淺論感染旋毛蟲兔血清酶變化與蟲體密度關(guān)系

淺論感染旋毛蟲兔血清酶變化與蟲體密度關(guān)系【摘要】目的：探討旋毛蟲病時肌酸激酶(CK)、醛縮酶(ALD)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和乳酸脫氫酶(LDH)與蟲體密度的關(guān)系，為旋毛蟲病血清酶的檢測分析提供參考資料。方法：將實驗用兔隨機分成三組：輕度感染組、重度感染組和對照組，感染后不同時間檢測血清CK、ALD、ALT、AST和LDH活性，處死后用人工消化法進行肌幼蟲計數(shù)。結(jié)果：兔旋毛蟲病時五種血清酶(CK、ALD、ALT、AST和LDH)均升高，五種血清酶與宿主腓腸肌蟲體密度有相關(guān)性。結(jié)論：CK、ALD、ALT、AST及LDH與宿主腓腸肌蟲體密度有相關(guān)性。

【關(guān)鍵詞】旋毛蟲病;血清;酶類;蟲體密度;兔

【ABSTRACT】Objective：Tostudytherelationshipsbetweenserumcreatinekinase(CK)，fructosediphosphatealdolase(ALD)，alanineaminotransferase(ALT)，aspartateaminotransferase(AST)，lactatedehydrogenase(LDH)andthelarvaedensityinrabbitsinfectedwithTrichinellaspiralis，soastosupplybasicdataforserumenzymesexaminationin：Experimentalrabbitsweredividedintothreegroups：lightlyinfectedgroup，heavilyinfectedgroup，andcontrolserawereobtainedatintervalstagespostinfectionfrominfectedrabbits，theactivitiesofserumCK，ALD，ALT，ASTandLDHweretherabbitsinfectedwithwerekilled，themuscleslarvaenumberswerecountedbyanartificaldigestion：Thelevelofthefiveserumenzymes(CK、ALD、ALT、ASTandLDH)allwaspositivesignificantcorrelationbetweenthelevelsoffiveserumenzymesandlarvaedensityinthegastrocnemius：Therewassignificantcorrelationbetweenthepeaksvaluesoffiveserumenzymes(CK、ALD、ALT、ASTandLDH)andlarvaedensityinthegastrocnemiusmuscles.

【KEYWORDS】Trichinosis,Serum,Enzymes,LarvaeDensity,Rabbits

旋毛蟲病(Trichinosis)是由旋毛形線蟲(Trichinellaspiralis)引起的一種嚴重的人獸共患寄生蟲病。人類多因進食未煮熟的豬肉而感染，臨床上以發(fā)熱、水腫、肌痛及嗜酸性粒細胞增多為主要特征，可經(jīng)肌肉活檢而確診，但因活檢受到取材限制，血清酶檢測就成為輔助診斷旋毛蟲病的一項重要的實驗室檢查。研究表明旋毛蟲感染宿主后，宿主多種血清酶如肌酸激酶(CK)、醛縮酶(ALD)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)等可發(fā)生變化[16]，但血清酶活性的升高與病情嚴重程度[3，6]及肌肉蟲體負荷的關(guān)系還有不同意見[1，6]。本研究用旋毛蟲感染兔進一步觀察了五種血清酶(即CK、ALD、ALT、AST、LDH)的變化與肌肉蟲體負荷的關(guān)系，為旋毛蟲病血清酶的檢測分析提供有用的基礎(chǔ)資料。

1材料與方法

儀器和試劑Aeroset全自動生化分析儀(美國雅培公司)，血清酶測定試劑盒(北京世診中拓生物技術(shù)有限公司)，人工消化液(胃蛋白酶，濃鹽酸1mL，蒸餾水100mL)。

旋毛蟲肌幼蟲的制備用小白鼠傳代保種的旋毛蟲感染昆明小鼠，35d后處死，將全部肌肉剪碎，按每g肌肉加入60mL人工消化液的比例，用人工消化法制備肌幼蟲，用5%明膠調(diào)至約1000條/mL和約2000條/mL兩種懸液。

動物分組及感染雄性健康家兔31只，體重～。隨機分成3組：輕感組11只，重感組10只，對照組10只。輕感組每只灌胃法喂入約1000條/mL的幼蟲明膠懸液5mL，重感組每只喂入約2000條/mL的幼蟲明膠懸液5mL，對照組喂入5%明膠5mL。

血液標本采集于感染前及感染后第1、2、3、4、10、14周從耳緣靜脈取血，分離血清保存于4℃冰箱，于24h內(nèi)檢測。

血清CK、ALD、ALT、AST、LDH檢測用購置試劑盒在生化分析儀上檢測，保證儀器在質(zhì)控狀態(tài)，方法均為速率法。

每克肌肉荷蟲量(LPG)的觀察于第14周血標本取完后，將兩個感染組兔處死，取每只兔的腓腸肌，如前述用人工消化法進行肌幼蟲計數(shù)，算出每克肌肉荷蟲量(條/g)。

統(tǒng)計學(xué)分析計量資料用(x±s)表示，兩組間比較用t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，差異有顯著性時再做q檢驗，以進行均數(shù)間的兩兩比較;相關(guān)性采用直線回歸及相關(guān)分析法。

2結(jié)果

五種血清酶的變化

感染組五種血清酶總體上都有不同程度的升高，出現(xiàn)先升后降的動態(tài)變化過程，血清酶數(shù)值的最高峰平均出現(xiàn)在第3周，重感組高于輕感組(差異有統(tǒng)計學(xué)意義)。除血清LDH輕感組與對照差異無統(tǒng)計學(xué)意義外，血清LDH重感組及其他幾種血清酶(CK、ALD、ALT和AST)與對照組相比都有不同程度的升高。

感染旋毛蟲兔腓腸肌中蟲體密度

21只感染兔在腓腸肌中均發(fā)現(xiàn)肌幼蟲。蟲體密度重感組高于輕感組，分別為(1913±1069)條/g和(927±522)條/g()。

感染兔五種血清酶與蟲體密度的相關(guān)性

分別計算CK、ALD、ALT、AST、LDH與蟲體密度的相關(guān)性，每項指標均用其峰值(血清酶峰值在第3周)，蟲體密度即上述腓腸肌中的蟲體密度。結(jié)果五種血清酶CK、ALD、ALT、AST、LDH與蟲體密度的相關(guān)系數(shù)分別是、、、及()，均呈正相關(guān)。

3討論

本研究所檢測的五種血清酶中，據(jù)文獻資料CK和ALD有性別差別，其余三種(ALT、AST和LDH)沒有性別差別。為避免可能因性別造成的影響，故選擇同性別實驗動物。兔是研究旋毛蟲病時常用實驗動物，本研究將感染兔處死取腓腸肌消化計數(shù)，均發(fā)現(xiàn)肌幼蟲，說明全部感染成功。作者曾觀察肌幼蟲在感染旋毛蟲兔橫紋肌內(nèi)的分布，結(jié)果在舌肌、咬肌、膈肌中蟲體密度較大，在肱三頭肌、肩胛肌、肱二頭肌、腓腸肌和胸大肌蟲體密度居中，肋間肌和腰肌蟲體密度較小。腓腸肌蟲體密度居中，易于取材，是旋毛蟲病肌肉活檢常用的取材部位，故本研究選用腓腸肌檢查蟲體密度。

血清酶檢測是旋毛蟲病一項重要的實驗室輔助檢查。在旋毛蟲病時，關(guān)于血清酶活性與感染量、臨床癥狀或肌肉中蟲體密度的關(guān)系尚存在不同意見。Bowman等(1991)用狗實驗結(jié)果為CK活性與幼蟲感染劑量正相關(guān)[10];Lindor等(1983)報道感染旋毛蟲豚鼠，CK峰值與感染劑量呈正相關(guān)[1]。也有相反的報道，Wisniewska(1970)用旋毛蟲感染大鼠，結(jié)果CK活性與蟲體密度無直接關(guān)系;在一組旋毛蟲病人，LDH活性與臨床嚴重性之間無相關(guān)性，分析這種無相關(guān)性的原因可能與病人從感染到檢測血清酶的時間間隔不同有關(guān)，而旋毛蟲感染者的血清酶是動態(tài)變化的。以上兩種不同結(jié)果限制了血清酶檢測在旋毛蟲病的臨床應(yīng)用價值。動物實驗，因嚴格控制實驗條件，將更有助于獲得規(guī)律性的結(jié)果。本研究觀測到五種血清酶的活性與宿主腓腸肌蟲體密度呈正相關(guān)，與Lindor等(1983)和Bowman等(1991)報道的結(jié)果一致[1，10]。

旋毛蟲感染時血清酶的增高是肌細胞損傷、肌膜破壞、肌膜滲透能力增加等原因，導(dǎo)致酶漏向血液所致[11]，與幼蟲感染量及肌肉蟲體負荷密切相關(guān)。本研究觀測到五種血清酶與宿主腓腸肌蟲體密度呈正相關(guān)，而肌肉中蟲體密度是影響旋毛蟲病病情的重要因素。因而，血清酶的水平在一定程度上可以反映旋毛蟲病的病情。

【參考文獻】

1LindorLJ,WassonDL,Gleichoftrichinellosisonlevelsofeosinophils，eosinophilmajorbasicprotein，creatinekinaseandbasophilsintheguineapig[J].ParasiteImmunol，1983，4:1314.

2TassiC,MaterazziJ,PozioE,etkinaseisoenzymesinhumantrichinellosis[J].ClinChimActa,1995，239(2):197202.

3BoczonK，WinieckaJ，KocieckaW，etdiagnosticvalueofenzymaticandimmunologicaltestsinhumantrichinellosis[J].TropenmedParasitol,1981，32(2):109114.

4SimonJW，RiddellNJ，WongWT，etobservationsonthefirstdocumentedoutbreakoftrichinellosisinHongKong[J].TransRSocTropMedHyg，1986，80(3):394397.

5PozioE，VareseP，MoralesMA，etofhumantrichinellosiscausedbyTrichinellaspiralisandbyTrichinellabritovi[J].AmJTropMedHyg，1993，48(4):568575.

6Wisniewskaspiralis:diagnosticvalueofcreatinekinaselevelsinratandman[J].ExpParasitol，1970，28:577584.

7李立宏，張進順，李寶亮，等.感染旋毛蟲兔五種血清酶變化的研究[J].河北北方學(xué)院學(xué)報:醫(yī)學(xué)版，2006，23(1)：3032.

8康格非.臨床生物化學(xué)和生物化學(xué)檢驗[M].第1版.北京：人民衛(wèi)生出版社，

9李立宏，唐宏偉，趙旭輝，等.旋毛蟲肌幼蟲在實驗感染兔橫紋肌內(nèi)的分布[J].中國人獸共患病雜志，2003，19(1)：92