑流體所含有特異增加物質(zhì)溶解能力來(lái)進(jìn)行分離純化的技術(shù)。15.固相析出分離法solidphasecrystallization：通過(guò)變化溶液條件，使溶質(zhì)以固體形式從溶液中分出的操作技術(shù)。16.鹽析法saltprecipitation：運(yùn)用多個(gè)生物分子在濃鹽溶液中溶解度的差別，通過(guò)向溶液中引入一定數(shù)量的中性鹽，使目的物或雜蛋白以沉淀析出，達(dá)成純化目的的辦法。17.有機(jī)溶劑沉淀法organicsolventprecipitation：向水溶液中加入一定量親水性的有機(jī)溶劑，減少溶質(zhì)的溶解度，使其沉淀析出的分離純化辦法。18.等電點(diǎn)沉淀法：運(yùn)用蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)溶解度最低而多個(gè)蛋白質(zhì)又含有不同等電點(diǎn)的特點(diǎn)進(jìn)行分離的辦法。19.結(jié)晶crystallization：溶液中的溶質(zhì)在一定條件下因分子有規(guī)則的排列而結(jié)合成晶體。20.吸附adsorption：物質(zhì)從流動(dòng)相（氣體或液體）濃縮到固體表面從而達(dá)成分離的過(guò)程。21.凝膠層析gelchromatography：將樣品混合物通過(guò)一定孔徑的凝膠固定相，由于各組分流經(jīng)體積的差別，使不同分子量的組分得以分離的層析辦法。22.離子交換法：運(yùn)用溶液中帶電粒子與離子交換劑之間結(jié)合力的差別進(jìn)行23.色譜聚焦chromatofocusing：是一種高分辨的新型的蛋白質(zhì)純化技術(shù)，根據(jù)蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)，結(jié)合離子交換技術(shù)的大容量色譜。24.多緩沖劑：一種兩性電解質(zhì)緩沖劑，是分子量大小不同的多個(gè)組分的多羧基多氨基化合物。25.親和純化技術(shù)affinitypurification：運(yùn)用生物分子間的特異性結(jié)合作用的原理進(jìn)行生物物質(zhì)分離純化的技術(shù)。26.親和層析affinitychromatography：運(yùn)用生物大分子含有與某些對(duì)應(yīng)的分子專一性可逆結(jié)合的特性而建立的分離純化技術(shù)。27.配基ligand：在親和層析中起可逆結(jié)合的特異性物質(zhì)。28.載體matrix：與配基結(jié)合的層析介質(zhì)。29.親和過(guò)濾affinityfiltration：將親和層析和膜過(guò)濾技術(shù)結(jié)合運(yùn)用，涉及親和錯(cuò)流過(guò)濾和親和膜分離。30.親和錯(cuò)流過(guò)濾affinitycrossflowfiltrationACFF：將親和層析與超濾技術(shù)結(jié)合，高分子底物經(jīng)專一可逆的親和反映后，用膜進(jìn)行錯(cuò)流過(guò)濾，兼有親和層析與膜過(guò)濾的優(yōu)點(diǎn)。31.親和膜affinitymembrane：運(yùn)用親和配基修飾的微濾膜為親和吸附介質(zhì)親和純化目的蛋白質(zhì)，是固定床親和層析的變型。32.親和萃取affinityextraction/親和分派：affinitypartitioning：運(yùn)用偶聯(lián)親和配基PEG為成相聚合物進(jìn)行的雙水相萃取。33.親和反膠團(tuán)萃取affinity-basedreversedmicellarextraction：指在反膠團(tuán)相中除普通的表面活性劑以外，添加另一種親水頭部為親和配基的助表面活性劑，通過(guò)親和配基與目的分子的親和結(jié)合作用，增進(jìn)目的產(chǎn)物在反膠團(tuán)相的分派。34.親和沉淀affinityprecipitation：生物親和互相作用與沉淀分離相結(jié)合的生物大分子的分離純化技術(shù)。35.親和電泳affinityelectrophoresis：將電泳與親和層析相結(jié)合新發(fā)盛的一種新型制備規(guī)模的生物分離技術(shù)。36.離心技術(shù)centrifugation：運(yùn)用離心力分離復(fù)雜混合物組分的辦法，37.離心力centrifugationforce：在一定角度速度下作圓周運(yùn)動(dòng)的任何物體都受到向外的力。38.相對(duì)離心力relativecentrifugationforceRCF：實(shí)際離心場(chǎng)轉(zhuǎn)化為重力加速度的倍數(shù)。39.沉降速度：在離心力作用下，物質(zhì)粒子于單位時(shí)間沿離心力方向移動(dòng)的距離。40.沉降系數(shù)：在單位離心力場(chǎng)中，顆粒的沉降速度。41.膜分離技術(shù)membraneseparationtechnology：運(yùn)用天然或人工合成的、含有選擇透過(guò)性的薄膜，以外界能量或化學(xué)位差為推動(dòng)力，對(duì)雙組分或多組分體系進(jìn)行分離、分級(jí)、提純或富集的過(guò)程。42.超濾技術(shù)ultrafiltrationtechnology：分子級(jí)膜分離手段，以壓力差為推動(dòng)力將不同分子量的物質(zhì)進(jìn)行選擇性分離。43.塔板理論theplatemodel：闡明了色譜、蒸餾和萃取之間的相似性，將色譜柱構(gòu)想成由許多液液萃取單元或理論塔板構(gòu)成。44.速率理論：研究多個(gè)動(dòng)力學(xué)因素對(duì)峰展寬的影響。45.純化purification：根據(jù)目的蛋白與雜質(zhì)之間的差別進(jìn)行純化。46.反義核酸：指天然存在或人工合成的，能與靶DNA或RNA堿基互補(bǔ)，并能與之結(jié)合特異阻斷其翻譯的一段DNA或RNA。47.黏多糖：指含有氨基糖與糖醛酸或它的衍生物的多糖。48.抗生素：由生物在其生命過(guò)程中所產(chǎn)生的一類在微量濃度下就能選擇性地克制它種生物或細(xì)胞生長(zhǎng)地次級(jí)代謝產(chǎn)物。49.細(xì)胞因子cytokines：由健康人血細(xì)胞增殖、分離、提純或由重組DNA技術(shù)制成地多肽類或蛋白質(zhì)類制劑。簡(jiǎn)答：生物藥品特性藥理學(xué)特性：活性強(qiáng)、治療針對(duì)性強(qiáng)、毒副作用少、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、可能含有免疫原性；理化特性：含量低、雜質(zhì)多、工藝復(fù)雜、收率低、構(gòu)成構(gòu)造復(fù)雜、空間構(gòu)造決定生物活性、活性高、有效劑量小。生化制藥工藝中分離純化的特點(diǎn)生物材料構(gòu)成復(fù)雜、目的物含量低、易變性失活、分離辦法有很大經(jīng)驗(yàn)成分、環(huán)節(jié)多、產(chǎn)品驗(yàn)證與化學(xué)上純度概念不完全相似。分離純化原理根據(jù)分子形狀與分子大小、根據(jù)電荷差別、根據(jù)分子極性與溶解度大小、根據(jù)吸附特性、根據(jù)生物配基特性鹽析的環(huán)節(jié)：鹽溶→鹽析（血漿→硫酸銨飽和濃度為30%→提取上清液→硫酸銨飽和濃度為33%→沉淀γ-球蛋白）有機(jī)溶劑沉淀法優(yōu)點(diǎn)：乙醇等有機(jī)溶劑易除去，產(chǎn)品更純凈；密度差較大，離心收集。缺點(diǎn)：容易使蛋白質(zhì)變性，操作常需低溫，成本高，需防火防爆。吸附法的優(yōu)缺點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：設(shè)備簡(jiǎn)樸、操作簡(jiǎn)便、價(jià)廉、安全。少用或不用有機(jī)溶劑，吸附過(guò)程中PH變化小，較少引發(fā)生物活性物質(zhì)的變性失活。缺點(diǎn)：選擇性差，收率不高；某些無(wú)機(jī)吸附劑性能不穩(wěn)定。凝膠層析的特點(diǎn)操作簡(jiǎn)便，所需設(shè)備簡(jiǎn)樸；分離效果好，重復(fù)性高；分離條件緩和；應(yīng)用廣泛；分辨率不高，分離操作較慢。離子交換樹(shù)脂交聯(lián)度代表什么意義交聯(lián)度上升，膨脹度下降，K值增大，樹(shù)脂潛在的選擇能力提高；要有一定的膨脹度確保確保大分子可進(jìn)入顆粒內(nèi)部。親和層析對(duì)載體的規(guī)定充足功效化，與配基進(jìn)行共價(jià)連接；有較好的理化穩(wěn)定性和生物惰性；含有高度的水不溶性和親水性；含有多孔的立體網(wǎng)狀構(gòu)造，能使被親和吸附的大分子自由通過(guò)；應(yīng)為大小均勻的剛性小球。氨基酸類藥品的制造辦法：蛋白水解法、化學(xué)合成法、發(fā)酵法、酶法。蛋白質(zhì)水解法：以毛發(fā)等蛋白質(zhì)為原料，通過(guò)酸堿或酶水解成多個(gè)氨基酸混合物，經(jīng)分離純化獲得多個(gè)藥用氨基酸。發(fā)酵法：借助微生物在有氧或無(wú)氧條件下進(jìn)行生命活動(dòng)制備微生物菌體或其代謝產(chǎn)物的過(guò)程。酶轉(zhuǎn)化法：在特定酶的作用下使某些有機(jī)物轉(zhuǎn)化成對(duì)應(yīng)氨基酸?；瘜W(xué)合成法：以酸、醛、酯及某些氨基酸為原料，經(jīng)氨解、水解、縮合、取代及氫化還原等化學(xué)反映合成氨基酸。蛋白質(zhì)提取分離純化辦法材料選擇（富含所需要蛋白質(zhì)或多肽成分的，易于獲得、易于提取、無(wú)害的生物組織。）→提?。ㄗ畲蟪潭忍崛∮行С煞郑軇┻x擇是核心）→分離純化（等電點(diǎn)、分子形狀和大小、溶解度、電離性質(zhì)、功效專一性、溶劑系統(tǒng)中的分派等）提取：以溶解性、穩(wěn)定性來(lái)選擇適宜的溶劑。純化分離辦法使用次序：原則：相似性質(zhì)的純化辦法普通不重復(fù)使用，純化辦法次序先后的安排上要考慮到有助于減少工序，提高效率?，F(xiàn)在臨床使用的胰島素來(lái)源動(dòng)物胰臟來(lái)源：經(jīng)動(dòng)物胰臟提取或適宜提取的豬、牛胰島素。半合成胰島素：以豬胰島素為原料，酶修飾后得到人胰島素。重組DNA技術(shù)生產(chǎn)胰島素：重組DNA技術(shù)生產(chǎn)人胰島素、速效胰島素、長(zhǎng)效胰島素。核酸的提取DNA的提?。浩胀ㄊ沁\(yùn)用DNA-核蛋白易溶于1mol/LNaCl溶液而不溶于0.14mol/L。RNA的提取：：運(yùn)用RNA-核蛋白易溶于0.14mol/LNaCl溶液而不溶于1mol/L的性質(zhì)，先提獲得到RNP。肌苷酸的發(fā)酵生產(chǎn)直接發(fā)酵法二步發(fā)酵法：發(fā)酵法生產(chǎn)肌苷；肌苷磷酸化半合成法生產(chǎn)肌苷酸：在發(fā)酵過(guò)程中添加前體物次黃嘌呤后，經(jīng)由微生物產(chǎn)生的胞外酶轉(zhuǎn)化成肌苷酸。核酸制備的辦法水解法、發(fā)酵法、半合成法酶類藥品的提取和純化原料選擇→生物材料的預(yù)解決→提取→濃縮→純化→結(jié)晶動(dòng)物材料預(yù)解決：機(jī)械法、凍融（冷到-10℃左右，再緩慢溶解至室溫，重復(fù)多次）、丙酮粉（組織經(jīng)丙酮快速脫水干燥制成丙酮粉）酶的結(jié)晶辦法鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法、復(fù)合結(jié)晶法、透析平衡法、等電點(diǎn)法條件選擇：酶的純度、酶的濃度、金屬離子、晶種、溫度、時(shí)間、ph注意事項(xiàng)：避免酶蛋白變性；避免輔因子丟失；避免酶被蛋白水解酶降解黏多糖在構(gòu)造上的特點(diǎn)：黏多糖基本上是由特殊的重復(fù)雙糖單位構(gòu)成，在此雙糖單位中涉及一種N-胰腺氨基己糖；黏多糖的構(gòu)成構(gòu)造單位中有兩種糖醛酸兩種氨基己糖；尚有若干其它單糖作為附加成分多糖分離純化的普通辦法原料→提取→除蛋白→透析→沉淀→粗品→純化抗生素發(fā)酵生產(chǎn)工藝1.青霉素發(fā)酵工藝的建立對(duì)抗生素工業(yè)有何意義？青霉素是發(fā)現(xiàn)最早，最卓越的一種B-內(nèi)酰胺類抗生素，它是抗生素工業(yè)的首要產(chǎn)品，青霉素是多個(gè)半合成抗生素的原料。青霉素的缺點(diǎn)是對(duì)酸不穩(wěn)定，不能口服，排泄快，對(duì)革蘭氏陰性菌無(wú)效。青霉素通過(guò)擴(kuò)環(huán)后，形成頭孢菌素母核，成為半合成頭孢菌素的原料。2.如何根據(jù)青霉素生產(chǎn)菌特性進(jìn)行發(fā)酵過(guò)程控制？青霉素在深層培養(yǎng)條件下，經(jīng)歷7個(gè)不同的時(shí)期，每個(gè)時(shí)期有其菌體形態(tài)特性，在規(guī)定時(shí)間取樣，通過(guò)顯鏡檢查這些形態(tài)變化，用于工程控制。第一期：分生孢子萌發(fā)，形成芽管，原生質(zhì)未分化，含有小泡。第二期：菌絲繁殖，原生質(zhì)體含有嗜堿性，類脂肪小顆粒。第三期：形成脂肪包含體，積累儲(chǔ)蓄物，沒(méi)有空洞，嗜堿性很強(qiáng)。第四期：脂肪包含體形成小滴并減少，中小空泡，原生質(zhì)體嗜堿性削弱，開(kāi)始產(chǎn)生抗生素。第五期：形成大空泡，有中性染色大顆粒，菌絲呈桶狀。脂肪包含體消失，青霉素產(chǎn)量提高。第六期：出現(xiàn)個(gè)別自溶細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)無(wú)顆粒，仍然桶狀，釋放游離氨，pH上升。第七期：菌絲完全自溶，僅有空細(xì)胞壁。一到四期為菌絲生長(zhǎng)久，三期的菌體適宜為種子。四到五期為生產(chǎn)期，生產(chǎn)能力最強(qiáng)，通過(guò)工藝方法，延長(zhǎng)此期，獲得高產(chǎn)。在第六期到來(lái)之前發(fā)束發(fā)酵。3.青霉素發(fā)酵工程的控制原理及其核心點(diǎn)是什么？控制原理：發(fā)酵過(guò)程需持續(xù)流加葡萄糖，硫酸銨以及前提物質(zhì)苯乙酸鹽，補(bǔ)糖率是最核心的控制指標(biāo)，不同時(shí)期分段控制。在青霉素的生產(chǎn)中，及時(shí)調(diào)節(jié)各個(gè)因素減少對(duì)產(chǎn)量的影響，如培養(yǎng)基，補(bǔ)充碳源，氮源，無(wú)機(jī)鹽流加控制，添加前體等；控制適宜的溫度和ph，菌體濃度。最后要注意消沫，影響呼吸代謝。4.青霉素提煉工藝中采用了哪些單元操作？青霉素不穩(wěn)定，發(fā)酵液預(yù)解決、提取和精制過(guò)程要條件溫和、快速，避免降解。提煉工藝涉及以下單元操作：①預(yù)解決與過(guò)濾：在于濃縮青霉素，除去大部分雜質(zhì)，變化發(fā)酵液的流變學(xué)特性，便于后續(xù)的分離純化過(guò)程。②萃?。浩湓硎乔嗝顾赜坞x酸易溶于有機(jī)溶劑，而青霉素易溶于水。③脫色：萃取液中添加活性炭，除去色素，熱源，過(guò)濾，除去活性炭。④結(jié)晶：青霉素鉀鹽在乙酸丁酯中溶解度很小，在乙酸丁酯萃取液中加入乙酸鉀-乙醇溶液，青霉素鉀鹽可直接結(jié)晶析出。氨基酸發(fā)酵工藝1.如何對(duì)谷氨酸發(fā)酵工藝過(guò)程進(jìn)行調(diào)控？發(fā)酵過(guò)程流加銨鹽、尿素、氨水等氮源，補(bǔ)充NH4+；生物素適量控制在2-5μg/L；pH控制在中性或微堿性；供氧充足；磷酸鹽適量。2.氨基酸生產(chǎn)菌有什么特性，為什么？L-谷氨酸發(fā)酵微生物的優(yōu)良菌株多在棒狀桿菌屬、小短桿菌屬、節(jié)桿菌屬和短桿菌屬中。含有下述共同特性：①細(xì)胞形態(tài)為短桿至棒狀；②無(wú)鞭毛，不運(yùn)動(dòng)；③不形成芽孢；④革蘭氏陽(yáng)性；⑤生物素缺點(diǎn)型；⑥三羧酸循環(huán)、戊糖磷酸途徑突變；⑦在通氣培養(yǎng)條件下產(chǎn)生大量L-谷氨酸。3.生物素在谷氨酸發(fā)酵過(guò)程中的作用是什么？生物素是不飽和脂肪酸合成過(guò)程中所需的乙酰CoA的輔酶。生物素缺點(diǎn)型菌種因不能合成生物素，從而克制了不飽和脂肪酸的合成。而不飽和脂肪酸是磷脂的構(gòu)成成分之一。因此，磷脂的合成量也對(duì)應(yīng)減少，這就會(huì)造成細(xì)胞膜構(gòu)造不完整，提高細(xì)胞膜對(duì)谷氨酸的通透性，解除其對(duì)谷氨酸脫氫酶的克制，源源不停生產(chǎn)谷氨酸。維生素發(fā)酵生產(chǎn)工藝1.比較分析現(xiàn)行維生素C的兩種生產(chǎn)工藝過(guò)程及本質(zhì)區(qū)別，有什么優(yōu)勢(shì)？現(xiàn)行的維生素c生產(chǎn)工藝過(guò)程有：萊氏化學(xué)合成法和兩步發(fā)酵法。萊氏化學(xué)合成法：D-葡萄糖為原料，進(jìn)過(guò)催化氫化生成D-山梨醇，然后生物氧化轉(zhuǎn)變?yōu)長(zhǎng)-山梨糖，酸性液中丙酮化，對(duì)α-β-二仲醇進(jìn)行保護(hù)。L-山梨糖高錳酸鉀在堿性溶液中氧化為二丙酮-2-酮-L-古龍酸，除去丙酮，內(nèi)酯化和烯醇化得到L-抗壞血酸。整個(gè)合成過(guò)程必須保持第4位碳原子的構(gòu)型不變。兩部發(fā)酵法：①催化氫化：催化氫化D-葡萄糖，控制壓力，在氫做還原劑、鎳做催化劑的條件下，將醛基還原成醇基，從而制備D-山梨醇。②第一部發(fā)酵：D-山梨醇C2位羥基氧化為羰基，其它基團(tuán)不變，微生物轉(zhuǎn)化得L-山梨糖。③第二部發(fā)酵：L-山梨糖到2-酮基-L-古龍酸需要將C1位醇基氧化為羧基，保持其它基團(tuán)不發(fā)生變化。其中兩步發(fā)酵法更含有優(yōu)勢(shì)。因素以下：①以生物氧化替代化學(xué)氧化簡(jiǎn)化了生產(chǎn)工藝。②省略了丙酮化反映環(huán)節(jié)，節(jié)省了丙酮、硫酸等大量化工原料和其防爆設(shè)備，節(jié)省了成本，有助于安全生產(chǎn)。③三廢和污染較小。④提高了生產(chǎn)能力。2.維生素C的生產(chǎn)工藝中，手性中心是如何實(shí)現(xiàn)的？維生素C分子中含有兩個(gè)手性碳原子，故有四個(gè)光學(xué)異構(gòu)體。其中L(+)-抗壞血酸括性最高，D（-）-異抗壞血酸活性僅為其20％，工業(yè)上將其作為食品抗氧劑。D(-)-抗壞血酸和L(+)-異抗壞血酸幾乎無(wú)活性。3.在將來(lái)，一步發(fā)酵能取代兩部發(fā)酵，成為維生素生產(chǎn)的主流工藝嗎，為什么？一步法發(fā)酵對(duì)工業(yè)菌株的山梨醇/糖旁路代謝途徑進(jìn)行敲除。與原始菌株比較，發(fā)現(xiàn)單菌發(fā)酵24h后，培養(yǎng)基中剩余的山梨醇糖含量基本保持恒定，NSR缺失株相對(duì)于原始菌株殘?zhí)橇刻岣吡?5.9%?；蚬こ讨扑幑に?.工程菌與宿主菌對(duì)培養(yǎng)基規(guī)定有何不同，為什么？碳源：大腸桿菌以蛋白胨等蛋白質(zhì)的降解物作為碳源；酵母運(yùn)用葡萄糖、半乳糖等單糖類物質(zhì)為碳源。氮源：不同工程菌對(duì)氮源運(yùn)用能力差別大，含有很高的選擇性。大腸桿菌運(yùn)用酵母粉等大分子有機(jī)氮源；酵母運(yùn)用氨基酸為氮源。選擇劑：基因工程大腸桿菌含有抗生素抗性基因，抗生素作為選擇劑；基因工程酵母菌慣用氨基酸營(yíng)養(yǎng)缺點(diǎn)型。2.影響工程菌培養(yǎng)工藝的重要參數(shù)是什么？如何優(yōu)化控制？溫度：生長(zhǎng)與生產(chǎn)溫度不一致。較高溫度體現(xiàn)量大，易形成包涵體。方略：較低溫度下有助于體現(xiàn)可溶性蛋白質(zhì)。對(duì)于熱敏感的蛋白質(zhì)，高溫會(huì)降解破壞。方略：生產(chǎn)期可采用先高溫，然后低溫，變溫體現(xiàn)，避免蛋白質(zhì)降解。pH：理解發(fā)酵過(guò)程中各個(gè)階段的適宜pH后來(lái)，進(jìn)一步設(shè)法控制pH在適宜的范疇內(nèi)。分階段控制pH：根據(jù)實(shí)驗(yàn)成果來(lái)擬定生長(zhǎng)最適pH和產(chǎn)物最適pH，以達(dá)成最佳生產(chǎn)。溶解氧：從供應(yīng)量和需要量（菌體生長(zhǎng)、質(zhì)粒穩(wěn)定性、產(chǎn)物積累）二個(gè)方面考慮，使之需氧不超出設(shè)備的供氧能力，在臨界溶解氧濃度之上。3.誘導(dǎo)物對(duì)生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成有何影響，為什么？誘導(dǎo)物用來(lái)誘導(dǎo)體現(xiàn)型工程菌。在細(xì)胞生長(zhǎng)到一定階段，必需添加誘導(dǎo)物，以解除目的基因的克制狀態(tài)，活化基因，進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯，生成產(chǎn)物。適宜的誘導(dǎo)時(shí)間非常重要。誘導(dǎo)物的濃度及其發(fā)酵溫度會(huì)影響體現(xiàn)量和產(chǎn)物存在形式。化學(xué)誘導(dǎo)型啟動(dòng)子：lzc、tac、T7等，誘導(dǎo)時(shí)間為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)久。溫度誘導(dǎo)型啟動(dòng)子：PL、PR等，誘導(dǎo)時(shí)間為對(duì)數(shù)期或稍后某些。基因工程制藥工藝1.什么是基因工程菌，工程菌構(gòu)建的基本過(guò)程和各階段的重要任務(wù)是什么，所涉及基因工程原理是什么？將目的基因?qū)爰?xì)菌體內(nèi)使其體現(xiàn)，產(chǎn)生所需要的蛋白的細(xì)菌稱為基因工程菌。工程菌構(gòu)建的基本過(guò)程以下：目的基因克隆（PCR、文庫(kù)篩選、化學(xué)合成）→體現(xiàn)載體構(gòu)建（酶切、鏈接）→遺傳轉(zhuǎn)化與篩選（外源基因?qū)肱c培養(yǎng)）→工程菌（獲得新形狀、功效、產(chǎn)生物質(zhì)）酶切：在特異位點(diǎn)上催化雙鏈DNA分子的斷裂，產(chǎn)生對(duì)應(yīng)的限制性片段。（DNA+緩沖液+限制性內(nèi)切酶；37℃，1小時(shí)；加熱、加EDTA終止；電泳檢查酶切完整性）鏈接：DNA雙鏈上相鄰的3’羥基和5’磷酸基團(tuán)共價(jià)結(jié)合形成3’-5’磷酸二酯鍵，使原來(lái)斷開(kāi)的DNA缺口重新連接起來(lái)。（載體片段和基因片段，緩沖液，連接酶；16-26℃，數(shù)小時(shí)；70℃加熱10min終止反映）轉(zhuǎn)化：把外源基因?qū)胨拗骷?xì)胞的過(guò)程。（氯化鈣法向大腸桿菌導(dǎo)入外源基因）2.目的基因克隆的重要辦法有哪些？分析其特點(diǎn)及其合用范疇①PCR擴(kuò)增。優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便快速，高效，數(shù)kb單基因克隆。缺點(diǎn)：DNA聚合酶活性和保真性限制。（94℃變性→55℃退火→72℃延伸→94℃變性……）②文庫(kù)篩選。優(yōu)點(diǎn)：長(zhǎng)片段，無(wú)堿基錯(cuò)誤，位置序列基因克隆。缺點(diǎn)：繁瑣，過(guò)程復(fù)雜，耗時(shí)，昂貴。③化學(xué)合成：簡(jiǎn)便，精確，已知序列基因克隆，引物合成。缺點(diǎn)：受合成儀性能限制，長(zhǎng)度很短。3.大腸桿菌中高效體現(xiàn)蛋白藥品著重設(shè)計(jì)哪幾個(gè)方面？為了確保工程菌構(gòu)建的有效性，必須遵照GMP及其有關(guān)生物制品研究技術(shù)指導(dǎo)原則，做好菌種的統(tǒng)計(jì)和管理。①體現(xiàn)載體，具體統(tǒng)計(jì)體現(xiàn)載體，涉及基因的來(lái)源、克隆和鑒定，體現(xiàn)載體的構(gòu)建、構(gòu)造和遺傳特性。②宿主細(xì)胞:具體統(tǒng)計(jì)宿主細(xì)胞的資料，涉及細(xì)胞株系名稱、來(lái)源、傳代歷史、鑒定成果及基本生物學(xué)特性等。③目的基因序列:目的基因的序列涉及插入基因和體現(xiàn)載體兩端控制區(qū)的核苷酸序列，以及全部與體現(xiàn)有關(guān)的序列，做到序列清晰。重組人干擾素生產(chǎn)工藝1.重組人干擾素生產(chǎn)工藝路線有哪幾條，有何缺點(diǎn)？①體外誘生干擾素制備工藝：仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)人白細(xì)胞：血漿→人白細(xì)胞（病毒誘導(dǎo)）→分離純化→人白干擾素。缺點(diǎn)：產(chǎn)量低，1gIFNα需要105L人血白細(xì)胞，來(lái)源困難，工藝復(fù)雜，收率低，價(jià)格昂貴，潛在的血源性病毒污染的可能性。②Namalva細(xì)胞培養(yǎng)（病毒培養(yǎng)）→合成干擾素→分離純化→多壓型混合干擾素。優(yōu)點(diǎn)：初次實(shí)現(xiàn)大規(guī)模商業(yè)化生產(chǎn)，用細(xì)胞培養(yǎng)8000L。缺點(diǎn)：活性低，退出臨床應(yīng)用。③工程菌構(gòu)建→發(fā)酵培養(yǎng)→包涵體→復(fù)性→重組人干擾素。工藝特點(diǎn)：發(fā)酵過(guò)程，隨即變性、復(fù)性過(guò)程。缺點(diǎn)：生物合成、純化及制劑階段均使用了某些動(dòng)物或人血液提取成分，仍然沒(méi)有擺脫潛在的傳輸血源性疾病的危險(xiǎn)。④工程ＣＨＯ細(xì)胞系構(gòu)建→細(xì)胞培養(yǎng)→收集培養(yǎng)液→分離純化→重組人干擾素。工藝特點(diǎn)：分泌體現(xiàn)，產(chǎn)量低，成本高，過(guò)程控制嚴(yán)格。能夠做到無(wú)血清培養(yǎng)。⑤基因工程假單胞桿菌發(fā)酵生產(chǎn)工藝。工藝特點(diǎn)：發(fā)酵周期短：幾個(gè)小時(shí)，無(wú)需變性、復(fù)性過(guò)程，獲得有活性產(chǎn)品，純化過(guò)程：裁減抗體親和層析，制劑中采用非人血清白蛋白新型保護(hù)劑，使得整個(gè)制造過(guò)程中不使用任何血液提取成分。2.重組人干擾素發(fā)酵工段的核心控制點(diǎn)是什么，如何實(shí)現(xiàn)最優(yōu)化過(guò)程控制？①搖瓶培養(yǎng)：搖瓶培養(yǎng)：30℃，pH7.0，250rpm，16-20h；②種子罐培養(yǎng)：接種：接入50L種子罐，接種量10%培養(yǎng)：30℃，pH7.0控制：級(jí)聯(lián)調(diào)節(jié)通氣量和攪拌轉(zhuǎn)速。3.干擾素純化工藝的原理是什么？基于蛋白質(zhì)的電荷性除去雜質(zhì)，精確控制緩沖液和上樣液的pH及電導(dǎo)值，純化干擾素4.干擾素純化工藝過(guò)程中各工段的目的是什么？①溶解粗干擾素：配備緩沖液（超純水，pH7.5磷酸緩沖液，0.45μm濾器和10ku超濾系統(tǒng)，百級(jí)層流下收集），冷卻至2-10℃。在均漿器中完全溶解粗干擾素。②等點(diǎn)沉淀與疏水層析：磷酸調(diào)節(jié)至pH5.0，沉淀雜蛋白，離心收集上清液（含有人干擾素）。用NaOH調(diào)節(jié)上清液pH7.0，并用5MNaCl調(diào)節(jié)溶液電導(dǎo)值180ms/cm，上樣，進(jìn)行疏水層析，運(yùn)用干擾素的疏水性進(jìn)行吸附。在2-10℃下，用0.025M磷酸緩沖液（pH7.0）+1.6MNaCl進(jìn)行洗滌，除去非疏水性蛋白。用0.01M磷酸緩沖液（pH8.0）進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，干擾素?；颌诘入婞c(diǎn)沉淀與鹽析：磷酸調(diào)節(jié)pH4.5，調(diào)節(jié)電導(dǎo)值40ms/cm，2-10℃靜置過(guò)夜，除雜蛋白。1000ku超濾膜過(guò)濾，除去大蛋白。調(diào)節(jié)溶液pH8.0，10ku超濾膜，0.005M緩沖液。③陰離子交換層析與濃縮：0.01M磷酸緩沖液（pH8.0）平衡樹(shù)脂，鹽濃度線性梯度5~50ms/cm進(jìn)行洗脫，2-10℃，配合SDS收集干擾素峰。把目的餾分合并，調(diào)節(jié)溶液pH和電導(dǎo)值，10ku超濾膜，0.05M醋酸緩沖液（5.0）中透析。④陽(yáng)離子交換層析與濃縮：用0.1M醋酸緩沖液（pH0.5）平衡樹(shù)脂。上樣，相似緩沖液沖洗。鹽濃度線性梯度5-50ms/cm進(jìn)行洗脫，配合SDS收集干擾素峰。合并餾分，10ku超濾膜系統(tǒng)。⑤凝膠過(guò)濾層析：0.15MNaCl的0.01M磷酸緩沖液（pH7.0）清洗系統(tǒng)和樹(shù)脂。上樣，相似洗脫液進(jìn)行洗脫。合并干擾素部分。⑥無(wú)菌過(guò)濾分裝：0.22μm膜過(guò)濾干擾素溶液，分裝，-20℃下列的冰箱中保存。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)制藥工藝1.離體動(dòng)物細(xì)胞對(duì)葡萄糖和谷氨酰胺的代謝特性是什么？蛋白質(zhì)的合成、修飾、分泌功效與制藥有何關(guān)系？葡萄糖代謝：糖酵解為主，生成丙酮酸和乳酸。丙酮酸經(jīng)TCA循環(huán)，氧化產(chǎn)生CO2和水，釋放能量。葡萄糖一小部分進(jìn)入PPP途徑，生成4、5、7碳糖和NADPH。谷氨酰胺：作為氮源，轉(zhuǎn)氨、脫氨（為主），合成非必需氨基酸。大多數(shù)谷氨酰胺通過(guò)脫氨生成谷氨酸，并釋放銨離子。小部分谷氨酰胺通過(guò)轉(zhuǎn)氨生成其它嘌呤、嘧啶和氨基糖等合成代謝的前體。氨基酸在粗糙內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體上，以mRNA為模板，進(jìn)行密碼翻譯，生成蛋白質(zhì)的多肽鏈。在粗糙內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔和高爾基體內(nèi)加工修飾形成糖基化蛋白質(zhì)。糖基構(gòu)造易變化，不同細(xì)胞系糖基化特性不同，要根據(jù)藥品的構(gòu)造選擇適宜細(xì)胞系。2.制藥動(dòng)物細(xì)胞系的種類和特點(diǎn)有哪些？有限細(xì)胞系：是生長(zhǎng)和壽命有限的細(xì)胞，通過(guò)若干傳代培養(yǎng)后失去增殖能力，老化死亡。有限生長(zhǎng)，無(wú)致瘤性，有接觸克制性。e.g.2BS。壽命取決于細(xì)胞來(lái)源的物種和年紀(jì)、器官。胚成纖維細(xì)胞人（50代），雞胚（30代），小鼠（8代）無(wú)限細(xì)胞系：壽命和活性不受傳代次數(shù)影響的細(xì)胞系，可持續(xù)培養(yǎng)。也稱為永久細(xì)胞系或持續(xù)細(xì)胞系。沒(méi)有接觸克制現(xiàn)象，對(duì)培養(yǎng)條件和營(yíng)養(yǎng)因子等規(guī)定低，倍增時(shí)間短，非常適合于制藥工業(yè)生產(chǎn)。人源細(xì)胞系：Namalwa，WI-38，MRC-5哺乳動(dòng)物細(xì)胞系：CHO，貼壁或懸浮培養(yǎng)，對(duì)剪切力和滲入壓有較高的忍受能力。BHK-21，C127，Vero雜交瘤細(xì)胞系：脾臟B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞通過(guò)原生質(zhì)體融合，獲得的雜交細(xì)胞。無(wú)血清培養(yǎng)，高密度懸浮生長(zhǎng)，容易轉(zhuǎn)染和生長(zhǎng)，大量分泌和高效體現(xiàn)3.與大腸桿菌和酵母系統(tǒng)相比，哺乳動(dòng)物源細(xì)胞系統(tǒng)制藥的優(yōu)缺點(diǎn)，如何選擇？CHO細(xì)胞：Chinesehamsterovary，中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢，亞二倍體核型，2n=22。特點(diǎn)：貼壁型生長(zhǎng)，也可懸浮培養(yǎng)，對(duì)剪切力和滲入壓有較高的忍受能力。最為普遍和成熟體現(xiàn)糖基化蛋白藥品的細(xì)胞。多個(gè)衍生突變株，高體現(xiàn)。BHK-21細(xì)胞：成纖維樣細(xì)胞，非整倍體，2n=44.用于增殖病毒、制備疫苗和重組蛋白。C127細(xì)胞，貼壁生長(zhǎng)，適合于牛乳頭病毒DNA載體的轉(zhuǎn)化。Vero細(xì)胞：多倍體核型，貼壁依賴性。Vero6最為慣用，增至病毒，生產(chǎn)疫苗。4.工程動(dòng)物細(xì)胞系的建立：基本過(guò)程，體現(xiàn)載體設(shè)計(jì)，轉(zhuǎn)化與培養(yǎng)方案篩選和鑒定辦法。它們與基因工程微生物的異同是什么？5.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基構(gòu)成成分及其作用是什么？與微生物培養(yǎng)基培養(yǎng)基相比，有何特殊性？動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基的成分重要有糖類、氨基酸、維生素與無(wú)機(jī)鹽、激素及附加成分。作用：糖類提供細(xì)胞生長(zhǎng)的碳源和能源。分解后釋放出能量ATP。氨基酸可通過(guò)生糖或生酮途徑轉(zhuǎn)變?yōu)樘腔蛑舅?，間接提供能量。維生素既不是細(xì)胞的物質(zhì)基礎(chǔ)，也不是能量物質(zhì)，對(duì)代謝和生長(zhǎng)起調(diào)節(jié)和控制作用。無(wú)機(jī)鹽是細(xì)胞代謝所需酶的輔基，同時(shí)保持細(xì)胞的滲入壓和緩沖PH的變化。激素對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)有刺激作用。貼附因子的作用是讓細(xì)胞的貼壁生長(zhǎng)。6.生產(chǎn)用最適動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)當(dāng)選擇哪種，為什么？合成培養(yǎng)基，組分穩(wěn)定，容易配備。已有幾十種合成培養(yǎng)基，大部分已商品化7.如何控制動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基的質(zhì)量？培養(yǎng)用水質(zhì)：必須按照GMP規(guī)定進(jìn)行制備，除去普通水中的各類元素、有毒或有害物質(zhì)及微生物和熱源，達(dá)成純水原則。緩沖液：H2CO3/NaCHO3；NaH2PO4/Na2HPO4；恒定pH。平衡鹽溶液：BBS，由NaCl、無(wú)機(jī)鹽和葡萄糖、緩沖劑、批示劑構(gòu)成。滿足細(xì)胞對(duì)鹽離子、碳營(yíng)養(yǎng)規(guī)定；pH和滲入壓規(guī)定；直觀觀察pH。磷酸鹽緩沖液：PBS，KCl、KH2PO4、NaCl、NaHPO4。培養(yǎng)物、器皿的洗滌液。氨基酸配備：50倍濃縮液。使用L型氨基酸，對(duì)于DL混合型氨基酸，使用量應(yīng)當(dāng)加倍。谷氨酰胺不穩(wěn)定，需單獨(dú)配備（100倍濃縮液，-20℃保存）。8.基質(zhì)依賴性與非依賴性細(xì)胞系對(duì)培養(yǎng)條件的規(guī)定有什么不同？如何滿足？貼壁依賴性細(xì)胞：依賴于生長(zhǎng)基質(zhì)，并在表面才干生長(zhǎng)的細(xì)胞。只能貼壁生長(zhǎng)。多數(shù)天然細(xì)胞。非貼壁依賴性細(xì)胞：不依賴于生長(zhǎng)基質(zhì)，可懸浮生長(zhǎng)。淋巴細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞。生長(zhǎng)基質(zhì)：變化介質(zhì)表面特性，支撐、增進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞貼附的物質(zhì)。為支持介質(zhì)表面提供適量帶正電荷，細(xì)胞被吸附在介質(zhì)上。9.細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)有幾個(gè)辦法，有何特點(diǎn)，如何選擇應(yīng)用？①單層貼壁培養(yǎng)。單層貼壁培養(yǎng)是指把細(xì)胞貼附于一定的固體支持表面上，生長(zhǎng)形成單層細(xì)胞的培養(yǎng)辦法，適合于貼壁依賴性細(xì)胞培養(yǎng)。②懸浮培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)是指細(xì)胞在細(xì)胞反映器內(nèi)游離懸浮生長(zhǎng)的培養(yǎng)過(guò)程，重要對(duì)于非貼壁性依賴性細(xì)胞，如雜交瘤細(xì)胞。③微囊培養(yǎng)。把動(dòng)物細(xì)胞包埋在微載體內(nèi)或膠囊內(nèi)固定化后，進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，適合于貼壁依賴性和非貼壁依賴性細(xì)胞。④微載體培養(yǎng)。微載體是三維培養(yǎng)系統(tǒng)，有很大的比表面積，細(xì)胞貼附于載體上增值，再懸浮于細(xì)胞液中，兼含有貼壁和懸浮培養(yǎng)的雙重優(yōu)點(diǎn)。10.比較微生物發(fā)酵控制過(guò)程的異同動(dòng)物細(xì)胞微生物溫度在線，恒溫，水套層，電熱片，加溫三基點(diǎn)，發(fā)酵熱對(duì)生長(zhǎng)和生產(chǎn)影響，變溫控制，降溫?cái)嚢瑁菽娃D(zhuǎn)速，加剪切保護(hù)劑，消沫劑基于供氧與混合，化學(xué)消沫劑與分散劑，機(jī)械消沫溶解氧臨界氧濃度供氧與耗氧的平衡，臨界氧濃度之上CO2需要通入，調(diào)節(jié)pH尾氣，呼吸強(qiáng)度pH恒定，緩沖劑，通氣，補(bǔ)料，綜合控制三基點(diǎn)，變pH，加酸/堿；緩沖劑，補(bǔ)料代謝檢測(cè)與分析底物消耗，副產(chǎn)物生成，胞內(nèi)代謝，分泌底物消耗，產(chǎn)物的生成，生物化學(xué)變化補(bǔ)料補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)，控制代謝過(guò)程解除底物克制，增加前體放料解除副產(chǎn)物，收獲產(chǎn)物解除產(chǎn)物克制重組人紅細(xì)胞生成素的生產(chǎn)工藝1.比較多個(gè)體現(xiàn)系統(tǒng)生產(chǎn)rhEPO的優(yōu)缺點(diǎn)。①SV40病毒啟動(dòng)子的體現(xiàn)載體，在COS-1中瞬時(shí)體現(xiàn)hEPO。②昆蟲(chóng)SF9細(xì)胞中桿狀病毒載體體現(xiàn)rhEPO。產(chǎn)率有所改善，糖基化程度較小。③家蠶系統(tǒng)體現(xiàn)，糖基化簡(jiǎn)樸，藥品在體內(nèi)穩(wěn)定性較低、活性較差等問(wèn)題。④大腸桿菌體現(xiàn)，僅具體外抗原結(jié)合活性。⑤干擾素-α基因啟動(dòng)子的rhEPO體現(xiàn)載體，BALL-1細(xì)胞，產(chǎn)生較高量的rhEPO。⑥CHO、BHK細(xì)胞中穩(wěn)定體現(xiàn)，rhEPO與天然EPO構(gòu)造、活性相似。2.CHO培養(yǎng)生產(chǎn)rhEPO的基本工藝過(guò)程及其控制點(diǎn)是什么，為什么？①?gòu)?fù)蘇：液氮凍存的CHO細(xì)胞系在37℃中水浴快速融化。無(wú)菌離心，棄上清。②培養(yǎng)：加適量DMEM（10%小牛血清），37℃、CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，持續(xù)傳三代。③消化：用胰蛋白酶消化貼壁細(xì)胞后，制成細(xì)胞濃度約為2.5×106個(gè)/ml。用于接種。④反映器滅菌：加纖維素載體片及pH7.0的PBS緩沖液，高壓滅菌。⑤接種：排出PBS緩沖液，加DMEM培養(yǎng)基（含10％血清），接入種子細(xì)胞。⑥貼壁培養(yǎng)：pH7，<50r/min，37℃，DO50-80%。⑦擴(kuò)增培養(yǎng)：80－100r/min。pH7，37℃。⑧灌流培養(yǎng)：控制溫度、DO、pH值等培養(yǎng)條件，進(jìn)行無(wú)血清培養(yǎng)基持續(xù)培養(yǎng)。⑨收獲培養(yǎng)物：持續(xù)收獲，4℃－8℃保存?？刂泣c(diǎn)：①攪拌控制：接種后,攪拌速度緩慢，使細(xì)胞貼附于載體上，隨著細(xì)胞數(shù)量的增加逐步提高攪拌速度。②溫度控制：較為嚴(yán)格，恒定37℃③pH值控制：7.2-7.4,輸入CO2和碳酸氫鹽溶液維持其恒定。④溶解氧控制：在50-80％的范疇內(nèi)，通入氧氣、空氣、氫氣或氮?dú)獾谋壤旌蠚怏w。⑤葡萄糖控制：流加補(bǔ)料⑥代謝廢物控制：監(jiān)測(cè)銨、乳酸鹽類等，維持較低濃度，減少對(duì)細(xì)胞損害。3.rhEPO分離純化工藝中使用了哪些操作單元，為什么？收獲培養(yǎng)液、透析、過(guò)濾、DEAE離子交換、凝膠過(guò)濾。三廢解決工藝1.簡(jiǎn)述制藥公司清潔生產(chǎn)的途徑①資源綜合運(yùn)用——原料資源的綜合運(yùn)用、水資源的綜合運(yùn)用、二次資源綜合運(yùn)用、廢物綜合運(yùn)用；②改革工藝和裝備——原料解決工藝的改革、產(chǎn)品制造工藝的全過(guò)程統(tǒng)籌、裝備技術(shù)的更新；③改善操作和加強(qiáng)管理；④必要的末端解決。2.簡(jiǎn)述制藥工業(yè)的末端污染特點(diǎn)制藥廠排出的污染物普通含有毒性、刺激性和腐蝕性?；瘜W(xué)制藥廠的污染物還含有數(shù)量少