氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定不同產(chǎn)地苦玄參中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留

氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定不同產(chǎn)地苦玄參中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留【摘要】目的測(cè)定廣西不同產(chǎn)地苦玄參中5種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量。方法以混合溶劑超聲提取，提取物通過(guò)活性炭?jī)艋筮M(jìn)行氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定。結(jié)果5種農(nóng)藥回收率在72%～108%之間，RSD＜12%。農(nóng)藥的最低檢測(cè)限在～μg/kg之間。5種產(chǎn)地藥材中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留均未超過(guò)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)論GCMS內(nèi)標(biāo)法測(cè)定苦玄參藥材中的農(nóng)藥殘留，方法簡(jiǎn)便快速、可靠、靈敏度高，可作為有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的定性定量方法。

【關(guān)鍵詞】氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法有機(jī)磷農(nóng)藥苦玄參

Abstract:ObjectiveTodeterminetheresidueoffiveorgarophosphorouspesticidesindifferentoriginofPicriafel-terraeLour..MethodsUltrasonicwavewasusedtoextractmulti-pesticides.Aftercleanedupwithactivecarbon,theextractionwasreadyforGC-MSanalysis.ResultsTherecoveriesoffiveorganophosphorouspesticideswerebetween72%～108%,withRSD＜12%.TheLODswereintherangeof～μg/kg.Theirresiduesoforganophosphoruspesticidesdidn‘texceednationalstandard.ConclusionTheGC-MSmethodhasadvantagesoftimesaving,convenience,sensitivity.ItcanbeusedforqualitativeandquantitativeanalysisofresiduesoforganophosphorouspesticidesinPicriafel-terraeLour.

Keywords:GC-MS；Organophosphoruspesticides；Picriafel-terraeLour

有機(jī)磷農(nóng)藥在我國(guó)的使用已有三十多年歷史，其品種和用量目前仍居各類農(nóng)藥之首［1］。中藥材在未按GAP要求進(jìn)行規(guī)范化種植前，藥農(nóng)曾有濫施農(nóng)藥的現(xiàn)象，致使農(nóng)田土壤及中藥材中農(nóng)殘含量超標(biāo)，對(duì)中藥的污染很嚴(yán)重，制約了我國(guó)中藥材產(chǎn)品的質(zhì)量，嚴(yán)重地影響到用藥的安全性。

苦玄參為廣西地道藥材，來(lái)源于玄參科植物苦玄參Picriafel-terraeLour.的干燥全草［2］，在廣西作藥用歷史已久，也是多種中成藥的原料，市場(chǎng)需求量大。為了解苦玄參藥材農(nóng)藥污染情況，為中藥使用的安全可控提供科學(xué)依據(jù)，以廣西特產(chǎn)藥材苦玄參為研究對(duì)象，用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定苦玄參藥材中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量。

1儀器與材料

Agilent6890N/5973N氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，HP-5MS彈性石英毛細(xì)管柱，AE100型電子分析天平。

苦玄參分別采于廣西龍州、梧州、蒼梧、平樂(lè)、寧明縣，經(jīng)廣西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院劉壽養(yǎng)副教授鑒定為玄參科植物苦玄參Picriafel-terraeLour.)干燥的全草，粉碎，過(guò)2號(hào)篩，備用。

丙酮、石油醚均為分析純，重蒸后使用；水為超純水；活性炭?jī)?chǔ)存于密閉容器中備用；過(guò)濾濾紙用丙酮浸泡、干燥后使用；5種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品乙酰甲胺磷、甲拌磷、殺螟硫磷、毒死蜱均購(gòu)自迪馬公司，純度95%，甲基-對(duì)硫磷國(guó)標(biāo)液。內(nèi)標(biāo)磷酸三丁酯為分析純。

2方法與結(jié)果

色譜條件進(jìn)樣口溫度250℃，程序升溫：100℃→10℃/min→200℃(5min)→2℃/min→210℃post280℃(4min)，接口溫度280℃，載氣為He，柱流量為/min，進(jìn)樣方式為脈沖不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣體積為1μl。

質(zhì)譜條件：電子能量70ev，氣體壓力為kPa，質(zhì)量掃描范圍為30～500amu，選擇離子采集各有機(jī)磷農(nóng)藥離子碎片。結(jié)果見(jiàn)表1。表1GC-MS-SIM法測(cè)定5種有機(jī)磷農(nóng)藥的開(kāi)始采集時(shí)間和監(jiān)測(cè)離子

實(shí)驗(yàn)溶液的制備

對(duì)照品液的制備分別精密稱取對(duì)照品乙酰甲胺磷mg，甲拌磷mg，殺螟硫磷mg，毒死蜱mg，甲基對(duì)硫磷國(guó)標(biāo)液2ml置10ml量瓶中，用丙酮定容至刻度，搖勻，分別制得乙酰甲胺磷儲(chǔ)備液、甲拌磷儲(chǔ)備液、殺螟硫磷儲(chǔ)備液、毒死蜱儲(chǔ)備液、甲基對(duì)硫磷儲(chǔ)備液。

混合母液的制備精密量取上述乙酰甲胺磷儲(chǔ)備液ml、殺螟硫磷儲(chǔ)備液ml，甲基對(duì)硫磷儲(chǔ)備液8ml、其余儲(chǔ)備液各ml，置10ml量瓶中，用丙酮稀釋至刻度，即得混合對(duì)照品母液。

內(nèi)標(biāo)液的制備精密稱取磷酸三丁酯1mg，置于500ml量瓶中，加丙酮稀釋至刻度，搖勻，得濃度為2μg/ml的內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液。供試品溶液的制備精密稱取苦玄參藥材粗粉2g，置100ml錐形瓶中，加入石油醚-丙酮20ml，置冰浴中超聲處理10min，濾過(guò)，濾渣及濾器用石油醚-丙酮10ml洗滌，合并濾液，置50ml燒杯中，用空氣流濃縮至約15ml，加入g活性炭，放置5min，振搖數(shù)次，直至顏色變淺，濾過(guò)，用提取溶劑洗滌濾渣及濾器，合并濾液，在濾液中精密加入20μl內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液，用氮?dú)獯蹈?，再精密加入丙?ml溶解，備用。

標(biāo)準(zhǔn)曲線與檢測(cè)限分別精密吸取混合對(duì)照品母液，，，1，ml置2ml量瓶中，逐個(gè)精密加入內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液20μl，用丙酮稀釋至刻度并搖勻。分別取1μl進(jìn)樣，按上述色譜-質(zhì)譜條件進(jìn)行測(cè)定，每種濃度的標(biāo)準(zhǔn)品液連續(xù)進(jìn)樣2次。以各農(nóng)藥定量離子峰面積與內(nèi)標(biāo)定量離子峰面積的比值為縱坐標(biāo)(Y)，標(biāo)準(zhǔn)品的進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)(X)，進(jìn)行線性回歸，制作標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。以信噪比(S/N)=3為衡量指標(biāo)，考察5種農(nóng)藥的檢測(cè)限。結(jié)果見(jiàn)圖1和表2。

表2各農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線、相關(guān)系數(shù)、線性范圍以及最小檢出限

精密度實(shí)驗(yàn)取制作標(biāo)準(zhǔn)曲線中間濃度的對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，按“”色譜條件分別測(cè)定農(nóng)藥峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積，計(jì)算其比值，得到乙酰甲胺磷、甲拌磷、甲基對(duì)硫磷、殺螟硫磷、毒死蜱的RSD分別為%，%，%，%，%。

加樣回收率精密稱取同一產(chǎn)地苦玄參藥材粉末10份，每5份分別精密加入混合農(nóng)藥對(duì)照品溶液，ml，混勻，揮干。按上述樣品處理及測(cè)定方法操作，計(jì)算加樣回收率。結(jié)果見(jiàn)表3。表35種有機(jī)磷農(nóng)藥的添加回收率

樣品農(nóng)藥殘留量測(cè)定采用上述方法對(duì)5個(gè)產(chǎn)地苦玄參的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果均未檢出有機(jī)磷農(nóng)藥。

3討論

用GC-MS內(nèi)標(biāo)測(cè)定方法同時(shí)測(cè)定5種有機(jī)磷農(nóng)藥，MS檢測(cè)器選擇性較高，在對(duì)農(nóng)藥的定性定量方面是其他檢測(cè)器無(wú)法相比的。內(nèi)標(biāo)法克服了GC-MS外標(biāo)法中進(jìn)樣量、樣品分析過(guò)程儀器狀態(tài)不穩(wěn)定引起的響應(yīng)值變化等系統(tǒng)誤差，重復(fù)性好。

在廣西5個(gè)產(chǎn)地的苦玄參藥材中沒(méi)有檢出有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，但這并不能說(shuō)明種植過(guò)程中沒(méi)有使用過(guò)有機(jī)磷農(nóng)藥，由于有機(jī)磷農(nóng)藥化學(xué)結(jié)構(gòu)中多含有酯鍵，不穩(wěn)定，易受熱、酸、堿影響而降解，不易長(zhǎng)期殘留，故在藥材中檢出較少［3，4］。但在一些藥材產(chǎn)區(qū)，由于農(nóng)藥的濫用、誤用或采收時(shí)間不當(dāng)［5］，均有可能造成有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留。因此，仍應(yīng)建立其測(cè)定方法，以保證中藥材在使用時(shí)有機(jī)磷農(nóng)藥不超標(biāo)。

【參考文獻(xiàn)】

［1］帥琴，楊薇，鄭岳君，等．固相微萃取與氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑的殘留［J］.色譜，2003，21(3)：273.

［2］廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳．廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)［S］.南寧：廣西科學(xué)技術(shù)出版社，1