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胸腹水常規(guī)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1.【檢驗(yàn)?zāi)康摹繛榱耸剐馗顾R?guī)檢驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)化,特制定本規(guī)程。2.【職責(zé)】2.1實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP,室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實(shí)。2.2本SOP的改動(dòng),可由任一使用本SOP的工作人員提出,并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字:室負(fù)責(zé)人、科主任。3.【樣本類型及實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】3.1樣本類型:新鮮胸腹水3.2患者準(zhǔn)備:患者處于安靜狀態(tài)精神、體力、情緒等因素的影響較小。3.3容器添加劑類型:乙二胺四乙酸二鈉或二鉀(EDTA鈉鹽或鉀鹽)抗凝管3.4實(shí)驗(yàn)試劑:冰醋酸3.5【標(biāo)本的采集和保存】3.5.1由穿刺取得的標(biāo)本為防止細(xì)胞變性,出現(xiàn)凝塊或細(xì)菌破壞、溶解等,送檢及檢查必需及時(shí)。3.5.2為防止凝固,最好加入100g/L乙二胺四乙酸二鈉或二鉀(EDTA鈉鹽或鉀鹽)抗凝,每0.1ml可抗凝6ml漿膜腔積液,及時(shí)完成細(xì)胞涂片檢查。3.5.3PH測(cè)定應(yīng)用肝素抗凝專用采樣器。4.【測(cè)定原理】蛋白定性原理:滲出液中可含多量漿膜粘蛋白,在酸性條件下可產(chǎn)生白色霧狀沉淀。5.【操作步驟】5.1一般性狀檢查5.1.1記錄標(biāo)本送檢量、顏色及透明度;有無(wú)凝固物質(zhì)或沉淀物,可按漿液性、粘液性、黃色透明、膿樣混濁、乳糜樣、血樣等報(bào)告。5.1.2測(cè)比密前,標(biāo)本應(yīng)充分混勻,其方法與尿比重測(cè)定相同。量少時(shí)可用折射計(jì)法測(cè)定。5.2漿膜粘蛋白定性試驗(yàn)(Rivalta反應(yīng))5.2.1[原理]:滲出液中可含多量漿膜粘蛋白,在酸性條件下可產(chǎn)生白色霧狀沉淀。5.2.2[操作]:取100ml量筒,加蒸餾水100ml,滴入冰乙酸0.1ml(PH3-5),充分混勻,靜止數(shù)分鐘,將穿刺液靠近量筒液面,逐滴輕輕滴下,在黑色背景下,觀察白色霧狀沉淀的發(fā)生及其下降速度等。5.2.3[結(jié)果判斷]:陰性:清晰不顯霧狀。陽(yáng)性(±):漸呈白霧狀。(+):加后呈白霧狀。(2+):白霧云狀。(3+):白濃云狀。5.2.4[附注]:在滴下穿刺液后,如見濃厚的白色云霧狀沉淀很快地下沉,而形成較長(zhǎng)的沉淀物,即Rivalta反應(yīng)陽(yáng)性;如產(chǎn)生白色混濁不明顯,下沉緩慢,并較快消失者為陰性反應(yīng)。5.3顯微鏡檢查5.3.1細(xì)胞總數(shù)及有核細(xì)胞計(jì)數(shù):計(jì)數(shù)方法基本與腦脊液相同。漏出液中有核細(xì)胞數(shù)量常在300×106/L以下。滲出液中有核細(xì)胞數(shù)量較多,常在500×106/L以上。5.3.2細(xì)胞分類:穿刺液應(yīng)在抽出后立即離心,用沉淀物涂片后以瑞氏-姬姆薩染色液染色進(jìn)行分類,必要時(shí)制備稍厚涂片,在干燥前放置乙醚乙醇等量混合液中固定30分鐘,用蘇木素-伊紅(HE)或巴氏法染色查找癌細(xì)胞。6.【結(jié)果計(jì)算與判斷】滲出液與漏出液的鑒別鑒別點(diǎn)漏出液滲出液原因非炎癥所致炎癥、腫瘤或物理、化學(xué)刺激所致外觀淡黃漿液性不定:可黃色、膿性、血性、乳糜性透明度透明或微混大多混濁比密<1.015>1.015凝固性不自凝能自凝粘蛋白定性陰性陽(yáng)性蛋白總量常小于25g/L常大于30g/L蛋白電泳以白蛋白為主,白/球比低于血漿電泳譜與血漿相似有核細(xì)胞計(jì)數(shù)<300×106/L(腹水)<1000×106/L(胸水)>500×106/L(腹水)>1000×106/L(胸水)有核細(xì)胞分類以淋巴細(xì)胞、間皮細(xì)胞為主依病因而定,急性感染以中性粒為主、慢性感染以淋巴細(xì)胞為主細(xì)菌檢查無(wú)細(xì)菌發(fā)現(xiàn)可找到病原菌7.【臨床意義】7.1穿刺液中以多形核白細(xì)胞為主,多提示化膿性炎癥或早期結(jié)核性積液。在結(jié)核性滲出液的吸收期可見嗜酸性粒細(xì)胞增多。7.2以淋巴細(xì)胞增多為主,提示慢性炎癥,可見于結(jié)核性滲出液、病毒感染、系統(tǒng)性紅斑狼瘡的多發(fā)性漿膜炎等。7.3以間皮細(xì)胞及組織細(xì)胞增多為主,提示漿膜上皮脫落旺盛,可見于淤血、惡性腫瘤等。7.4心包積液有核細(xì)胞數(shù)量超過(guò)1000×106/L,多提示為心包炎。7.5腹水有核紅細(xì)胞數(shù)量超過(guò)500×106/L,主要為中性粒細(xì)胞(>50%),提示為細(xì)菌性

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