生物化學(xué)課件：DNA親子鑒定

DNA親子鑒定什么是DNA

(DeoxyriboseNucleicAcid)?DNA全名為脫氧核糖核酸由A、T、G、C組成(A-T,G-C)雙股螺旋狀帶有遺傳訊息存在于所有有細(xì)胞核的細(xì)胞中(病毒除外)人類的DNA總數(shù):3x109b.p.(30億對)人類的染色體就是由DNA和某些特定蛋白質(zhì)所組成除了精子細(xì)胞與卵細(xì)胞含有23條染色體，人類每個體細(xì)胞皆含有46條染色體，一半來自父親一半來自母親。除了同卵雙胞胎外，找不到任何兩人的DNA排列完全相同，這正好用來做為DNA親子血緣關(guān)系鑒定的根據(jù)。何謂親子鑒定應(yīng)用醫(yī)學(xué)、生物學(xué)和遺傳學(xué)的理論和技術(shù)，判斷有爭議的父母與子女之間是否有親生關(guān)系。親子鑒定又稱親權(quán)鑒定、父權(quán)鑒定

親子鑒定的原理判定親生關(guān)系的理論依據(jù)是孟德爾遺傳的分離律。按照這一規(guī)律，在配子細(xì)胞形成時，成對的等位基因彼此分離，分別進入各自的配子細(xì)胞。精、卵細(xì)胞受精形成子代，孩子的兩個基因組一個來自母親，一個來自父親；因此同對的等位基因也就是一個來自母親，一個來自父親。鑒定結(jié)果如果符合該規(guī)律，則不排除親生關(guān)系，若不符合，則排除親生關(guān)系（變異情況除外）。在大多數(shù)的情況下，母、子關(guān)系是已知的，要求鑒定假設(shè)父和孩子是否親生關(guān)系。此時首先從母、子基因型的對比中，可以確定孩子基因中可能來自父親的基因（生父基因，OG）。然后觀察假設(shè)父親的基因型，如果不具有生父基因，則可排除假設(shè)父與孩子的親生關(guān)系。若假設(shè)父也具有生父基因，結(jié)果就不能排除假設(shè)父的親生關(guān)系

哪些情況需要接受DNA親子鑒定1已婚夫婦，丈夫懷疑孩子不是自己的親生子；

2移民案件的血緣鑒定；

3婚姻外生育，需確定孩子的生父；

4懷疑醫(yī)院調(diào)錯嬰兒；

5失散家庭的認(rèn)親及失散兒童的認(rèn)領(lǐng)；

6涉及計劃生育超生子女的確認(rèn)；

7強奸案件中胎兒或嬰兒的生父認(rèn)定；

8刑事案件中嫌疑犯確認(rèn)；

9失蹤及死亡人士的身份證明。

DNA就像是老天爺發(fā)給我們的身分證一樣，每個人不知道何時要用到，但是，一生之中，有很多可能用到的機會。在先進、社會思潮較開放的國家中，甚至，人民都有預(yù)先為自己保留DNA的觀念。親子鑒定的發(fā)展在中國古代:「滴血認(rèn)親」方式二十世紀(jì)初葉ABO血型(1900)的發(fā)現(xiàn)，通過每個人紅細(xì)胞上抗原[Rh(1940s),MNSs,Kell,Duffy,Kiddsystem]的不同來推斷血緣關(guān)系，但此方法只能有60%~70%的準(zhǔn)確度。

1970年人類白細(xì)胞抗原（HLA）發(fā)現(xiàn)[DiscoveredbyDaussetandLvanyi(1954)]再輔助紅細(xì)胞上抗原的特征也僅能使血緣關(guān)系鑒定準(zhǔn)確度提升至95%，就醫(yī)學(xué)觀點僅能勉強認(rèn)同。1990年之后拜分子生物學(xué)發(fā)展(PCR-amplifiedRFLP,VNTR,STRcombined)，親子血緣關(guān)系鑒定有重大突破，準(zhǔn)確度提升至99.9%，這就是DNA鑒定。親子鑒定方法

1、傳統(tǒng)的親子鑒定是進行血型測試。一般孩子6個月以上才可以做，并需要大量的血液樣本。這種方法過程煩瑣、取樣痛苦且錯誤率高。傳統(tǒng)的血型判斷在一定程度上有其作用,但親子鑒定并不能按照血型來鑒定。

2、DNA親子鑒定測試。DNA親子鑒定是通過人體任何組織取樣（例如口腔上皮細(xì)胞取樣），也可以在孩子未出世前進行。該方法是目前親子測試中最準(zhǔn)確的一種--準(zhǔn)確率可達(dá)99.99999％，具有精巧、簡便、快速、經(jīng)濟、實用的特點。父子關(guān)系相對機會（RCP），按照國內(nèi)外親子鑒定的慣例，當(dāng)RCP值大于99.73%時，則可以認(rèn)為假設(shè)父與孩子具有親生關(guān)系。

3、STR（SNP）檢測。當(dāng)前DNA親子鑒定利用人類基因組中的重復(fù)堿基序列(STR作為第二代分子標(biāo)記)和PCR技術(shù)進行個體識別，但STR具有很大的局限性，SNP是第三代分子標(biāo)記技術(shù)是將來的發(fā)展方向，美國911尸體辨認(rèn)即利用了此技術(shù)。ABO血型配對父親A型，母親B型，則小孩血型可能出現(xiàn)的情形:父親AB型，母親AB型，則小孩血型可能出能的情形:AOBABBOOAOOOABAAAABBABBB

SequencesofsometandemrepeatsinDNAhavealengthofonly2-7basepairs,thatrepeatonlyinalimitednumberofcopies,calledshorttandemrepeats(STR)ormicrosatelliteDNA目前親子鑒定所采用的檢驗方法—STRmethodTAGATAGATAGATAGATAGATAGA12345親子鑒定的樣本血液口腔黏膜細(xì)胞精液組織

懷孕期親子鑒定

(A)胎盤組織(CVS):懷孕10~13周內(nèi)

(B)抽羊水:懷孕14~24周內(nèi)臍帶血液:小孩出世時收集臍帶血液樣本CombinedDNAindexsystem(CODIS)&Top15PCR/STRsystemsusedbyparentagetestinglaboratoriesin1999System%ofuseSystem%ofuse1.vWA948.D5S818632.TH01849.D3S1358443.CSF1PO7810.D18S51444.D7S8207811.D8S1179445.TPOX7512.FGA446.D13S3176913.D21S11387.D16S53966CODIS共13組14.FES/FPS4715.F13A0144STRLocusLocousChromosomeLocationLocousChromosomeLocation1.vWA12p12-pter8.D5S8185q21-312.TH0111p15.59.D3S13583p3.CSF1PO5p33.3-3410.D18S5118q21.34.D7S8207p11.21-2211.D8S117985.TPOX2p23-2per12.FGA4q286.D13S31713q22-3113.D21S1121q11.2-q217.D16S53916p24-qter14.FES/FPS15q25-qter15.F13A016p21-p25親子鑑定報告--不能排除註:本鑑定系統(tǒng)之總排除能力(CPE)為0.999998不能排除賴XX與賴!!之親子關(guān)係。親子關(guān)係指數(shù)(CPI)為108141.85834596親子關(guān)係概率(PP)為99.999075288685%

項目賴XX(父親)賴!!(小孩)黃XX(母親)PI值親子關(guān)係說明血型(ABO)AAA---不能排除D16S53911,1112,1112,1210不能排除D7S82011,1011,1112,111.3419不能排除D13S31712,912,913,93.4130不能排除CSF1PO12,912,1213,121.3774不能排除TPOX11,811,1111,91.6308不能排除TH019,89,99,91.0582不能排除F13A016,3.23.2,3.26,3.21.6036不能排除FES/FPS11,1111,1111,112.0886不能排除vWFA31/A17,1617,1618,173.7879不能排除HPRTB13,1314,1314,132.7556不能排除F13B10,1010,1010,101.3793不能排除FABP10,910,1011,101.0647不能排除LPL12,1010,1012,100.5848不能排除CYAR0411,77,711,72.9412不能排除CD47,77,712,71.8519不能排除GPP3A096,66,66,61.6000不能排除D8S117911,1016,1016,123.7965不能排除親子鑑定報告--可以排除註:本鑑定系統(tǒng)之總排除能力(CPE)為0.999998根據(jù)D16S539,D7S820,TPOX,F13A01,vWFA31/A,HPRTB,F13B,CYAR04,CD4,GPP3A09,D8S1179等DNA位點之分析結(jié)果,可以排除卓XX與卓??之親子關(guān)係。

項目

卓XX(父親)

卓??(小孩)

趙XX(母親)親子關(guān)係說明血型(ABO)BOB不能排除D16S53911,1013,913,13可以排除D7S82012,1110,911,10可以排除D13S31713,1212,1011,10不能排除CSF1PO10,1011,1011,11不能排除TPOX10,98,811,8可以排除TH0110,99,99,9不能排除F13A013.2,3.26,44,3.2可以排除FES/FPS12,1111,1111,10不能排除vWFA31/A19,1817,1616,16可以排除HPRTB14,1413,1213,13可以排除F13B9,910,1010,9可以排除CYAR0411,76.1,6.111,6.1可以排除CD47,712,1212,7可以排除PI(paternityindex)—親權(quán)指數(shù)定義:假設(shè)父提供生父基因成為孩子生父的可能性和隨機男人提供生父基因成為孩子生父的可能性的比值假設(shè)父親提供生父必需基因型的概率為

X隨機男子具有生父必備基因型的概率為Y（Y即為人群中該基因的出現(xiàn)頻率）PI=X/Y父子關(guān)系相對機會（RCP）上述計算出的PI值是一個絕對值，為使鑒定結(jié)果能夠以概率形式表達(dá)父子關(guān)系的相對機會(relativechanceofpaternity,RCP)，PI值須轉(zhuǎn)換成一種相對值RCP。計算出PI值后，RCP=[PI/（PI+1）]×100%。按照國內(nèi)外親子鑒定的慣例，當(dāng)RCP值大于99.73%時，則可以認(rèn)為假設(shè)父與孩子具有親生關(guān)系。如果RCP值達(dá)不到99.73%時，則可以認(rèn)為假設(shè)父與孩子不具有親生關(guān)系。RCP值達(dá)不到99.73%，應(yīng)該增加檢測位點數(shù)直至RCP大于99.73%為止。CombinedPaternityIndex(CPI)--總親子關(guān)系指數(shù)

--每一個位點就可以計算出一個PI值，多個位點的累計PI值等于各個位點PI值的乘積，但前提條件是所檢測的各位點之間沒有遺傳連鎖關(guān)系為每個個別的PI值之積

CPI=PI1xPI2xPI3x….xPInProbabilityofPaternity(PP)--總親子關(guān)系概率

PP=CPI/(CPI+1)ProbabilityStatementsCPIPP(%)ChanceofPaternity>39999.8–99.9Practicallyproven>9999.1–99.8Extremelylikely>1995–99Verylikely>990–95Likely>480–90Hint>2.