煎煮法提取赤芍中芍藥苷的研究

煎煮法提取赤芍中芍藥苷的研究【摘要】目的研究常規(guī)煎煮法提取赤芍中芍藥苷的方法。方法采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，考察乙醇濃度、提取時(shí)間、提取次數(shù)、提取溫度對(duì)煎煮法提取芍藥苷的影響并進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果最佳煎煮法提取赤芍中芍藥苷的工藝是80℃下40%乙醇提取3次，2h/次，芍藥苷提取率為mg/g。結(jié)論煎煮仍是常用的中藥提取方法，該研究為赤芍煎煮法提取提供參考的優(yōu)化方法和工藝條件。

【關(guān)鍵詞】煎煮法;赤芍;芍藥苷;正交實(shí)驗(yàn)

赤芍RadixPaeoniaeRubra為毛茛科植物芍藥Paeonialactiflorapau或川赤芍的干燥根，在神農(nóng)本草經(jīng)和歷代醫(yī)籍文獻(xiàn)中均有記載，其功效為清熱涼血、祛瘀止痛。赤芍有免疫調(diào)節(jié)作用，常用于腫瘤和血瘀癥的治療，尤以肝病常見(jiàn)。國(guó)內(nèi)外研究表明，其主要有效部位為赤芍總苷[1，2]，赤芍總苷中的主要成分為芍藥苷，芍藥苷具有擴(kuò)張血管、鎮(zhèn)痛鎮(zhèn)靜、抗炎抗?jié)儭⒔鉄峤獐d、利尿、抗應(yīng)激性潰瘍病、擴(kuò)張冠脈血管、對(duì)抗急性心肌缺血以及抑制血小板凝聚等多方面作用，而且毒性小，臨床已用于治療冠心病。

赤芍提取方法很多，包括超聲波提取、水煎煮、微波提取等，使用的提取溶劑包括水、乙醇、甲醇等，然而常規(guī)的煎煮法仍然是目前藥典和工業(yè)實(shí)際最常用的提取方法。本文采用L16(45)正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，綜合考慮水和乙醇作為溶劑，以乙醇濃度(當(dāng)濃度為0時(shí)即為水煎煮)、提取時(shí)間、提取次數(shù)和提取溫度等工藝條件為考察因素，以芍藥苷含量為考察指標(biāo)，確定煎煮法提取赤芍中芍藥苷的最佳工藝。

1儀器與試藥

日本島津液相：LC-10ATvp，SPD-M10Avp二級(jí)管陣列檢測(cè)器(DAD)，SIL-10AD自動(dòng)進(jìn)樣器，CLASS-VP色譜處理系統(tǒng)。電子天平，恒溫水浴鍋。赤芍(凈制中藥飲片，杭州中藥飲片廠);芍藥苷對(duì)照品(購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所);甲醇(色譜純);乙醇(分析純);桶裝純凈水經(jīng)Milipore過(guò)濾后使用。

2方法與結(jié)果

高效液相色譜分析

色譜條件色譜柱：AgilentC18柱(150mm×mm，5μm);流動(dòng)相：甲醇-%醋酸(30∶70);流速：ml/min;檢測(cè)波長(zhǎng)：230nm;進(jìn)樣量：20μl。保留時(shí)間約在min。柱溫：30℃。

對(duì)照品溶液的配制精密稱取芍藥苷標(biāo)準(zhǔn)樣品mg，置50ml量瓶中，加30%的甲醇定容至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液(mg/ml)。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別精密稱取芍藥苷標(biāo)準(zhǔn)品g，用30%甲醇定容至50ml(mg/ml)，取該溶液依次進(jìn)樣，，，，，，μl，以色譜峰峰面積積分值對(duì)進(jìn)樣量回歸，回歸方程為Y=-6+349，r=94，線性范圍是～μg。

芍藥苷的提取按正交設(shè)計(jì)實(shí)施實(shí)驗(yàn)，每次稱取赤芍飲片10g，溶劑用量固定為10倍，提取完畢后，用10ml的移液管量取提取液ml，稀釋至ml，然后從稀釋后的提取液中移取1ml于離心管中，12000r/min的條件下離心10min，取樣進(jìn)行高效液相分析芍藥苷濃度，并計(jì)算芍藥苷得率。其中芍藥苷得率為單位質(zhì)量赤芍藥材提取出來(lái)的芍藥苷質(zhì)量，單位為mg/g。

最佳工藝條件的研究采用L16(45)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表，對(duì)乙醇濃度、提取時(shí)間、提取次數(shù)、提取溫度4個(gè)因素進(jìn)行考察，并進(jìn)行方差分析。結(jié)果見(jiàn)表1～2。

由表1～2可得各因素對(duì)芍藥苷提取率的影響大小次序?yàn)镃BAD，最佳工藝條件為A2B4C3D4，即以40%乙醇為提取溶劑，100℃提取3次，2h/次。由于80℃和100℃下的提取率非常相近，故從能源節(jié)約的角度出發(fā)，選擇提取溫度80℃。提取次數(shù)增加1次，不僅增加10倍溶劑倍量，并且40%乙醇回收過(guò)程也較為耗能，提取次數(shù)為3次和4次差別在10%以內(nèi)。綜合考慮，在實(shí)際生產(chǎn)中，為了節(jié)約能耗和成本，最佳工藝方案為以40%乙醇為提取溶劑，80℃提取3次，2h/次。

按上述最佳工藝條件對(duì)芍藥苷的提取工藝進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果芍藥苷提取率為mg/g。表1正交實(shí)驗(yàn)表2方差分析

3結(jié)論

通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)分析可知，影響因素順序?yàn)樘崛〈螖?shù)提取時(shí)間乙醇濃度提取溫度。綜合考慮節(jié)能和提取成本，最佳煎煮法提取赤芍中芍藥苷的工藝為以40%乙醇為提取溶劑，80℃提取3次，2h/次。

【參考文獻(xiàn)】

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