復(fù)方奧硝唑乳劑的制備及質(zhì)量控制

復(fù)方奧硝唑乳劑的制備及質(zhì)量控制

通過(guò)研究奧硝唑和酮康唑聯(lián)合使用的外抗菌效果，闡明了這兩種藥物對(duì)散列菌和白菌的抗菌效果具有相互作用，并可用于婦科常見(jiàn)厭氧菌、流行性疾病和白菌等的感染。筆者制備復(fù)方奧硝唑乳劑,并采用雙波長(zhǎng)-系數(shù)倍率法,同時(shí)測(cè)定奧硝唑和酮康唑的含量,報(bào)道如下。1儀器和試劑盒1.1儀器DV-650型分光光度計(jì)(美國(guó)貝克曼);UV-VIS8500紫外/可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海天美科學(xué)儀器有限公司)。1.2含量觀表3.32%奧硝唑原料及對(duì)照品(湖南維康制藥有限公司生產(chǎn),批號(hào):030208,含量99.52%);酮康唑原料(中國(guó)南京第二制藥廠生產(chǎn),批號(hào):981216);酮康唑?qū)φ掌?中國(guó)藥品生物制品檢定所提供,批號(hào):02949801)。2處方和準(zhǔn)備2.1羧甲基纖維素鈉注射奧硝唑20g,酮康唑30g,吐溫-8020mL,魚(yú)肝油500mL,亞硫酸氫鈉5g,羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)10g,注射用水適量,共制成1000g。2.2復(fù)方奧硝唑乳劑制備工藝取CMC-Na加適量注射用水使溶脹完全,加入亞硫酸氫鈉,研磨混勻,再依次加入魚(yú)肝油、吐溫-80、奧硝唑、酮康唑并研磨使混勻,最后加入注射用水繼續(xù)研磨制成復(fù)方奧硝唑乳劑。2.3空白基質(zhì)的制備取CMC-Na加適量注射用水使溶脹完全,加入亞硫酸氫鈉,研磨使混勻,再依次加入魚(yú)肝油、吐溫-80并研磨使混勻,最后加入注射用水繼續(xù)研磨即制成空白基質(zhì)。3質(zhì)量控制3.1斷裂本品為類(lèi)白色或略帶淡黃色的乳劑。3.2識(shí)別標(biāo)記3.2.1奧硝唑取樣品測(cè)定項(xiàng)下供試品液10mL,加硫酸溶液(3→10)2mL,三硝基苯酚1mL,即產(chǎn)生黃色沉淀。3.2.2橙紅色沉淀的制備取本品約0.5mL,加0.1mol·L-1鹽酸溶液20mL,在水浴上加熱,使酮康唑溶解,放冷,濾過(guò),濾液加碘化鉍鉀試液數(shù)滴,即生成橙紅色沉淀。3.3檢查pH值為4.0～6.0。3.4重量測(cè)定3.4.1測(cè)定波長(zhǎng)的確定按處方比例,稱(chēng)取奧硝唑?qū)φ掌贰⑼颠驅(qū)φ掌?分別用無(wú)水乙醇稀釋至適當(dāng)濃度;取空白基質(zhì),加無(wú)水乙醇適量,超聲振蕩2min使溶解,過(guò)濾,棄初濾液,取續(xù)濾液;以無(wú)水乙醇為空白,取奧硝唑溶液、酮康唑溶液、空白基質(zhì)溶液以及三者混合液于200.0～400.0nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描,結(jié)果見(jiàn)圖1。由圖中可看出,3組分在彼此的吸收波長(zhǎng)范圍內(nèi)相互之間干擾嚴(yán)重,故采用雙波長(zhǎng)-系數(shù)倍率法消除共存組分之間的干擾,對(duì)奧硝唑和酮康唑的含量進(jìn)行測(cè)定。3.4.2檢測(cè)a值的測(cè)定按處方比例,配制奧硝唑、酮康唑與空白基質(zhì)的混合溶液,酮康唑與空白基質(zhì)的混合溶液以及奧硝唑與空白基質(zhì)的混合溶液(不同的濃度5份),以0.5nm為間隔逐一篩選,分別測(cè)定吸收度A值,最后確定:κ奧硝唑=A266.5/A279.0=1.2270,RSD=1.07%(n=5),κ酮康唑=A242.0/A272.0=1.5708,RSD=0.42%(n=5)。3.4.3cl-1、cml-1、cml-1、cml-1、cml-1、cml-1、cml-1、cml-1、cml-1、cml-1、c按處方比例,精密稱(chēng)取奧硝唑?qū)φ掌?.0110g,酮康唑?qū)φ?.0156g,空白基質(zhì)0.4914g,置于50mL容量瓶中,加無(wú)水乙醇適量,超聲振蕩2min使溶解,過(guò)濾,棄初濾液,分別取續(xù)濾液0.40,0.60,0.80,1.00,1.20,1.40,1.80mL于25mL容量瓶中,用無(wú)水乙醇稀釋并定容至刻度,以無(wú)水乙醇為空白,在選定的波長(zhǎng)處測(cè)定A值,分別將奧硝唑濃度C奧硝唑(μg·mL-1)、酮康唑濃度C酮康唑(μg·mL-1)與△A回歸,得奧硝唑含量測(cè)定回歸方程:C=107.4235△A-0.3542,r=0.9995;△A=1.2270A279.0-A266.5,線性范圍為7.04～14.08μg·mL-1;酮康唑含量測(cè)定回歸方程:C=29.6178△A-0.4053,r=0.9999;△A=A242.0-1.5708A272.0,線性范圍為9.984～19.968μg·mL-1。3.4.4奧硝唑加回收率按處方比例,精密稱(chēng)取奧硝唑0.0155g,酮康唑0.0234g,空白基質(zhì)0.7792g,置于50mL容量瓶中,加無(wú)水乙醇使溶解,超聲振蕩2min,定容,搖勻,過(guò)濾,棄去初濾液,分別取續(xù)濾液:0.6,0.8,0.9,1.0mL于25mL容量瓶中,用無(wú)水乙醇稀釋,定容,搖勻,在242.0,266.5,272.0和279.0nm波長(zhǎng)處測(cè)定A值,分別代入回歸方程計(jì)算。結(jié)果奧硝唑平均回收率為100.10%,RSD=0.58%;酮康唑的平均回收率為100.10%,RSD=0.90%。見(jiàn)表1。3.4.5奧硝唑標(biāo)識(shí)量的測(cè)定按處方比例,模擬制備復(fù)方奧硝唑乳劑4批,稱(chēng)取供試品1.0g(約含奧硝唑20mg,酮康唑30mg)于100mL容量瓶中,加無(wú)水乙醇適量,超聲振蕩2min,定容,搖勻,過(guò)濾,棄去初濾液,取續(xù)濾液1mL于25mL容量瓶中,用無(wú)水乙醇定容,搖勻,按“3.4.4”項(xiàng)下操作并計(jì)算結(jié)果,結(jié)果奧硝唑的標(biāo)示量為99.34%,99.35%,99.20%,99.08%,平均標(biāo)示量為98.99%,RSD=0.61%;酮康唑的標(biāo)示量為99.81%,99.31%,99.53%,99.86%,平均標(biāo)示量為99.37%,RSD=0.40%。3.4.6奧硝唑-酮康唑含量測(cè)定取“3.4.5”項(xiàng)下的供試液1份,分別于0,0.5,1.0,1.5,2.0,4.0,8.0,12.0,24.0h測(cè)定A值,代入方程,奧硝唑的含量為標(biāo)示量的(99.26±0.62)%,酮康唑的含量為標(biāo)示量的(99.42±0.58)%,結(jié)果穩(wěn)定。4奧硝唑和酮康唑的相互作用本制劑是針對(duì)婦科常見(jiàn)厭氧菌、滴蟲(chóng)、白念珠菌等感染而擬訂的復(fù)方制劑,以?shī)W硝唑、酮康唑?yàn)橹魉帯W硝唑是繼甲硝唑、替硝唑之后的第3代新型硝基咪唑類(lèi)衍生物,目前其制劑在我國(guó)已作為第四類(lèi)新藥上市,臨床上主要應(yīng)用于抗厭氧菌感染,治療滴蟲(chóng)性陰道炎、阿米巴病等。有研究表明,與同類(lèi)藥物替硝唑相比,其抗菌活力強(qiáng),半衰期長(zhǎng),臨床療效確切,不良反應(yīng)低,有較好的應(yīng)用前景。而酮康唑作為臨床上普遍使用的咪唑類(lèi)抗真菌藥物,療效確切,本處方通過(guò)局部給藥來(lái)降低其不良反應(yīng)。通過(guò)對(duì)奧硝唑與酮康唑體外抑菌效果考察,發(fā)現(xiàn)兩藥合用后,對(duì)淋球菌和白念珠菌的抑菌作用均增強(qiáng),而且經(jīng)正交實(shí)驗(yàn)考察,奧硝唑與酮康唑的濃度分別為2%和3%時(shí)抑菌效果最佳,所以確定奧硝唑與酮康唑的濃度分別為2%和3%。經(jīng)我院臨床使用,發(fā)現(xiàn)對(duì)滴蟲(chóng)、淋球菌以及白念珠菌感染導(dǎo)致的陰道炎等婦科感染有較好的療效。根據(jù)陰道用藥特點(diǎn)及主藥性質(zhì),擬制成的O/W型乳劑。其中魚(yú)肝油不僅作為油相,而且由于富含維生素A、D,還可維持皮膚、黏膜等正常生理機(jī)能,促進(jìn)病患部位恢復(fù);同時(shí),由于酮康唑具有酰銨基和咪基,極易氧化變色,使藥效降低,因此加入適量抗氧化劑亞硫酸氫鈉,防止酮康